细菌展示技术

细菌展示技术（精选8篇）

细菌展示技术 篇1

各位同学大家好，今天我们为大家带来的是：细菌细胞表面展示技术，严谨的科学定义是：指通过重组 DNA 技术，将外源功能蛋白表达并定位于特定细菌细胞的表面，以达到一定的研究与应用目的是一项新的蛋白质应用技术。这句话该怎么理解：一般基因工程需要把蛋白提取出来，最好是菌体可以把蛋白分泌到菌体外，表面展示技术是把目的蛋白表达在细胞表面，外源蛋白的这种表面锚定有4个好处：1.可以使特定的反应在细胞表面直接发生而提高反应效率，2.能克服某些大分子底物不能穿越细胞膜而进入胞内，3客服某些反应产物在细胞内不能进行特定的构型折叠等弊端，4.使产物的提取纯化过程简化。

接下来，我组将从发展史，菌体构建，技术应用，未来展望4各方面为大家介绍。1.发展史

大多数生物技术都是经历了噬菌体——细菌——真核（酵母菌）的三个发展应用阶段，表面展示技术也不例外。包括：1985年Smith等人创建噬菌体表面展示技术，次年，Freudl 报道细菌表面展示技术，以及近年来兴起的酵母菌表面展示技术与杆状病毒表面展示系统。

噬菌体表面展示技术：该展示系统是最早发展起来的,历经20多年发展,现在最常用的噬菌体表面展示系统主要有:丝状噬菌体、K噬菌体、T4噬菌体和T7噬菌体展示系统。噬菌体表面展示技术具有表面展示技术的基本优点,而且技术发展相对成熟,但由于载体自身的限制,使得该展示系统存在着很大缺点。比如,外源蛋白的插入可能影响噬菌体的装配,使其失去感染力;多肽或蛋白质与噬菌体外壳蛋白融合表达时存在不可预测的偏差性等。

酵母菌表面展示系统：酵母表面展示系统是近年发展起来的一种重要的真核蛋白表面展示系统。酿酒酵母是具有细胞壁的单细胞真核微生物,是目前常见的酵母表面展示系统载体蛋白来源。根据交配型的差异分为MATa和MATA两种单倍体,其细胞表面分别表达a或A凝集素,它们是酵母细胞壁上的两种甘露糖蛋白,可介导细胞间的性黏附使细胞融合。目的蛋白可分别与a或A凝集素融合,展示于酵母细胞表面。与细菌相比,酿酒酵母在表面展示技术上的应用具有许多优势:(1)具有公认的安全性;(2)其蛋白质折叠和分泌方式与哺乳动物相似,展示哺乳类蛋白优于细菌系统;(3)具有众所周知的发酵特性;(4)展示的蛋白质可通过糖基磷脂酰基醇(GPI)锚定或二硫键绑定在细胞壁上。因此,酵母表面展示系统是一种更为安全、高效的表面展示系统。但该系统也存在一些缺陷,例如酵母生长适温范围窄,主要的蛋白质后加工过程与哺乳动物细胞差异较大,重组酵母缺少选择标记等。2006年有人报道酵母的质量控制系统并不能区分表达完整折叠的蛋白和折叠结构缺陷型蛋白〔4〕,这也进一步表明了酵母表面展示系统在蛋白表达上还不完善,筛选出来的蛋白应用前可能还需要进一步分析研究。

杆状病毒表面展示系统：属于高等真核生物展示系统。该展示系统以杆状病毒为载体,外源基因插入病毒的衣壳蛋白基因或囊膜蛋白基因后经过加工处理,与衣壳蛋白或囊膜蛋白进行融合表达并在病毒粒子或感染细胞表面进行展示。作为一种真核生物展示系统,杆状病毒表面展示系统允许大片段外源基因的插入,能有效地在病毒粒子表面展示外源蛋白,而且可以对外源蛋白进行糖基化加工和折叠等翻译后修饰,尤其适合需进行特异的翻译后加工才能有效折叠和具有生物活性的高等真核生物细胞表面蛋白和分泌蛋白的展示。目前研究及应用最为广泛的杆状病毒表面展示系统是苜蓿尺蠖核型多角体病毒和家蚕核型多角体病毒表面展示系统〔5〕。相对于前几种展示系统,该展示系统可能具有更大的发展和应用空间。2.细菌表面展示体系的构成

细胞表面展示体系通常由运载蛋白（carrier protein）、靶蛋白（又称乘客蛋白，passenger protein）和受体菌三者组成，其中运载蛋白与靶蛋白以融合蛋白的方式交联，根据运载蛋白与靶蛋白融合位置的不同，一般分为 N 端融合、C 端融合和三夹板式融合等 3 种交联方式。2.1运载蛋白

运载蛋白的功能是将靶蛋白引导并锚定于细胞表面特定部位，因此一般应具有以下特性：①在结构上具有锚定单元，使靶蛋白能固定在细胞表面；②一般具有信号肽或转运信号，藉此引导表达的融合蛋白穿越细胞质膜； ③与外源蛋白融合后其本身的锚定特性不发生改变； ④展示的靶蛋白不易被胞内蛋白酶降解。目前已证实多种具有上述特性的细菌细胞蛋白，按其结构部位与功能，可分为细胞膜孔道蛋白、冰晶核蛋白、细胞壁相关蛋白、S－层蛋白、细胞表面附属物蛋白和其他类型蛋白等。接下来重点介绍两个应用最广的冰晶核蛋白和我们稍微熟悉的细胞表面附属物蛋白，两个运载蛋白。

2.1.1冰晶核蛋白

冰晶核蛋白（INP）是存在于丁香假单胞菌等细菌中的一种可诱发生物冰核形成的分泌蛋白，也是目前应用最为广泛的运载蛋白已从丁香假单胞菌克隆到 inaK、inaV 和 inaZ 等基因均位于染色体上，其编码产物的大小为 1 200～1 500 个氨基酸。在结构上，inaK 等基因均为单一开放阅读框，其编码蛋白由 3 个典型的结构域组成：①N 端结构域（约占序列的 15％），其中含有3～4 个与膜转移相关的结构单元，但是均未发现有分泌信号序列存在于这个区域中。此结构域含有较为丰富的 Asp 和亲水性氨基酸 Ser 和 Thr。Asp 残基可与细胞壁上的糖基磷脂酰肌醇通过N－聚糖连接方式进行连接，而 Ser 和 Thr 残基则可通过 O－聚糖连接方式与外膜多糖中的甘露糖相结合，从而将该蛋白锚定固着在外膜表面。②C 端结构域（占 4％），其主要的生理功能是参与冰晶形成。③中间的疏水结构域（占 81％），其序列中周期性地出现 8 个、16 个和 48 个氨基酸残基的重复序列，其功能主要是起“晶核”的作用而诱导冰晶的形成。在 C 端结构域和中间疏水结构域也均未发现分泌信号序列。INP 分子结构的这一特征为靶蛋白的转运提供了更多的可行选择。已报道采用 INP 的 N端加上少数中间重复单元、或仅采用其前 175 个氨基酸残基的N 端，均能有效转运和展示外源蛋白。

