乙型肝炎是我国发病率最高的传染性疾病之一,约有超过10%的人口为乙型肝炎患者,病毒携带者的比例还要比这个数字高出许多,对乙型肝炎病毒(HBV)复制情况进行正确的判断,可对乙型肝炎的治疗及疗效的评价提供依据[1],在常年的临床实践中,肝病科多以乙肝病毒“两对半”的检测作为感染HBV的依据,并通过HBV-DNA的检测来评价疗效,然而,目前越来越多的研究证实HBV前S1抗原(Pre S1Ag)更能够反映病毒的复制情况,可作为HBV存在和复制的标志及抗病毒治疗的疗效指标[2]。该研究对2011年1月—2012年12月该院收治的288例乙型肝炎患者的血清进行乙肝“两对半”、Pre S1Ag和HBV-DNA联合检测,以探讨其相关性。
288例乙肝血清标本均为该院住院和门诊治疗的乙肝患者,男性152例,女性136例,年龄21~68岁,中位年龄39岁,所有患者均符合中华医学会制定的诊断标准,此标准与2006年在《中国乙型肝炎防治指南》[3]中公布。
乙肝“两对半”检测采用酶联免疫吸附法(ELLSA),其中HB-s Ag、HBs Ab、和HBe Ag检测采用夹心法;HBe Ab和HBc Ab检测采用竞争法,Pre S1Ag检测采用ELLSA法的双抗夹心法,操作过程由技术熟练的检验科技术人员严格按照说明书进行。结果检测采用酶标仪(型号:ELx-800)读取吸光度(A)值,以阳性或阴性报告结果。采用荧光定量PCR进行HBV-DNA检测,扩增检测结果DNA拷贝数>1 000为阳性。
所有统计数据采用采用SPSS19.0软件分析,组间计数资料比较采用χ2检验。
包括Hbe Ag阳性的2种组合中,HBV-DNA和Pre S1Ag阳性率分别为87.1%、86.0%和100.0%、100.0%,HBV-DNA和Pre S1Ag在2组中阳性率差异无统计学意义(P>0.05),而在不包括Hbe Ag阳性的3种组合中,HBV-DNA和Pre S1Ag阳性率分别为42.3%、45.7%;46.3%、44.8和11.1%、11.1%,见表1。HBV-DNA检测阳性标本中,Pre S1Ag的阳性率为87.2%,Hbe Ag阳性率为75.6%;HBV-DNA检测阴性标本中Pre S1Ag和Hbe Ag的阳性率仅为7.8%和5.2%,Pre S1Ag的阳性率在HBV-DNA阳性和阴性标本中差异有统计学意义(P<0.05),见表2。
多年以来Hbe Ag一直是肝病科医生判断乙肝病毒是否在体内复制并具有传染性的重要指标,当Hbe Ag转化为Hbe Ab意味着乙肝病毒复制结束,病情向好的方面转化[4],但在后来的研究中发现,即使Hbe Ag转为阴性,仍有部分患者能检测到乙肝病毒的活跃复制,因此,有学者认为[5]Hbe Ag不能作为反映乙肝病毒复制的唯一指标,需结合其他指标的检测综合判定。前S1蛋白存在于乙肝病毒的外膜,是乙肝病毒与肝细胞结合的位点,其在乙肝病毒组装、分泌并侵袭肝细胞的过程中发挥重要作用[6],Pre S1Ag作为乙型肝炎新的血清学指标,在临床越来越显示出其应用价值[7]。
该研究表明,在含有Hbe Ag阳性的2种组合中,Pre S1Ag的检出率分别为86.0%和100.0%,HBV-DNA的检出率分别为87.1%和100.0%,而在HBV-DNA阳性的患者中,Pre S1Ag阳性率达到87.2%,说明Pre S1Ag和HBV-DNA在反映乙肝病毒复制方面有很高的一致性,也具有较高的伴随关系,高于国内王建军等[8]等的报道。Pre S1Ag可作为观察病毒是否复制的实验室指标,HBV-DNA一直作为反映病毒复制的金标准,但其检查需要昂贵的设备,对化验室技术人员的要求也非常高,不利于在基层医院开展,而Pre S1Ag检测操作简单,价格低廉,适宜推广应用。另外,HBs Ag+HBe Ag+HBc Ab阳性组合,Pre S1Ag和HBV-DNA阳性检出率分别为87.1%和86.0%,Pre S1Ag阳性检出率稍高于HBV-DNA,但差异无统计学意义(P>0.05),而在HBs Ag+HBe Ag阳性组合中,两者阳性检出率均为100%,提示在对乙肝患者的日常检测中,可以用Pre S1Ag代替HBV-DNA作为反应病毒是否复制的标志。在Hbe Ag阴性的3种组合中,HBV-DNA和Pre S1Ag阳性率分别为42.3%、45.7%;46.3%、44.8和11.1%、11.1%,说明了即使在Hbe Ag检测阴性的情况下,仍然存在这病毒的复制,考虑Hbe Ag阴性检测结果可能与乙肝病毒的Pre C区基因变异出现终止密码子,阻碍了Hbe Ag的形成有关[9]。提示Hbe Ag虽然是传统的反应病毒复制的指标,但不能完全代表病毒的复制情况,还存在部分乙肝病毒复制患者Hbe Ag检测阴性。本研究显示:HBV-DNA阳性的172例标本中,Pre S1Ag和HBe Ag阳性率分别为87.2%和75.6%,但Pre S1Ag和HBe Ag联合检测阳性率达96.5%,说明在HBe Ag检测阴性的情况下,Pre S1Ag依然可以反映乙肝病毒复制,联合应用乙肝两对半和Pre S1Ag检测可提高诊断准确率,减少单纯依靠Hbe Ag检测出现的误诊。
综上所述,Pre S1Ag检测操作简单,价格低廉,可代替HBV-DNA作为观察乙肝病毒是否复制的实验室指标,Pre S1Ag联合乙肝“两对半”检测是乙型肝炎早期诊断和评价疗效的可靠指标,可在临床推广应用。
摘要：目的 探讨乙肝病毒前S1蛋白抗原(PreS1Ag)、乙肝病毒基因(HBV-DNA)和乙肝“两对半”检测的相关性及在乙肝诊治中的价值。方法 PreS1Ag和乙肝“两对半”检测采用酶联免疫法,HBV-DNA检测采用荧光定量PCR扩增技术。结果 包括HbeAg阳性的2种组合中,HBV-DNA和PreS1Ag阳性率分别为87.1%、86.0%和100.0%、100.0%,HBV-DNA和PreS1Ag,在不包括HbeAg阳性的3种组合中,HBV-DNA和PreS1Ag阳性率分别为42.3%、45.7%;46.3%、44.8和11.1%、11.1%。HBVDNA检测阳性标本中,PreS1Ag的阳性率为87.2%,HbeAg阳性率为75.6%;二者联合检测阳性率为96.5%,HBV-DNA检测阴性标本中PreS1Ag和HbeAg的阳性率为7.8%和5.2%,二者联合检测阳性率为9.5%。结论 PreS1Ag检测联合乙肝“两对半”检测是乙型肝炎早期诊断和评价疗效的可靠指标,可在临床推广应用。
关键词：乙肝病毒,乙肝病毒前S1抗原,乙肝病毒基因
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