积极分子自我鉴定wq（共12篇）
大二上学期我被评为积极分子，回首这一年的时间里，我一直在不懈努力，认真学习党的思想，学习文化课知识，积极参与班级及学院的活动。
思想方面
我始终坚持中国共产党的领导，坚定政治立场，服从党的要求，在思想上与中国共产党保持一致。通过上学期的党课学习，我深深感受到作为一名积极分子，更要紧随党员加强学习，提高自身的思想觉悟，以提高自己的政治素质和理论水平。严格要求自己，通过各方面的学习不断完善自己。
学习方面
在过去的一年中，努力学习，通过了英语四六级考试，以及计算机二级考试。上课认真听讲，及时做好笔记，课后能仔细地复习。遇到不会的问题，虚心向同学请教，并反复思考琢磨、求解。和同学共同讨论研究关于学习上的知识，共同进步。
工作、生活方面
积极参加班级和学院，学校组织的活动，开拓自己的视野，结交更多的朋友。严格要求自己，认真做好每一件事，以集体利益为最高准则。在生活上，与同学互帮互助，团结友爱。
关键词： 高中化学 苏教版 教材 科学方法体系
一、苏教版高中化学教材的特点
高中学习阶段，教材在本质上并没有多大改变，但高中化学教师在教学实践过程中应当注重教学方法创新，针对新教材中的教学活动全新设计，从学生学习实践出发，积累丰富的教学经验，全面提高教师及学生素质，化学教师应当重点分析教材，深入探究教材，科学构建方法体系，使学生深入化学学习之中。
苏教版高中化学教材中出现了很多突出化学学科的科学方法体系，例如：苏教版化学教材中包含了很多化学反应的热效应相关知识，学习的时候给学生充分空间进行化学实验探索。还有在化学教材中加入了化学平衡常数，避免了学生理解化学知识的时候缺乏合理性及科学性，使使用苏教版的高中生在学习过程中将高中化学知识与大学某些化学知识衔接在一起，这一特点在苏教版化学教材中的化学反应方向及沉淀溶解平衡教学内容中得到体现。不仅如此，苏教版化学教材在讲解平衡常数、盐类水解的平衡及电离平衡等化学平衡知识的时候注重讲解化学本质与化学现象的统一，将高中化学的科学性及高中教学的实践性有机结合与统一。
我国高中教学中，化学科学方法得到了广泛认可，不仅包含化学知识教育，而且注重广泛培养学生对科学学习方法的掌握，使学生使用苏教版化学教材的时候养成良好的学习习惯，为此，高中化学教师应当在课堂上有意识地培养学生对科学技能的掌握，将新课改精神渗透在课堂提倡的行为之中，将综合性人才培养当做最终目标。
我国高中教学体系之中，对于学科科学方法体系认知不足，化学教师对科学方法体系的了解不多，进行课堂教育的时候只是传授表面的学习方法，一定程度上违背素质教育的宗旨，可以说，高中化学教育体系之中若缺少科学方法体系，则会使高中化学教学失去原有意义，也在一定程度上导致学生对化学知识学习缺乏兴趣，总的来说，高中化学教育过程中，苏教版化学教学着重深化化学科学方法体系的作用及相关知识，还结合高中化学教学现状，纠正学生对化学学科的态度，引导学生掌握正确的化学学习方法，并将科学的学习方法渗透到平时的化学学习之中。因此，在苏教版化学教材的指导下，高中化学教师应当培养完善学生学习化学学科的方法，使每一个教育者能够深刻地体会到科学方法体系的内容及精神实质，提高高中化学教师的教育教学素质。
二、苏教版高中化学教材中科学方法体系的分析
苏教版高中化学教材构建科学方法体系的时候有两种方法，一种是科学事实的方法，一种是理性思维的方法。
首先，针对科学事实的方法，最常用的方法就是观察法，使用苏教版化学教材的时候，观察法的科学方法体系能够充分调动学生感官，使学生借助相关仪器实践化学实践，教材中常用的化学观察法有化学实验、模型、化学图表等，例如：在“化学反应中的热量”学习中，关于生石灰与水的反应实验中，学生可以通过亲手实践观察整个实验过程，使对知识有深刻印象，同时有助于学生积累丰富的化学学习经验。
另外，常用的方法还有实验法，使用实验法的时候，苏教版化学教材通过陈述实验建议、信息提示及实验思路和技术支持等内容增强学生在化学学习之中的实践性及自主性和创造性，使学生在学习过程中强化合作探究意识，例如：在实验设计和内容形式丰富上，苏教版教材巧妙地渗透科学实验的对比思想及控制变量思想，例如：在溶液及胶体的光照对比下，溴水中加入四氯化碳溶液前后现象对比等。
其次，在化学教材的科学方法体系之中，另一个常用方法就是理性思维方法，其中最常用的就是综合分析法，通过各方面因素的科学分析，学生能够在化学学习过程中积累相关经验或得出结论，帮助学生强化对化学知识的积累，例如：学习化学反应速率时，教师可以引导学生通过实验探究方式对不同化学反应速率进行探索，使学生对化学反应速率的概念及表达方式有所了解。
另一个常用方式就是归纳演绎方法，在苏教版化学教材中，归纳法的精髓就是从特殊事实到一般理论的具体引用，而演绎法就是通过一般理论演绎出特殊事实，学习过程中将归纳法及演绎法灵活结合，如学习“原子核外电子排布与元素周期律”相关知识的时候，这一方法非常有效。
在化学学习过程中，联想假设法有助于学生构建科学的化学知识框架，理解抽象的化学知识，对教材中的化学反应进行科学论证，如学习“化学能转化为电能”的时候，带领学生进行锌片、铜片及稀硫酸的原电池实验，使学生在联想过程中得出电子移动的过程，提高学生的科学思维能力。
三、结语
填写单位：温泉县财政局填写时间：2011年1月7日
1.是否建立由主要领导挂帅、相关处室参加的内部监督工作机制？如有，请列举具体的组织形式。
否
2．是否建立专职的内部监督机构或配备专职的内部监督人员？
否
3.是否结合实际情况和《办法》制定适用于本地州（市）财政部门内部监督工作的具体实施办法或细则？请具体列举。
否
4.是否开展对《办法》的学习、交流和培训？请列举具体的开展形式。
否
5.是否按《办法》规定开展对本级财政部门内部各业务管理机构履行财政管理工作职责情况的监督检查，对本部门有预算管理职能的内部各业务机构的重点检查数是否达到
1该类机构数的30%？请具体说明。
否
6.是否按《办法》规定开展对本部门及所属单位预算、财务与资产管理及内部控制制度建立执行等情况的监督检查？请具体说明。
否
7．是否严格按照《办法》的规定，规范内部监督工作流程，严肃工作纪律？请具体说明。
否
8．是否实现财政监督机构与其他业务管理机构对于财政管理信息系统的信息共享？如有，请具体说明。
否
9．是否制定年度重点检查计划，并严格按照计划开展重点检查工作？
是，但不太规范，需进一步完善。
10．是否组织实施日常内部监督工作？如事前监督、事中适时动态监控等，并列举具体的组织实施形式。