2.1.2细菌表面附属物

细菌表面附属物，如鞭毛和菌毛（性毛）等也可以作为运载蛋白。鞭毛主要由若干拷贝 FliC 蛋白与其他成分构成，其两端高度保守，而中间超变区则可以用外源蛋白代替用来构建表面展示体系，同时鞭毛保持原有的功能不变。但是由于中间超变区的大小有限，插入的外源基因的大小有一定的限制。菌毛是长细丝状的细菌附着物，由约 1 000 个主要的亚基菌毛蛋白和一些对附着和组装有重要作用的小蛋白组成，形成一个螺旋筒状结构。每个细胞含有约 500 个拷贝，菌毛蛋白含有超变区可用于插入靶蛋白。Ⅰ型菌毛含有甘露糖残基，介导结合到大肠杆菌上皮受体，由于其在细胞表面数量巨大，可产生强烈的免疫反应，具有附着和易于纯化的特性，在疫苗开发和文库构建上具有优势

2.2靶蛋白

靶蛋白是在细胞内合成后经跨膜转运和在细胞表面固定并展现功能的特定蛋白，其活性大小直接决定着展示系统性能的优劣。并非所有内源或外源合成蛋白都适合于用作靶蛋白，一般要求靶蛋白分子内不能形成二硫键或者在发挥活性时需要进行特殊的折叠、靶蛋白一级结构中带电荷的氨基酸不能对融合蛋白在细胞表面的锚定产生干扰、靶蛋白功能活性区域（如酶的活性中心）的位置通常不能太靠近融合位点等。

2．3 宿主菌

宿主菌的遗传背景也是影响展示系统性能的关键因素。宿主菌应对异源蛋白具有很好的兼容性和较低的蛋白酶降解活性，同时应具有容易培养或某种有利于展示性能发挥的特性，如恶臭假单胞菌的强抗逆性能。革兰阴性菌是研究较早和目前报道较多的宿主菌，近年也开发了多种革兰阳性菌表面展示系统。3.技术应用：

经历近30年的发展，细菌表面展示技术广泛应用于疫苗开发，蛋白质文库与肽文库的筛选，全细胞催化剂，全细胞吸附剂及降解剂，和其他应用等5个方面。其中蛋白质文库与肽文库的筛选是：从庞大的随机文库中筛选出目标蛋白或肽片段，对于得到高活性的突变酶或提高抗原决定簇的免疫能力具有重要意义。将靶蛋白展示到细菌表面，不但可以利用荧光活性分选技术进行筛选，而且直接得到纯化的单克隆。Daugherty 等通过在大肠杆菌表面展示 scFv 和进行点突变建立突变体库，再使用流式细胞仪分选系统进行筛选，建立了一种高效筛选突变文库的方法Kim 等采用 DNA shuffling 技术对枯草芽孢杆菌 BSE616 的纤维素酶基因进行改造，建立了大于 1×106的文库，通过菌落形态进行筛选，得到的最优菌株的纤维素酶活性比对照高 5 倍采用免疫学技术对大的文库进行筛选具有较高的效率和灵敏性。Bessette 等将 15 个氨基酸的肽插入大肠杆菌外膜蛋白 OmpA上，构建了含有 5×1010克隆的大文库，通过筛选得到 7 个氨基酸的保守序列，对人血清白蛋白、抗 T7 抗原决定簇、人 C 反应蛋白、HIV－1 gp120 和碱性磷酸酶等都有很高的亲和性。

细菌展示技术 篇2

一、细菌性角斑病

1. 细菌性角斑病的症状

此病主要发生在叶、叶柄、茎、卷须以及果实上。叶片叶片染病初生针尖大小透明状小斑点, 扩大后形成具有黄色晕圈的淡黄色斑, 中央变褐或呈现灰白色穿孔破裂, 湿度大时病部发生乳白色细菌溢脓。茎和果实染病, 刚开始呈现水浸状病斑, 后也溢有白色菌脓, 干燥时变为灰色并且形成溃疡和裂口。

2. 防治办法

(1) 选好西瓜抗病品种。 (2) 播种前进行种子灭种处理。具体做法如下:50℃温水浸种20分钟, 捞出晾干后催芽播种, 也可以用碳酸钙300倍液浸种1小时, 或者用40%福尔马林150倍液浸种1小时, 捞出晾干后催芽播种。 (3) 药剂防治办法。用50%的DT可湿性粉剂500倍液、60%的DTM可湿性粉剂500倍液、或者用72%的农用链霉素水溶性粉剂4000倍、兽用40万单位青霉素钾盐5000倍液叶面喷雾, 都有很好的防治效果。

二、细菌性叶斑病

1. 表现症状

此病主要危害叶片、茎蔓和果实。叶部病斑初期呈现水浸状斑点, 发展为带有黄边的褐色小斑, 以后病斑扩展增大, 达到叶脉后, 沿着叶脉向叶柄扩展。病斑扩大后互相愈合, 形成比较大的病斑, 导致叶片干枯。果实受害后容易造成烂果。

2. 防治办法

(1) 播种前, 把园地清除干净并及时清除病残叶。 (2) 播种前种子消毒处理。通常用40%福尔马林150倍液浸种30分钟, 捞出清洗干净浸种催芽。 (3) 药剂防治。发病初期用4000倍液农用链霉素或新植霉素、50%DT或DTM500倍液、进行叶面喷雾, 7天1次, 连续喷4次左右即可。

三、西瓜枯萎病

1. 表现症状

此病主要危害西瓜茎蔓, 受害处初呈现水浸状斑, 随后病斑迅速扩展达到环绕茎蔓1周后, 病部变小, 两端仍然呈水浸状, 因水分输导受到影响, 茎蔓先端叶片出现凋萎, 由上向下发展, 最后整株凋萎死亡。植株根部很少腐烂, 这一点与真菌性枯萎病有区别。

