香蕉基因工程研究进展（精选10篇）
香蕉是世界上一种重要的作物.基因工程技术的发展为培育具有优良性状的香蕉品种提供了有效的手段.本文综述了近年来香蕉基因工程研究的最新进展,包括香蕉遗传转化受体系统的建立,香蕉作物中一些有益功能基因的.克隆以及香蕉遗传转化的最新科研成果.并对各种香蕉遗传转化受体系统和目前主要的香蕉遗传转化进行了客观评价,提出了香蕉遗传转化研究中存在的问题,最后对通过基因工程手段改良香蕉品种进行了展望.
作 者：黄永红 易干军 周碧容 曾继吾 吴元立 HUANG Yong-hong YI Gan-jun ZHOU Bi-rong ZENG Ji-wu WU Yuan-li 作者单位：广东省农业科学院果树研究所,广州,510640 刊 名：西北植物学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA 年，卷(期)：2006 26(10) 分类号：Q789 Q949.71+8.22 关键词：香蕉 植株再生 基因克隆 遗传转化
PRRSV近年严重感染猪群, 在世界各地造成严重经济损失, 目前仍无有效疫苗能控制猪感染蓝耳病。台湾大学黄鹏林与郑谦仁的研发团队把蓝耳病毒基因植入香蕉细胞, 再筛选出可以表达蓝耳病毒基因的幼苗, 培育出可诱发免疫功能的基改香蕉口服疫苗。基改香蕉树的香蕉可以诱发猪只免疫反应, 树茎和香蕉叶也具有相同功效。黄鹏林透露, 目前已取得两岸及美国专利, 未来将可广泛应用于解决其它如牛、羊等动物性病毒性疾病。他预估, 不出10年就可应用在人类疾病预防治疗, 例如肝炎、流感及禽流感等流行性疾病, 改写医疗历史。
这项研究成果论文已经发表在国际知名期刊《植物生物技术杂志》, 引起国际瞩目, 向台湾研究团队探询利用这项研究成果研发人类疾病植物性口服疫苗的可能性。
关键词 香蕉 ；MaNPR1E ；基因克隆 ；表达分析
分类号 S668.1
Molecular Cloning and Expression of MaNPR1E Gene from Banana
（Musa acuminata L. AAA group， cv. Cavendish）
WANG Zhuo1） XU Biyu1） JIA Caihong1） LI Jianping1）
LIU Juhua1） ZHANG Jianbin1） MIAO Hongxia1） JIN Zhiqiang1，2）
（1 Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology， CATAS， Haikou， Hainan 571101；
2 Haikou Experimental Station， CATAS， Haikou， Hainan 570102）
Abstract NPR1（nonexpressor of PR gene 1），involved in regulating plant broad-spectrum resistance，plays important roles in plant system resistance. In this study， we report the molecular characteristics of NPR1E gene cloned from banana（Musa acuminate L. AAA group， cv. Cavendish）using a RACE-PCR-based strategy. MaNPR1E（accession number：KF582550） contained an open reading frame of 1 755 bp which encoded a polypeptide of 584 amino acids. Protein alignment showed that they contain the complete typical conserved BTB/POZ （BR-C， ttk and bab/Pox virus and Zinc finger）domain， ankyrin repeats and NPR1/NIM1 like defence protein C terminal，which belongs to a typical NPR1 protein. Phylogenetic analysis showed that the deduced amino acid sequences of MaNPR1E also have high similarity to PdNPR3（XP_008808341.1） and EgNPR3（XP_010914123.1） from Phoenix dactylifera and Elaeis guineensis，respectively. Tissue-specific studies showed that the expression of MaNPR1E was constitutive expressed in various tissues of banana seedling. In resistant and susceptible varieties of banana after inoculation Foc TR4， the expression of MaNPR1E was decreased. While in resistant varieties the time point of MaNPR1E， compared to control， increased higher than that in susceptible varieties at time points， also the expression of MaNPR1E was induced by Ethephon and salicylic acid. These results suggest that MaNPR1E may play an important role in the regulation of Banana resistance to the infection of Foc TR4.
Keywords banana ； MaNPR1E ； gene clone ； expression analysis
活动目标：
1.通过游戏形式引导幼儿(幼儿食品)发挥想象，并用语言、动作表达想象结果。
2.发展幼儿的想象力和表达能力。
3.大胆地参与讨论，清楚地表达自己的观点与想法，发展求异思维。
4.通过观察图片，引导幼儿讲述图片内容。
重点和难点：
1.引导幼儿能发挥想象。
2.将想象结果用语言和动作表现出来。
活动准备：
1.香蕉若干。
2.方纸盒一只，湿毛巾若干。
活动过程：
一、产生兴趣师(出示方纸盒作神秘状)：这里面有一样好吃的东西，样子长长的，皮黄黄的，剥皮后才能吃，你们猜猜是什么?