否
11．是否完善财政部门各项内部控制制度？是否对本部
门各项内部控制制度及本部门内部控制制度实施情况进行检查评价？请具体说明。
否
12．是否建立内部监督检查负责人专题会议制度和内部监督检查联络员制度等内部监督检查协调机制？
否
13．是否对内部监督检查发现问题进行及时整改和纠正？具体的整改方式如何？
否
14．是否落实内部监督检查处理意见和管理建议？采用何种方式落实？
否
15．是否对下级财政部门内部监督工作进行督促和指导？具体采用何种督促和指导方式？
是。采取目标责任考核，定期下乡督促检查。
16．是否建立内部监督检查工作考核机制，加强对本级及本级以下财政部门内部监督检查工作的考核通报？
是，加强了下级财政部门的考核通报。
17.是否及时总结《办法》实施过程中出现的有关情况
和问题，建立内部监督检查专题报告制度？
否
18．是否将内部监督检查结果作为财政部门年度评选先进和干部考核、任用的参考依据？
在思想方面，本人积极上进，有着良好道德修养。在平日的学习、生活中，我积极地向党组织靠拢，并参加了学院组织的“入党积极分子”的培训。努力学习政治理论知识，因为理论上的成熟是政治上成熟的基础，政治上的清醒来源于理论上的坚定。
在学习方面，本人始终严格要求自己，虚心学习，坚持发挥不懂就问的精神刻苦钻研。与此同时，我能耐心地解答同学的疑问。基本上牢固的掌握了一些专业知识和技能，同时把所学的理论知识应用于实践活动中，把所学知识转化为动手能力、应用能力和创造能力，力求理论和实践的统一。
在工作方面，本人虽然不是班里的任何班干部，但是对于班里的、系里的及院里的活动能参与的积极参与，能帮忙的尽力帮助。服从组织安排，听从领导分配，认真负责地把各项工作做好。并且虚心向领导和同事们学习业务知识，不断充实提高自己，为更好地做好工作务实基础。
作为一个入党积极分子，不能只是光有一腔热情而没有实际的能力，要有相应的知识才可以把自己的热情化为行动，才可以真正做到为人民服务。所以我注意学习方面的各种问题。上课努力听讲，尽量消化自己学过的知识。认真学好专业知识的同时注意注意自己其他非专业知识的学习，尽量提高自己的综合素质。
党员是平凡的，也是不平凡的。党员的平凡体现在从身边事情做起，以身作则，为人民服务。作为一个入党积极分子，作为一个向党组织靠拢的人，工作方面一定要全心全意为人民服务。(插入社团方面)
有这样一个案例:(一个学生给我的一封信)
周老师,您好!
我是一个高二学生,上学期不努力学习给我造成很大影响。所以这学期以来我一直在努力。其实本应高兴,但我却相反,一直郁郁寡欢,我害怕,我不知道自己将来的命运。所以一直忧虑不安。我想创造自己的辉煌学业,但每次看到自己的表现都很不好,我便失望了。我是不是真的不行了?
学生雨虹
从信中,我发现,是狭隘的自我评价方式造成了雨虹目前的困境。她渴望通过努力学习获得满意的分数和理想的成绩,但因为以前知识亏欠太多致使她现在尽管付出了那么多努力,却屡屡不能如愿。几次没有取得好成绩,让挫折感在心中越积越多,加上消极的自我暗示,使之对前途萌生失败的预感,没有好心情,无法享受快乐,日益远离成功和自信。
目前,调整心态、改变以往不恰当的自我评价方式是最迫切要做的。针对着她的情况我与她进行了一下交流。
纠正她认识上的误区
1.重新审视自己的心态,并加以调整
“铁杵磨成针”的故事在我国已经家喻户晓,借助这个故事,人们激励自己不断勤奋进取。同时,人们也忽略了故事中隐含的两个问题,一个是努力不等于成功;二是我们要通过努力争取成功,更要追求努力与成功的比值,让我们在工作中付出的每一份努力,都被最大化地有效利用。好比我们常说,买电脑要讲究性价比,是一个道理。
以往不努力学习,失败是理所当然的,自己也能够接受。但是现在,努力学习了,并满怀希望借此取得好成绩。有一点你要清楚,那就是努力≠成功,成功还要受学习方法以及学习心理等多方面因素的影响。比如你,基础不扎实就是你最大的隐患。但此时,你也许没意识到,自己已经在“努力”和“成功”二者之间划了等号。在急于求成的心态之下,你失去了平常心,你对学习成绩的关注就有点盲目和过分,你对自己的评价也就更单一和排它。
新学期虽然你基本进入了一个普通高中生的学习状态,由于你以前基础比较差,对于自己知识上的漏洞要在课下补,不懂的问题要主动问,要变被动学习为主动学习。
在以后的学习中,我坚信,只要方法得当加上勤奋努力,终究会有成功的一天,而一旦放弃,就彻底远离了成功。我们既要坚持努力下去,又要提高学习效率。
2.排除心中杂念,恢复失衡心态
为了证明“自己行”给别人看,你可能会把成绩看得很重。使得你学习中不免分神,去想别人会如何看待自己。而此时你最需要的就是心无旁骛,需要完全把精力和注意力放在学习上。你听说过张大千的故事吗?一个朋友一次问他:“你晚上睡觉时,你的长胡子是放在被窝外面还是被窝里面。”他被问住了,因为以前他从来没把这个问题当回事。于是他说,明天我再告诉你吧。”晚上睡觉时,他先把胡子放被窝外面,觉得不好;后来又把胡子放在被窝里面,觉得也不舒服。折腾来折腾去,一宿没睡好。很可笑,是吧。可生活当中,确实有不少人在关注一些很无聊和琐碎的事情,你是不是也在担负着同样可笑的包袱呢。
3.根据自己的能力和知识基础,调整对自己的期望值,给自己一个合理的目标要求
有个人经过一个建筑工地,问那里的石匠们在干什么?三个石匠有三个不同的回答。第一个石匠回答:“我在做养家糊口的事,混口饭吃。”第二个石匠回答:“我在做最棒的石匠工作。”第三个石匠回答:“我正在盖一座教堂。”从这三个人的回答中可以看出,第一个石匠的自我期望值最低,第三个石匠的自我期望最高。拿破仑曾经说过:“一个不想当元帅的士兵不是一个好士兵。”士兵有雄心壮志,有非常高的自我期望当然是好事。但一定要掂量好自己离目标有多远的距离,以及采取什么样的策略去实现自己的目标。
在前几年的东京国际马拉松邀请赛中,名不见经传的日本选手山田本一出人意料地夺得了世界冠军,当记者问他凭什么取得如此惊人的成绩时,他说了这么一句话:“凭智慧战胜对手。”
当时许多人都认为,这个偶然跑在前面的矮个子选手是故弄玄虚。马拉松是体力和耐力的运动,只要身体素质好又有耐性就有望夺冠,爆发力和速度都在其次,说用智慧取胜,确实有点勉强。
两年后,在意大利国际马拉松邀请赛上,山田本一又获得了冠军。有记者问他:“上次在你的国家比赛,你获得了世界冠军,这一次远征米兰,又压倒所有的对手取得第一名,你能谈一谈经验吗?”