2. 发展办法

此病与细菌性叶斑病的防治方法相同。

四、西瓜果腐病

1. 发病症状

西瓜果腐病, 发病初期在西瓜果实表面出现不容易发现的水浸状小斑点, 以后迅速发展扩大, 呈现不规则水浸状大块病斑。病斑多发生在果实上表面, 后期果实开裂小口。病斑与果实表面健部界限明显, 随病的发展, 果实的肉质随着腐烂, 失去商品价值, 降低经济效益。

2. 防治办法

细菌展示技术 篇3

申请人：滦县燕滦果蔬专业合作社

项目简介

万亩有机果品基地的优势：环京津冀都市经济发展圈，且滦县地处北京的东大门要道，地理位置非常优越；在环境污染日益加重的情况下，标准化、产业化的有机果品基地建设符合国家倡导的节能环保的环境政策，有助于提高绿色农产品的国内、国际市场竟争力，促进全球经济一体化发展；该有机果品生产属生态农业，合理回收利用养殖场的粪便，通过有机肥厂进行菌种发酵、实施无害化处理工艺，用于有机果生产的肥料，有助于解决地下水、空气的污染问题；在充分利用当地优势的基础上，引进国外先进技术，创新研发了系列优异品种。其中“一种提高果品产量和质量的果树修剪方法”已申请国家发明专利，申请号为：201310335697.3。

该基地可全部实现宏观立体产业，树上产有机果品，树下种有机野菜，苜蓿草类植物和果树叶片可用于养牛、养羊，转化为有机奶源，属科学发展的循环农业，一旦完全启动，可提高当地就业率，并能带来良好的经济和社会效益。

产业回报率高，销售网络可扩展到全国，是可持续发展的阳光产业。

过去的5年是燕滦果疏专业合作社夯实基础的5年，该基地已经得到县政府的大力支持，有望在未来5年实现直管园区1万亩，销售收入达到3.5亿元，利润达1.8亿元，助农增收每年1.5亿元，有望成立燕滦集团，发展成为滦县农业支柱产业之一，同时成为中国科学院各大专院校科技转换示范基地、小康社会示范基地。

合作方式：技术转让

公司简介

滦县燕滦果蔬专业合作社位于河北省滦县杨柳庄镇王子村南，地处渤海湾，燕山山脉，是中国优质苹果产区，中国优质苹果生产基地百强乡镇。厂区占地面积40亩，成立于2008年，生产基地以滦县为中心，覆盖唐、秦两市9个县（市）区的14个乡镇，现种植果品面积4万余亩，主要品种有苹果、梨、葡萄。合作社管理完善，先后完成国家农业开发项目4个，部门项目3个，燕滦果品科普惠农项目1个。该合作社近几年实施品牌产品订单农业，从基地农产品安全追溯体系落实、农资供应到回收产品等均得到了各个基地果农的认可，产品供不应求。“燕滦”商标已在2010年成为河北省著名商标，2014年申报了中国驰名商标，截止到今年，滦县燕滦果蔬专业合作社已经获得国家及河北省、唐山市颁发的多项省级、市级荣誉。

海洋墓葬方法

申请号：201410135409.4

类型：发明

申请人：梅洪达

项目简介

该发明的特点在于巧妙地将殡葬方法与建立人造岛礁发展渔业有机地结合起来。实行海洋墓葬的棺椁可用混凝土在工厂模具化生产，也可根据需要采用其他大质量棺椁，将遗体消毒后放置棺椁中，涂上密封胶，将盖用预埋螺栓拧紧密封，并在棺盖上镶上墓碑或墓志铭，完成后运至指定海域放入海底永久存放并设立标识。

该发明的目的是为了尽快消除火葬方法带来的高能耗和环境污染以及为骨灰的存放而建设的占用珍贵土地的陵园。据民政部门的统计，全国可供建设陵园公墓的土地10年内全部用完，因此殡葬问题直接关系到民生方面。海洋墓葬不但解决了高能耗、环境污染、陵园建设用地以及永久存放的问题，还为海洋渔业的发展恢复了生机。海洋墓葬是总结了各种殡葬方法而发明的现代最先进的殡葬理念和行为方法。它可以让我国的殡葬事业良性循环并可持续发展实现长治久安。让我们的地球村变得更清洁美好，让人类与大自然更加和谐相处。

该发明的历史意义在于“变废为宝”，使本来要消耗大量能源又污染环境、破坏大自然万物生长的行为，通过人工巧妙地与大自然相融合而产生有利于各方面的发展条件，从而使逝者有了安息之地，又使海洋生物有了繁衍栖息之所，进入人与自然良性循环的生物链。

该发明的优点是：海洋墓葬的方法节约了大量能源，最大限度做到了节能减排又可持续发展，既保护了环境又节约了大量殡葬用地。如此方法得到实施推广将为人类殡葬史又翻开新的一页，逝去的人们不再占用有限的土地资源，并创造出海洋生物的生存栖息环境和生物链良性循环，使逝者入土为安变为入海轮回。因此建议有关部门废除火葬而实行海洋墓葬。尤其在人口过度集中、土地少、老龄化集中的地区实行，使海洋墓葬能解决日益严重的环境问题、土地问题、民生问题，让我们的天空更蓝，环境更好，人类更健康长寿。

合作方式：技术转让；技术入股

一种添加自然地貌的城镇规划模式

申请号：201420419588.X

类型：实用新型

申请人：池昭新

项目简介

该新型城镇规划模式是在传统的“街道连片规划模式”基础上，按严格的科学预测数据添加了自然地貌，并通过调节居宅楼层数与占地比例，将人口的空间密度控制在接近或等于街道连片模式的每平方公里0.8万—2.5万人之间。自然地貌分为城镇功能扩建备用空间与永久性自然地貌，扩建备用空间包括道路、停车位、可再生能源、水源、公共服务等，从而使城镇成为高度适应交通、能源、公共服务及环境发展状况的弹性体系，综合效益高出“连片模式”一倍以上，有助于解决城镇汽车拥堵、能源危机及大气污染等难题。

合作方式：技术转让

太阳能光伏空调冷热机组

专利号：ZL201110292998.3

类型：发明

专利权人：广州西河冷热设备工程有限公司

项目简介

该项目是利用太阳能光伏板直接给冷热机组供电，光伏板和冷热机组之间不需要蓄电池。在白天，太阳能光伏板供电给冷热机，当得到的电量大于50W以后，冷热机启动，产生冷量和热量，可以用保温水箱将多余的冷量和热量分别储存起来。储存冷量的保温水箱叫蓄冷器，储存热量的保温水箱叫蓄热器。太阳能直驱空调冷热机自身的冷热系统是整体式，不存在铜管连接，可提高冷热系统的可靠性，并能减少空调的安装费用。太阳能空调冷热机是一种新型产品，还未进入大规模、大批量生产阶段，该产品还可广泛应用于食品车间、药厂车间等准备新建的车间顶层以及商场、写字楼、宾馆、加油站、别墅、复式、顶层住房等。endprint