二、想象活动
1.这香蕉会变戏法，你们信不信?
2.(轻轻地把香蕉摆放成状)：香蕉开始变戏法了，你们看它像什么?
像小桥、像月亮、像彩虹、像小床、像小船、像大刀、像电话师：请你们和老师一起打电话吧（幼儿模拟打电话状，与教师做简短的对话。)师：香蕉除了当作电话外，还可以当作什么?请你们每人拿一只香蕉，想一想，做一做动作，好吗?
三、分享
1.师：让我们剥开香蕉，看看剥开后的香蕉像什么?
(幼儿尝试剥开香蕉皮，对不会剥的幼儿，教师适当给予帮助。)
2.师：下面你们一边吃一边看看有什么变化?
(引导幼儿在吃的过程中感知、交流香蕉从“整体部分 没有”的渐变过程，教育幼儿把果皮放入指定的地方。
3.让我们剥开香蕉，看看剥开后的香蕉像什么?
(幼儿尝试剥开香蕉皮，对不会剥的幼儿，教师适当给予帮助。)
师：下面你们一边吃一边看看有什么变化?
(引导幼儿在吃的过程中感知、交流香蕉从“整体、部分、没有”的渐变过程。)
教学反思
此次活动内容体现了直接兴趣性，根基性，活动性、整体性和发展性。活动组织遵循了相互作用（师生互动、生生互动、个体与集体互动、幼儿与环境互动）的原理，始终以动静结合融入的形式展开，符合幼儿身心发育特点，易于幼儿在轻松、愉快的气氛和实践中接受。
范清水 2015.11 本节课是在学生学习了“分桃子”“分苹果”“分糖果”的基础上进行教学的。学生对大量物体的等分已经有了一定的经验，从学生对“分香蕉”的具体情境，抽象出除法算式，掌握除法算式的读法、写法，并认识除法算式的各部分名称。会用除法算式表示并解释平均分的具体过程。在学生还不知道除法的情况下，从已有的生活经验出发，在操作水平上解决除法问题的过程。学生从中积累了一些平均分的经验，开始认识除法。
本节课我联系学生的生活实际，创设问题情境，激发学生学习数学的积极性。利用孩子喜欢的故事引入新课，不仅能激发孩子的学习兴趣，而且还能让孩子们很好地展示自己的智慧。我现在采取的是接受学习和探究学习相结合。引入新课时，让孩子进一步加深理解把一个物体平均分的意义，让孩子直接说出除法算式。在此基础上，让孩子动手操作探究除法算式各部分表示的意义！让孩子在实践中，体验总数的不同分法：如：把12根小棒平均分成2份、3份、4份、6份、12 份时，每份得到的是不同的个数。同时，让孩子学会用小棒练习它们的分法。在教学中我大胆放手让孩子展开对新内容的学习，分一分、摆一摆、说一说、写一写，我只适当地指导和点拨，我相信孩子，给他们充足的时间和思考的空间，自主探索、合作交流。让学生的潜能得到一定的开发。
当然这节课上完后总体的感觉不是很好，上完课我就及时对这节课做了反思，不足的地方还很多：
1、在备这节课时的思路还是比较清晰的，但是对要以学生的角度去思考，去设问题考虑的不是很全面，在提出问题时语言有几处不到位，比如：从“分一分”“摆一摆”中引出除法，当时设想的是“同学们的分法都很好，那你们知道把一些东西平均分成几份，求每份是多少，可以怎样来计算？”而在上课时说成了“用小棒分是不是很麻烦，那你们谁能用一种简单的方法计算”这个问题说的很没有水平，说明我对教材的挖掘还是不够。
2、这节课是要在具体的情境中理解除法的意义，从平均分来引出除法，在我提出两只小猴子争吵怎么分时，学生回答平均分，紧接着我有提问“那谁知道什么是平均分？”有一学生这样回答“平均分就是每份分的一样多”，学生这个问题回答的很不错可是我没有抓住，应该抓住这个问题来再次强调分均分的含义，让孩子更具体理解平均分，为下面的环节打好基础。
3、建立平均分的意义也是很重要的，要让孩子在具体的情境中知道在这个除法算式中每个数代表的意义，此处考虑的不是很到位，在本节课中还有一个重点就是包含分，可是我对这个重点没有抓住，以至于学生对此处的概念比较模糊，在遇到问题是不知道怎样去选除数，总是把除数和商搞混。
