枸杞的功能（精选11篇）
关键词：枸杞多糖,小鼠,免疫
大量研究认为, 多糖及多糖复合物参与和介导了细胞各种生命现象的调节, 特别是免疫功能的调节[1,2,3]。而机体的免疫系统及其免疫应答又对机体的健康成长及各种正常生理功能的提高有着重要作用。本研究探讨枸杞多糖对小鼠的免疫功能的增强效果, 并探讨其作用机制。
1 材料和方法
1.1 枸杞多糖
宁夏优质枸杞购自宁夏种子公司, 洗净晾干, 取2 000 g, 水提得多糖-1。将水煮的残渣用1.5%的氢化钠碱提得多糖-2。合并多糖-1和多糖-2为试验用枸杞多糖。
1.2 试验动物及分组
清洁级昆明种小鼠120只 (购自甘肃省医学科学研究院实验动物中心) , 6～8周龄, 体重20 g±2.0 g, 雌雄各半, 随机分为溶剂对照组、高剂量枸杞多糖 (灌服200 mg/kg) 、中剂量枸杞多糖 (灌服100 mg/kg) 、低剂量枸杞多糖 (灌服50 mg/kg) , 每组30只。
1.3 试剂
MTT[3- (4, 5-Dimethyl- thiazo1-2yl) 2, 5-diphenyltetrazolium bromide]、PRMI-1640培养粉、刀豆蛋白A (ConA) 为 Sigma公司产品。
1.4 迟发性变态反应 (DTH) (足跖增厚法)
小鼠腹腔注射2% (V /V) 羊红细胞SRBC 0.2 mL致敏后4 d, 测量左后足跖厚度, 然后在测量部位皮下注射20 μL 20% SRBC, 注射后于24 h测量左后足跖部厚度, 同一部位测量3次, 取平均值。以攻击前后足跖厚度的差值 (足距肿胀度) 来表示DTH的程度。
1.5 ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验
无菌取脾, 制成单细胞悬液。经200目筛网过滤, 用Hank′s液洗3次, 然后将细胞悬浮于2 mL的完全培养液中, 调整细胞浓度为2×106个/mL。将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中, 每孔1 mL, 一孔加50 μL ConA (相当于5μ g/mL) , 另一孔作为对照, 置5% CO2 37℃培养72 h。培养结束前4 h, 每孔轻轻吸去上清液0.7 mL, 加入0.7 mL不加小牛血清的RPMI-1640细胞培养液, 同时加入MTT (5 mg/mL) 50 μL/孔, 继续培养4 h。培养结束后, 每孔加入1 mL盐酸异丙醇, 吹打均匀, 使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中, 每个标本分装3孔作为平行样, 在多功能免疫分析仪 (Wallac 1420 芬兰) , 波长570 nm读取OD值。
1.6 脾脏抗体生成细胞检测
每只鼠经腹腔注射2% (V /V) 羊红细胞SRBC 0.2 mL免疫5 d后, 取脾, 制成细胞悬液。将表层培养基加热溶解后, 与等量双倍Hank′s液混合, 分装小试管, 每管0.5 mL, 再向管内加50 μL 10% SRBC、10 μL脾细胞悬液, 混匀倾倒于琼脂糖玻片上, 放入二氧化碳培养箱中温育1.5 h, 然后加补体, 继续温育1.5 h, 计数溶血空斑数。
1.7 半数溶血值 (HC50) 的测定
每只鼠经腹腔注射2% (V /V) 羊红细胞SRBC 0.2 mL免疫5 d后取血, 制备血清, 用SA缓冲液将血清稀释200倍。取1 mL加入10%SRBC 0.5 mL, 补体1 mL。另设不加血清的对照管。置37℃水浴中保温30 min, 冰浴终止反应。2 000 r/min离心10 min。取上清1 mL, 都氏试剂3 mL于试管内。同时取10% SRBC 0.25 mL, 加都氏试剂至4 mL, 于另一试管内充分混匀, 放置1 min。于540 nm处以对照管作空白, 分别测定各管光密度值, 按下式计算HC50。
HC50= (枸杞多糖光密度值÷SRBC半数溶血时的光密度值) ×稀释倍数
1.8 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验
每只鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液1 mL, 30 min后处死动物, 腹腔注射生理盐水2 mL, 充分混匀, 吸腹腔洗液1 mL, 平均分滴于2张载玻片上, 置37℃温育30 min。用生理盐水漂洗, 晾干, 固定, Giemsa染色, 镜检。
注:与对照组相比较, *表示P<0.05, **表示P<0.01, 下表同。
1.9 采用F检验及均数t检验
应用SPSS 11.0软件进行统计学分析, 计算P值。
2 结果
2.1 枸杞多糖对小鼠细胞免疫功能的影响
小鼠灌胃枸杞多糖15 d后, 高、中、低3个剂量组的足跖肿胀度与对照组比较均有统计学差异, 而各剂量组的淋巴细胞增殖力与对照组比较无显著差异, 见表1。
2.2 枸杞多糖对小鼠体液免疫功能的影响
小鼠灌胃枸杞多糖15 d后, 高、中、低3个剂量组的溶血空斑数及200 mg/kg剂量的半数溶血值与其对照组比较均有统计学差异。结果见表2。
2.3 枸杞多糖对小鼠巨噬细胞功能的影响
小鼠灌胃枸杞多糖15 d后, 高剂量组的吞噬率和吞噬指数与其对照组比较均有显著性差异。结果见表3。
3 讨论
植物多糖是一种广泛存在于植物中的天然大分子物质, 由于其独特的功能, 近来被广泛应用于临床来提高机体的免疫能力, 增强机体的抗氧化作用, 以调节生理功能[2,3,4]。多糖类化合物作为免疫调节剂能激活淋巴细胞、巨嗜细胞和自然杀伤细胞等免疫细胞;还能激活补体, 促进细胞因子生成等多途径对免疫系统发挥调节作用[4,5,6]。
枸杞具有抗氧化、降血脂、保肝等多种生理功能, 是无毒副作用的保健食品。其多糖含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等。本试验也证实, 灌胃小鼠枸杞多糖15 d后, 枸杞多糖在50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg 3个剂量组均能提高抗体生成细胞数;在100 mg/kg、200 mg/kg 2个剂量组还能增加小鼠的半数溶血值;在100 mg/kg、200 mg/kg 2个剂量组的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数与其对照组比较也显著增高;灌胃小鼠枸杞多糖15 d后, 50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg 3个剂量组的足跖肿胀度与对照组比较均有统计学差异, 说明枸杞多糖能显著增加小鼠足跖肿胀程度。这都表明, 枸杞多糖可促进正常小鼠的细胞免疫、体液免疫和巨噬细胞功能, 具有明显的免疫增强作用。此外, 本试验也表明, 在 ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验中, 枸杞多糖对小鼠的淋巴细胞转化力影响不明显。
综上所述, 枸杞多糖能明显增强机体的细胞免疫、体液免疫功能和巨噬细胞功能, 具有明显免疫增强作用。
参考文献
[1]田庚元, 冯宇澄, 林颖.植物多糖的研究进展[J].中国中药杂志, 1995, 20 (7) :441.
[2]李金锋, 郭静文, 黄信孚.猪苓多糖、香菇多糖和分枝杆菌多糖对淋巴因子活化杀伤细胞活性增强作用的研究[J].中国中西医结合杂志, 1996, 16 (4) :224-226.