合作方式：技术转让

预防高血压、缺血性心脑疾病的保健酒及其制备方法

专利号：ZL201110307401.8

类型：发明

专利权人：赵全成

项目简介

该发明在祖传秘方的基础上，经过多年实践研究而得，以多种中药为主要成分，用白酒浸制过滤并封存一定时间后供患者服用，能提高免疫力，抑制高血压、高血脂、高血糖等。其制备方法简单易行，利用三七花、玫瑰花、茉莉花、红花、桂花、菊花、金银花等原料，可改善口感，服用方便，具有较高的食用价值，一旦广泛应用将带来良好的经济社会效益。该发明具有降低高血压、高血脂、高血糖的作用，为广大“三高”患者的辅助治疗带来了福音，日常服用也具有良好的保健作用。

合作方式：技术入股；许可生产

一种自锁防风衣架

专利号：ZL201320754081.5

类型：实用新型

申请人：陈光西

项目简介

该自锁防风衣架包括衣架本体和挂衣钩。衣架本体通过锁杆与挂衣钩连接，挂衣钩为弧形；锁杆上设有轴孔，轴孔由固定孔和连通固定孔的滑动孔组成，轴孔上设有在固定孔和滑动孔间运动的十字形锁芯；十字形锁芯在滑动孔位置时能够旋转，在固定孔位置时不能旋转，且处于水平位置的十字形锁芯的杆体与弧形挂衣钩内弧的两端位置闭合。通过该产品可使衣架的挂衣钩在挂上晾衣杆时，能自动形成闭合挂扣，并挂在晾衣架上，使衣架不易脱落，对使用衣叉等取挂也很方便。

合作方式：技术转让

混合甲酚高效脱色方法

专利号：ZL201010238134.9

类型：发明

专利权人：温国荣

项目简介

该脱色方法的步骤：配备浓度为0.03%—0.08%的二氧化氯水溶液作为试剂Ⅰ；配备浓度为0.015%—0.06%的硫酸铝、0.01%—0.04%的三氯化铁、0.01%—0.04%的硫酸、0.01%—0.04%的松香粉混合水溶液作为试剂Ⅱ；将试剂Ⅰ与试剂Ⅱ以1比0.5—1.5的重量份比例混合配制成脱色稳定剂；按脱色稳定剂与混合甲酚料液以重量份2‰—8‰的比例混合均匀后，倒入蒸馏釜中蒸发析出混合液中残存水分；用精馏塔对除去残存水分的混合甲酚液进行精馏，即得到合格混合甲酚产品。该发明用脱色稳定剂先行除去混合甲酚料液中的水、中性油及有机物杂质，再精馏获得合格产品，过程简单、高效快捷，成本低廉，无二次污染，产品质量高，长期放置不变色。

合作方式：技术转让

无源接点的无线连接控制装置

专利号：ZL201120031280.4

类型：实用新型

专利权人：傅署阳

项目简介

“无源接点的无线连接控制装置”项目历时多年，在进行了大量的市场调查、分析和技术研究后设计而成。其投资小，技术含量高，市场前景广阔，适用于冶金、电力、交通、石化、煤炭、能源、化工、军工及海洋船泊等行业。可以大大简化电气控制系统的复杂性，同时又可以节约大量的有色金属，还可以形成全新的无线连接全集成自动化控制系统技术的革命。

该装置无论是在设计电气自动化控制系统过程中，还是正在生产运行过程中的电气自动化控制系统，都能配套使用，填补了国内外无源接点的有线连接复杂控制的空白，为全集成自动化控制系统的革新找到了一个行之有效的创新性的节能降耗方法，为科学发展开拓出了一个新途径。

合作方式：技术转让；合作研发

一种挂壁可翻式助力凳；一种安全型便秘助释装置；一种向上翻转式扶撑支架

专利号：ZL201420017878.1；

ZL200810042070.8；

ZL 201220330337.5

类型：实用新型；发明；实用新型

专利权人：姚水福

项目简介

该系列产品可以广泛应用在家庭卫生间的坐便器、洗脸盆、浴缸、淋浴池、病人的床头吊手，当作休息凳用于无电梯的老房楼梯间、门口的换鞋凳。其主要采用铝合金压铸成型，部分零部件是工程塑料，表面均采用仿桃木处理，十分美观，形成了无障碍设施和家庭卫浴装潢新结合的理念，打破了原有的管状类产品感觉是公共厕所或者医院的概念，给居住在无电梯的高楼老年人带来了方便，且可以锁定墙面，占用空间少。

合作方式：技术转让

可松紧拉链锁头

专利号：ZL201320229082.8

类型：实用新型

专利权人：李兵

项目简介

该专利属于闭合扣锁装置，包括：上盖、下盖、拉把、螺柱、锁定块、拨片。下盖上表面设有柱台且柱台位于下盖唇部处中间位置，在上盖设有一螺纹孔垂直贯穿上盖、柱台，螺柱旋入该螺纹孔以连接上盖和下盖。通过在下盖上设计阶梯柱台，在上盖开有通孔并设有锁定块，使得拉锁头的上、下盖不但可以相对地上下分开，而且在正常使用时结合牢固，不会影响拉动；锁定块的设计使得螺柱一旦固定好后就无需再旋动，在松、紧上下盖时，只需手动转动锁定块，不用借助任何工具；不需旋动螺柱，使用寿命更长。

合作方式：技术转让

砂石料自动装车台

申请号： 200520069749.8

类型：实用新型

申请人：李少平

项目简介

该砂石料自动装车台，主要包括台板、闸门和两个侧板。当车辆开到台板出料口下方时，可通过电路控制自动打开闸门，砂石料即可连续自动装入车箱，装满后，再自动关闭闸门，装载效率可比铲斗式装载机提高十几倍。具有结构简单实用和装料速度快、效率高而降低成本等优点。主要用于筑路工程装载砂石料，也适合矿区等料场使用。若与地磅秤等计量设备配合，便可用于煤场售煤，如地面设有铁轨，还可用于为火车装煤等物料。endprint