4、这节课是用“分一分”来引出除法的，所以在学生用小棒分完之后应强调分的结果，平均分重点是在结果，而在此处我没有重视，以至于在学生分的时候就不知道怎么去分，例如：用 12跟小棒代替香蕉来分给两只猴子，有一位孩子是这样分的，先给同桌4 根，再给自己4根，可是剩下4根不够分了。
5、数学要让学生学会思考，提出问题，发现问题很重要，可以让学生自己去从主题图中去思考！
这些都是有待在以后的教学中，不断总结经验，不断提高教育教学水平。
《分香蕉》教学反思
香蕉茎叶含有多种维生素和较高的可溶性碳水化合物,尤其是香蕉叶富含粗蛋白,香蕉茎杆、叶梢中有良好性能的纤维,可作为造纸、粗纤维加工的原料[2]。这些副产物广泛应用于多个生产领域,如开发新型饲料、生产有机肥、栽培食用菌等方面。香蕉茎叶中的有效成分较丰富,可通过对其有效成分的研究而开发生物质能。因此,充分利用香蕉茎叶资源可以避免资源浪费,具有很大的市场价值。
1 香蕉茎叶资源的开发利用现状
1.1 生产有机肥及栽培食用菌
香蕉茎叶残体是优质的有机肥料,可与微生物堆积成有机肥料利用,这也是目前在种植区香蕉茎叶利用最普遍的情况,由此增加香蕉叶绿素的含量,减少灌溉次数及化肥施用量并提高香蕉的产量及品质;同时还能改善土壤的理化性质,增加土壤有机质及N、P、K等元素的含量,促进香蕉生长[5]。在平菇生产中利用发酵的香蕉茎叶残体作基质,产量、质量均明显提升,不仅解决了以前依赖木屑栽培平菇的问题,还实现了资源的二次利用。利用香蕉叶残体代替稻草栽培平菇,成本较低[1,6]。在香蕉园行间栽培食用菌,不仅提供了充足的原材料,还能充分利用空间与土地资源。
1.2 饲料加工
据报道,反刍动物对香蕉叶的消化率为65%,茎的消化率为75%[7]。以香蕉茎为主要原料生产菌体蛋白饲料添加剂,鸡和猪的饲喂试验表明可增强鸡和猪的免疫力,使其提早发育,加速生长[8]。将鲜亮香蕉茎叶切成5~8 cm,加2%玉米粉混合均匀,青贮30 d后开窑,香蕉茎叶呈绿黄色优质料,可作牛的饲料。用青贮香蕉叶代替60%的草饲喂牛,不影响牛的泌乳量和乳中成分,还能提高牲畜的适口性和消化率[9]。一般新鲜香蕉叶要与其他喂料混合青贮或加工后才可作喂料。因为鲜香蕉茎叶中含有大量单宁(鞣酸),会影响适口性,抑制瘤胃微生物酶活性,还会降低蛋白质的消化率[1,2,3]。
1.3 粗纤维加工利用
哥斯达黎加研究者用香蕉茎杆制造出一种生态纸,用于绘图、印刷及制作帘子、灯罩、雕刻、艺术、书刊和书的封面,以及其他艺术和工艺用途[10],可见香蕉叶是造纸和制板的良好原料。由于香蕉叶鞘中含有良好的造纸纤维,其又属于韧皮纤维,化学性质与传统纤维素纤维有许多相似之处,具有抗碱、酚、甲酸、氯仿、丙酮和石油醚的能力,可溶于热浓硫酸中,其抗酸性优于棉纤维,而抗碱性不如棉纤维[11]。但香蕉纤维中又含有一定的蛋白质,因而表现出蛋白质纤维的一些特性。经加工的香蕉茎纤维有强度高、伸长小、质量轻、吸水性好、吸湿放湿快、易降解等优点[2]。香蕉纤维最早用于造纸和包装袋的制作生产,其物理机械性能均能满足纺织加工的要求。目前香蕉纤维可与棉或其他纤维进行混纺,并可加工光泽好、吸水性强的服装[12]。
1.4 医用
香蕉茎叶除含有N、P、K大量元素外,还含有丰富的Fe、Ca等营养成分。Fe元素是合成血红素蛋白质的主要物质;Ca元素有利于维持神经肌肉的兴奋、神经冲动的传导、心脏的正常搏动,可预防高血压和心脏病[1]。因此,香蕉茎叶可作为防治高血压及心血管疾病的一种医用原料[13]。
2 开发生物质能
2.1 香蕉茎、叶中有效成分的研究和应用