山田本一性情木讷,不善言谈,回答记者的仍是上次那句让人摸不着头脑的话:“用智慧战胜对手。”这回记者在报纸上没再挖苦他,只是对他所谓的智慧迷惑不解。
过了好些时日,这个谜团终于被解开了,山田本一在他的自传中这么说:“每次比赛之前,我都要乘车把比赛的线路仔细看一遍,并把沿途比较醒目的标志画下来,比如第一个标志是银行,第二个标志是一棵大树,第三个标志是一座红房子,这样一直画到赛程的终点。比赛开始后,我就以百米冲刺的速度奋力向第一个目标冲去,等到达第一个目标,我又以同样的速度向第二个目标冲去。四十几公里的赛程,就被我分解成这么几个小目标轻松地跑完了。起初,我并不懂这样的道理,我把我的目标定在四十几公里处的终点线上,结果我跑到十几公里时就疲惫不堪了,我被前面那段遥远的路程给吓倒了。
是目标分解法帮助山田本一获得了胜利。他通过把整个目标分解成了几个小的阶段性目标,通过一个个触手可及的小目标的实现,打下了现实基础和心理自信,掌控全局,最终完美收官。对你来说,最好制定一个比自己现有水平稍高的目标要求。比如,如果你平时考试成绩低于平均分5分,那你可以要求自己下次争取前进1分;如果你的英语学得不好,是不是保证每次作业起码单词不错。在完成了既定目标之后,下次再给自己制定一个小步子的目标。
学会改变不恰当的自我评价方式
你习惯于靠下次考试成绩来证明自己前段时间的学习效果。如果考得好,就认为自己这段时间努力了,成功了;如果考得不如意,就会全盘否定自己近期的付出,这种做法不可取。学习是一个过程,任何结果不过是过程中的一点。因为一点,而否定了大部分,是一种狭隘的评价方式。我们要学会从平时的学习、生活中积极评价自己,如搞懂了一道数学题,掌握了几个英语单词,老师的讲解触动了内心的灵感等,这些看似不值一提的小事,都是我们成功的果实。如果我们能有意识地在平时积累那种成功、自信的感觉,就会使自己内心充满渴望、自信,就会看到成功在向你招手。
和父母、老师沟通
你不是孤军奋战,你身后有可以信赖的力量随时待命。你可以把自己的困难和感受说给父母、老师听,他们的关怀和理解会让你振奋和自信;你可以把自己的打算告诉老师,获得他们的肯定和指导。他们不光满足你物质和知识上的需要,也能给你心理支持和精神力量。
1.积极交流
每天尽量找一点时间,比如饭前饭后和父母谈谈自己的学校、老师和同学,谈谈自己高兴或不高兴的事,让他们分享你的喜怒哀乐。还要创造机会,每周至少跟爸妈一起做一件事,比如做饭、田间劳动、打球、逛街、看电视等。一边活动,一边交流。有时父母忙,难于会面,可利用书面留言、电话、手机短信等方式交流。
2.学会倾听
父母批评或训斥你时,不要贸然顶嘴,要平心静气地听完父母的话,有助于弄清他们生气的原由。
3.控制情绪
与父母沟通不良时,不随意发脾气,以免不小心说出伤害父母的话,做出伤害父母的事。想要动怒时,可用深呼吸、离开一会或用凉水洗脸等办法自我抑制。
4.讨论协商
遇事多与父母讨论,力求达成共识。你如果学习成绩不理想,就应该跟父母谈谈你用的学习方法,请他们帮你总结经验教训,采用更有利于提高学业成绩的方法。
本人参加了党校举办的第三十六期入党积极分子培训班的学习。本人始终以饱满的热情、积极的态度自觉主动地参加学习和实践，认真遵守培训班的课堂纪律，在按时参加学习。现就本人进入党校学习以来各种方面的情况作如下自我鉴定：
一、政治理论学习更加充实了思想
在思想品德上,本人有良好道德修养,并有坚定的政治方向.我热爱祖国,热爱人民,坚决拥护共产党领导和社会主义制度,遵纪守法,爱护公共财产,团结同学,乐于助人.学习过程中，通过对马克思主义、中国特色社会主义理论体系等的学习，以及对党员的条件、义务与权利、信念和十八大精神、意义的学习，提高自己对一些重大现实问题的理解和认识。虽然学习的时间不长，但个人的马克思主义的理论素养和政治素养得到明显提高。
二、党性修养得到了提高
通过对政治理论的学习以及实践，感觉到作为一个入党积极分子至少应该做到：一是坚持全心全意为人民服务的宗旨;二是密切联系群众;三是勇于承认和改正自己的缺点和错误，敢于同一切错误思想和不良倾向作斗争。
三、学习方面，本人始终以高标准严格要求自己，虚心学习，刻苦钻研。工作方面，积极承担并完成系里分配的任务，被评为“优秀学生干部”。
进入党校学习后,老师们的讲解让我在原有认知的基础上对党有
了更深入和真实的认识。我上课努力听讲,尽量消化自己学过的知识。党校学习结束之后，我将会以严谨的态度继续学习党的知识，关心时事和党的政策;同时，平时从小事做起，踏踏实实地来，尽量用党员的标准来要求自己。
家中一共六口人，父亲郭心昌和母亲杨德菊都是勤劳、朴实的农民，哥哥，嫂子均是工厂工人，政治面貌都为群众，
自懂事以来，从长辈们的谈论中，从流传盛广的歌谣中，从电视报纸中，共产党的名字就一直出现在我面前，沐浴着共产党的春风，我充分享受着党给我们带来的幸福生活，并一直心存感激，一曲“没有共产党就没有新中国”深深烙在我幼小的心灵。
1995年9月，未满7岁的我进入了湖北省枝江县袁码头小学，走进了知识的殿堂，迈出了人生学习的第一步，在小学7年的时间里，我接受了正规的教育，不但跟老师们学习了很多的文化知识，也开始与人交往，开始与人相处，而且在各种各样的素质教育中，我初步接触到了中国这个伟大的名字，知道在毛爷爷的带领下有了今天的幸福生活，知道了在中国共产党的领导下香港、澳门的回到了祖国的怀抱，并且励志要成为对社会有用的人，为建设祖国的明天而奋斗。伴随着“我们是社会主义的接班人……”的歌声，二年级的时候，戴上鲜红的红领巾，我庄严地举起了右手，成为一名少先队员，“我热爱中国共产党，热爱祖国，热爱人民，好好学习，好好锻炼，准备着为共产主义事业贡献力量!”的誓言一直在我耳边回响，并激励着我不断进步。在小学7年的时间里，我一直担任着班干部，积极参加学校的各项活动，勤奋学习，和同学们和睦相处，在欢声笑语中度过自己快乐的童年，曾多次获得三好学生的称号，在数学奥林匹克竞赛中取得较好成绩，最终以优异的成绩完成了小学的学习。
义务教育的普及，9月我进入湖北省枝江县问安第一中学开始了初中三年的学习。面对新的面孔，心的环境，我积极调整自己的状态，尽快使自己适应新的生活方式。同时，随着年龄的增长，我幼小的心灵有了些许的成熟，对于自己的将来有了一丝责任感，所以，在初中三年的生活中，我不断完善自己：学习上，我勤勤恳恳，一丝不苟，在各类考试中频频获得喜人的成绩;生活上，我和同学相处融洽，互帮互助，得到了同学们的好评;工作中，我一直担任学习委员、团支书等职务，在各类活动中积极表现， 成为老师的帮手，同学的榜样。在初一时，就积极申请中国共产主义青年团这个党的后备组织，当我举起右手宣读誓词的时候，意识到自己身上的重担，团员的身份时刻提醒着我严格要求自己，在生活学习中起模范带头作用，同时，我接受了来自团的洗礼，参加团组织的各类业余活动，不但使自己对于组织有了进一步的认识，还在活动中让自己的能力得到提高。