合作方式：技术转让

牧草悬集机

申请号：201310218733.8

类型：发明

申请人：赵景玉

项目简介

该牧草悬集机的优点：可将牧草悬集机直接连接在割草机上，使割草机割下的牧草一次成形，无需再重复搂一遍。机械操纵悬齿架及悬齿的升起和回落，不受重量限制，可把悬齿做长做粗些，适合收获生长状态不同的牧草，悬浮器及悬齿配合合理，其漏草率仅3%以下。在运用牧草悬集机时，不需要将以前的割草机全部淘汰或取缔，只需将机架作适当的调整将该专利产品的核心技术合理运用即可。作业时无需专人操作，可同时操作拖拉机、割草机和该牧草悬集机，比现有脚踏机省力方便。

合作方式：技术转让

沙漠地区建设地下水库

申请人：哈秋舲

项目简介

该地下水库充分利用了水资源。主要工程是水泥浆定向喷射防渗技术与水泥浆旋喷防渗技术，工程深度很浅，技术难度不大，工程风险很小，可有效地土保持水土、绿化沙漠，使沙漠土壤可以得到长远的、逐步的、有效的治理。采用机械施工，工作效率高，工程量小，可以大规模作业，工程质量高，工程造价低，工程可行性条件好，综合效益高。

该地下水库集水技术有良好的综合效益，且符合 “节约资源，保护环境，可持续发展”的自然发展规律，是治理沙漠，改善生态环境的重大技术。

合作方式：合作开发

海水养殖用围网

申请号：201310219103.2

类型：发明

申请人：陈炳

项目简介

该海水养殖用围网，使用网衣，网衣有上纲、下纲和网片，上纲连接有浮体，下纲连接有沉子使网衣下沿沉入海底；浮体上安装有竖立的杆子，竖立的杆子部分露出海平面，浮体和杆子构成浮桩；浮桩系有至少两道对称分布的缆绳，每道缆绳的另一端与海底固定桩连接，浮桩沿着需要布设围网的路线设置有多个，沿线各浮桩之间逐个用连接缆索连接；上纲逐个系挂在浮桩超过海平面的位置上。

该海水养殖用围网在布设围网的路线上设置了一连串的浮桩，浮桩用系在桩上的缆绳锚泊，用连接缆索将各浮桩连接成“浮桥”而围网上纲系挂在连接缆索上。该围渔海域仅取决于围网布设时海底固定桩的构建难度，从理论上讲可以无限大。另外浮桥结构稳定性强，围网网衣随洋流漂移小，能抗大风浪，急潮流，且适合深海水域采用。

合作方式：技术转让

防倒味水封排水装置

专利号：ZL201320552277.6

类型：实用新型

申请人：尹庆华

项目简介

该防倒味水封排水装置，包括进水管、排水管和构成两水管交接空间的盒体。进水管由上通入盒体，排水管由下通入盒体，且盒体的进水管下端管口与排水管交错，且进水管下端管口低于排水管上端管口。该装置特别适合安装在公共场所的卫生间男用小便池与地下水管道连接，防倒味效果优异，又可防止蚊虫从地下水管道中爬出来，而且还可以随时打开清理旋盖，清理堵塞物，以保证下水通畅，保证室内空气清新，卫生干净整洁，保护身体健康，是家庭理想产品。

该装置可选择生产塑料材质，生产各种不同规格的产品，且成本低，便于安装，可用于新老住宅防倒味改造处理和公共场所的卫生间及家庭厨房水池、家庭卫生洗面池等，防倒味效果优异，有利于保持室内空气清新的健康产品，具有很高的实用价值，能够得到广大用户的认可，可大批量生产，一旦深入推广将带来良好的经济和社会效益。

合作方式：技术转让

一种具有光亮层的水泥泡沫隔热板及其加工方法

申请号：201210333420.2

类型：发明

申请人：包孝耀

项目简介

该水泥泡沫隔热板的加工步骤：1、将彩砖光亮剂、钛白粉、白水泥、水泥、细沙和水充分搅匀成浆糊状的浆料，再将浆料放进模具中振动，并填实模具形成光亮层Ⅰ的湿胚，然后静置干燥。2、将碎石、水泥和水充分搅匀成水泥混凝土，将水泥混凝土放进模具中振动，使之形成混凝土层Ⅱ湿胚。3、将泡沫塑料层Ⅲ压进混凝土层Ⅱ湿胚的一面，再将步骤1制成的光亮层Ⅰ干燥后的湿胚，压进混凝土层Ⅱ湿胚的另一面，干燥后脱模。采取以上措施的该发明，隔热效果好，光亮美观，加工工艺流程简单。

合作方式：技术转让

编后语：

为进一步深入贯彻落实《国务院关于加快培育和发展战略性新兴产业的决定》，加大对战略性新兴产业领域（如：“电子信息、生物医药、新能源、节能环保、高端装备制造、新材料”等）优秀技术的宣传推广力度，中国经贸导刊杂志社决定筛选部分优秀技术在中国经贸导刊“技术转移”专栏上进行推介宣传，以加速科技成果的推广转化及产业化进程。如有对以上技术成果感兴趣的，请拨打联系电话：010—85119061。

高新技术成果展示暨交易大厅简介 篇4

马鞍山市高新技术成果（专利技术及产品）

展示暨交易大厅简介

马鞍山高新技术成果（专利技术及产品）展示暨交易大厅是由我市国家级示范生产力促进中心牵头建设的、集科技成果展示交易和转化服务等功能于一体的综合性平台，总面积约2200平方米，于2012年6月正式建成。大厅通过广泛征集全市优秀高新技术成果（专利技术及产品）、自主创新项目以及市内外高校科研院所优秀科技成果等，以产品实物、模型、文字资料、图片、宣传片等形式进行展示，并与市生产力促进中心“一站式科技服务平台”有机融合，为企业与高校、企业与企业之间合作洽谈、成果交易提供专业化、社会化服务，促进科技成果在我市的转移转化。首届展示共遴选了我市科技型企业的283项 高新技术成果（专利技术及产品）、国内知名高校的40余项科技成果以及我市24位科技创新创业领军人物和10余条科技政策进行展示。其中，自主创新项目（成果）211项，产品100余件，专利80余项。近日，该平台被省知识产权局认定为安徽省专利技术（马鞍山）展示交易中心。

细菌展示技术 篇5

2009年秭归县中稻病虫灾害和防治技术展示区试验

为全面了解植保工作在防灾减灾工作中发挥的重要作用,为准确计算每年经过防治病虫害挽回的损失量提供依据,继2008年中稻病虫灾害防治技术展示区试验后,2009年再次进行了中稻病虫害防治技术展示区试验,现将试验结果报告如下: 1 试验基本情况

作 者：聂家云 胡艾 黎国青 郑军 向小波 作者单位：湖北省秭归县植保植检站,秭归,443600刊 名：湖北植保英文刊名：HUBEI PLANT PROTECTION年，卷(期)：2010“”(2)分类号：S481+9关键词：