香蕉茎叶养分资源丰富,是开发生物质能的优质原材料。李子建[14]利用香蕉茎叶的成分进行活性预试验,筛选出蛋白质、半纤维素、果胶、活性多糖、脂肪、单宁、叶绿素、叶黄酮为有效成分。研究表明:香蕉叶石油醚抽出物的乳化能力最强,其次为叶多糖和叶绿素铜钠盐,可见其除油污能力较强;香蕉叶石油醚抽出物、叶多糖和叶绿素铜钠盐具有良好的起泡性和稳泡性,临界胶束浓度CMC值分别为1.0、1.0、3.0 g/L,相应浓度下的表面张力分别为34.295、42.398、40.123 m N/m,已经接近或超过参照物的表面活性。研究香蕉茎叶有效成分的提取、洗涤活性和抗氧化特性并应用于实际生产,具有较好的生态效益、社会效益、经济效益[4]。
2.2 以香蕉叶为原料制取叶绿素铜钠盐
叶绿素铜钠盐是一种价值很高、出口前景广阔的天然食用色素,叶绿素铜钠盐以固有的鲜亮绿色性,较叶绿素对光、热更稳定,因其特有的杀菌除臭性能而被广泛用于食品、医药卫生和日用化学工业[2,3]。研究表明,在60℃条件下用75%乙醇萃取,用5%Na OH溶液皂化30 min、20%Cu SO4溶液铜化20 min、2%Na OH溶液成盐,可得0.65%~0.70%(以鲜叶计)的叶绿素铜钠,是由竹叶制取叶绿素铜钠所得率的2~47倍,并且生产的香蕉叶叶绿素铜钠产品各项指标均符合《国家食品添加剂标准(GB3262—82)》[15]。
2.3 香蕉叶挥发油的提取
香蕉茎、叶中的碳水化合物含量高,用香蕉叶挥发油提取的化学成分中含有22个化合物,多为烷烃类及其衍生物,占整个香蕉叶的0.2%,烷烃类及其衍生物是有机合成、医药和能源工业的重要原料[16]。由此可见,香蕉茎、叶也是生产生物质能的优质原料。
3 前景展望
关键词：香蕉皮；黄色素；提取工艺；稳定性
中图分类号： TS264.4文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）09-0316-05
香蕉（Musa nanalour）属于芭蕉科（Musace）芭蕉属（Musa），是典型的热带经济作物，也是人们最喜欢的水果之一。通常人们只食用香蕉果肉，占香蕉30%～40%质量的香蕉皮则大多被丢弃，对香蕉皮资源的开发利用还比较少，目前香蕉皮主要用于制备果胶 、多功能膳食纤维 、饲料添加剂。经研究发现，香蕉皮中主要含有酚类、油脂类、有机酸、缩合鞣质、蛋白质和糖类，还有多种维生素和无机盐等成分[1-2]，因此香蕉皮极具开发利用价值。香蕉皮的利用和开发，既可变废为宝保护环境，又可提高香蕉加工企业的经济效益[3]。香蕉皮具有较强的抗氧化性，主要是多酚类物质，目前对提取香蕉皮中的多酚物质研究较多[4]。此外，有研究者还探讨了香蕉皮黄酮的提取与利用[5]。由于香蕉皮易发生褐变，因此，香蕉皮黑色素的提取工艺也已成熟[6]。但是，国内对香蕉皮黄色素的研究还比较少，仅有香蕉皮黄色素的稳定性初步研究[7]，未见提取工艺的研究报道。黄色素是一类重要的天然色素，占市场需求量的60%，具有广阔的开发实力及前景。目前国内主要生产的天然黄色素有栀子黄、姜黄和柑橘黄。栀子黄色素用于面类制品着色时，易发生绿变，且稳定性不高[8]。姜黄素对还原剂的稳定性较强，着色性强，但对光、热、铁离子敏感。柑橘黄对光很敏感，易褪色，在使用时应考虑适当加入抗氧化剂。若能开发一种新来源的天然黄色素，将是对食品着色剂中黄色素的补充，故进行本研究。
1材料与方法
1.1材料与仪器
1.1.1材料香蕉为市售，八至九成熟，表皮完整且呈亮黄色，无黑色斑迹。将新鲜香蕉皮刮掉内层中软部分后，用水洗去内层的胶状物，再用滤纸吸干水分，切碎至0.5 cm×0.5 cm大小备用。
1.1.2试剂95%乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、30%过氧化氢、无水亚硫酸钠、浓盐酸、氢氧化钠、蔗糖、氯化钠、柠檬酸、维生素C、山梨酸钾、亚硝酸钠、六偏磷酸钠、苯甲酸钠等均为分析纯，购自成都市科龙化工试剂厂。
