原发性高血压 (Essential Hypertension, EH) 是遗传与环境因素共同作用所致的多基因遗传病, 是冠心病、脑卒中等心脑血管疾病的独立危险因素, 严重影响人类健康。随着分子生物学的发展, 高血压相关基因研究及基于基因型的个体化降压治疗成为研究热点。在血压的调节和高血压的发生发展中, 肾素-血管紧张素系统 (Renin-Angiotensin System, RAS) 起着极重要的, 有时是关键性的作用。目前高血压病的基因治疗也集中在针对RAS各个成分的基因上, 该系统每个成分都被高度怀疑为高血压相关基因[1]。
血管紧张素转换酶 (Angiotensin-Converting Enzyme, ACE) 基因是RAS基因中主要的基因之一, 位于染色体17q23区, 约21 kb, 含26个外显子和25个内含子。ACE基因的内含子16上有一个287bp的插入 (Insertion, I) 和缺失 (Deletion, D) 的多态性。因此ACE基因分为II、DD和ID 3种基因型[2]。该研究旨在探明ACE基因的多态性在老年原发性高血压患者中的分布情况, 并探讨此多态性分布与血管紧张素II受体拮抗剂厄贝沙坦降压疗效的关系。以2011年1月—2011年12月该院门诊就诊的初发的1级原发性高血压患者30例为研究对象, 现报道如下。
选取在该院门诊就诊的初发的1级原发性高血压患者 (年龄≥60岁) 30例, 其中男性16例, 女性14例, 年龄63～84岁, 平均年龄 (73.2±5.8) 岁。入选患者均符合2005年中国高血压防治指南的诊断标准, 即坐位收缩压≥140 mmHg和 (或) 舒张压≥90mmHg, 并排除继发性高血压、肝肾功能异常及糖尿病。所有患者均填写知情同意书。
入选患者均服用厄贝沙坦 (赛诺菲公司) 单药治疗, 150 mg/d, 每4周由专人采用水银柱袖带血压计测量坐位右上臂血压, 每次测量3次并计算均值, 测量时间为上午8∶00—10∶00, 共观察8周。
肝素抗凝外周血4 mL, 应用红细胞裂解液提取白细胞, 按照基因组DNA提取试剂盒 (离心柱型) 提供的实验步骤提取DNA。紫外分光光度计 (Pharmacia Biotech) 测定DNA浓度, 并标化样品DNA浓度值至20 ng/μL。
采用聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction, PCR) 法检测ACE基因的多态性。引物序列:Forward:5'-GCCCTGCAGGTGTCTGCAGCATGT-3', Reverse:5'-GGATGGCTCTCCCCGCCTTGTCTC-3' (江阴百桥国际生物科技孵化园有限公司设计、合成) 。PCR反应体积10μL, 包括:10×buffer (含Mg2+) 1μL, 10μmol/L上、下游引物各0.2μL, 10 mmol/L三磷酸脱氧核苷 (deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 0.8μl, 基因组DNA20 ng, 20 U/L Taq DNA聚合酶0.05μL, 消毒双蒸水6.75μl。应用-PCR仪进行PCR扩增, 反应条件为:94℃预变性3 min, 94℃变性30 s, 56.5℃退火30 s, 72℃延伸60 s, 共32个循环, 最后72℃延伸10 min。PCR扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳, 进行多态性分析。
应用SPSS11.5软件进行统计学分析。计数资料用百分数表示, 计量资料用均数±标准差表示, 采用t检验。
PCR产物分为2种片段:597 bp的插入片段 (I) 和319 bp的缺失片段 (D) 。ACE基因分为3种基因型:II型 (597 bp) ;DD型 (319 bp) ;ID型 (597 bp和319 bp的杂合子) (见图1) 。
入选患者II基因型有14例, 占总数的46.7%, 其中男性6例, 女性8例;ID基因型有13例, 占43.3%, 其中男性9例, 女性4例;DD基因型有3例, 占10%, 其中男性1例, 女性2例。
M:DNA Marker, 自上而下依次为500 bp, 400 bp, 300 bp, 200 bp和100 bp。
1～5为其中5例患者的ACE I/D基因型电泳结果:1、3、4为II型, 2为ID型, 5为DD型。
根据ACE基因I/D基因型分布将入选患者分为II组和ID+DD组 (由于本组资料中DD基因型只有3例, 故将ID型和DD型合为一组) 。两组的基线血压值比较, 差异无统计学意义。
II组患者服用厄贝沙坦治疗8周, 收缩压降幅为 (12.21±1.97) mmHg, 舒张压降幅为 (5.93±1.54) mmHg。ID+DD组患者治疗后收缩压较基线水平下降了 (12.25±3.13) mmHg, 舒张压较基线水平下降了 (5.88±1.89) mmHg。厄贝沙坦的降压疗效在2组不同基因型的患者间比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。