细菌展示技术 篇6

【发布日期】2006-02-05 【生效日期】2006-02-05 【失效日期】 【所属类别】政策参考 【文件来源】国家知识产权局

国家知识产权局关于实施全国专利技术展示交易平台计划的通知

各省、自治区、直辖市知识产权局，新疆生产建设兵团知识产权局，计划单列市、副省级城市知识产权局，国家专利产业化试点基地，知识产权试点示范园区：

为贯彻党的十六大和十六届五中全会关于知识产权工作的精神，适应新的形势，配合国家知识产权战略的制定实施，推动全国专利技术市场的健康快速有序发展，我局决定实施全国专利技术展示交易平台计划，以有效服务于我国专利技术转移、转化与实施，加速我国专利技术的商品化和产业化，促进我国自主知识产权产品、产业和企业的形成与发展。

现将全国专利技术展示交易平台计划印发，请遵照执行。

特此通知。

二○○六年二月五日

全国专利技术展示交易平台计划

一、计划背景

专利法实施20年来，伴随我国改革开放和市场经济的发展，全国专利事业快速发展。但是，专利实施与产业化的情况已愈来愈不适应形势发展需要。一个重要原因是我国专利技术市场发展滞后，缺乏诚信、低成本的常设专利技术转移、交易、实施转化的市场服务体系。尤其对于非职务发明人和中小企业来说，一方面专利技术找不到合适的产业化投资人，另一方面投资人找不到合适的专利技术。现有的大型科技展会门槛太高，中小企业和个人很难进入。社会上一些不法分子趁机打着中介服务的旗号欺骗坑害专利权人和投资人，严重挫伤了广大发明人发明创造和专利转化的积极性。

按照党的十六大、十六届五中全会和全国科技大会精神，我国要建设创新型国家，要积极发展具有自主知识产权的核心技术和关键技术，要形成一批拥有自主知识产权和知名品牌、国际竞争力较强的优势企业。大力发展我国自主知识产权产品、产业和企业是我们今后的一项重要战略任务。这一战略任务对于我国知识产权的创造、管理、实施和保护等各个方面提出了更高的要求。专利技术交易、实施与产业化直接关系到我国自主知识产权产品、产业、企业能否快速发展。因此，应当大力推进我国专利技术交易、实施和产业化。

目前，需要着力加快培育和发展完善我国专利技术市场，加快培育和发展专利技术转移、交易、实施转化的市场服务体系建设。为使专利技术供需各方，尤其是非职务发明人和中小企业及中小投资人能够有一个诚信、低成本的常设展示交易场所，国家知识产权局决定实施全国专利技术展示交易平台计划。

二、指导思想和总体目标

实施全国专利技术展示交易平台计划的指导思想是：以党的十六大、十六届五中全会和全国科技大会关于知识产权工作的精神为指导，适应我国发展有自主知识产权产品、产业的迫切需要，配合国家知识产权战略的制定实施，通过管理创新、制度创新和机制创新，建立全国专利转化实施的常设展示交易平台，推动专利技术市场的健康快速有序发展，有效服务于我国专利技术的转化实施，加速我国专利技术的商品化与产业化，促进我国自主知识产权产品、产业的发展。

实施全国专利技术展示交易平台计划的总体目标是：按照国家专利产业化工程的总体部署，在“十一五”期间或更长的时间内，在全国部分具备条件的城市选点和支持发展若干个区域性专利技术展示交易中心，建设和发展形成一个诚信和低成本的全国专利技术展示交易服务体系，进而形成一个具有较高知名度和公信力的全国专利技术展示交易网络平台。

三、平台任务与功能

专利技术展示交易平台是指为专利技术供需各方特别是非职务发明人和中小企业等提供专利技术及产品展示、交易及其他相应的一系列相关服务的服务系统，包括专利展示交易专门场所、专业咨询服务人员、专利信息资源、其他软硬件服务设施等平台要素。专利技术展示交易平台的具体形式包括有形的展示交易市场和网上市场。

专利技术展示交易平台的主要任务与功能包括：

（一）组织专利技术及产品现场或网上展示、交易、推介活动，举办专利或知识产权咨询、研讨活动；

（二）开展日常专利经纪活动，促进专利技术与资本对接；提供专利信息服务；提供相关专利咨询，帮助企事业单位、专利发明人选择正确的发明创造方向和路径，促进发明创造活动与市场衔接；

（三）宣传普及知识产权方面的法律、法规和有关知识；举办专利经纪、专利市场管理及知识产权知识培训，开展专利经纪工程师、专利发明人等培训交流活动；

（四）围绕专利技术交易开展相关的知识产权投融资、评估、评价、咨询等服务；根据有关规定和要求，提供专利实施合同备案、专利广告出证等服务；

（五）开展专利技术市场的统计和相关研究、咨询工作；

（六）接受政府知识产权部门或其他相关部门的委托，开展其它专利或知识产权相关活动。

（七）系统内的协作交流。

专利技术展示交易平台由纳入本计划的各专利技术展示交易中心组成。各展示交易中心独立运作，在业务上互相配合，互相支持。条件成熟时，国家知识产权局将组织指导各中心之间联合建立有效的全国合作机制，促进互动，开展全国各中心联合活动，构建全国统一的专利技术展示交易中心网络，形成具有公信力的服务于全国的专利技术展示交易大平台。适当时，由国家知识产权局统一组织各中心举办共性活动，如全国性专利展会、宣传培训等；或委托某一中心临时性担当活动牵头承办单位，负责组织、协调各中心共同举办活动。

全国专利技术展示交易中心使用国家知识产权局统一标识，通过媒体广为宣传，提高知名度，树立统一的社会公益服务形象。

四、认定条件

（一）中心申报单位是独立的法人，资金、设施等投入在50万元以上，按照企业运作方式进行管理，允许和鼓励民间资本参与；

（二）具有符合开展专利技术展示交易要求的场地、设施等硬件条件，其中室内场地面积在400平米以上；

（三）具有6人以上较高素质的管理人员和业务人员，运营体制、内部机构设置及管理方式合理，提倡社会知识产权中介服务机构、技术转移机构、相关专业人士和专利发明人等参与；