1.1.3主要仪器UV1000紫外-可见分光光度计，上海天美科学仪器有限公司；RE-52A旋转蒸发仪，上海红叶设备有限公司；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；JD100-4G电子天平，沈阳龙腾电子有限公司；HH-S恒温水浴锅，江苏省金坛市正基仪器有限公司；KQ-B玻璃仪器气流烘干器，北京中兴伟业仪器有限公司；DHG-9075A电热恒温鼓风干燥箱，上海齐欣科学仪器有限公司。
1.2试验方法
1.2.1提取溶剂的选择分别称取10.000 g经过预处理的香蕉皮块分装于6个250 mL三角瓶中，分别加入蒸馏水、50%乙醇、95%乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙醚各100mL，在室温下浸提，1 h后在白色背景下观察其溶液颜色和状态。
1.2.2提取工艺研究按照“1.2.1”节选定的提取剂，分别考察提取剂体积分数、温度、料液比、提取时间、提取次数5个因素，分别设定依次递增的4个水平，进行单因素试验。试验材料为10.000 g经过预处理的香蕉皮，提取溶液定容到100 mL，以黄色素的最大吸收波长λmax = 440 nm[7]下测得吸光度作为试验结果。在单因素试验基础上，选择影响较大的4个因素进行L9（34）正交试验，最终确定香蕉皮黄色素的最佳提起工艺。
1.2.3稳定性研究所用色素溶液均为最佳提取条件下提取得到。
1.2.3.1温度的影响将20 mL色素提取液分装于4支50 mL的具塞试管中，分别置于室温（25 ℃左右）及50 ℃、75 ℃、90 ℃ 的3个恒温水浴锅中，处理2 h后，观察其颜色的变化并测定其在440 nm处吸光度。
1.2.3.2pH值的影响将5 mL色素溶液分装于14支10 mL的具塞试管中，并利用配制好的酸碱液（1 mol/L HCl、1 mol/L NaOH）调节色素溶液的pH值使其值为1～14，振荡30 s，静置30 min后观察其颜色变化，并对颜色变化不大的测定吸光度。
1.2.3.3光照的影响将20 mL色素提取液分装于2支50 mL的具塞试管中，分别置于室内黑暗、光照2种条件下，温度均为25 ℃左右，每隔24 h分别对提取液在紫外-可见分光光度计440 nm处测定吸光度，连续测定7 d。
1.2.3.4蔗糖的影响分别吸取8 mL色素提取液4份置于10 mL具塞比色管中，将已配制好的浓度为1%、5%、10%、15%的蔗糖溶液分别取2 mL加入比色管中，振荡30 s，静置2 h 后观察其颜色变化，并测定吸光度。
1.2.3.5食盐的影响分别吸取8 mL的色素提取液5份置于10 mL具塞比色管中，将已配制好的浓度为4%、8%、12%、16%、20%的食盐溶液分别取2 mL加入已加提取液的比色管中，振荡30 s，静置2 h后观察其颜色变化，并测定吸光度。
1.2.3.6氧化剂（H2O2）的影响分别配制1.5%、3%、6%、15%的H2O2溶液各2 mL于5个25 mL的具塞比色管中，并各移取18 mL色素提取液于每支比色管中，振荡30 s，静置3 h后观察其颜色变化，并测定吸光度。
1.2.3.7还原剂（Na2SO3）的影响分别配制0.1%、0.2%、0.5%、1%的Na2SO3溶液10 mL，并分别移取1 mL于4支25 mL具塞比色管中，再向每支比色管中移取19 mL色素提取液，振荡30 s，静置3 h后观察其颜色变化，并测定吸光度[26]。
1.2.3.8柠檬酸的影响分别配制1%、2%、3%、4%的柠檬酸溶液各2 mL于4个10 mL的具塞比色管中，再分别吸取8 mL色素提取液于各比色管中，振荡30 s，静置2 h后测定其吸光度[3]。
1.2.3.9山梨酸钾的影响分别配制1%、2%、3%、4%的山梨酸钾溶液各1 mL于4个10 mL的具塞比色管中，再分别吸取9 mL色素提取液于各比色管中，振荡30 s，静置2 h后测定其吸光度。
