反复自然流产 (RSA) 是妇产科常见病, 约40%~60%不明原因, 指连续2次及以上的自然流产。目前多数研究表明, 母体免疫系统能否识别并耐受胚胎抗原是关键。大量研究结果显示, 正常妊娠中母体对胚胎的免疫反应以Th2体液免疫为主, 而Th1细胞免疫过强极有可能导致流产。为探讨研究外周血淋巴细胞亚群Th1/Th2的水平及其细胞因子德变化和临床意义, 辅助临床治疗。现回顾性分析该院2010年10月—2011年10月收治的60例妇女的临床资料, 将结果报道如下。
选取在深圳市盐田区计生中心经过妇检, B超, 尿HCG都正常无不孕, 无死胎或流产史, 要求人流的妇女30例为正常早孕组。同期经我中心排除因遗传, 感染及血型不合, 抗精子抗体阳性等因素, 确诊为RSA的妇女30例为病例组。见表1。
注:以上年龄, 孕周, 孕次比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。
采用Beckman Coulter FC500及其原装试剂, 利用表面分子将其分类CD3+CD4+CD-30T (Th1) , CD3+CD4+CD+30T (Th2) 细胞。ELISA试剂盒购自美国GBD公司。
分析前收集RSA组和对照组孕妇空腹取静脉血5 m L, 注入5.0 m L于EDTA.K2管, 空腹静脉血4 m L, 分离血清, -20℃保存待检测。严格按照操作程序。
采用SPSS13.0统计学处理软件包进行数据分析, 计量资料采用均值±标准差表示, 进行t检验。
对照组与病例组的CD3+, CD4+, CD+30, CD-30经过统计学比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表2。对照组与病例组的IFN-γ、IL-10经过统计学比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表3。
大多认为早期妊娠母体对胚胎的免疫耐受主要有以下: (1) 妊娠期对母体免疫反应的抑制。 (2) 胎盆的屏障作用可将胚胎抗原封闭, 避免与母体免疫接触, 同时将母体抗体及其免疫因子进入胎儿导致免疫反应隔离。Greco等[1]分别把妊娠与产妇, 男性与未孕的女性的外周血淋巴细胞在体外与胎盘生物制剂进行MLC培养, 发现前者可令淋巴细胞转化而后者不能, 证实了早孕期间的免疫耐受是动态的。相关研究结果显示:“免疫细胞分泌的细胞因子影响胚胎的着床、发育, 生殖的神经内分泌以及胎盘功能, 以维持正常妊娠活动”。
Th1细胞分泌IL-2, TNF-α, IFN-γ等, 引起局部炎症反应和迟发细胞免疫反应, Th2细胞分泌IL-4, IL-5, IL-6, IL-10等, 引起体液免疫促进B细胞增殖和抗体形成。Piccinni等[2]报道, 孕鼠胎盘IL-4比血中高5-10倍。而流产鼠胎盘IL-4等浓度相对低, 但IL-2, TNF-α, IFN-γ等浓度高。Makhseed等[3]对流产倾的妇女进行实验研究, 发现其成功怀孕组以Th2型的细胞因子为主, 而失败的以Th1型的细胞因子为主。Th1型细胞因子通过直接或间接激活NK、细胞毒性T淋巴细胞 (CTLs) 、巨噬细胞等多种毒性细胞妨碍妊娠。Th2型细胞因子主要是通过抑制Th1型细胞因子的产生及其作用来维持妊娠, 大部分反复自然流产均是由于患者机体不能产生足够的Th2型细胞因子来抑制Th1型细胞因子所致。国内刘庆之等[4]对此亦有论述。
大量研究表明Th2淋巴细胞有利于妊娠, 而Th1则相反。但需注意适量的Th1型细胞是有利于促进胎儿生长和母体抗感染能力。Haynes等[5]认为, 对妊娠来说, Th1与Th2的平衡更应该考虑。现已证实, Th2型细胞因子对维持正常妊娠起重要作用, 而Th1型细胞因子则不利于妊娠的正常进行[6];两种细胞因子之间的平衡对维持正常妊娠发挥重要作用。正常妊娠时Th1/Th2的比值下降, 母体免疫反应偏离Th1型而偏向Th2型。在RSA中Th1/Th2比值上升, 母体免疫反应呈相反变化。可见, 细胞因子自身、与妊娠有关的激素、感染等因素均对两型因子间平衡起重要调节作用
该研究主要从淋巴细胞的表面分子和淋巴细胞因子进行实验研究, 发现RSA的患者CD3+, CD4+, CD3+CD4+CD-30和IFN-γ相对正常妊娠妇女表达增强, 而CD3+CD4+CD+30, 和IL-10表达相对较弱。提示正常妊娠为一种特殊的Th2现象, Th1受到抑制。陈巧儿[7]等报道, RSA患者经过免疫治疗后, 促进机体向Th2淋巴细胞转化, 利于妊娠成功。综上所述, 利用流式细胞仪对RSA快速诊断, 结合运用淋巴细胞免疫治疗[8]或者给予细胞因子如Th2类因子制剂或抗Th1类因子制剂, 调节优势应答的类型, 达到早预防, 早治疗, 达到妊娠成功的目标。
摘要：目的 探讨反复自然流产患者外周血中Th1/Th2亚群水平及其细胞因子的变化, 研究在反复自然流产患者中的意义。方法 采用流式细胞仪检测和用酶联免疫吸附法检测30例反复自然流产患者血液中的Th1/Th2亚群水平, 并以30例正常健康早孕组为对照。结果 反复自然流产患者Th1和IFN-γ高于对照组, Th2和IL-10低于对照组数据比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论 反复自然流产患者的Th1/Th2和细胞因子失衡可能是反复自然流产的原因, 需加以重视。
关键词：反复自然流产,淋巴细胞亚群Th1/Th2, Th1/Th2细胞因子
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