（四）有明确的发展目标，并拟定近期及5年发展规划，规划应系统、详实和具有可操作性，应当是在组织相关方面和专家经过充分调研论证的基础上制定的；

（五）具有符合建设和发展专利技术展示交易平台客观要求的规章制度和配套措施；

（六）中心申报单位所在地具有良好的专利转移、专利孵化创业、专利实施与产业化环境；

（七）中心建成以后，通过发展，能够发挥带动和辐射城市周边区域乃至全国的作用；

（八）国家知识产权局认为必需的其他条件。

五、申报、认定和管理

（一）申报

1．中心申报单位首先要根据本计划精神和具体要求，就中心所从事的平台建设进行全面深入调研、论证，提出论证报告。在论证报告的基础上制定建设规划方案。建设规划方案应详实，具有可操作性。

建设规划方案主要内容应包括：

（1）背景、必要性和意义；

（2）可行性分析（包括当地特色与优势）；

（3）建设主体；

（4）总体目标与阶段目标；

（5）主要功能与作用、具体业务内容；

（6）管理机制、运作模式与组织架构；

（7）支持和保障条件；

（8）近期工作计划和长期规划；

（9）其它相关内容。

2．中心申报单位所在地知识产权局对申报单位的申报工作给予指导和帮助，必要时可共同向国家知识产权局进行申报。

3．向国家知识产权局正式递交申报方案时，应同时附建设论证报告和所在地省级知识产权局出具的推荐函。

4．申报材料以正式纸件文本和电子文本形式报国家知识产权局协调管理司。

（二）认定

1．国家知识产权局将按照标准和要求进行考查，择优认定。

2．优先考虑条件优越并具有很高积极性的中心申报单位。

3．优先考虑已初步发展、已形成一定基础并有较好发展前景的专门的专利技术展示交易机构或企业。

4．国家知识产权局依照内部管理程序对申报单位进行审查认定。予以认定的，行文批复，纳入平台建设计划。

（三）管理

1．国家知识产权局对纳入计划的申报单位授予“全国专利技术××展示交易中心”牌匾。

2．国家知识产权局职能部门对中心工作进行指导和监管。中心所在地知识产权局按照国家知识产权局职能部门的要求对中心业务给予相应的支持、指导和帮助。国家知识产权局在必要时制定指导全国各中心工作的规范性、指导性文件，加强对全国各中心工作的规范和指导。

3．中心按照国家知识产权局批准的建设规划方案进行平台建设，开展业务。中心在实施平台建设规划方案过程中，需要调整方案的，应报国家知识产权局备案。

4．中心以全国专利技术××展示交易中心的名义开展业务，并使用国家知识产权局的统一标识。

5．中心应遵守国家法律、法规和政策，维护国家知识产权局的良好社会形象，维护全国知识产权系统的良好社会形象，树立和维护全国专利技术展示交易平台的品牌形象。

6．中心开展业务工作遵循现代中介机构运作规律和市场运行规律，采取非营利性公益机构模式，按企业化方式进行管理。

7．中心要积极配合国家知识产权局的工作开展活动，承担国家知识产权局委托的工作。

8．中心要制定文明服务规程，工作人员要着装整齐，用语规范，文明服务，树立良好的服务意识和服务形象。

9．中心应向国家知识产权局职能部门及时汇报工作情况，按要求提交阶段或工作总结。出现问题时应及时向所在地知识产权局、国家知识产权局汇报。

10．国家知识产权局制定平台工作评价指标，对各中心开展定期考评工作，以年为周期，组织年检。考评结果作为今后平台计划工作进行奖优汰劣的重要依据。

对优秀的予以表彰，对不合格的要求其整改，情况严重不符合要求的撤消其资格；对连续两年整改不合格的中心，撤消其资格；对撤消资格的中心，收回国家知识产权局授予的牌匾，并收回使用统一标识的授权。

11．未被国家知识产权局授权或授权后被撤销授权的任何机构不得使用“全国专利技术××展示交易中心”称谓和国家知识产权局的统一标识。

六、扶持措施

（一）国家知识产权局对认定纳入平台计划的中心，根据情况，从专利信息、政策、全国平台品牌建设等方面，给予一定扶持。

（二）中心所在地政府和知识产权局、相关部门给予相应的政策、资金、场地、设施等扶持或配套支持。

（三）鼓励和支持社会相关各界、公众、专利发明人等给予各种形式的赞助和支持。

细菌展示技术 篇7

关键词：辣椒细菌性疮痂病,绿色防控,关键技术

辣椒细菌性疮痂病又称细菌性斑点病, 经常在辣椒上发生。近年来, 随着辣椒新品种的引进与栽培面积的不断扩大, 病害发生日趋严重[1]。特别是在温室栽培条件下, 如果环境调控不及时, 更易引起病害发生, 严重影响辣椒的品质及产量。为了使辣椒的产量不受影响, 又保证其食用安全性, 根据病害发生动态和危害程度, 及时有效地开展绿色防控显得尤为重要。

1 症状

此病除主要为害辣椒叶片外, 还可为害茎蔓、果实。其典型症状是发病部位隆起疮痂状的小黑点而引起落叶。幼苗期感病后, 最先会在子叶上出现银白色的小斑点, 后逐渐发展成水渍状, 最终呈暗色凹陷的病斑, 造成叶片脱落, 发病严重的可导致植株死亡。成株期开始发病的时期为开花盛期, 发病时叶片最初会出现水渍状的小斑点, 呈黄绿色, 然后逐渐扩大成近圆形或不规则形状的暗褐色病斑, 中间凹陷, 边缘稍稍隆起, 表面粗糙, 呈疮痂状。当小病斑达到一定数量后, 就会相互连接在一起形成大的病斑。发病严重的叶片会干枯脱落。辣椒的茎、叶柄及果梗初期受害症状与叶片类似, 均形成疮痂状隆起。其果实受害后最初为水渍状边缘的疱疹或暗褐色隆起的小点, 而后逐渐扩大, 最终形成圆形或长圆形的黑色疮痂斑, 若遇潮湿的环境, 就会有菌脓从病部溢出。

2 病原

辣椒细菌性疮痂病只侵染辣椒和番茄, 病原为野油菜黄单胞菌疮痂致病变种[Xanthomonas campestris pv.vesicatoria (Doidge) Dowson], 属薄壁菌门黄单胞菌属细菌, 菌体杆状, 两端钝圆, 单极生鞭毛, 能游动, 菌体排列成链状, 有荚膜, 无芽孢。革兰氏染色为阴性, 好气性。培养基上菌落浅黄色, 半透明, 圆形。细菌发育适温27~30℃, 最低温度5℃, 最高温度40℃[2,3], 致死温度59℃10 min。