，我以优异的成绩考入湖北省重点中学——湖北省枝江第一高级中学。第一次出远门到县城，又是一个陌生的环境，一种崭新的生活方式，特别是第一次走出乡村到了一个崭新的城市，面对着纷繁复杂的一切，我看到了城乡之间的那种无形的差距，同样，这也更坚定了我努力学习，励志为建设家乡做贡献的决心。在接下来3年的学习生活中，我积极主动和老师同学交流，既保持乡村孩子的那份淳朴，又乐于接受新鲜的事物，让我在生活中重新找回了那份自信。特别是进入高三以来，面对高考的压力，我深深感到自己身上来自家长和老师的期望，以及自己多年来努力的艰辛，所以，我全力以赴。尽管有沉重的学习压力，我总坚持在空闲时间翻开教室的报纸去追寻那些党走过的足迹，在这3年里，我看到了共产党在不断成长的痕迹，神舟六号的成功发射，人大代表对“三农”问题的关注，五一二发生后的应对，我再一次感到了共产党这个集体“为人民服务”宗旨的伟大，从而更加坚定了要成为其中一员，履行“为人民服务”职责的信念。
高考过后，因为发挥失常，高考落榜的我没有萎靡不振，毅然选择了进入原高中高考补习学校开始复读的道路。此时的我心中只有一个为自己的以后创造一个新平台的念头——考入一所理想的高等学府。为此，我将自己全身心投入紧张的学习之中，同时还在班上担任班干部的职责，因为“为人民服务”的信念一直存在于我内心深处，尽管是一些平常的小事，却也做得心满意足，即使有时并没有得到大家的肯定。
，我考入湖北经济学院，这是我一生中最大的转折点。一入大学，我就怀着激动的心情向党组织递交了入党申请书，从此我时时刻刻用党员的标准来严格要求自己。大一的时候，就竞选院学生会干事，作为老师和学生沟通的桥梁，踏踏实实的工作，经常为同学们做一些力所能及的事，关心同学们的学习和生活，在各方面起到表率作用，工作期间，组织举办了“新老生交流会”，“模拟企业精英挑战赛”，“十大经院老师评选活动”等大型活动，在工作之余，我积极参加学校举办的各种活动，也取得一定的成绩，获得21暑期实践积极分子称号，移动MM杯营销推广大赛三等奖，学习也没有落下，大学几年，分别获得三等奖学金，二等奖学金，励志奖学金和省政府奖学金，同时也获得院优秀学生干部称号。
我深知用共产党员的标准衡量，还有很大差距。如：工作方法简单，处理问题不够冷静，影响同学之间的团结等…… 但我立志为实现伟大的理想去努力、去追求，争取早日加入党组织。我渴望成为一名光荣的中国共产党员，积极靠近党组织，接受党的培养和教育，以党章规定的党员标准严格要求自己从一点一滴做起，不断提高党性修养，加强党性锻炼。我深深地懂得共产党员意味着拼搏，奋斗甚至意味着牺牲，我入党只是为了更直接地接受党的领导，为共产主义事业奋斗。在接下来的日子里，我将更加严格要求自己，完善自己，积极向党组织靠拢，增强自身的意志力，不断学习党的先进理论，并开展实践，用对祖国和人民以至于周围的同学的忠诚和责任鞭策自己，努力不辍，奋斗不息。
这一系列全党大会的召开，内容的公布，对于我是一个很好加深了解的契机，这些经验，再联系党成立以来的历史经验，归括起来，还是中国共产党的性质，三个代表重要思想在党的执政活动中的全面实施。这是坚持和发展社会主义的必然要求，是我党艰辛探索和实践的必然结论。
通过对党的学习与了解，知道当的十三届三中全会以来，我党坚持实事求是，实现了全党工作中心向经济建设转移，逐渐形成了建设有中国特色社会主义路线、方针、政策，创立了邓小平理论。通过二十年的实践证明：坚持改革开放，充分发展生产力，坚持四项基本原则，坚持以经济建设为中心，方向是正确的，人民是拥护的。
党的十六大以来，这些经验，覆盖了改革发展稳定、内政外交国防、治党治国治军等各个方面，是以江泽民同志为核心的党中央领导全党进行理论创新的重要成果，是全党和全国各族人民实践创造的智慧结晶，标志着我们党对什么是社会主义、怎样建设社会主义，建设什么样的党、怎样建设党的认识进一步深化，对共产党执政的规律、社会主义建设规律和人类社会发展规律的认识水平进一步提高。这些基本经验，同我们党在新时期的基本理论、基本路线、基本纲领一道，对于党和国家事业的发展具有长远的指导作用。
药用贝母及其鉴定现状介绍
贝母是我国中医学之中常用的贵重药材之一，其本身是指百合科贝母属多种植物的鳞茎，味苦性寒，具备化痰止咳、清热散结以及润肺等多种药用功能，在咳嗽痰热类的多种病症治疗中有广泛的应用。目前我国药典中收载的药用贝母为百合科贝母属9种植物：浙贝母、平贝母、伊犁贝母、新疆贝母、川贝母、湖北贝母、暗紫贝母、梭砂贝母、甘肃贝母的新鲜或干燥鳞茎。由于我国贝母产地众多，且形态差异不大，所以在鉴定方面一直存在一定的问题，对药用贝母的临床应用安全性有很大影响。在我国对于中药材的鉴定长期采用性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定等几种方法，但是这些传统的鉴定的方法在当前已经不能满足中药发展的要求，分子生物学的发展为药用贝母的鉴定带来全新的局面。分子生物学鉴定方法的应用使得鉴定手段越来越丰富，把中药鉴定从形态扩展到了DNA，这就大大提高了药用贝母鉴定的效率，增强了其临床应用的安全性。
资料和方法
试剂。除限制性内切酶HinfI、BcnI和Psp1406I；lmol/L的Tris-HCI（12.1g Tris-Base溶于800ml水中，加入浓HCI用酸度计调节pH至8.0，加水定容至IL）；O.5mol/L的EDAT（186.1g乙二胺四乙酸二钠溶于700ml水中，用10mol/L Na0H调节pH8.0，加水定容至IL，高温灭菌后备用）；10*TBE（108g Tris-Base溶于800ml水中，加入55g硼酸和40ml o.5mol/L EDAT，pH8.0，加水定容至IL）；凝胶载样缓冲液（含50%甘油，0.25%澳酚蓝，4℃保存）；O.5mg/ml溴乙锭（EB）工作液（加入凝胶的终浓度为o.5ug/ml）。
方法。将各种贝母的5s区的PCR扩增产物，分别以Bcnl、HinfI和Psp1406I限制性内切酶水解（37℃，4小时），随后65℃变性处理10分钟以终止反应，取出在2%的琼脂凝胶上电泳，上样量为每个样品8uL。Hinfl酶切体系：20uL反应体系中含有10xBuffer 2uL，HinfI0.5uL（10u/uL），模板溶液6uL，超纯无菌水适量（补足20ul）；BcnI酶切体系：20uL反应体系中含有10xBuffer2uL，BcnI0.6uL（10u/uL），模板溶液6uL，超纯无菌水适量（补足20ul）；Pspl406I酶切体系：20uL反应体系中含有10xBuffer 2uL，Psp1406I1.2ul（10u/uL），模板溶液6uL，超纯无菌水适量（补足20ul）。
结果