1.2.3.10亚硝酸钠的影响分别配制0.1%、0.3%、0.6%、1%、2%亚硝酸钠溶液各1 mL于5个10 mL的具塞比色管中，并分别吸取9 mL色素提取液于各比色管中，振荡30 s，静置2 h后测定其吸光度。
1.2.3.11维生素C、苯甲酸钠、六偏磷酸钠的影响溶液配制浓度及操作同“1.2.3.10”节。
2结果与分析
2.1提取溶剂选择
由表1可知，95%乙醇、丙酮和乙醚对香蕉皮黄色素提取效果均较好，但丙酮、乙醚有害身体健康，从食品安全性考虑，95%乙醇更合适，故初步选用高浓度乙醇为提取剂。
2.2单因素试验结果与分析
2.1.1乙醇体积分数对色素提取效果的影响分别称取5000 g经过预处理的香蕉皮于4个250 mL的圆底烧瓶内，并准确量取35%、55%、75%、95%乙醇溶液各50 mL于各个烧瓶中，将烧瓶放置于70 ℃的恒温水浴锅中回流1 h，过滤
表1不同提取剂对香蕉皮黄色素的浸提效果比较
提取剂提取液颜色与状态乙酸乙酯无色透明水无色浑浊50%乙醇浅黄澄清95%乙醇亮黄澄清丙酮亮黄澄清乙醚亮黄澄清
滤，收集滤液，所得滤渣转入烧瓶中再量取50 mL相同溶剂回流 1 h，再收集滤液，将2次所得滤液浓缩至50 mL，浓缩液在紫外-可见分光光度计440 nm处测定其吸光度。以乙醇体积分数为横坐标、吸光度为纵坐标绘制曲线（图1）。由图1可知，95%体积分数的乙醇溶液使色素溶出最多，吸光度为0.290，而75%乙醇提取液浓缩后吸光度为0.278，仅次于95%乙醇提取液的色素溶出率。55%乙醇提取液吸光度为0.162，远小于75%乙醇提取液吸光度。因此选择75%的乙醇溶液为香蕉皮黄色素的最佳提取剂。
2.1.2温度对色素提取效果的影响按照同样方法，样品5.000 g，料液比1 g ∶10 mL，提取剂75%乙醇，回流提取2次，每次1 h，温度分别设定25、40、55、70 ℃，提取结束后 440 nm 测定提取液吸光度，结果如图2所示。低温条件下色素不易溶出，并且在设定范围内温度越高色素提取效果越好，且70 ℃下，其浓缩液吸光度达到0.286；但一般色素不耐高温，因此初步确定55 ℃为提取色素的最佳温度。
2.1.3料液比对色素提取效果的影响参考栀子黄色素提取工艺最佳料液比是1 g ∶10 mL[8]，故选择料液比（g ∶mL）为1 ∶5、1 ∶10、1 ∶15、1 ∶20等4个水平进行香蕉皮黄色素提取，其他条件如“2.1.2”节。试验结果（图3）表明，料液比为1 g ∶10 mL时，色素溶出率最大，因此初步确定最佳料液比为1 g ∶10 mL。
2.1.4提取时间对色素提取效果的影响在料液比 1 g ∶10 mL、75%乙醇溶液、55 ℃的水浴条件下提取2次，研究了不同提取时间（1、2、3、4 h）对香蕉皮黄色素提取效果的影响，结果（图4）表明，随着提取时间的增加，提取效果越来越好，但是由于2～4 h间增加的吸光度为0.058，不如1～2 h间增加的多，1～2 h间增加的吸光度有0.068。从节省能源及时间来看，选择2 h为最佳提取时间。
2.1.5提取次数对色素提取效果的影响按照前面步骤得到的最佳条件，在料液比1 g ∶10 mL、75%乙醇溶液、55 ℃的水浴条件下提取2 h，分别测定提取1、2、3、4次的提取液的吸光度，结果（图5）表明，随着提取次数的增多，提取效果越好，特别是提取2次较提取1次增加的吸光度较多，增加达到0.210，而提取3次和4次也有增加，但是增加的效果不大，分别为0.130和0.040；因此，选取2次为最佳提取次数。
2.3正交试验结果与分析
2.3.1正交试验因素水平的确定根据单因素试验结果，乙醇体积分数、温度、料液比、提取时间4个因素都对香蕉皮色素的提取影响较大，而提取次数相比其他4个因素影响不大，因此本试验固定提取次数为2次，以乙醇体积分数、温度、料液比和提取时间为因素，每个因素设定3个水平，进行4因素3水平正交试验（表2）。
