维生素C又叫抗坏血酸,是水溶性药物,水溶后显酸性反应,它参加人体内多种代谢过程,降低毛细血管的通透性及脆性,增加机体抵抗力。干化学法检测维生素C采用还原法,尿液总维生素C含量的高低对血红蛋白、胆红素、葡萄糖及亚硝酸盐可产生严重的负干扰,干扰的程度随维生素C浓度的增加而增加[1]。随着科学技术的不断进步,维生素C的临床应用越来越广泛,对其研究也越深入,其中很多研究结果表明维生素C对尿液多个检验项目的测定有不同程度影响[2]。维生素C为还原物质与尿液干化学试带上的试剂发生竞争性抑制反应,对实验结果有干扰,影响检测结果的准确性,易造成误诊和漏诊。为了解维生素C对胆红素负干扰程度,该研究2012年1月—2013年5月期间对尿干化学法测胆红素(BIL)的影响进行分析,现报道如下。
收集祈福医院门诊和住院患者30例BIL3+阳性,维生素C阴性的新鲜中段尿液标本各>12 m L,患者为严重肝损伤,患者年龄15~70岁,男18例,女12例。
(1)仪器:长春迪瑞H-500尿液分析仪,型号:H-500。
(2)试剂:长春迪瑞实业有限公司生产的H系列尿液分析试纸,与长春迪瑞H-500尿液分析仪配套使用,且所用试剂均在有效期内,并严格按照存储要求保存。
(3)质控液:长春迪瑞实业有限公司的尿液分析质控液,与仪器试剂配套使用。
(4)维生素C:分析纯(AR),江苏省无锡市晶科化工有限公司生产,严格常温避光干燥保存。配制试样后再2 h内完成实验。
将上述每例尿液各分成6组于试管中,2 m L/管,共180管,分别加入不同剂量的维生素C:0 mg、0.2114 mg、0.4932mg、0.9863 mg、1.973 mg、2.466 mg并充分混匀。这6组得出来的各管维生素C浓度分别为0 mmol/L、0.6 mmol/L、1.4 mmol/L、2.8 mmol/L、5.6 mmol/L、7 mmol/L。迪瑞H-500尿液分析仪用H系列尿液分析试纸及配套尿液分析质控液进行室内质控检测,各项指标均在控后,严格按照尿干化学检测的操作规程对6组标本检测,所有标本在在2 h内完成[2]。
6组30例模拟维生素C阳性尿液的检测结果,各种浓度的维生素C对胆红素(BIL)的影响,当维生素C浓度为1.4 mmol/L时,就开始出现负干扰,当维生素C浓度为5.6 mmol/L时,尿胆红素(BIL)的假阴性达到100%。见表1。
3讨论
尿胆红素的检测对肝胆系统疾病的诊断有重要的价值,有助于诊断黄疸,胆红素可以敏感的反映肝细胞功能,临床实验表明,在病毒性肝炎黄疸前期未出现黄疸前,尿中的胆红素就已经明显增加[3],其与尿胆原结合可以为诊断黄疸的类型提供依据。由此可见,尿胆红素的检测对于临床诊断有极其重要的作用。
上试验数据表明维生素C含量>1.4 mmol/L时,尿胆红素开始出现负干扰;当维生素C含量≥5.6 mmol/L时,尿胆红素出现假阴性,即随着维生素C浓度的增加,对胆红素结果负干扰的影响也增加,该结果与其他学者的研究具有一致性[1,2,4,6]。出现该结论的原因是:尿液化学分析仪检测胆红素原理是结合胆红质在强酸性介质中,与2,4-二氯苯胺重氮盐起偶联反应呈紫红色[3],而维生素C具有还原性,当尿液中含高浓度维生素C时,与尿液干化学试带上的试剂发生竞争性抑制反应,抑制了偶氮反应使尿胆红素呈假阴性[4]。
这一研究表明,当尿胆红素受维生素C影响出现负干扰或假阴性时,就可能导致医生出现漏诊或误诊;该项研究结果也提醒检验人员,当尿液检查出现维生素C试验阳性时,需要警惕结果的可靠性。在目前检验人员从技术方面也作了一些改进,例如尿试纸条采用特别的尼龙层,来抑制一定浓度的维生素C对化验结果的干扰;将尿液煮沸几分钟,破坏维生素C后再进行化验检查[5];或加入定量氧化酶适当处理再进行检测;也可选择抗维生素C的试带或用含有维生素C膜块的试带(如尿11项试带)[6]等。但上述的方法对于尿胆红素及其他尿液相关检查项目的影响程度还无相关的数据,只能将结果作为参考。该项研究也存在不足,因其还与维生素C的代谢有关,故不能对尿胆红素与维生素C的关系进行线性关系对照,目前多大剂量和服药多长时间对尿液化学检测有影响还未见报道[7],存在的不足需要更多学者进行分析报告。
综上所述,用尿干化学测定尿胆红素的方法易受维生素C的影响,在检测尿常规前最好不要服用或静脉注射大量的维生素C,尤其是肝病患者,故医生或检验人员对需要做尿常规检查的患者要做好健康教育工作是十分重要的。提醒检验技术人员对维生素C试验阳性的结果应考虑与病人的病情是否相符,并及时与临床医生沟通。因此,临床医生必须结合患者的用药情况、体征、症状综合分析,才能有助于疾病的诊断与治疗,从而确保医疗质量;同时检验人员在日常工作中应高度重视,必要时在报告中注明,为临床提供客观、准确的检验依据。
摘要：目的 对尿胆红素阳性的尿液加入不同浓度的维生素C,讨论其对测定结果的影响。方法 收集该院30例严重肝损坏患者的尿液并加入不同浓度梯度的维生素C,然后对模拟维生素C阳性的尿液确保在2 h内用干化学的方法对尿胆红素进行定性实验,并对其影响进行分析。结果 对模拟维生素C阳性尿液的检测,当VitC浓度为1.4 mmol/L时,BIL的检测出现负干扰,当VitC>5.6 mmol/L时,BIL的假阴性率为100%。结论 尿中维生素C的检测是可以避免临床漏诊或误诊,减少实验误差,更好的满足临床对黄疸的诊断和黄疸类型的鉴别诊断。
关键词：维生素C,干化学,尿胆红素
[1] 戴海玲,苏屿.尿中维生素C对干化学法测定结果的影响[J].海南医学,2010,21(20):121-122.
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[3] 师红彪,陈琳.浅谈干化学尿液分析仪的原理及临床意义[J].健康必读,2012(9):110-111.
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[6] 张春岑.使用尿液化学分析仪应注意的问题[J].包头医学,2011,35(3):143.
[7] 丛玉隆,马俊龙,邓新立.尿液常规分析质量控制剂临床研究应用体会[J].临床检验杂志,2001,19(4):241.