[3]李杰, 张楚箐.中药多糖的免疫调节及抗肿瘤作用[J].中国兽医杂志, 2004, 40 (11) , 31-33.
[4]张明军, 胡庆和, 贾本立.枸杞多糖对小鼠腹腔巨噬细胞作用的定量细胞化学研究[J].宁夏医学院学报, 1994, (4) :20-24.
[5]杨小萍, 张声华.枸杞子糖类的研究[J].林业化学与工业, 1998, 18 (2) :65-68.
摘 要：目的:探讨补充枸杞多糖对排球运动员免疫功能的影响。方法 实验组和对照组每天进行大强度训练。连续训练30 d。训练期间实验组每天早晚服用枸杞多糖各2.5 g，对照组每天早晚各服安慰剂2.5 g。在实验前后分别检测免疫指标CD3+%、CD4+%、CD8+%、CD4+/ CD8+、IgA、IgG和IgM。结果：30 d的大强度训练后，实验组CD3+%、CD4+%、CD4+/CD8+、IgA、IgG较对照组明显升高(P<0.05) ；CD8+% 明显低于对照组(P<0.05)。结论：补充枸杞多糖对排球运动员细胞免疫功能具有改善的作用。
关键词：枸杞多糖;免疫功能;排球运动
中图分类号：G804.2
文献标识码：A
文章编号：1007-3612(2008)08-1084-03
Effects of Lycium Barbarum Polysaccharides (LBP) Supplementation on Immune Function in
Volleyball Players
LI Lei
（Department of P.E., Huaiyin Normal Institute, Huaian 223002, Jiangsu China）
Abstract:Objective: Study the effects of Lycium barbarum polysaccharides supplementation on immune function in volleyball rowing athletes．Methods :Fourteen elite volleyball athletes were allocated into LBP group and control group. Al1 the subjects performed high intensity exercise everyday for 30 days. The subjects of the LBP group supplemented LBP 2.5g and the subjects of the control group supplemented placebo 2.5g everyday. Blood samples were collected before and after exercise results: compared with the control group, tCD3+%, CD4+%,CD4+/ CD8+、 IgA, IgG increased significantly; while the percentage of CD8+ decreased Significantly in the exercise group. Conclusion: supplementation of LBP could improve the cell immune function and humoral immune function in volleyball athletes.
Key words: lycium barbarum polysaccharides; LBP; immune function; volleyball sports
运动与免疫之间相互关系的问题最早开始于19世纪，但一直到20世纪80年代运动训练对免疫功能的影响才为多数研究者所重视［1］。进入90年代以来，随着相关学科的发展，运动免疫学研究发展迅速。免疫功能与运动的关系越来越引起人们的重视，普遍认为体育锻炼可以提高机体的免疫参数，增强机体吞噬细胞，自然杀伤细胞的活性，防止感染的发生。但也有大量研究证实，长时间运动或强度过大的运动可引起机体免疫抑制，在这种状态下，运动员的负荷训练产生的疲劳不易消除，容易遭受如感冒等感染性疾病的侵犯［2］。
枸杞(Lycium barbarmL.)是一种补益类名贵中药属茄科（Solanaceae）枸杞属为多年生落叶灌木，全世界约有80余种，主要分布在南北美洲及欧亚大陆［3］。我国枸杞约有7个种3个变种，主要分布在西北和华北的3个地区枸杞的化学成分较复杂，现已发现枸杞发挥各种功能作用的主要活性成分是枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides,LBP）。
现在枸杞多糖已经被广泛地应用于食品。目前有关补充枸杞多糖对运动员免疫功能影响的研究仍不多见，本研究拟探讨补充枸杞多糖对排球运动员免疫功能的影响。
1 研究对象与方法
1.1 研究对象 山东师范大学备战全国大学生运动会的14名男子排球运动员，其中健将2名，一级运动员5名二级运动员7名。所有受试对象均无代谢及免疫系统疾病史，受试前1月未患病，并志愿参加本实验。受试对象随机分为实验组和对照组，每组7人，其基本情况见表4.2±2.31.2 研究方法 实验组服用枸杞多糖胶囊，每日2次，每次两粒每日剂量5 g(按说明书服用)，实验期为4周。由宁夏伊然健康品集团公司提供。对照组服用等量的安慰剂(为颜色形状相同的胶囊，内填淀粉)。实验共进行4周，为4周大运动量训练。实验期间，除正常饮食和服用枸杞多糖胶囊和安慰剂外，受试者均不服用其他营养保健品和药品，实验条件均相同。
1.2.1 免疫功能测定 对照组和实验组在实验前和第31 d的清晨分别在安静状态下抽取肘静脉血5 mL，肝素抗凝后待检。
1.2.2 检测指标及方法 淋巴细胞亚型：CD3+T淋巴细胞百分比计数(CD3+%)、CD4+T淋巴细胞百分比计数(CD4+%)、CD8+T淋巴细胞百分比计数(CD8+% )、CD4+／CD8+比值采用Annexin V染色方法，检测仪器为美国BECK MANCOULTER(贝克曼一库尔特)公司生产的机器型号为Z2的流式细胞仪。由山东大学齐鲁医院检验中心检测。血清免疫球蛋白：IgA、IgG、IgM采用免疫比浊法，检测仪器为PUS-2018G型半自动生化分析仪。
1.2.3 统计分析 采用SPSS10．0软件包，通过t检验和单因素方差分析对实验所得数据进行统计处理，显著差异水平为0.05。
2 结 果
2.1 补充枸杞多糖对T淋巴细胞亚群的影响 从表2可以看出，对照组训练后CD3+%、CD4+%及CD4+/CD8+比值降低，CD8+%升高但是差异没有显著性统计学意义(P>0.05)。实验组CD3+%、CD4+%训练后明显升高，差异有显著(P<0.05),CD4+/CD8+比值训练后升高，有显著性统计学意义(P>0.05)。CD8+%训练后降低，但是差异没有显著性(p>0.05)。训练前对照组和实验组CD3+%、CD4+%、CD8+%、CD4+/CD8+比值组间比较差异没有显著性(P>0.05)。训练后实验组的CD4+%和CD4+/CD8+比值明显高于对照组(P<0.05),CD8+%明显低于对照组(P<0.05)。
2.2 补充枸杞多糖对免疫球蛋白浓度的影响 由表3可以看出，对照组训练后IgG、IgM 的浓度稍微升高，IgA稍微下降，但没有显著性差异(P>0.05)，实验组训练后IgM的浓度稍微升高，但差异没有显著性(P>0.05)。实验组实验后IgG明显高于训练前(P<0.05)，并与对照组相比有显著性差异(P<0.05)；IgA较实验前也显著升高(P<0.05)。
