论文题目：降胆固醇益生菌的筛选及其改善高脂饮食小鼠脂代谢机制研究
摘要：众所周知,高脂血症是引发心血管疾病（CVD）和动脉粥样硬化的主导因素。世界卫生组织预测,至2030年,将有多达40%的死亡与心血管疾病相关,预计影响全球约3000万人的健康。长期高脂饮食的摄入会导致高脂血症等代谢性疾病的发生。迄今为止,治疗高脂血症最广泛的方法是服用药物。然而,长期服用药物价格昂贵,毒副作用大。因此,功能性和营养性食品的开发将对改善高脂血症具有重要意义。研究证实,益生菌有降血脂的功效,而益生菌预防或缓解高脂血症及其调节脂质代谢的机制却少有研究。本研究目的是筛选具有降胆固醇能力的益生菌菌株,探讨筛选菌株对高脂饮食小鼠的降血脂作用及其调节脂代谢的机制。从韩国泡菜中分离出具有胆盐水解酶活性和高效降低胆固醇能力的益生菌菌株。体外测定筛选菌株的抗氧化能力,耐酸耐胆盐特性,抗生素敏感性和抑菌特性等。将C57BL/6N小鼠随机分为3组进行动物试验,即正常饮食组（Control组）,高脂饮食组（HFD组）和高脂饮食中加入筛选菌株组（筛选菌株干预组）。喂养8周,测定小鼠的体重、腹部及肾周脂肪系数、血清和肝脏相关的血脂指标、观察肝脏组织病理学变化,研究筛选菌株的降血脂作用。通过机体的脂质代谢相关因子和肠道菌群的变化,来探讨筛选菌株调节脂质代谢的作用机制。结果:1.体外试验筛选获得具有较强降胆固醇能力的乳酸菌菌株LP104,鉴定为植物乳杆菌,益生特性研究发现该菌株具有耐酸耐胆盐、耐受胃肠液和抑制致病菌的益生特性。植物乳杆菌LP104还具有抗生素敏感性和良好的体外抗氧化能力。2.植物乳杆菌LP104干预的高脂饮食小鼠模型结果表明,该菌株能够显著降低小鼠体重、Lee’s指数,腹部及肾周脂肪系数进而缓解肥胖;植物乳杆菌LP104还能够改善高脂饮食诱导的小鼠血清及肝脏中TC、TG、LDL和HDL的水平的改变,达到降血脂的目的;此外,植物乳杆菌LP104能显著降低血清或肝脏中的ALT、AST、LPS和TNFα水平。说明植物乳杆菌LP104能够有效缓解由高脂饮食引起的小鼠高脂血症的发生。3.Western blotting分析了小鼠肝脏中CYP2E1和Nrf2的蛋白水平,发现植物乳杆菌LP104能够下调CYP2E1和上调Nrf2蛋白水平的表达。表明植物乳杆菌LP104可以激活CYP2E1/Nrf2信号通路,进而提高小鼠体内抗氧化酶GSH-Px水平来缓解由高脂饮食诱导的机体氧化应激,改善肝脏氧化损伤,预防高脂饮食诱导的代谢综合症的发生。4.小鼠肝脏中p-AMPK,SREBP-1,SCD1,p-ACC,PPARα,MTP和ACOX的蛋白水平分析表明,植物乳杆菌LP104能够上调p-AMPK,PPARα,MTP,ACOX和下调SREBP-1,SCD1和p-ACC蛋白水平的表达。表明植物乳杆菌LP104通过激活AMPK信号通路,抑制脂肪合成相关基因SREBP-1和SCD1的表达来减少脂肪生成;同时抑制p-ACC表达,增加PPARα,MTP和ACOX蛋白的表达,促进脂肪酸氧化来达到降脂的目的。5.高通量测序分析了小鼠盲肠的菌群组成,发现高脂饮食引起了小鼠盲肠中S24-7丰度的显著降低及Proteobacteria和Desulfovibrio丰度的显著增加。植物乳杆菌LP104能够显著增加Bifidobacterium,Lachnospiraceae,Butyricicoccus,Ruminococcus,Roseburia,Enterococcus,Clostridium和Staphylococcus的丰度并显著降低Oscillospira,Gemella和Biotia的丰度来改变肠道微生物的组成。表明植物乳杆菌LP104通过降低Firmicutes与Bacteroidetes的比值来改善肥胖,增加盲肠内有益细菌Bifidobacterium的丰度,使高脂饮食诱导的肠道菌群紊乱趋于正常。植物乳杆菌LP104通过改善肠道微生物的组成来调节脂质代谢。综上,植物乳杆菌LP104是一株具有良好降血脂功效和调节脂代谢潜力的益生菌株。植物乳杆菌LP104通过激活AMPK/Nrf2/CYP2E1信号通路和改善肠道菌群的组成调节高脂饮食诱导的脂代谢紊乱。
关键词：植物乳杆菌LP104;脂代谢;氧化应激;AMPK;肠道菌群
学科专业：食品安全与控制
摘要
abstract
第一章 前言
1.1 选题来源
1.2 选题依据
1.3 研究目的及意义
1.4 研究内容
1.5 创新点
1.6 技术路线
第二章 降胆固醇益生菌菌株的筛选
2.1 材料
2.2 方法
2.3 结果
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 植物乳杆菌LP104改善高脂饮食小鼠脂代谢机制
3.1 材料
3.2 方法
3.3 结果
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 植物乳杆菌LP104对高脂饮食小鼠肠道菌群的影响
4.1 材料与方法
4.2 结果
4.3 讨论
4.4 小结
结论
参考文献
致谢