根据各贝母的5s区测序结果，找出了暗紫贝母有而其它贝母无的位点（在5’端316bp），用PirmeirPmer5.0软件筛选出BcnI，并用该软件确定其它贝母的5s区全序列均无此酶切位点，因此理想的酶切结果应为：暗紫贝母的5S区PCR产物被切成316bp和370bp两段，其它贝母仍保留700bp左右的原长度，这主要是因为5SrDNA在细胞中以高度重复排列的方式存在，虽然由于同步进化的力量，这些重复单位间已接近纯合，但父母本的差异以及环境因素的影响仍能导致杂交现象的产生（即各拷贝之间存在着少许差异），因此在实际酶切时，仍有少部分PCR产物不能切开，而非酶切不完全的缘故（研究证明将酶量加大，酶切时间延长后电泳结果均无变化）。此外，根据湖北贝母在3’184bp处的特异位点选择出Psp1406I，该酶在其它贝母的5s区均无酶切位点。
同样根据各贝母的5s区测序结果，找出了梭砂贝母在5’端278bp处的特异位点，用Pirmepirmer5.o软件筛选出HinfI，并用该软件在各种贝母（包括梭砂贝母）5s区全序列中寻找有无该酶切位点，结果表明：梭砂贝母、浙贝母、蒲忻贝母、甘肃贝母、暗紫贝母分别在5’端49与275、615、615、624、616bp处均有该酶的酶切位点，理想的酶切结果应为酶切后梭砂贝母为49bp、229bp、407bp三条带；浙贝母为615bp和58bp两条带；蒲沂贝母为615bp和58bp两条带；甘肃贝母为624bp和58bp两条带：暗紫贝母为616bp和58bp两条带。所有被切后50bp左右的小片段在电泳图上都几乎看不见，这主要是由于小分子量的DNA片段在电泳的过程中易发生扩散，梭砂贝母被HinfI酶切后具有特异性的酶切图谱，且该法在药材的鉴定上也很稳定。
讨论
作为一名入党积极分子，首先要解决为什么要入党的问题。因为入党动机是激励我入党的主观原因，从根本上决定了作为一名党员应具有的素质和行为，也是个人世界观、人生观的集中反映。其实正确的入党动机的形成并不在一朝一夕，而是在我三年多的学习、思考中渐渐地体会到的。入党不是给别人炫耀的，更不是用来满足自己虚荣心的，而是应该踏踏实实为党奉献，全心全意为人民服务，在学习和生活中发挥先锋模范作用。
思想上，生活中，团结同学，尽量发挥自己的作用，作一些力所能及的事情帮助和关心同学，比如听说同学病了，就去看望问候;听说朋友心情不好，就去劝勉鼓励。在担任班级干部期间，认真履行自己的职责，对班级事务和同学关系注入了很大的热情，而且坚持锻炼自己做好班级工作，学好专业课程两方面的能力。作为一名入党积极分子，我在申请期间，定期向党组织和入党介绍人汇报自己的思想，并积极参加党组织举行的有关活动：上党课，参加党课学习小组，参加党员发展会等。所有这些行动对提高自己的思想认识起着重要的作用。
在学习中，我更加明确学习目的，端正学习态度，想办法，找问题，不断改进学习方法，勤奋认真地钻研知识。虽然有时成绩进步不大偶尔甚至出现下降，但我总是努力摆脱成绩不好的阴影，总结教训，投入到新的学习中，坚持不懈。长期以来，我都始终贯穿着自己是入党积极分子的思想。在集体活动中，我都积极参与，和大家积极配合完成集体任务。但是我还是存在着许多缺点和问题的。首先，在学习专业知识基础课程时，我觉得自己进取心不很强，主动性也较差，主要表现在学习时只能顾及理解，钻研得少，思考得也少，有时遇到挫折却知难而退，因为对自己信心不足，总是耽于“能力有限”而放弃钻研。
生活中，团结同学，尽量发挥自己的作用，作一些力所能及的事情帮助和关心同学，比如听说同学病了，就去看望问候;听说朋友心情不好，就去劝勉鼓励。在担任班级干部期间，认真履行自己的职责，对班级事务和同学关系注入了很大的热情，而且坚持锻炼自己做好班级工作，学好专业课程两方面的能力。在生活中，有时我却又表现得太过要强，认为许多事情自己都要去插手，才算关心集体。我觉得自己脾气不好，有时会因为一些小事，而乱发脾气，伤了同学之间的和气，也给别人种下了不好的印象。
我正在努力的发觉并改正错误;而且我更加期盼着能够在老师、同学们的监督和帮助下改正缺点和错误。除了学习科学文化，最根本的是学习马列主义，毛泽东思想，尤其是邓小平理论。在学业有成后的将来，还要积极参加改革开放和现代化建设的伟大实践，在改造客观世界的同时改造主观世界。我将不断肃清头脑中一切非无产阶级的思想，使自己的言行符合党、国家和人民的根本利益，把自己锻炼成为具有坚强党性的共产党员。理想是远大的，但还要从实处着手，我会从现在开始以实际行动开始努力，以一个党员的标准，严格要求自己，尽量缩小与党员标准之间的距离。请党考验我吧。
范文二
本人×××，男，现为××××。XX年5月参加了区直机关第十三期入党积极分子培训。这份鉴定主要是总结本人工作以来各种方面的情况，以便进行批评与自我批评，同时也是积极入党员的材料。
一、政治方面：
树立共产主义信仰。一个人如果没有一种可以终生奉行的信仰的话，也就失去了自己的方向，在很多事情上会很糊涂，不知道怎么处理，日子也过得漫无目的，浪费时光。有信仰才能有动力，才有原则，才会让自己觉得很充实，才可以分辨是非。我参加工作以后，这个感觉越来越强烈，同时通过对实事和我党政策的了解，更加坚定了我的共产主义的信仰。因为我觉得它是最科学，最先进的，揭示了历史的发展趋势，未来的世界也将是这样的，自己理应为真实的未来而努力。XX年的5月，我进党校学习，虽然学习时间紧，但收益却颇大。老师的讲课都是比较精辟的，他们的真心话语和精彩的分析让我在原有认知的基础上对党有了更深入和真实的认识。通过学习，感觉到自己的基础知识有所不足，党校学习结束后，本人并没有停止学习，而是更加努地学习党的“三个代表”，更加深入的了解马列主义，毛泽东思想、邓小平理论，更加深入地学习科学发展观，用中国特色社会主义理论武装自己的头脑，提高自己的理论水平。
二、学习方面：
本人认为自己无论是作为一个入党积极分子，不可以只是空有一腔热忱而没有相应的能力，要有相应的知识才可以把自己的热情化为行动，才可以真正做到为人民服务。所以我注意学习方面的各个问题。平时认真学习统计业务知识、统计法律法规，积极参加省、市局组织的业务培训，努力提高自己的业务知识。
三、工作方面：
党员是平凡的，也是不平凡的。党员的平凡体现在从身边事情做起，以身作则，为人民服务。作为一个入党积极分子，作为一个向党组织靠拢的人，工作方面一定要全心全意为人民服务。我作为统计系统的一分子，在工作中能正确处理苦与乐，得与失、个人利益和集体利益的关系，坚持甘于奉献、爱岗敬业。日常做好对企业统计人员业务指导工作，以热情周到态度服务企业;充分利用各项统计调查资料进行系统的加工整理和分析预测，反映分析情况，为各级领导决策提供依据。
无论以前做的怎么样，本人都应该认真总结经验，眼光向前看，用党员的标准来要求自己，努力克服自己的弱点和缺点，不断地提高自己，争取早日加入中国共产党。
范文三
回顾大学三年，通过良师的教导和自身的刻苦学习，我已初步掌握如何运用英语知识进行一般商务活动，也养成了认真对待学习和工作的好习惯!