3 讨 论
运动员尤其是排球运动员在大强度训练或比赛期问，可以发生细胞免疫和体液免疫机能抑制，从而使机体对病原微生物易感性增高或所患感染性疾病症状加重，所以，训练和比赛期间定期检测免疫指标作为常规的机能监测是非常必要的［4］。已有大量的文献资料证明T淋巴细胞及其亚群和人体运动免疫调节有十分重要的联系［5,6］，如大负荷训练后期CD4+/CD8+比值表现为非常显著的下降，表示运动员的免疫功能发生紊乱。在本研究中观察到对照组训练后T淋巴细胞亚群的比值，为整个实验中各组的最低值。另据相关伤病登记资料统汁，历年的这个时期也是包括感冒在内的感染性疾病的高发期，说明排球运动员运动强度越大，训练时间越长，T淋巴细胞及其亚群的功能受抑制程度就越高，恢复速度就越慢［7］。
T淋巴细胞是一种重要的免疫活性细胞。按其表面特有标志CD分子的不同分为CD4+T细胞和CD8+T细胞两大亚群，按功能不同分为辅助性T 细胞(Th)、抑制性T细胞(Ts)、细胞毒性T细胞(Tc)［8］。T 淋巴细胞作为免疫细胞在清除病毒感染，抗肿瘤及排斥异体方面起着重要的作用。T淋巴细胞是免疫应答中细胞免疫的主要执行者。T淋巴细胞亚群在介导细胞免疫和体液免疫过程中充当了重要的角色，是反映免疫功能的重要指标。CD4+T又称为辅助性T细胞，起增强免疫应答的作用；CD8+T细胞又称细胞毒性T细胞，在免疫应答中起抑制的作用［9］。CD+／CD°的比值是评估机体细胞免疫状态的一个重要指标。CD4+/CD8+比值上升提示免疫应答的正调节占优势，而比值下降甚至少于1的时候，提示免疫功能低下。有研究发现长时间大强度的训练后，运动员的细胞免疫功能会受损，主要表现为CD8+细胞的过度激活和CD4+T细胞的过度抑制［10］。本研究发现，对照组在30 d的训练后，其CD3+%、CD4+%及CD4+/CD8+比值都有下降的趋势，CD4+/CD8+的比值降到接近1的水平，表明长时间耐力训练使细胞免疫功能有所下降。实验组训练后CD3+% 、CD4+%较训练前明显升高，提示训练后免疫功能明显增强；训练后CD ％和CD4+／CD8+的比值较对照组明显升高，CD8+％较对照组明显降低，提示训练后实验组细胞免疫功能较对照组明显增强。我们分析认为训练后实验组免疫功能不但没有下降，而且较对照组明显增强，这可能与补充枸杞多糖有关。
刘彦平等报道［11］，给小鼠连续灌服LBP20 天能增加正常小鼠脾脏总T 细胞数及辅助性T 细胞亚群（Th）百分比，提高淋巴细胞转化率。汪积慧［12］等通过对小鼠灌服LBP 液研究发现，LBP 可明显提高T淋巴细胞的增殖作用 。曲红等［13］实验发现，10～50 mg/kg 的LBP 对老年小鼠抑制性T 细胞Ts 有明显调节作用，可抑制Ts 细胞的活性。在本实验中发现，服用枸杞多糖胶囊的排球运动员。由此证明，枸杞多糖（LBP）能够提高力运动小鼠的细胞免疫功能。
免疫球蛋白(Immunoglobulim Ig)是B细胞在抗原刺激下活化增殖并分化为成熟的浆细胞所分泌的具有抗体活性的糖蛋白分子?。它除直接对抗相应病原微生物和毒素外，还能诱发其他各种功能，如补体活化、吞噬作用等，是机体非常重要的防御机能［14］。大量研究表明，长时间大强度运动会降低运动员的免疫功能［15,16］。而免疫功能的下降恰恰是一次次过渡训练未能充分恢复造成免疫抑制累积的结果。而作为机体非常重要防御机能的免疫球蛋白的变化能非常敏锐地提示当时机体所处的状态如何。
IgG是血清中含量最高的，为机体再次免疫应答产生的主要机体，也是机体抗感染的“主力军”，还发挥免疫调理、ADCC等重要免疫效应；IgM为初次体液免疫应答中最早出现的抗体，为机体抗感染免疫的“先头部队”；IgA具有中和毒素等作用［17］。因此，通过检测血清中IgG、IgM、IgA水平，可了解合成组织器官的功能及机体抗感染免疫能力，从而可用来评估机体体液免疫状态。有研究得出反复多次短时间高强度运动则会诱导免疫球蛋白的“超量恢复”［18］，这一点对于某些剧烈运动也可以提高人体的免疫力提供了理论依据。本文试验中对照组训练后IgG、IgM 的浓度稍微升高，可能也证实了这一观点。
本文报道的实验组实验后IgA、IgG明显高于训练前(P<0.05)，并与对照组相比有显著性差异(P<0.05)说明补充枸杞多糖能促进IgG、IgA的合成，有助于提高免疫力。IgG作为血清中含量最高的具有中和毒素、中和病毒及免疫调理、ADCC等功能。浆细胞内形成的双体IgA进入黏膜上皮细胞可在上皮细胞间隙中，可与分泌片组成分泌型IgA，然后随分泌液排出黏膜表面。分泌型IgA能阻止病原微生物由黏膜侵入体内，具有抗菌、抗毒素和抗病毒等多种作用［19］，是黏膜局部抗感染的重要免疫物质。我们推断LBP提高免疫的方式至少有2种：通过神经内分泌作用于免疫系统和直接作用于免疫系统。如宋炳生等人认为下丘脑-垂体-肾上腺轴和交感神经激活是应激造成免疫抑制最重要的两条途径［20］。LBP在常用剂量范围内通过下丘脑去甲肾上腺素(NA)的调节作用，通过外周免疫器官神经信息使脾NA含量下降至正常值的40%～50％，同时通过下丘脑调动血浆皮质酮参加免疫应答.近年来，国内大量研究证实枸杞多糖在神经内分泌免疫调节网络中有免疫增强功能。LBP在体内具有浓度依赖性增强大鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力，促进其产生IL-l和TNF水平［21］。枸杞多糖可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长，对小鼠的胸腺具有一定的保护作用，可下调血清中VEGF、TGF-βl水平。LBP-X可通过调节人外周血单核细胞IL-2和TNF-α基因的表达而增强免疫功能。另外也推断可能是因为枸杞多糖含有丰富的超氧化物歧化酶(简称SOD)：SOD 是生物体内普遍存在的能消除自由基的金属酶［22］，枸杞多糖可能是通过消除自由基来达到调节体液免疫的作用［23，24］。
4 结 论
对于长期从事大强度训练的排球运动员，补充枸杞多糖（LBP）可使其训练后的CD3+%、CD4+%、CD4+/CD8+比值较训练前明显升高，有显著性统计学意义。实验组实验后IgG明显高于训练前，并与对照组相比有显著性差异；IgA较实验前也显著升高(P<0.05)。 提示细胞免疫和体液免疫功能得到改善。因此，枸杞多糖（LBP）可以作为一种运动营养补剂降低因力竭运动引起的机体免疫功能下降，从而使大运动量训练所致机体感染的情况得到有效的缓解和控制，为中国的枸杞的深层开发和利用提供科学依据。
参考文献：
［1］ 陈佩杰.运动免疫学研究概述［J］.上海体育学院学报，1996，20(1)：37-41.
［2］ 刘海英，熊正英.运动营养学的发展与展望［J］.渭南师范学院学报，2004，9（5）：23-26.
［3］ 何进,阎淳泰,梁永祥.枸杞果实化学成分研究概况［J］.中国野生植物资源,1997(1):8-11.
［4］ 尹剑春，颜军.运动训练对心理应激大鼠神经内分泌免疫若干指标的影响［J］.北京体育大学学报，2006，29(1)：70-73.
［5］ Gameron K R. T-cell sub-populations and polyclonal lymphocyte funtion in continuous
and intermittent exercise. Aust J Sci Med Sports，1989(4):15-19.