2.3.2正交试验结果与分析由表3可知，RC>RB>RA>RD，即提取时间影响最大，其次是温度，再次是乙醇体积分数，影响最小的是料液比。从正交试验的直观分析看，提取效果最好的条件是A3B2C3D1，即乙醇体积分数85%，温度60 ℃，提取时间3 h，料液比1 g ∶10 mL；但从每个因素看，最佳条件是每个因素的k最大值的条件，即A3B3C3D3，具体为，乙醇体积分数85%，温度70 ℃，提取时间3 h，料液比 1 g ∶20 mL。对这2个条件做验证试验，提取过程如“1.2.1”节，吸光度分别为0.476、0.493。A3B3C3D3比A3B2C3D1提取效果好，但吸光度差值较小，为0.017，仅提高了3.57%。由表4可知，0.01
合分析，从香蕉皮中提取黄色素的最佳条件为：乙醇体积分数85%，温度60 ℃，料液比1 g ∶10 mL，提取时间3 h。
2.4稳定性试验结果
2.4.1温度的影响结果由表5可见，该色素在70～90 ℃之间不稳定，且高温下色素已被破坏，而25～50 ℃之间，色素保持相对稳定。故该色素在50 ℃左右及以下都较稳定，但当温度达到70 ℃以上，色素就不稳定。因此，使用时应限制其温度在50 ℃左右或更低温度。
表5不同温度对色素提取液的影响
温度（℃）吸光度温度（℃）吸光度250.243700.351500.255900.430
2.4.2pH值的影响结果由表6可知，在pH值为1～6之间，提取液颜色无明显变化，但是pH值=7时，颜色发生了突变，由黄色变为橙黄色，且随着pH值的增大，颜色逐渐加深，直至pH值=14时提取液变为深红色。表明该色素提取液在弱酸性条件下较稳定，在中性偏碱性或碱性条件下都极不稳定。故该色素不应加入碱性溶液中，其最佳pH值条件为 4～6。
表6不同pH值对色素提取液的影响
pH值吸光度pH值溶液颜色10.1957淡橙黄色20.2018淡橙红色30.2089橙红色40.21210橙红色50.26711淡红色60.28312淡红色13深红色14深红色
2.4.3光照的影响结果图6为色素提取液在黑暗和光照下1周内吸光度的变化，可见，随着时间的增长，色素吸光度的差值逐渐增大，但到7 d时，吸光度相差仅为0.051，故短时间内（7 d）光照对色素稳定性影响不大。
2.4.4食品配料（蔗糖、食盐）对色素的影响由图7、图8可知，蔗糖、食盐等常用的食品配料对色素稳定性影响均较小，且蔗糖在5%低浓度时色素颜色增加，吸光度增大，对香蕉皮黄色素有增色作用。因此可在食品中添加低浓度蔗糖以保持色素的着色力。将香蕉皮黄色素添加到食品中，食品中原有蔗糖、食盐等成分不会对其产生影响。
2.4.5氧化剂（H2O2）与还原剂（Na2SO3）对色素的影响H2O2为强氧化剂。由图9可知，在H2O2浓度低于6%的条
件下，色素非常稳定，直至浓度达到15%才使色素提取液的吸光度有少许下降，由最初的0.266下降到0.223，可见H2O2对色素的稳定性影响不大，即该色素的耐氧化性较强。Na2SO3为食品中常见的抗氧化剂和护色剂。由图10可知，在较低浓度下（0.1%～1.0%范围内）亚硫酸钠对色素稳定性几乎无影响，且对色素有一定的保护作用，故在食品加工中可同时加入该色素与低浓度的亚硫酸钠。但由于亚硫酸钠具有弱碱性，而该色素在碱性条件下极不稳定，因此在含有该色素的食品中不可加入高浓度的亚硫酸钠，防止色素变质。
2.4.6柠檬酸、山梨酸钾对色素的影响由图11可知，加入不同浓度的柠檬酸，色素的吸光度未发生明显变化，而柠檬酸
具有还原性，可见柠檬酸在提取液中对色素有一定的保护作用；因此，柠檬酸作为食品中常用的酸味剂和抗氧化剂可与香蕉皮黄色素同时使用。随着添加防腐剂山梨酸钾浓度的增大，色素吸光度逐渐增大，可见一定浓度的山梨酸钾会使色素的着色力增强；因此，若在食品加工中同时加入该色素和一定浓度的山梨酸钾，后者对前者有增强着色力的效果。