在思想品德上，本人有良好道德修养，并有坚定的政治方向。我热爱祖国，热爱人民，坚决拥护共产党领导和社会主义制度，遵纪守法，爱护公共财产，团结同学，乐于助人。并以务实求真的精神热心参予学校的公益宣传和爱国主义活动。
在学习上，我圆满地完成本专业课程。并具备了较强的英语听读写能力。对office办公和其它流行能熟练操作，并在因特网上开辟了自己个人空间。平时我还涉猎了大量文学、心理、营销等课外知识。相信在以后理论与实际结合当中，能有更大提高!
在生活上，我崇尚质朴的生活，并养成良好的生活习惯和正派的作风。此外，对时间观念性十分重视。由于平易近人待人友好，所以一直以来与人相处甚是融洽。敢于拼搏刻苦耐劳将伴随我迎接未来新挑战。
在工作上，我通过加入院学通社与合唱团，不但锻炼自己的组织交际能力，还深刻地感受到团队合作的精神及凝聚力。更加认真负责对待团队的任务，并以此为荣!
作为积极乐观新时代青年，我不会因为自己的大专文凭而失去自信，反而我会更加迫切要求自己充实充实再充实。完善自我石我未来目标。且我相信:用心一定能赢得精彩!
白驹过隙，转眼间大三下学期已经过去了，作为一名预备党员，我学习了“两会”的相关内容，其中留给我印象最深的是提出的“中国梦”。每年的两会都是我们关注的焦点，通过两会，看了温家宝的政府报告，我们回顾了过去一年我们国家的蓬勃发展，同时也看到了今后的发展方向和目标。在过去的一年中，是我国发展进程中极不平凡的一年：我们保持了经济平稳较快发展，载人航天、高速铁路等实现重大突破，第一艘航母“辽宁舰”入列等等，我们圆满完成了“x”规划，在社会主义经济、政治、文化、社会及生态文明建设方面取得了重大进展。今年我国仍会注重转变经济发展方式，改善民生，关注环境，促进发展农业等等，通过两会，我看到了中华民族伟大复兴的“中国梦”，实现“中国梦”是每一个中华儿女共同的心愿，同志当选以来，在国内国际多个场合，结合不同工作内容就“中国梦”的具体内涵、奋斗目标、总体布局、实现路径等进行了系统阐述。“中国梦”成为激荡神州大地，承载亿万海内外中华儿女梦想和重托的热门词汇。“中国梦”更让我进一步认识到如何结合两会设定自己的目标，确定努力的方向。
那么何为“中国梦”呢?
习近平主席说，“每个人都有理想和追求，都有自己的梦想。现在，大家都在讨论中国梦，我以为，实现中华民族伟大复兴，就是中华民族近代以来最伟大的梦想。这个梦想，凝聚了几代中国人的夙愿，体现了中华民族和中国人民的整体利益，是每一个中华儿女的共同期盼。历史告诉我们，每个人的前途命运都与国家和民族的前途命运紧密相连。国家好，民族好，大家才会好。实现中华民族伟大复兴是一项光荣而艰巨的事业，需要一代又一代中国人共同为之努力。空谈误国，实干兴邦。
我们这一代共产党人一定要承前启后、继往开来，把我们的党建设好，团结全体中华儿女把我们国家建设好，把我们民族发展好，继续朝着中华民族伟大复兴的目标奋勇前进。”
习近平主席说，“有梦想、有机会、有奋斗，一切美好的东西都能够创造出来。”听来让青年人们心潮澎湃。“有梦想”，实质上是告诉我们，每个人都要有理想，有信念。“有机会”，昭示着中国具有实现“梦想”的各种有利条件。“有奋斗”，则是“梦想”的落脚点。实现“梦想”而不是“空想”，这需要13亿中国人的责任、共识、改革创新和实干。“中国梦”聚集了每一个中国人的梦想和希望。聚沙成塔，中国梦需要汇聚起全体中国人的磅礴力量。“中国”不是一个抽象的名词，它是我们每个人脚下的大地和头顶的天空、生活的街巷和挚爱的亲朋、呼吸的空气和跳动的脉搏，是每一个老人的记忆和所有孩子的未来。因此，托起“中国梦”，是包括你我在内的13亿中国人的共同责任，需要13亿人的关注和力量。
实现“梦想”，需要最大限度地凝聚共识，“中国梦”的本质内涵就是国家富强、民族振兴、人民幸福。在实现“中国梦”的征程中，要团结一心，奋发有为，形成推动社会进步发展的强大能量，这同样也是世界文明的共同追求，顺应了人民对美好生活的期盼。梦想的形成，逐梦的路径，需要我们共同奋斗，在世人面前展现我们这个国家自信、前进的行程，也是我们这个民族给世界文明添彩的过程。
“喊破嗓子，不如甩开膀子。”如今，我国面临的政治、经济、社会、民生问题必须通过实实在在的努力工作来加以解决，坚定不移的走改革和创新之路。在人口红利，制度红利逐步消失的情况下，改革和创新无疑成为我们最大的红利，在发展的十字路口上，只有改革和创新才能推进中国经济社会的可持续发展。
党的和政府的两会为我们指明了前进的方向、行动的准则。加强政治、经济、社会、文化、生态文明建设，倡导弘扬公平正义，减少三公消费，勤俭爱民，转变政府职能，国家机构改革的推进等等，举国上下“正能量”得以形成、凝聚，我们有了希望，有了目标，有了梦想!一个人不怕一无所有，就怕没梦想。我们要把“中国梦”当作自己的“青年梦”，我们应当满怀信心、勤奋学习、大干一场。豪情满怀地踏上我们伟大民族的“圆梦”征程。我们要把个人的梦想融入到“中国梦”中去，胸怀理想，满怀激情，敢于担当，敢于创造。奋勇投身中国特色社会主义伟大实践，为实现“中国梦”发挥主力军作用，我们要以苦干续写中国辉煌，用实干托起中国梦想，用“青年梦”托起“中国梦”。
那么作为一名当代的大学生，尤其是一名预备党员，我深刻地意识到我们不仅要在思想上学习两会精神，更要在行动上，切身体会两会精神，用具体的行动为中国梦贡献出自己的一份力量。
首先，在思想上，要不断加强政治思想学习。以前在平时的学习生活中，对政治、对国家发生的大事不是很关注，只知道埋头苦学课本理论知识，但是我知道自己在慢慢改变，慢慢进步。现在的我主动加强政治学习，经常看电视新闻、看报纸、关心时事政治。坚定正确的政治方向;懂得了党员的职责和义务，时刻拿一名党员的标准严格要求自己。我还及时学习党中央颁布的决策，在思想上和党组织保持高度一致。并且能够利用课余时间自学了一些政治理论方面的书，并认真做了自学笔记。通过学习，我认识到，我们党一直把全心全意为人民服务作为党的宗旨，把实现和维护最广大人民群众的根本利益作为一切工作和方针政策的根本出发点，党的一切工作或全部任务，就是团结和带领人民群众为实现这些利益而奋斗。同时，我也学习领悟了加强党的执政建设的意义和重要性，把这种思路和自己的学习工作有效地结合起来，调整自己的学习工作方法并提高自己的效率。通过对理论知识的学习，树立正确的牢固的世界观、人生观，价值观，加强自己的责任感和使命感，提高自己工作、学习和生活的动力。
然后，在生活中，要将全心全意为人民服务作为坚定信念时刻鞭策、鼓励自己，以这个理念为学校、为学院、为班级多做些事情，学校正在快速的发展，作为北京科技大学的一份子，作为一名预备党员，在平时的生活中，我们的一言一行都要以学校的利益作为出发点，起到一个先锋模范作用。
最后，在学习上，我会更加严格要求自己，学好自己的专业知识，此外，还要不断扩大自己的知识面，提高自己的各方面能力，及时的为自己充电，使自己不会在飞速发展的信息时代中落伍，以便更好地发挥潜能，更好地适应社会发展的需要。