［6］ Nieman D C, BerkLs, Simpson Westerberg M, et al. Effects of long endurance running
on immune system parameters and lymphocyte function in experienced marathoners. Int J Sports Med,1989(10):317-323.
［7］ 矫玮，佟启良，王安利，等.运动量及年龄因素对淋巴细胞转化的影响［J］.北京体育大学学报，2001，24(2)：30-32.
［8］ Keast D，Arstein D. Depression of
P1asma Glutamine Concentration After Exercise Stress and It s Possible Iinf1uence on the Immunebn System［J］.Med J，1995，8：15-18.
［9］ Newsholme E A， Parry-Bi 1 1ing M ，Mcandrew，et a1.A Biochemical Chani sm to Explain Some
Characteri stics of Overtraining［J］.Med Sport Sci，1991，32：79-93.
［10］ 王玉琴，李骁天.周期性大强度运动训练对竞技健美操运动细胞免疫机能的影响［J］.北京体育大学学报，2006，29(4)：491-493.
［11］ 刘彦平,毛辉青,李萍,等.枸杞多糖对小鼠T 淋巴细胞亚群和淋巴细胞转化作用的研究［J］.青海医学院学报, 2000,21(4):4-5.
［12］ 汪积慧,李鸿梅.枸杞多糖免疫调节作用的研究［J］.齐齐哈尔医学院学报,2002,23(11):1204-1207.
［13］ 曲红，王德山.枸杞多糖的药理及临床研究概况［J］.山东医药工业，2002,21(4):36-37.
［14］ Wong C W，Waston D L.Immunodulatory EffectS of
Dietary Whey Proteins in Mice．［J］Dai ryRes.1995，62(2)：359-368.
［15］ 张缨. 实用运动免疫学［M］.北京:北京体育大学出版社, 2005:137-138.
［16］ Gleeson M, Pyne D B, Mcdonald W A, et al. Pneumococcal antiboty responses in elite swimmers ［J］.Clin Exp Immunol,1996,105:238-244.
［17］ DEKA, Fuente M, Martin MI, Ortega E. Changes in the phagocytic function of peritoneal macrophages from old mice after strenuous physical exercise. Comp Immune Microbial Infect Dis，1990,13:189-198.
［18］ Mahan M P, Young M R. Immune parameters of untrained or exercise-trained rats after exhaustive exercise. J Appl Physiol，1989,66:282-287.
［19］ Fitzgerald L Over-training increase the susceptibility to Infection. Internation Journal of Sports Medicine, 1991 (suppl): 5-8.
［20］ 宋炳生，杨玉龙等. 枸杞多糖的免疫调节作用［J］.药学实践杂志,1997，15：69-72.
［21］ 齐春会，张永祥．枸杞多糖体外对正常及衰老小鼠免疫细胞功能的作用研究及作用机制的研究［J］.中国免疫学杂志，1999，15(9)：419-421.
［22］ 邱世翠,高法彬,彭启海,等.枸杞对抗体形成细胞的作用研究［J］.时珍国医国药, 2001,12 (7): 585-586.
［23］ 曹建民，田野，赵杰修，等.营养干预对运动性盆血运动员血清铁蛋白，转铁蛋白影响的研究［J］.北京体育大学学报，2007，30(10)：1350-1351.
治气血不足，营养不良，疲乏无力，饮食减少：
山药30g，兔肉120g，党 参30g，大枣30g，枸杞子15g，加水共煮至肉熟透，饮汤食肉。
治体弱乏力，贫血昏花，视物模糊，肾虚阳痿，腰痛：
枸杞子100g，熟青笋100g，瘦猪肉500g， 猪油100g，食油、白糖、味精、料酒、芝麻油、水豆粉、酱油适量。猪瘦肉洗净，去筋膜，切成7cm长的丝。青笋切成同样长的细丝，枸杞洗净待用。炒锅入油烧热，将肉丝、笋丝同时下锅划散，将料酒、白糖、酱油、食盐、汤、味精搅匀，与枸杞一同加入锅中颠翻几下， 淋入芝麻油推匀， 装盘即成。
治肾虚眩晕，头痛神衰，腰酸足软：
淮山药50g，枸杞子15g， 猪 脑1具，生姜、葱、味精、食盐等适量。猪脑漂洗干净，淮山药、枸杞子洗净，一同放入砂锅中，入葱、姜、清水适量。将砂锅置武火上煮沸后，移文火上煮熟即可，食用时加食盐、味精调匀。分顿食用。
治老年体虚：
在沙滩上，我看见了五颜六色的贝壳。有红的，有黄的，有紫的……这些贝壳的样子真是千奇百怪呢!有三角形的，有扇形的，有圆形的……贝壳上面还有各种各样的`图案哩!
这么多的贝壳，一个有一个的特点。无论拣起哪一个，都会觉的很奇怪，很有趣。如果画家能把每个贝壳都画得栩栩如生，那么画家的本领就太了不起了!
我突然觉得自己仿佛就是一个贝壳，穿着五颜六色的衣裳，卧在沙滩上，悠闲的享受着温暖的阳光。一个小朋友轻轻的拣起我，扔下大海，当我落到水中，瞬间感觉浑身凉飕飕的，不只是我一个，这一片沙滩上的贝壳，都会经历过这样的事情。直到那个小朋友走了以后，我才从海里回到沙滩上，继续懒洋洋躺在那儿。一只小螃蟹爬来，告诉我剪海草的快乐。鱼儿游了过来，告诉我游泳的乐趣……
过了好一会儿，我才回过神来，记起我不是贝壳，我是在拣贝壳呢!
然后，我和爸爸去玩“冲浪”。又清又蓝的海水冲到了我的小脚丫，我拿起了冲浪板，就开始冲浪了。开始冲浪了，我感觉自己快要从冲浪板上摔下来。我越想越担心，害怕被淹死。后来，爸爸手把手地教我，我学会冲浪啦!
