缺血性心脏病(IHD)又名心脏病，是指因冠状动脉功能障碍或者发生器质性的变化导致心肌缺血缺氧为主要特征的心脏病。目前这种疾病在我国的患病率越来越高，已经对人类健康构成了严重威胁，因此，研究防治该病的有效药物显得十分重要。中医药在该病的防治方面有较为独特的优势和较大潜质[1,2]。相关临床研究表明，《太平惠民和剂局方》中所载失笑散(药物组成：蒲黄、五灵脂)具有活血祛瘀，散结止痛的功效，因而在抗心肌缺血，抗动脉粥样硬化，降血脂，降血压，镇静，提高耐缺氧能力等作用[3]。“谨守病机，异病同治”理论指导下，该方已被广泛应用到临床各科。20XX年XX月—20YY年YY月该院选取N例将将经典古方“失笑散”制成颗粒剂，复制动物心肌缺血模型，以“失笑散颗粒”对50例大鼠进行干预性试验，以探讨失笑散颗粒对实验性心肌缺血大鼠心肌超微结构的影响，现将结果报道如下。
健康SD大鼠，雄性，体重180～220 g，由河北医科大学实验动物中心提供(动物合格证号：DK0608-0060)。
莱卡UTC切片机(全自动控温，半自动控制修、切片功能，双压缩机制冷);XDH–B型心电图机(热笔直描式交、直流两用);H–750型透射电子显微镜(分辨率：0.2 nm, 1 024×1 024象素，有图像导航功能和样品位置记忆功能)。
失笑散(DSS)：组成药物为蒲黄(pollen typhae)、五灵脂(tro gopterus dung)，上述中药均经河北医科大学中医学院中药系专家鉴定符合国家药品标准规定。复方丹参滴丸(规格27 mg/粒，主要成分为丹参、三七、冰片)。盐酸异丙肾上腺素注射液(ISO)(规格1 mg/2 mL)。
将50只心电图正常的大鼠随机分为5组，每组10只。空白对照组给等容量生理盐水，模型对照组给等容量生理盐水，低剂量组8 g/kg，高剂量组16 g/kg，阳性对照组81.0 mg/kg复方丹参滴丸，各组均连续灌胃给药7 d，从第3天起除正常对照组外，其他小组在给药后的1 h后给予5 mg/(kg·d)异丙肾上腺素，皮下注射，1 d/次，连续5 d，正常对照组给予等量生理盐水皮下注射，末次注射iso 2 h后，处死动物，对心肌超微结构进行观察：处死大鼠，迅速取大鼠心尖心肌组织(同一部位)，置于4%戊二醛溶液中，4℃冷藏1 h，磷酸盐缓冲溶液冲洗，锇酸后固定，再经磷酸盐缓冲溶液冲洗、丙酮梯度脱水、浸透、包埋、切片等一系列处理，制成超薄切片，再经醋酸铀、柠檬酸铅双重染色后，放于透射电子显微镜下，观察心肌细胞超微结构。
对大鼠心肌超微结构的影响：空白对照组(见图1)线粒体完整，肌纤维排列整齐，嵴排列规则;模型组(见图2)线粒体肿胀甚至破裂，肌纤维排列紊乱，嵴出现溶解消失;阳性对照组(见图5)和低剂量组(见图4)线粒体完整，肌纤维排列轻度紊乱，嵴有部分溶解或消失;高剂量组(见图3)线粒体完整，肌纤维排列基本正常，嵴偶有融合或消失，病变轻微。
《金匮发微》谓之“和血泄水，水湿去而血分调”，认为失笑散方是一通血脉，祛痰浊，调血水的名方。该方由五灵脂组成，《本草衍义补遗》：能行血止血。治心腹冷气，妇人心痛，血气刺痛。五灵脂行经血有功，不能生血。尝有人病眼中翳，往来不定，如此乃是血所病也。盖心生血，肝藏血，肝受血则能视，目病不治血为背理。《纲目》：五灵脂，足厥阴肝经药也，气味俱厚，阴中之阴，故入血分。肝主血，故此药能治血病，散血和血而止诸痛。止惊癎，除疟痢，消积化痰，疗疳杀虫，治血痹、血眼诸症，皆属肝经也。失笑散不独治妇人心痛血痛，凡男女老幼一切心腹胁肋少腹痛疝气，并胎前产后血气作痛及血崩经溢，俱能奏功。又按李仲南云，五灵脂治崩中，非止治血之药，乃去风之剂[4]。冲任经虚，被风伤袭营血，以致崩中暴下，与荆芥、防风治崩义同。该研究证实失笑散颗粒能够减轻心肌缺血程度及范围，降低血清心肌酶水平，维持细胞膜的完整性，减少自由基对心肌细胞膜的损害，起到保护受损心肌细胞的作用改善冠脉循环，提高心肌氧的供应，调节心肌氧的供需平衡，减轻心肌缺血性损伤[5]。