3 发病规律

3.1 发病条件

高温持续时间长, 叶面结露对该病的发生和流行至关重要[4]。露地栽培多发生在7—8月高温、多雨季节, 特别是在暴雨过后, 伤口增加, 容易形成发病高峰。感病品种的种植、氮肥过量, 磷钾不足、连作都会加重发病。同时陈海平等[5]研究结果表明, 若种植密度过大至40 cm×50 cm, 且未及时整枝, 会增加叶片之间摩擦的机会, 导致病害侵染的几率增加, 使得后期病害发展加重。

3.2 病菌传播

该病病原菌主要在种子表面或随病残体在土壤中越冬, 为翌年病害的初次侵染源。也可以随带病种子作远距离传播到无病地区。当条件适宜时靠雨水、灌溉水、风、昆虫及农事操作等传播, 并引起多次再侵染。病菌从气孔、伤口侵入, 经3~6 d潜育后在细胞间大量繁殖, 致使表皮组织增厚呈疮痂状。

4 防治措施

辣椒细菌性疮痂病的防治应采用加强栽培管理和药剂防治结合的绿色防控措施。

4.1 农业防治

一是选用抗病品种。不同品种对该病害抵抗力有很大差异, 一般辣椒较甜椒抗病。可选用茄门、22号尖椒、保加利亚尖椒、辽椒二号等抗病优种。可根据当地气候条件、品种特性、育苗条件、苗龄等, 选择适宜的播种期[6]。二是加强田间管理。栽培时宜采用垄作稀植, 浇水时可采用膜下滴灌、渗灌等技术。基肥增施磷、钾肥, 多施有机肥, 追肥注意控制氮肥用量, 及时整枝防止植株生长过度, 保持植株通风透光性。温室栽培时遇高温天气棚内要及时通风、降湿, 防止温湿度过高。收获后及时清除病残体或者及时深翻30 cm以上, 以促使病残体分解和病菌死亡。三是实行轮作。发病的地块要避免连茬, 最好应与非茄科作物轮作2~3年或以上。

4.2 化学防治

一是种子消毒。自繁种子应从无病田或无病株上选留, 外来品种在播种前必须先进行种子的消毒处理。主要有以下几种方法: (1) 温汤浸种。先将种子放入清水中浸泡6~10 h, 滤干后放入55℃温水中处理10 min, 再用冷水冷却。 (2) 药液浸种。种子洗净后, 稍晾干, 或用1∶10的农用链霉素浸种30 min, 或用1%硫酸铜溶液浸种5 min。取出后用水洗净再催芽播种。二是及时喷药。该病施药预防效果不佳, 应加强监测, 在发病初期及时喷药防治, 可用喷新植霉素4 000~5 000倍液、77%可杀得可湿性粉剂500倍液、72%农用硫酸链霉素可溶性粉剂3 000~4 000倍液、20%噻唑锌悬浮剂300~500倍液、20%噻菌铜悬浮剂1 000~1 500倍液、50%氯溴异氰尿酸可溶性粉剂1 500~2 000倍液均匀喷雾, 视病情隔5~10 d喷1次, 一般连喷2次, 基本能控制病害流行。注意不能长时间使用单一的药剂进行防治, 应各类药剂交替使用, 以提高防治效果。

参考文献

[1]董金皋.农业植物病理学 (北方本) [M].2版.北京:中国农业出版社, 2007:411.

[2]赵国栋.辣椒疮痂病的发生与防治[J].现代农村科技, 2009 (8) :24-25.

[3]哀彩尧.辣椒疮痴病的发生与防治[J].江苏农业科学, 1987 (4) :30.

[4]张玉聚, 李洪连, 张振臣, 等.中国蔬菜病虫害原色图解[M].1版.北京:中国农业科学技术出版社, 2010:456.

[5]陈海平, 莫云彬, 董国堃.大棚辣椒细菌性斑点病发原因分析及防治对策[J].辣椒杂志, 2004 (1) :27-28.

细菌展示技术 篇8

1. 材料的制备选取具典型病症的病鱼，用已灭菌的解剖刀等采集病鱼的血液、肝脏、肾脏、病灶组织和脾脏等，称重后放入已消毒的研钵或电动打浆机中打成浆糊状（打得越细越好），接着按1∶（7～10）的比例加入0.7%生理盐水，用打浆机等匀浆后用2～3层纱布过滤，除去残渣（残渣用生石灰无害化处理），即制成原毒疫苗。

2.原毒疫苗的灭活把装有原毒疫苗的三角烧瓶放在水浴锅内，进行隔水加热，使瓶内外温度为60～65℃，保持2小时，即可灭活去毒。为掌握好温度的变化，三角烧瓶和水浴锅内要各放1支温度计，随时观察温度变化。原毒疫苗灭活后，待凉即可按需要分装于小瓶中，每100毫升疫苗再加入10%福尔马林1毫升，使用前用等量蒸馏水稀释。

3. 灭活疫苗的使用①注射法。注射疫苗前，先用0.2%～0.25%敌百虫溶液浸浴鱼4～5分钟（有麻醉和驱杀寄生虫的作用），以利于注射操作。将已稀释的疫苗用注射器从鱼胸鳍基部或背部注入，注射深度为0.3～0.5厘米（以不伤及鱼的内脏为准），体重250克的鱼注射0.1毫升，体重500克的鱼注射0.2～0.3毫升，体重750克以上的鱼注射0.5毫升。②浸浴法。选取无伤、无病、大小整齐、体健、鳞片完整、体长16～20厘米的鱼，于浸浴免疫前拉网锻炼2～3次。将疫苗倒入木桶或塑料桶内，每50克疫苗加入塘水40～50千克，再加入食盐，使其浓度为1.5%～2%，接着将鱼苗放入桶中浸泡25～30分种即可。每50克灭活疫苗可浸泡鱼苗70～100千克，可分两批进行。用后的疫苗液不可随意倒弃，应加入3%～4%漂白粉溶液，静放4～5小时后再倒入粪池等处。

4.灭活疫苗的保存制备好的疫苗宜尽快使用，暂时不用时要用石蜡封好，放入1～4℃冷库或冰箱内避光保存，有效期为2～3个月。速冻条件下，疫苗可保存1.5年以上。灭活疫苗也可放在地窖、山洞等阴凉无光处保存，有效期为30～40天。

5.注意事项①灭活疫苗使用前应先进行安全性试验，对体长15～20厘米的健康鱼每尾注射0.3～0.5毫升，放在25～28℃的水槽或大玻璃缸内观察12～15天，确定安全后再全面使用。②灭活疫苗防治假单胞菌、气单胞菌和屈挠杆菌病效果最好，其他细菌病次之。③免疫注射应在鱼未发病时进行，发病后免疫效果将大减或几乎无效。④免疫前后的一段时间内不要使用抗生素。