2. 德·厚万家，令类体验，红·动天下。
3. 有机好枸杞，德令红传奇。
4. 天然滋补降三高，养元固本抗衰老。
5. 天然德令红，自然更出众。
6. 天然枸杞，德令红福。
7. 为自然而生，因品质而红。
8. 好在天然，贵在有机。
9. 圣水哺乳杞，得天独厚食。
10. 每一粒都是冰川的新鲜。
11. 天山养生道，绿色德令红。
12. 天然德令红，品质更出众。
13. 中国红，传承爱。
14. 天然枸杞，绿色有机。
1.1 根干培养及育苗技术
枸杞主根肉质, 极软, 宜于弯曲整形, 为培养出各种奇形的根系, 应从幼苗做起。在育苗方面, 首先是品种的选择。一般选用宁夏大果品种, 于9~10月份采收, 采收后将果实用冷水浸泡1~2天, 搓去果皮、果肉, 再用水漂出果皮、果肉, 晾干后去杂即可得纯净种子。种子处理:枸杞种子催芽处理要在播种前30~40天进行。方法是:将种子浸水1~2天, 混沙后置于5~20℃温度下30~40天即可发芽播种。
1.2 播种技术
2月上旬将优质大粒枸杞的种子播种在育苗盘内, 当苗高5cm时移入10cm×10cm的塑料营养钵内, 移栽时带土坨, 不要弄伤主根。移入塑料营养钵后加强肥水管理, 让其快速生长。在生长过程中, 枸杞的根由于受容器限制, 主侧根均沿营养钵的容器壁盘旋成长, 6月下旬便长满了整个营养钵。7月上旬再由营养钵移人内径18cm、高16cm的泥盆中, 换盆时注意不要伤根。换盆后确定主干, 立杆绑缚、整枝, 适当摘心, 控制徒长枝旺长, 多生侧枝。加强水肥管理, 促进根、干生长。又由于根受花盆的限制, 仍沿盆壁螺旋式向盆底和四周生长, 很快便长满盆, 第2年春无霜期过后, 再从花盆中取出, 定植在大地, 快速培养。
2盆景制作的技术细节要求
2.1 葵桩与上盆
由于枸杞属蔓性植物, 大多数植株没有明显的主干, 因此造型时多采用“以根代干”的方法, 将树根提出土面代替树干。栽培基质以通气排水良好、酸碱度适宜、基本不含养分为原则, 笔者采用草炭:珍珠岩:蛭石 =l:l:l。效果良好。栽植前用l/1000的多菌灵溶液进行基质消毒, 成活率达100%。根桩萌发前, 要经常喷水, 保持枝干湿润, 约3周左右即可萌芽, 此时不要抹芽, 任其生长, 以促进根系发生。在整个养桩期, 基本不用往基质中施肥, 以免伤害新发根系, 可每隔10天往叶面施1次0.2%尿素和磷酸二氢钾混合液。当嫩芽长至10cm左右时, 去掉周围长出的多余枝条, 并对留下的枝条进行摘心, 使营养集中, 促进分枝。
2.2 树干的造型及管理
利用枸杞萌发力强、枝条生长陕的特点, 造成伞形、2层楼、3层楼等形式。伞形、2层楼、3层楼具有枝条分别为1、2、3枝, 剪后每层之间的树距15cm。分别将枝条用铁丝固定于合适的位置。在管理方面, 一是要注意保湿:根桩剪发前, 要经常喷水, 保持枝干湿润。二要注意抹芽:4月中旬萌芽时, 要及时抹芽, 每个枝干上只保留顶端四周的芽, 其余的全部抹去;三要注意修剪:4月下旬, 当留下的嫩芽长至10cm左右时进行修剪, 剪去杂乱枝, 再把选留下的枝条保留3~5cm短截。以后要经常修剪, 到6月底为止。四是要注意追肥:4月下旬开始追施氮肥, 用适度的尿素水溶液, 每隔10天1次, 到7月底, 各种形状均已形成, 停施氮肥, 改为每隔10天追施1次0.2%的磷酸二氢钾水溶液。
2.3 要加强修剪
合理修剪能有效地改善树冠内部通风透光条件, 对加速形成树冠, 调节生长和结果的关系, 平衡树势有着重要的作用。要掌握“三去三留”的剪枝原则, 即“去老留新、去病留健, 去弱留强”, 使结果枝条在树冠内均匀分布。在春节过后, 根据造型需要, 每枝只留基部2~3芽, 实行重剪。当树冠空间内生出的新梢长到10~15cm时, 应及时摘心剪梢, 促使这些枝条中下部发出较多的新枝条, 培养更多的结果枝组。平时宜经常抹芽除萌, 使营养集中, 及时去除病弱枝和过密枝, 从而维持均匀、饱满树冠。在夏季休眠后、立秋之前进行修剪并摘叶, 加强肥水管理, 会第2次生出花蕾叶芽, 到春节期间便果红叶绿。
2.4 注意果实的培养及造型
第3年春上盆缓苗后要加强肥水管理, 春季以氮、钾肥为主, 夏末秋初以施磷钾肥为主, 促进根、干及果实的生长。在大庆地区枸杞夏季不休眠, 5月上旬~7月中旬以营养生长为主, 在这一阶段时间要加大肥水管理, 促进根干的生长, 培养较多的侧枝, 为秋季的开花结果打好基础。另外在管护的同时要及时摘心确定主侧枝, 并随时用铁丝造型绑缚, 及时除去徒长枝或进行轻剪, 培养出更多的结果枝。为使果实成熟一致, 要剪去过早和过晚开花的结果枝。7月下旬开花期要多施磷钾肥, 加强管理, 并适当控水, 提高坐果率, 让其多结果, 结大果。8月下旬~9月下旬果实逐渐由绿色转红, 一串串红玛瑙般的枸杞子, 再配上盘根错节环抱奇石的根系, 显得十分壮观, 一直可以观赏到春节前后。
3病虫害防治
当发生病虫害时, 要及时清除病枝落叶, 加强营养, 以增强抗病力, 使用药剂时尽量傲到交互用药, 以免产生抗药性。
参考文献
[1]张敬德, 周丽娟.五种盆景供不应求[J].吉林农业, 2005 (11)
方约连老人的长寿得益于自身的保养和家人的照顾。除了正常的饮食之外，老人最大的一个养生特点是：常年吃枸杞，或泡茶饮，或煮粥食，有时直接食用。
枸杞子，也ⅡU枸棘，还有“无精”、“地仙”的美称。“枸”和“杞”原是两个树名，由于枸杞的刺如枸刺，茎如杞条，故叫枸杞。枸杞是一种值得大众多吃的保健食品，能滋阴、明目、补肾、健体，常服枸杞可以强壮筋骨、医治风湿痛；又可改善血液循环，提高身体适应力。而且枸杞最为人所乐道的疗效，在其养颜之功，常服有美白皮肤的效果，明目安神，甚至被认为可令人长寿轻身。
传统中医认为，枸杞具有很好的补肾益精、养肝明目的保健功能，是中老年人常用的滋补、美容、长寿的可选之品。枸杞、人参、何首乌三药被称为“益寿三宝”。科学家通过实验证明，枸杞具有促进和调节免疫功能、保肝和抗衰老三大药理作用。
保肝枸杞含有14种氨基酸及大量的胡萝卜素，还含有甜菜碱、烟酸、牛磺酸、维生素B、维生素C、钙、磷、铁，以及枸杞多糖等。所含物质对肝脏的解毒功能都有很好的促进和提高作用。特别是枸杞多糖能减少脂肪的沉积，抑制肝脏中过氧化脂质的形成。过氧化脂质对肝脏有明显的损伤作用。
抗衰老枸杞及枸杞的提取物，可以明显改善老年人的衰老症状和生化指标。而且，枸杞子有抗遗传损伤、维护正常细胞发育、提高脱氧核糖核酸损伤后的修复能力、促进衰老细胞向年轻化逆转的作用。另外，这一生化反应过程，对癌细胞的形成有其积极的预防作用。
提高免疫力枸杞多糖能促进机体巨噬细胞的吞噬能力，更令人惊奇的是，枸杞多糖对巨噬细胞还具有激活作用，这一点是提高机体免疫力的关键。
临床观察发现，每日服用枸杞多糖，并且连用两个月的老人，有80％以上的人胆固醇和甘油三酯明显下降，用药后，易疲劳、食欲缺乏和视力模糊等症状明显改善。长期服用的老人，头发不再脱落，面容也由憔悴变为红润，这是枸杞多糖的作用。如果你买不到枸杞多糖制品，直接食用枸杞，有着同样的效果。
据《当代健康报》
新鲜的梭鱼融合了山药的味道，味道香浓，营养丰富。
材料
主料：梭鱼一条;山药一根，
配料：枸杞，香菜，生姜，盐，味精，胡椒粉，干淀粉，白酒
做法
梭鱼去鳞、鳃和内脏，清洗干净，切成小段。
将切好的梭鱼用盐、白酒、干淀粉码味10分钟。
起油锅，将梭鱼段两面煎黄。
锅内加水、姜片、少量盐，大火煮开，中火煮20分钟。
山药洗净，去皮切大块，立即放入锅中煮10分钟。
最后加入泡发好的枸杞煮2分钟关火，再加入胡椒粉、鸡精、香菜段即可。
小诀窍
药去皮切片时，最好戴手套，以免手痒。
药最好在块下锅时再削皮，以免变色。
药不要久煮，用筷子能插动即可，时间长了会烂而不成形。
2. 红色德令红，绿色的承诺。
3. 幸福牵牵手，枸杞德令红。
4. 雪域枸杞德令红，健康养生情义浓。
5. 德令红，德领天下。
6. 德令红好，肾就好;肾好，家就好。
7. 德满杞园尽春色，令皆大江南北知。
8. 雪域圣水种枸杞，世家传承德令红。
9. 天然枸杞，滋养天下。
10. 德令红，健康映红。
11. 品天然，味自然，心悠然——德令红。
12. 雪域圣果，尊贵出众。
13. 德令红，只为让你爱上枸杞。
14. 德令红枸杞在手，品质生活全拥有!