该实验中，对大鼠心肌超微结构观察发现，空白对照组线粒体完整，肌纤维排列整齐，嵴排列规则;而模型组心肌超微结构发生了明显的改变，出现肌纤维排列紊乱、线粒体肿胀甚至破裂等变化，再从剂量组中分析，心肌超微结构近似正常，没有模型组紊乱程度，这与阳性对照组超微结构病理改变程度相似。这就表明失笑散颗粒能有效地抑制大鼠心肌组织超微结构病理改变，可能与自由基的产生有关，大量的自由基在心肌缺血以及再灌注过程中产生，与心肌细胞膜多聚不饱和脂肪酸发生作用，进行脂质过氧化反应，并产生一系列连锁反应，最终造成膜损伤，促使心肌细胞膜整体上遭到破坏，膜的通透性升高，整个细胞暴露在损伤的范围中，直至心肌细胞死亡。
综上所述，失笑散颗粒对实验性心肌缺血大鼠心肌缺血有明显的保护作用，对自由基有较强的清除作用，减少自由基对心肌细胞膜的脂质过氧化反应。
摘要：目的 观察失笑散颗粒对实验性心肌缺血大鼠心肌超微结构的影响, 并对其作用机制做初步探索。方法 将健康雄性SD大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、失笑散颗粒低剂量组、高剂量组和阳性对照组 (复方丹参滴丸) , 连续灌胃给药7 d, 连续灌胃给药7 d, 从第3天起除正常对照组外, 其他小组在给药后的1 h后给予5 mg/ (kg.d) 异丙肾上腺素, 皮下注射, 1 d/次, 连续5 d, 正常对照组给予等量生理盐水皮下注射。末次注射iso 2 h后, 处死动物, 观察心肌超微结构。结果 空白对照组线粒体完整, 肌纤维排列整齐, 嵴排列规则;模型组线粒体肿胀甚至破裂, 肌纤维排列紊乱, 嵴出现溶解消失;阳性对照组和低剂量组线粒体完整, 肌纤维排列轻度紊乱, 嵴有部分溶解或消失;高剂量组线粒体完整, 肌纤维排列基本正常, 嵴偶有融合或消失, 病变轻微。结论 失笑散颗粒对实验性心肌缺血大鼠心肌缺血有明显的保护作用, 对自由基有较强的清除作用, 减少自由基对心肌细胞膜的脂质过氧化反应。
关键词：实验性心肌缺血,失笑散,心肌超微结构,作用机制
[1] 曹康, 陈光亮, 李莉.复方银杏丹参颗粒对异丙肾上腺素致心肌损伤的影响[J].中国实验方剂学杂志, 2007, 13 (4) :51-53.
[2] 吴克芹, 牟艳玲, 李杰.甲胺鸢尾素对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的影响[J].中药药理与临床, 2011, 27 (3) :20-22.
[3] 陈莹, 周波, 路秀云, 等.全真一气汤合并失笑散治疗冠心病稳定型心绞痛的临床观察[J].中医药学报, 2012 (1) :108-110.
[4] 任雪梅, 曹志然.加味失笑散治疗冠心病心绞痛的临床应用及作用机理研究进展[J].世界中西医结合杂志, 2010 (12) :1084-1085, 1089.
[5] 祝光礼, 周凡, 陈铁龙.黄芪失笑散抗心肌缺血的实验研究[J].中华中医药学刊, 2007, 25 (11) :2232-2234.