我知道，我还有着许多不足，我决心在今后的工作和学习中，注意克服自己的缺点和不足，争取在思想、工作、学习等方面有更大的进步。正确地看待自己的长与短、得与失、名与利，做一个无论在组织上还是思想上都入党的人。坚定共产主义的理想与信念，为实现党的崇高理想共产主义而奋斗。
实现全面建成小康社会、建成富强民主文明和谐的社会主义现代化国家的奋斗目标，实现中华民族伟大复兴的中国梦，就是要实现国家富强、民族振兴、人民幸福，既深深体现了今天中国人的理想，也深深反映了我们先人们不懈奋斗追求进步的光荣传统。因此，要实现“中国梦”还必须凝聚中国力量。而这种力量就是中国各族人民大团结的力量。对此每位公民都做到忠于祖国，忠于人民，恪尽职守，夙夜在公，为民服务，为国尽力。
作为一名预备党员，关注两会，关注民生，为祖国的蓬勃发展贡献自己的一份力量，我们现在所能做到的就是努力学习，加强自身素养与能力，从身边的一点一滴做起，蓄力以望将来能够为建设更加富强民主的国家尽一份力量!为“中国梦”的实现而努力奋斗!
关键词：小叶锦鸡儿；内生菌；抑菌活性；分子鉴定
中图分类号： Q939.92文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）06-0105-02
收稿日期：2013-09-04
基金項目：国家自然科学基金（编号：31200103）；宁夏自然科学基金（编号：NZ12152）。
作者简介：李志英（1977—），女，宁夏青铜峡人，博士，讲师，研究方向为植物分子生物学。E-mail：lizhiying_1115@163.com。
通信作者：代金霞，女，宁夏银川人，博士，副教授，研究方向为环境微生物。E-mail：djxia05@163.com。植物内生菌（endophyte）是指生长在健康植物组织、器官内部，而又不引发宿主植物表现出明显感染症状的微生物类群[1]。植物内生菌长期生存于植物体内的特殊环境中并与宿主协同进化，一方面植物体为其提供生长所必需的能量和营养，另一方面，内生菌又可以通过自身的代谢产物或借助于信号传导作用对植物体产生影响[2]。许多植物内生细菌具有多方面的生物学和生态学功能，如固氮、促进植物生长、抗逆境、抗病虫害和生物修复等。
植物病害是引起植物品质下降、产量损失的主要原因之一，约80%的植物病害是由植物病原菌引起的。目前，对植物病害的主要防治手段是采用化学农药，而化学农药对人畜的副作用以及残留问题、环境污染问题已经成为农业生产中亟需解决的主要问题。植物内生菌能产生众多的抗菌产物并在一定条件下成为植物病原菌的拮抗菌，却不会引起宿主植物明显的病症，目前从植物体内筛选对植物病原菌具有抑制作用的拮抗内生菌并进行生物防治已经成为研究热点[3]。
小叶锦鸡儿（Caragana microphylia Lam.）为豆科蝶形花亚科锦鸡儿属植物，具有广泛的适应性和极强的抗逆性，是中国西北、华北、东北西部水土保持和固沙造林的重要树种之一。小叶锦鸡儿在维护干旱荒漠区的生态平衡、改善沙区环境、发展畜牧业生产、提高沙区的经济效能中发挥着十分重要的作用[4]。
本试验通过对小叶锦鸡儿内生细菌抑制植物病原菌的能力进行测定，试图筛选出具有较强抑菌活性的菌株并对其进行分子鉴定。研究结果不仅可为开发生物农药提供菌种资源，同时也将为丰富我国的微生物资源、推动干旱地区微生物资源的保护、开发和利用提供理论依据。
1材料与方法
1.1供试菌株
供试菌株分离自宁夏荒漠固沙植物小叶锦鸡儿的各部分组织中，根据培养形态选取其中的27株进行抑菌试验，菌种编号分别为：R05、R09、R10、R12、R14、R18、R41、R43、R44、R46、R47、R48、L01、L02、L05、L10、L12、L13、L15、L16、L17、L18、L19、L20、S01、S03、SD3。指示病原菌为：小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）、番茄枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici）、番茄炭疽病菌（Colletotrichum lycopersici）、玉米大斑病菌（Setosphaeria turcica）、马铃薯干腐病菌（Fusarium solani）、萝卜黑斑病菌（Alternaria sp.），均来源于宁夏大学农学院植物病理室。
1.2内生菌的分离与纯化
各称取1 g小叶锦鸡儿的根、茎、叶，表面消毒后置于灭菌研钵中研磨；将磨碎的组织加到含有灭菌生理盐水和灭菌玻璃珠的锥形瓶中，涡旋振荡1 min；将上清液倒入灭菌离心管中沉淀后，再将上清液进行梯度稀释，稀释率分别为10-1、10-2、10-3，各取0.1 mL涂LB平板，每个处理重复3次；同时取0.1 mL最后一次冲洗的无菌水涂平板，作为表面灭菌对照。将所有平板于28 ℃培养 72 h，挑取平板上的单菌落进行划线分离，直至得到纯的单菌落并保存在斜面上备用。
1.3抑菌能力的测定
采用LB固体培养基抑菌圈法进行抑菌活性的测定。用接种环分别挑取纯化好的内生菌单菌落接入装有20 mL液体发酵培养基的锥形瓶中，于28 ℃、150 r/min恒温振荡培养 48 h，取出后用无菌水调至D值一致。将指示病原菌接入PDA液体培养基中，在28 ℃、100 r/min条件下恒温振荡培养48 h，无菌过滤后取上清备用。
采用对峙培养法，取200 μL指示病原菌滤液并用无菌玻璃棒均匀涂布于LB固体培养基上，干燥后用灭菌打孔器对称打4个孔，取35 μL内生菌发酵液滴于孔中，置于 28 ℃ 恒温培养，每处理各3个重复。从培养第1天开始观察菌落生长情况，并记录内生菌形成的透明圈直径。抑菌能力通过计算内生菌菌落形成的透明圈直径与孔直径的比值（D/d值）来评价：D/d值越大，抑菌能力越强；比值越小，抑菌能力越弱；比值为1时表示菌落无抑菌能力。
1.4菌株的分子鉴定
将筛选出的具有较强抑菌能力的菌株进行总DNA的提取。采用细菌16S rDNA的通用引物27F、1492R进行PCR扩增[5]。扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测后委托上海生工生物工程技术服务有限公司进行16S rDNA全序列的测定，将所测序列在GenBank中进行BLAST同源性搜索，以确定菌株的分类地位。
2结果与分析
2.1小叶锦鸡儿内生细菌的抑菌活性
，分离的27株内生细菌对供试病原菌的抑菌能力差别较大，有6株内生菌对供试的所有病原菌均未表现出抑菌活性，而多数菌株对2种以上的病原菌表现出抑制活性。此外，同一菌株对不同病原菌的抑制能力也存在很大差异，如R10对番茄枯萎病菌和番茄炭疽病菌的抑制能力很强，但对萝卜黑斑病菌却无抑菌活性；L17、R18对萝卜黑斑病菌表现出很强的抑制活性，但对番茄炭疽病菌的抑菌活性却很低。从整体上看，小叶锦鸡儿内生细菌的抑菌能力较强，R43、L01、L02、L05、L16、L20、S03等7株内生细菌对所有供试病原菌都表现出一定的抑制活性。