中医早就有枸杞养生的说法，常吃枸杞能够强筋骨，耐寒暑。无论在民间，还是传统的医学界，枸杞都是备受推崇的。
《太平广记》里记载了这样一个传说，汉朝的时候，皇帝派人出使西域，使者到了西河这个地方，碰到了一件特别奇怪的事。他看到路边有一个年轻女子拿手杖打一个老头，老头须发皆白，却恭恭敬敬地跪在那儿受罚。使者就上去问是怎么回事，年轻女子的回答让使者大吃一惊。女子说，那个老头是她儿子。使者一听吓坏了，这么大岁数的老头怎么可能是你儿子呢？女子说：“以前我身体不是很好。我舅舅隐居在终南山，他给找到了一个秘方，我按照那个秘方吃了以后，身体就越来越好了，而且我从那以后就一直保持了年轻的容貌。可是我这个儿子，他不相信我的话，我让他吃那种药，他就是不吃。结果今天我们俩一起走路，他居然跟不上我。所以我很生气，就打了他。”
后代医家管这女子叫西河女子，在医学典籍中经常出现，而她服用的秘方就是枸杞子。
补肝明目用枸杞
枸杞子是可以滋补肾精的，中医理论认为肝肾同源，在中医的五行学说里，肝属木，肾属水，木如果想长得好，一定要有水来滋养它。所以肾精如果足了，首先受益的就是我们的肝脏。枸杞子有明目的作用，因为中医认为肝开窍于目，但凡我们的眼睛出现了问题，原因之一便是我们的肝有问题了，或者是肝阴虚，或者是肝阳上亢。
枸杞子有滋补肝肾的作用，所以可以明目。中医有个名方叫杞菊地黄丸，这个方子是怎么来的呢？实际上非常简单，就是六味地黄丸加上枸杞子和菊花。六味地黄丸原来是补阴的一个方子，加上杞、菊这两味药以后，药性就有了往上行的特点。因为菊花的药性是生发向上的，有散风热、明目的作用。而枸杞子也有明目的作用，所以这个方子就专治因为肝肾不足引起的迎风流泪、眼睛干涩这类症状。
杞菊地黄丸非常适用于老年人。很多老年人，随着身体慢慢衰老，肝肾之阴会出现不足的情况，然后就会出现眼睛干涩的症状。尤其在春天的时候，风一吹就会迎风流泪，这个时候我们就可以用杞菊地黄丸来治疗。
现在很多人天天坐在电脑前，时间长了也会感觉眼睛发涩、怕光、迎风流泪，也可以吃杞菊地黄丸来治疗。
能够“悦容颜”的枸杞子
枸杞子还有一个很好的药用价值——美容。像前面提到过的西河女子，吃了枸杞之后能够让青春永驻。现代药理分析，枸杞子里含有很多种营养成分，确实对我们的肌肤有好处。在古代的医书里有多处记载，枸杞子能够“美颜色，悦容颜”。
在这里，我给女性朋友们介绍一个美容的方子，是《摄生秘剖》一书里的方子。就是枸杞子和桂圆肉，各用等量，然后放到一起熬汤，熬成膏状，每天吃一勺。桂圆肉本身是养血的，可以补心血。我们的气血足了，脸上就会容光焕发。枸杞子和桂圆肉放在一起味道特别好，又起到了补益气血的作用。
我建议女性朋友可以经常吃上面这个方子，但是要注意两点：第一，痰湿重的人不要服用这个方子；第二，体内有邪气的人不能服用，比如正在感冒的人，或者是有传染性疾病的人。有痰湿的人往往舌苔特别厚腻，经常头晕，还会伴有胸闷、痞满，不爱吃东西，不愿意动弹等特点。
枸杞带给男人的幸福
现在，枸杞也受到了很多男性朋友的青睐，因为它有很好的补肾作用。现代医学对枸杞子做了很多药理分析，证明枸杞子有延缓衰老，调节人体免疫能力的作用。而且它还有一个比较重要的作用，就是能够提高人体性腺的活力水平。
我再给大家介绍一个方子——五子衍宗丸，这是一个中医名方，据考证最早是唐代张果创制的，后来传说张果把这个五子衍宗丸献给了唐玄宗。这个方子是专门用来治疗男性不育的，就是说男性的精子成活率低，或者说数量不多，都可以服用五子衍宗丸。
五子衍宗丸主要用的药包括枸杞子、菟丝子，菟丝子可以补肾阳，所以这两味药配在一起，是可以阴阳双补的。再加上覆盆子、五味子、车前子。车前子能够给体内的邪气一条出路，把体内水湿给沥出去。而五味子是把这几味药的药性收敛起来的，所以服这个五子衍宗丸，很少会有人上火。
五子衍宗九不光对男性的不育有疗效，而且对女性的不孕效果也非常好，就是说，男女都可以服用。曾经有人做过临床研究，对于那些不育的男士，排除了其他器质性的病变，让他们在每天睡觉前吃枸杞子。一个多月以后，这些人的整个生理机能就开始改变了，再一检测，有一半的男性生育功能已经正常了，一年以后，他们的爱人就都怀孕了。
前列腺的问题在老年男性当中是普遍存在的，前列腺疾病的治疗一直是一个很难的问题，而服用这个五子衍宗丸，夜尿频多、尿有余沥现象就可以慢慢解除了。其实，老年男性的前列腺有问题，跟他们的肾气不足是有关的，所以他们可以尝试服用枸杞，会收到意想不到的效果。
枸杞根叶皆是宝
枸杞在我们传统的中国医学里，是被广泛应用的一味中药。除了枸杞子，枸杞这种植物浑身都是宝：枸杞苗有清热、滋阴的作用。我们国家很多地方都有春天摘枸杞苗回家炒菜的风俗。枸杞树的根叫地骨皮，也有清热、滋阴的作用。
关于地骨皮这味药，我给大家介绍一个小偏方。很多人都患有痔疮，痔疮肿痛也是让人非常痛苦的。对于痔疮，地骨皮就能派上用场了：每次用30克地骨皮熬水，然后用这个药水来坐浴，有很好的解热镇痛的作用。
枸杞子一般是和地骨皮以及其他的苗、树枝放在一起用的，枸杞子的药性是温的，有些人服用后会觉得发热，而枸杞树其他部位的药材却可以制住枸杞子的热性。在日本有一位剧作家，叫永春水氏。他在书中记载说，年轻的时候他身体很不好，30岁之前经常有病，严重到一出屋子就会生病的程度。在他30岁的时候，有个人告诉了他一个方子，就是把干的枸杞树叶和树枝放在一起熬水喝。永春水氏记载说，自从服用了这个方子以后，身体一天比一天好，一直到60岁，他基本上没有得过什么病。
食之有道——枸杞的食用方法
枸杞既是食品，又是药品，服枸杞四季皆宜。可以把它像普通食品一样加入茶水、粥饭、羹汤、菜肴里，又无滋腻、上火等弊端。春季可单服，也可与黄芪煮水喝；夏季宜与菊花、金银花、胖大海和冰糖一起泡水喝，常服可以消除眼疲劳；秋季宜与雪梨、百合、银耳、山楂等制成羹类；冬季宜与桂圆、大枣、山药等搭配煮粥。
枸杞最简单的吃法就是我们在做粥的时候加一点进去，也可以放在大米里，跟米饭一起蒸熟了吃。
