洗手液在人们日常生活中是一种常见的洗护用品, 被广泛用于餐馆、旅店、家庭及公共场所, 洗手液与传统的固体皂相比有明显优势, 不仅使用方便, 还可避免细菌二次污染, 这使得洗手液的应用越来越广。目前部分市售洗手液中抑菌成分为对人体有害的化学成分, 而中草药具有清热解毒、抗菌的功效, 且具有毒副作用小、温和、价廉、来源广等优点, 在具有良好杀菌效果的同时, 还可以减少对手部皮肤的伤害, 因此对新型中药抑菌洗手液的研究具有一定的实用价值。
黄酮是蒲公英提取物中主要抑菌成分, 对一些病原微生物有极好的抑制作用。对于革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、螺旋体和病毒都有不同程度的抑菌效果。对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、卡他奈瑟菌有较强的杀灭作用[1]。此外黄酮类提取物还具有良好的体外清除超氧阴离子自由基的能力和美容美颜等作用。
HH-501数字超恒温水浴 (郑州科丰仪器设备有限公司) ;高速万能粉碎机 (FW-100D, 天津博得仪器有限公司) , DHG-9140A型电热恒温空气干燥箱 (上海亿恒科学仪器有限公司) ;752型紫外可见分光光度计 (上海舜宇恒平科学仪器) 、磁力加热搅拌器 (天津鑫博得仪器有限公司) 、电子天平 (上海舜宇恒平科学仪器有限公司) 、循环真空泵 (均购北京科伟永兴仪器有限公司) 、显微镜、培养皿、烧杯, 以及其他常见的玻璃仪器。
芦丁标准品 (中国药品生物制品检定所, 批号:100018-200408, 纯度按100%计算) 、蒲公英, 石油醚, SDS (十二烷基硫酸钠) 、甘油、柠檬酸、柠檬酸钠、色素、香精、卡松、无水乙醇、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蒸馏水。
取一定量蒲公英清洗、干燥后, 在搅碎机中粉碎, 取2g蒲公英粉末放入石油醚中浸泡1.5h, 以除去色素等脂溶性物质。浸泡后的蒲公英粉末用蒸馏水真空抽滤洗涤2-3次, 将洗涤过的蒲公英粉末与60%乙醇按1:20物料比混合, 放入60℃水浴锅, 加热2h, 抽滤, 收集滤液, 将滤饼再与乙醇浸泡2h, 抽滤, 合并滤液[2]。
精确称取干燥至恒重的芦丁标准品0.0625g, 用75%的乙醇溶解, 配制成浓度为0.25mg/mL的标准液[3]。稀释成不同浓度梯度, 分别加入5%的亚硝酸钠溶液2mL, 摇匀放置6min, 再加入1%三氯化铝溶液6mL, 摇匀放置6min, 再加4%氢氧化钠溶液20mL, 摇匀放置15min, 后在波510nm处测定吸光值, 绘制标准曲线[4]。标准曲线如图1所示, 线性回归方程为y=0.0067x+0.0167, R²=0.9973, 说明浓度在10-80mg/L范围内线性关系良好。
根据 (二) 中方法测定蒲公英提取液的吸光值, 根据标准曲线计算相应的黄酮类化合物浓度。计算出溶液的浓度为0.45mg/m L, 总黄酮含量为19.06%。
按照表1中的量, 取SDS10g于烧杯中, 加入适量纯水溶解, 再加入甘油1.0ml, 氯化钠1.4g, 卡松、色素、香精, 搅拌溶解均匀, 分次加入黄酮提取液, 于电热套中加热溶解, 待溶解后加柠檬酸将PH调至4.5～6.5之间, 再加水至100ml, 在电热套中加热溶解, 待完全溶解后取出静止待用[5]。
25℃条件下, 用新煮沸并冷却的蒸馏水配制1:10 (质量浓度) 的试样溶液, 混匀, 测定洗手液的pH值, 测得pH为6.5, 符合国家标准。
25℃条件下, 测定洗手液的粘度, 结果如表2所示。结果显示平均粘度为1195mPa·s, 洗手液能较长时间停留在皮肤上, 起到清洁效果。
取120mL洗手液试样两份, 分别置于250mL的无色具塞广口玻璃瓶中, 一份于 (40±2) ℃电热恒温箱内24小时, 取出恢复室温后观察其稳定性;另一份于 (-5±2) ℃冰箱内24小时, 取出恢复室温后观察其稳定性[6]。实验结果显示两份试样恢复室温后和试验前稳定性均无明显变化, 不分层、无沉淀、无颜色变化。
用移液管取0.25ml的洗手液产品于烧杯中, 加入100ml的水, 摇匀, 滴加纯机油, 振荡, 滴加到最后一滴机油不溶解为止, 准确记录洗手液溶解纯机油的体积, 用记录体积的大小来表征洗手液去污能力的相对大小。结果显示洗手液去污能力较强。
将洗手液稀释, 测量泡沫, 并记录泡沫高度, 结果如表3所示。结果表明泡沫平均高度为179mm, 符合国家标准。
取两种不同品牌的洗手液和新型中草药洗手液稀释并制成原液、1:10、1:100检液, 分别注入到灭菌平皿内1mL, 将融化并冷至45-50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内, 每皿约15 mL, 随即转动平皿, 使洗手液样品与培养基充分混合均匀, 待琼脂凝固后, 翻转平皿, 置36±1℃培养箱内培养48±2h。另取一个不加洗手液样品的灭菌空平皿, 加入约15mL卵磷脂吐温80营养琼脂培养基, 待琼脂凝固后, 翻转平皿, 置36±1℃培养箱内培养48±2h, 为空白对照。数菌落数, 记下各平皿的菌落数。结果显示新型中草药抑菌洗手液培养皿中的菌落数最少, 较其他品牌的抑菌效果好。
本文采用蒲公英提取物黄酮作为抑菌成分, 制备了一种新型中草药抑菌洗手液。通过洗手液性能检测, pH值为6.5, 对皮肤伤害较小, 泡沫平均高度为179 mm, 具有良好的稳定性, 粘度适中, 符合国家标准, 经去污能力测试, 去污能力强, 且具有良好的抑菌效果。
摘要：采用蒲公英提取物黄酮作为杀菌抑菌剂, 用十二烷基硫酸钠作为表面去污活性成分, 丙三醇作为保湿剂, 柠檬酸和柠檬酸钠缓冲液作为p H调节剂, 制备了一种新型的洗手液。对洗手液进行性能检测, pH值、泡沫高度、粘度、稳定性等指标均符合国家标准。同时对洗手液的抑菌性能进行了检测, 结果显示洗手液抑菌性能良好。
关键词：蒲公英,洗手液,抑菌
[1] 袁河.蒲公英中黄酮类化合物的提取纯化及应用研究[D].长沙:湖南农业大学, 2015.
[2] 侯丽.蒲公英中总黄酮提取工艺研究[J].农业科技与装备, 2017 (3) :52-53.
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[4] 王廷璞, 李一婧, 马伟超, 等.蒲公英中黄酮类化合物提取工艺优化及鉴定[J].中兽医医药杂志, 2011, 30 (2) :35-38.
[5] 张永忠, 徐建军, 叶玉杰.无患子果皮皂苷提取及天然洗手液制备研究[J].亚太传统医药, 2017, 13 (14) :34-36.
[6] 徐单单, 柯诗婷, 林珠妹, 等.麒麟菜提取物洗手液的研制[J].中国消毒学杂志, 2018, 35 (5) :329-332.
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