2.2内生细菌的鉴定结果
将筛选出的具有较强抑菌活性的内生菌16S rDNA序列与GenBank中的同源序列进行比较，结果表明，这些菌株分别与芽孢杆菌属（Bacillus）、類芽孢杆菌属（Paenibacillus）、假单胞菌属（Pseudomonas）、罗尔斯通氏菌属（Ralstonia）、中华根瘤菌属（Sinorhizobum）的细菌具有很高的同源性（表2），且多数菌株隶属于芽孢杆菌属。
小叶锦鸡儿内生细菌抑菌能力的测定结果
菌种
编号透明圈直径/孔直径（D/d值）番茄枯
萎病菌番茄炭
疽病菌玉米大
斑病菌小麦赤
霉病菌马铃薯干
腐病菌萝卜黑
斑病菌R051.381.001.002.761.001.28R091.001.002.951.731.001.50R103.864.672.572.812.381.00R121.001.001.001.001.001.00R143.122.241.003.571.002.38R182.151.001.002.242.278.39R411.001.001.001.001.001.00R432.672.052.335.052.675.67R441.001.001.002.111.004.00R461.001.001.001.001.001.00R473.141.003.103.332.093.00R481.001.001.001.712.544.95L012.382.091.714.002.626.15L022.131.672.003.252.237.17L053.574.333.812.332.221.91L101.001.001.001.001.001.00L121.001.001.001.001.001.00L131.731.001.002.832.257.22L152.252.452.001.002.501.00L162.722.362.954.252.22 6.92L171.731.002.113.381.959.43L181.001.001.001.001.001.00L192.273.763.142.382.181.00L202.352.763.336.002.188.33S013.674.572.763.051.821.00S033.194.383.713.482.582.50SD33.144.483.522.482.271.00
内生菌的16S rDNA的鉴定结果
菌株NCBI比对结果序列相似性
（%）R43，L01，L16Bacillus cereus100Bacillus thuringiensis100Bacillus subtilis100L19，R18Bacillus pumilus100L17Bacillus simplex100R10 Bacillus idriensis100R14，R47Paenibacillus ehimensis99S01Pseudomonas syringae97L02，L05，L20 Ralstonia pickettii100S03Sinorhizobum melioti100
3结论
植物体可以看作是被许多不同细菌开发的不同生境的复杂微生态系统。在植物微生态系统中，不同的内生菌可以占据不同的生态位，它们相互作用并在植物体内维持着微生态平衡。植物内生菌的生境特殊性决定了其既有理论研究的广度和深度，又有广泛的应用潜力，是个潜力巨大、尚待开发的微生物新资源。本研究运用抑菌圈法对小叶锦鸡儿内生细菌拮抗植物病原菌的能力进行了测定，结果表明， 多数菌株对不同的病原菌均表现出一定的抑制能力。经16S rDNA序列分析表明，多数具有较强抑菌活性的菌株隶属于芽孢杆菌属。
据报道，芽孢杆菌属的一些种类对外界有害因子的抵抗力强，菌体生长过程中产生的枯草菌素、制霉菌素等多种活性物质对植物病原菌有明显的抑制作用[6]。苏云金芽孢杆菌B.thuringiensis由于能产生δ内毒素，对鳞翅目等昆虫的幼虫有毒杀作用而被用以制造生物农药，是常用的生防资源菌[7]。芽孢杆菌属、假单胞菌属、类芽孢杆菌属的许多菌株不仅可以分泌吲哚乙酸或赤霉素等，从而有效促进植物的生长，而且能抑制多种病原菌的活性，从而显著提高植物的抗病性。
作为防风固沙的先锋物种，小叶锦鸡儿的生态学意义远大于其经济学意义，发掘与其共生的微生物资源不仅对探索极端环境中内生细菌-宿主植物的协同进化研究有着重要的指导意义，而且有助于我们更加透彻地认识其共生体系的形成及抗逆机理。期待能够从研究中找到增强小叶锦鸡儿抗逆性的合适途径，进而对沙漠化的治理起到积极的作用。
参考文献：
[1]Hallmann J，Quadt-Hallmann A，Mahaffee W F，et al. Bacterial endophytes in the agricultural crops[J]. Canadian Journal of Microbiology，1997，43（10）：895-914.
[2]Kiers E T，Denison R F. Sanctions，cooperation，and the stability of plant-rhizosphere mutualisms[J]. Annual Review of Ecology，Evolution，and Systematics，2008，39：215-236.
[3]Ryan R P，Germaine K，Franks A，et al. Bacterial endophytes：recent developments and applications[J]. FEMS Microbiology Letters，2008，278（1）：1-9.
[4]牛西午. 中国锦鸡儿属植物资源研究——分布及分种描述[J]. 西北植物学报，1999，19（5）：107-133.
[5]Weisburg W G，Barns S M，Pelletier D A，et al. 16S ribosomal DNA amplification for phylogenetic study[J]. Journal of Bacteriology，1991，173（2）：697-703.
[6]许曼琳，段永平，吴祖建，等. 芽孢杆菌两菌株对香蕉炭疽病菌的抑制作用及其机制[J]. 云南农业大学学报，2009，24（4）：522-527.
【积极分子自我鉴定wq】推荐阅读：
积极分子自我评价10-13
入党积极分子自我思想鉴定09-09
入党积极分子自我鉴定材料10-17
2024入党积极分子自我鉴定11-26
积极分子半年鉴定范文06-21
入党积极分子鉴定表02-01
入党积极分子自我总结09-27
入党积极分子个人工作鉴定范文02-11
党课积极分子结业鉴定表自我鉴定书11-30
入团积极分子考核表自我评价02-23