还有些人用枸杞来泡酒和炖汤。枸杞泡酒自古以来就有，清宫有一个秘方，是乾隆经常服的，叫松龄太平春酒，意指人喝了此酒，可以跟松树一样长寿。松龄太平春酒的主要成分是这样的：熟地黄、枸杞子各200克，红花、当归、茯神各50克，龙眼肉400克，松子仁500克，把这些药材放在酒里一起泡。经过临床调查发现，服完这种酒以后，人的精力确实旺盛了，而且还有延缓衰老的作用。
1 枸杞多糖对动物免疫系统的影响
1.1 枸杞多糖对动物免疫器官的影响
免疫器官可分为中枢免疫器官和外周免疫器官, 在体内广泛分布, 中枢免疫器官包括骨髓、胸腺、腔上囊, 外周免疫器官包括淋巴结、脾脏、黏膜相关淋巴组织。骨髓是造血干细胞生长及分化的场所, 可提供各种免疫细胞的前体细胞, B淋巴细胞、单核巨噬细胞、粒细胞、NK细胞、血小板和红细胞也在此分化、成熟, 胸腺的免疫功能主要是诱导T淋巴细胞的分化、成熟等。王静珍等[2]研究发现, 枸杞多糖能够对抗环丙酰胺对脾脏和胸腺的损伤, 在注射枸杞多糖100 mg/kg时, 7 d后试验组脾脏重量和胸腺重量均明显高于对照组。王玲等人研究了枸杞多糖对辐射损伤小鼠免疫功能恢复的影响, 灌胃枸杞多糖的小鼠在辐射30 d后, 取出脾脏和胸腺并称重, 照射组小鼠脾指数和胸腺指数明显下降, 而辐射给药组胸腺指数恢复明显且接近正常, 但对脾脏指数的影响不明显 (P<0.05) 。
1.2 枸杞多糖对免疫细胞的影响
1.2.1 枸杞多糖对淋巴细胞的影响
淋巴细胞可分为T淋巴细胞、B淋巴细胞和第三群淋巴细胞, 第三群淋巴细胞主要包括NK细胞和LAK细胞, 淋巴细胞在机体免疫应答中起核心作用。董永杰等[3]研究发现:50~100 mg/L枸杞多糖能明显增强聚羟基脂肪酸酯 (PHA) 活化的人外周血淋巴细胞的增殖;枸杞多糖能促进淋巴细胞产生肿瘤坏死因子-α (TNF-α) , 并呈现浓度依赖性。说明枸杞多糖能增强人外周血淋巴细胞的免疫功能, 发挥抗肿瘤作用。刘丽华等[4]研究发现, 枸杞多糖有正向免疫调节作用, 通过促进细粒棘球蚴感染小鼠脾脏T淋巴细胞向Th1分化, 抑制Th2分化, 发挥抗细粒棘球蚴的作用。张新等人对小鼠淋巴细胞信号系统效应进行探讨, 结果显示, 50~400μg/m L枸杞多糖可剂量依赖性地升高小鼠淋巴细胞内c AMP和c GMP水平, 50μg/m L枸杞多糖尚可升高丙二醇甲醚醋酸酯 (PMA) 活化的脾淋巴细胞内c GMP水平。说明枸杞多糖的作用途径可能是通过影响c AMP/c GMP系统及促进PKC活性来发挥免疫调节效应的。
1.2.2 枸杞多糖对NK细胞的影响
NK细胞是机体重要的免疫细胞, 不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关, 而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。刘彦平等[5]研究发现, 枸杞多糖对小鼠NK细胞活性有明显提高作用 (P<0.01) , 环磷酰胺可使小鼠NK细胞活性下降, 与对照组比较, 环磷酰胺组对NK细胞的抑制率为80.6%, 加入枸杞多糖后NK细胞活性有所提高 (P<0.01) 。张连生等人研究发现, 枸杞多糖对NK细胞的杀伤活性有提高作用。
1.2.3 对辅佐细胞的影响
在免疫应答过程中, 辅佐细胞能摄取、加工、处理并将抗原信息递呈给淋巴细胞的免疫细胞, 又称抗原递呈细胞。佘燕玲等[6]研究了枸杞多糖联合趋化因子 (CXCL10) 对肝癌小鼠辅助淋巴细胞分化的影响, 结果表明, 低剂量LBP组及LBP+CXCL10组能显著提高H22肝癌荷瘤小鼠Th1/Th2分化的比率。
1.2.4 对粒细胞的影响
郭宏伟等[7]研究了枸杞多糖抑制人慢性粒细胞白血病 (CML) K562细胞增殖的作用机制, 结果表明, 枸杞多糖对K562细胞的IC50约为227.50μg/m L, 经枸杞多糖作用后, K562细胞呈现凋亡的形态学改变。流式细胞仪可在2倍体前检测到凋亡峰, 凋亡细胞比例为8.43%~57.92%。说明枸杞多糖对K562细胞有抑制作用, 并能诱导其发生凋亡。
1.3 对细胞因子的影响
细胞因子是一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的蛋白质或小分子多肽, 可分为白细胞介素、干扰素 (IFN) 、肿瘤坏死因子 (TNF) 、集落刺激因子 (CSF) 等。枸杞多糖能在体内或体外通过提高细胞因子的分泌量或其基因表达或增强细胞因子的作用而发挥免疫调节功能。单铁英等人用RT-PCR法检测了枸杞多糖对γ-干扰素 (INF-γ) mR-NA表达的影响;ELISA法检测枸杞多糖作用后淋巴细胞培养上清液中TNF-α、白细胞介素-2 (IL-2) 分泌的变化。结果表明:80, 100μg/m L枸杞多糖能使淋巴细胞IFN-γmRNA的表达水平明显升高 (P<0.01) ;枸杞多糖能促进淋巴细胞产生IL-2和TNF-α, 并呈现浓度依赖性 (P<0.01) 。
1.4 对其他免疫细胞的影响
1.4.1 对MΦ的影响
MΦ是一种位于组织内的白细胞, 源自单核细胞, 而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。MΦ和单核细胞皆为吞噬细胞, 在脊椎动物体内参与非特异性防卫 (先天性免疫) 和特异性防卫 (细胞免疫) 。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用 (即吞噬及消化) , 并激活淋巴细胞或其他免疫细胞, 令其对病原体作出反应。周娅等[8]探讨了枸杞多糖增强MΦ功能的作用机制, 结果表明:灌胃与腹腔注射枸杞多糖均可明显增加小鼠腹腔静止期MΦ的NO诱生量及胞内溶菌酶 (LSZ) 与超氧化物歧化酶 (SOD) 的活性;灌胃枸杞多糖还使硫代乙醇酸钠 (TG) 活化MΦ的上述检测值进一步升高。说明枸杞多糖在体内可增强处于不同状态的MΦ功能, 对MΦ的效应可能既有整体的间接作用, 也存在局部的直接作用。许忠新等人研究了枸杞多糖对人外周血MΦ活性的影响, 结果表明, 用枸杞多糖处理后的MΦ对肿瘤细胞的杀伤功能增强, 80, 100μg/m L枸杞多糖刺激后MΦ吞噬作用明显增强 (P<0.01) 。