临床研究发现不同个体对抗高血压药物治疗的临床反应差异很大。基因变异及其多态性是影响个体间药物反应差异的主要因素之一[3]。ACE基因的多态性对血中ACE浓度和活性起着重要作用, 其中DD型ACE浓度和活性最高, ID型居中, II型最低。所以, D等位基因在ACE基因表达调控方面起活化作用, 而I等位基因则起抑制作用。此外, DD型正常人及EH患者AT1基因表达最高, ID型次之, II型最低, 提示D等位基因可能与血压的升高有关[4]。该研究中, DD基因型在老年EH患者中分布最少, II和ID基因型分布比例相当。II基因型和ID+DD基因型相比较, 基线收缩压及舒张压均无明显差异, 未发现D等位基因对老年EH患者血压水平的影响。该结果可能与研究病例数较少 (仅30例) 有关, 尚有待进一步进行大样本人群的调查。
在高血压病程中, 长期过度的RAS激活, 尤其是血管紧张素II (Angiotensin II, Ang II) 的增加是发生致死及致残性临床转归终点事件的中心环节。Ang II的合成有2种途径:ACE途径和非ACE途径。Ang II可与许多组织的细胞膜上的AT1受体结合使血压升高。血管紧张素转换酶抑制剂仅能抑制ACE途径AngII的产生, 而AngII受体拮抗剂则提供了新的治疗方法[5]。
厄贝沙坦是一种口服的血管紧张素II受体 (Angiotensin II receptor, AT受体) 拮抗剂, 血浆半衰期长达11～15 h。厄贝沙坦与血管紧张素竞争性地与AT受体结合, 抑制AT1受体的同时激活AT2受体, 增加内皮细胞中缓激肽及前列腺素的释放, 上调一氧化氮的表达, 发挥扩血管及降低血压的作用。同时厄贝沙坦不抑制缓激肽的降解, 故而无干咳等不良反应, 临床使用中患者依从性较好[6]。
该研究结果显示, 对老年原发性高血压 (1级) 的患者, 应用厄贝沙坦单药治疗8周, 血压可降至140/85 mmHg左右, 疗效基本满意。在这些受试者中, ACE基因II型与ID+DD型相比较, 对厄贝沙坦的降压反应无明显差异, 这与厄贝沙坦主要作用于RAS的终末环节AT受体有关。
总之, 厄贝沙坦可有效治疗老年原发性高血压, ACE基因I D多态性不影响其降压疗效。
摘要：目的 探讨老年原发性高血压患者ACE基因I/D多态性及其与厄贝沙坦降压疗效的关系。方法 入选老年原发性高血压患者30例, 予单药厄贝沙坦150mg/d治疗8周, 观察降压疗效, 同时采用PCR法确定入选患者ACE基因I/D多态性的分布情况。结果 服用厄贝沙坦后, 老年原发性高血压患者ACE基因II型与ID+DD型收缩压降幅为 (12.21±1.97) mmHgvs (12.25±3.13) mmHg (P>0.05) , 舒张压降幅为 (5.93±1.54) mmHgvs (5.88±1.89) mmHg (P>0.05) , 两组患者血压降幅无显著差异无统计学意义。结论 未发现老年原发性高血压患者ACE基因I/D多态性与厄贝沙坦的降压疗效有关。
关键词：ACE基因I/D多态性,原发性高血压,厄贝沙坦,老年
[1] 胡大一, 黄峻, 马长生, 等.心血管内科学高级教程[M].北京:人民军医出版社, 2011:32-35.
[2] 李莉, 杨建一, 王文娟.RAS及其基因多态性与原发性高血压[J].Int J Genet, 2006, 29 (5) :389-392.
[3] Marteau JB, Zaiou M, Siest G, et al.Genetic determinants of blood pres-sure regulation[J].J Hypertens, 2005 (23) :2127-2143.
[4] Jing L, Ningling Sun.A study of angiotensin converting enzyme gene polymorphism in essential hypertension[J].J China-Japan FriendshipHospital, 2005, 19 (1) :19-21.
[5] 马淑彦.厄贝沙坦与硝苯地平联用治疗高血压临床观察[J].China Prac Med, 2010, 17 (5) :146-147.
[6] 叶朝晖.厄贝沙坦联合尼群地平治疗高血压43例临床疗效观察[J].Guide of China Medicine, 2010, 14 (5) :81-82.
推荐阅读：
老年患者的生活护理07-06
原发性肝癌病人护理06-11
处置公共卫生突发性事件预案06-20
预防老年痴呆的方法05-30
老年人锻炼大脑的游戏06-15
老年人的祝福语06-26
老年人生日的祝福语05-23
针对社区老年人跌倒的护理06-23
重阳节对老年人的祝福06-26
我的中国梦演讲稿：编织老年梦06-16
