在不同湿度条件下高海拔死亡大鼠玻璃体液中胆胆碱酯酶、乳酸脱氢酶及钠离子浓度与死亡时间的关系

摘要目的探讨高海拔不同湿度(H)环境下，死亡雄性大鼠玻璃体液中胆碱酯酶(CHE)、乳酸脱氢酶(LDH)和钠离子(Na+)的浓度与死亡时间(PMI)的相关性。方法将105只雄性大鼠用空气栓塞法处死，分成A、B、C大组(45%H组;75%H组;100%H组)，每个大组按照死亡时间分成7个小组[0(死后即刻)、3、6、9、12、18、24h组]，每小组5只，其中0h组为对照组。采集玻璃体液，运用全自动生化分析检测仪检测CHE、LDH、Na+浓度。采用SPSS19.0统计软件对检测数据行相关分析。结果CHE、LDH、Na+浓度随PMI的增加呈现递减趋势(P<0.05)。在不同H条件下，同一死亡时间的CHE、LDH、Na+浓度均不同。45%H条件下LDH的三次回归模型系数最大，回归方程是:y^=11611.514-3606.831x+655.902x2-50.567x3;75%H条件下CHE的三次回归模型系数最大，回归方程是:y^=400.200-260.659x+60.074x2-4.339x3;100%H条件下，Na+三次回归模型系数最大，回归方程是:y^=21.143-8.56x+1.612x2-1.0x3。结论在高海拔不同湿度环境下，H对死亡雄性大鼠PMI有影响，Na+更适用于100%H下推断PMI。死亡雄性大鼠玻璃体液中CHE、LDH、Na+的浓度随PMI的延长呈递减趋势，可作为推断PMI的指标。

关键词:法医;病理;死亡;时间;多元回归;玻璃体液;湿度

运用玻璃体液内物质浓度的变化推断死亡时间(postmorteminterval，PMI)的难点在于其受多种条件影响，尤其在高原。本课题就湿度(H)对PMI推断的影响进行了相关研究。

1.材料与方法

1.1实验动物及分组

成年SD雄性大鼠(105只，体重200±20g)由西安交通大学医学部实验动物中心生产，生产许可证号:SCXK(陕)2018-001。在2260米海拔处饲养一周。将大鼠以心脏空气栓塞法处死后，分为A、B、C3个大组，A组置恒温(15℃)恒湿(45%)箱;B组置恒温(15℃)恒湿(75%)箱;C组置恒温(15℃)双蒸水浴箱(100%H)。A、B、C组分别于0(死亡即刻)、3、6、9、12、18、24h提取玻璃体液。用无菌去离子水以1:8比例稀释，离心(4℃，12000r•min-1，3min)取上清液，编号入EP管中，置-80℃冰箱冻存。

1.2样本检测

将待测样本常温解冻，取玻璃体液150ìL于检测瓶中，应用美国贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析检测仪检测CHE、LDH、Na+浓度。

1.3统计学处理

实验数据采用SPSS19.0统计软件处理，结果以均数±标准差表达，显著性检验采用单因素方差法分析，并行Pearson和一元、多元线性回归分析，检验水准á=0.05。

2.结果

2.1玻璃体液内的CHE浓度

大鼠死亡后在不同H与PMI下，玻璃体液中CHE浓度结果如表1所示，折线图如图1所示。随着PMI的延长，CHE浓度呈下降趋势(P<0.05)。在死亡0、12、18h时，随着H的增加CHE浓度增大。在死亡3、6、9、24h时，在H为45%～75%条件下，CHE浓度在同一时间减小，在H为75%～100%条件下，CHE浓度增大，随着H增加，浓度呈现先降低后升高的趋势。死亡0～3h内CHE浓度下降最快，可见图1中该时间段倾斜度最大。死亡12～24h内CHE浓度波动很小，可见图1中该时间段趋于平缓。

2.2玻璃体液内的LDH浓度

大鼠在不同H与PMI下，玻璃体液中LDH浓度结果如表2所示，折线图如图2所示。随着PMI的延长，LDH浓度呈下降趋势(P<0.05)。在死亡0、9、12、18、24h时，随着H的增加LDH浓度增大。在死亡3、6h时，H在45%～75%条件下，LDH浓度在同一时间增大，H在75%～100%条件下，LDH浓度减小，随着H增加，浓度呈现先升高后降低的趋势。在死亡0～3h内H在100%条件下，LDH浓度下降最快;在死亡0～6h内H在45%与75%条件下，LDH浓度下降最快，可见图2中该时间段倾斜度最大。在H为45%条件下LDH的浓度波动幅度较大;在H为75%、100%条件下，死亡12～24h内LDH的浓度波动很小，可见图2中该时间段趋于平缓。

2.3玻璃体液内的Na+浓度

大鼠死亡后在不同H与PMI下，玻璃体液内的Na+浓度结果如表3所示，折线图如图3所示。随着PMI的增加，Na+浓度呈下降趋势(P<0.05)。在H为45%～75%条件下，Na+浓度在同一时间增大，在H为75%～100%条件下，Na+浓度减小，随着H增加，Na+浓度呈现先升高后降低的趋势。在死亡0～3h内，Na+浓度下降最快，可见图3中该时间段倾斜度最大。在H为75%条件下，Na+浓度波动幅度较大;在H为45%条件下，在死亡3～24h内Na+浓度波动很小;在H为100%条件下，在死亡9～24h内Na+浓度波动很小，可见图3中该时间段趋于平缓，18h与24h浓度相等。

I

2.4相关分析结果

Pearson分析结果见表4，CHE、LDH、Na+浓度在不同H下与PMI呈负相关，P<0.01。

2.5线性回归分析结果

对不同H条件下的CHE、LDH、Na+浓度值与PMI进行回归分析，其中PMI作为自变量x，浓度值作为因变量y，作一次、二次及三次曲线估计分别得到三条回归模型，如表5所示。H在45%时LDH的r2值较高，说明其与PMI相关性高;在75%时CHE与PMI相关性高;在100%时Na+与PMI相关性高。综上所述，三种H条件下，H为100%的三次回归方程r2值较高，对推断PMI影响较大，Na+在100%H下推断PMI更准确。