1.4.2 对树突状细胞 (DC) 的影响
DC是动物体内存在的一种具有强大抗原递呈功能的一类特殊细胞, 被喻为“天然佐剂”, 能够直接摄取、加工和呈递抗原, 刺激体内的初始性T淋巴细胞活化, 是机体免疫应答者的“启动者”。此外, DC还可以通过直接或者间接方式促进B淋巴细胞的增殖与活化, 调控体液免疫应答。单铁英等[9]研究了枸杞多糖对人树突状细胞成熟的影响, 结果发现, 用枸杞多糖刺激的人DC表达MHC-Ⅱ、CD83、CD86和促进T淋巴细胞增殖的能力比空白对照组增加, 说明枸杞多糖可以促进体外培养的人DC成熟, 促进DC诱导的免疫应答启动。张纯清等人研究了枸杞多糖对诱导DC成熟和促进T淋巴细胞增殖的影响, 结果表明, 经枸杞多糖诱导的DC分子表达变化明显 (MHCⅡ+、CD+86、CD+83) , 差异有统计学意义 (P<0.05) , 而经RPMI-1640培养的DC分子表达与培养前无明显变化。
1.4.3 对红细胞免疫功能的影响
红细胞免疫是机体的一种防御机制, 红细胞中含有许多与免疫相关的物质, 并与其他免疫活性细胞如T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及吞噬细胞等联系密切。红细胞表面有一种叫补体受体 (CR1) 的蛋白质, 能黏附免疫复合物, 是体内携带、运输及清除循环免疫复合物 (CIC) 的主要承担者。佟书娟等[10]研究了枸杞多糖对小鼠红细胞免疫功能的影响, 结果表明, 枸杞多糖能明显提高正常小鼠RBC-C3bR花环率及RBC-IC花环率, 并能使由环磷酰胺 (25 mg/kg, 3次) 引起下降的RBC-C3bR花环率及RBC-IC花环率显著回升。
1.4.4 对生精细胞的影响
吴若芬等[11]研究了枸杞多糖对小鼠生精细胞染色体损伤的修复作用, 结果发现, 枸杞多糖对损伤后的染色体具有修复保护作用。黄晓兰等人研究发现, 枸杞多糖对小鼠睾丸细胞DNA损伤具有保护作用。
1.4.5 对肝细胞的保护作用
张红锋等[12]研究了枸杞多糖对四氯化碳 (CCl4) 和高糖 (HG) 致损大鼠肝细胞的作用, 结果表明, CCl4和HG均使肝细胞内葡萄糖激酶活性下降, Ca超载, 细胞内酪氨酸磷酸化水平降低。枸杞多糖可以改善CCl4和HG引起的葡萄糖激酶活性和钙离子浓度的变化, 以及CCl4引起的胰岛素信号通路中的酪氨酸激酶活性下降, 但不能改善高糖引起的酪氨酸激酶活性下降。由此认为, 枸杞多糖对自由基直接损伤的肝细胞有较好的保护作用, 而对高糖环境引起的肝细胞损伤不能完全修复, 这可能与CCl4和HG的作用机制不同有关。
2 枸杞多糖抗肿瘤及细胞凋亡的研究
2.1 调节机体免疫功能
10, 20 mg/kg枸杞多糖均能显著抑制移植性肿瘤5180的生长, 且可显著提高荷瘤小鼠胸腺指数及MΦ的吞噬功能, 促进脾细胞抗体形成, 增强淋巴细胞转化反应和CTL杀伤功能。以10 mg/kg枸杞多糖效果最佳, 接近阳性对照药物的抑瘤率, 并且可使荷瘤小鼠的免疫功能提高到接近正常小鼠水平, 枸杞多糖可通过提高机体免疫功能来抑制肿瘤[13]。
2.2 诱导肿瘤细胞调亡
研究发现, 20~1 000 mg/L枸杞多糖呈剂量依赖性地抑制人白血病HL-60细胞增殖, 且使HL-60细胞膜的流动性降低。作用48 h后, 荧光显微镜下细胞核明显固缩、凝聚和断裂, 出现浓染致密的颗粒块状荧光;经DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显的梯状条带, TUNEL方法检测呈阳性;流式细胞仪分析图上出现典型的凋亡细胞峰。当枸杞多糖浓度为20, 100, 500, 1 000 mg/L时, 细胞凋亡率分别为8.43%、17.70%、27.63%和30.24%。枸杞多糖可剂量依赖性地诱导HL-60细胞凋亡, 诱导肿瘤细胞凋亡是枸杞多糖抗肿瘤的重要机制。
2.3 增强IL-2、TNF-α基因表达
有学者通过RT-PCR发现, 在加入5, 10, 20, 40 mg/L枸杞多糖培养适当时间后, 枸杞多糖可剂量依赖性地显著提高人外周血单个核细胞IL-2和TNF-α基因表达水平。与阴性对照组相比, 枸杞多糖可使人外周血单个核细胞IL-2基因表达水平分别提高1.77, 3.92, 7.00, 7.37倍, TNF-α基因表达水平分别提高2.38, 3.94, 6.06, 15.4倍。枸杞多糖可通过诱生IL-2和TNF-α来增强免疫功能和抗肿瘤作用。
3 抗氧化和抗疲劳作用
高春燕等[14]采用超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系、烷基自由基引发亚油酸氧化体系、二苯代苦味肼基自由基 (DPPH) 体系, 对枸杞多糖抗氧化性能进行研究, 并同维生素C进行比较。结果表明:枸杞多糖对这几种自由基均有不同程度清除作用, 其对超氧阴离子清除作用不明显;清除羟基自由基能力与维生素C相当;在较小浓度时, 清除烷基自由基和DPPH自由基能力弱于维生素C, 但在较高浓度时与维生素C接近。
4 神经保护作用
王琳等[15]研究了枸杞多糖在坐骨神经损伤恢复中的作用, 选雄性ICR小鼠100只, 随机分为空白对照组、假手术组、模型组、枸杞多糖组 (10 mg/kg) 和运动训练组, 每组20只, 采用右侧坐骨神经卡压模型, 观察灌服枸杞多糖和运动对小鼠爬网漏脚率和坐骨神经运动传导速度的影响。结果发现:术后3周, 枸杞多糖组和运动训练组爬网漏脚率均低于模型组 (P<0.01) , 坐骨神经运动传导速度均高于模型组;术后4周, 运动训练组坐骨神经运动传导速度高于模型组。说明枸杞多糖可促进坐骨神经损伤的恢复。
5 展望