2.4.7亚硝酸钠、维生素C、苯甲酸钠对色素的影响由图12可知，在浓度范围为0.1%～2.0%内的亚硝酸钠、维生素C、苯甲酸钠溶液中，色素的吸光度变化均不大，且吸光度均较高，可见，亚硝酸钠、维生素C、苯甲酸钠对色素的稳定性基本无影响。这3种食品添加剂中，亚硝酸钠、维生素C均具有还原性，能够很好地抑制色素的氧化，使其保持稳定；苯甲酸钠是酸性防腐剂，香蕉皮黄色素对苯甲酸钠稳定与该色素在酸性条件下稳定相吻合。故在食品加工中一定浓度（0.1%～2.0%）的亚硝酸钠、维生素C、苯甲酸钠可分别与该色素配合使用。
2.4.8六偏磷酸钠对色素的影响将5种不同浓度（0.1%～2.0%）的六偏磷酸钠溶液加入色素提取液，保存2 h后观察色素的颜色与状态变化，结果（表7）表明，随着六偏磷酸钠浓度的增大，色素越来越不稳定；因此，六偏磷酸钠或含有六偏磷酸钠的复合磷酸盐等食品添加剂不可与该色素同时使用。
表7不同浓度的六偏磷酸钠对色素的影响
六偏磷酸钠浓度
（%）颜色及状态六偏磷酸钠浓度
（%）颜色及状态0.1黄色浑浊1.0白色浑浊0.3淡黄色浑浊2.0白色浑浊0.6淡黄色浑浊
3结论
本试验采用热回流提取法对香蕉皮黄色素的提取工艺进行了研究。通过单因素和正交试验确定香蕉皮黄色素的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数85%，温度60 ℃，料液比1 g ∶10 mL，提取时间3 h，提取次数2次。为进一步研究该色素的应用价值，进行了色素对温度、pH值、光照等条件的稳定性试验，及色素对某些常见食品配料和食品添加剂的稳定性影响。该色素对光较稳定，且氧化剂和还原剂都对其影响不大，大多数常见的添加剂（除六偏磷酸钠）也可与色素同时加入食品中，不影响色素的稳定性。但是只有在一定的温度和酸碱度下才保持稳定，温度若高于70 ℃，则很不稳定，pH值>6时色素也极不稳定，在pH值为7～14之间，色素颜色发生了剧烈变化，从黄色变为红色。因此在应用该色素时应注意温度、pH值等条件。
香蕉皮黄色素较稳定，可与大部分食品添加剂配合使用，作为食品着色剂有极高的利用价值；但该色素的纯化、结构、毒理试验及具体使用还有待进一步研究。
参考文献：
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[7]严赞开，王桂丽. 香蕉皮色素的稳定性研究[J]. 江苏农业科学，2009（1）：264-266.
----黄海燕
一、活动主题：秋天的画卷
二、活动目标：
1.促进幼儿园、老师、家长、孩子间的沟通，促进孩子们对团队的意识。
2.体验集体活动带来的乐趣和感受秋天的美。
3.体验植物顽强的生命力与大自然植物生生不息的链接。
三、活动时间：2014年10月18日（周六）上午9:00
四、活动地点：南宁市金花茶公园文娱大草坪
五、活动人员：苹果班全体幼儿、老师、及家长
六、活动准备：
1.班级老师确定好活动场地。
2.向各位家长做好通知工作，告知家长本次活动目标以及需家长配合的事项。
3.教师准备好亲子游戏及道具。
七、注意事项：
1.班级老师对幼儿进行活动安全教育，增强幼儿对安全意识防范和自我保护能力。
2.注意言行文明，爱护公物，不要随地乱扔垃圾。
八、活动过程： 1、8：40-----9:00集合：家长带领孩子在文娱大草坪集合。2、9:00---9:40亲子游戏。1）、木头人2）、钻山洞
3.9:40---10:00自行分组小组（3个家庭为1小组），,扑进大自然，捕捉秋天的痕迹。
.4、10:00---10:40主题活动《秋天的画卷》。建立概念：叶柄、叶脉、叶子的正反面。拼贴、设计、褐色、镶嵌、后期保存5、10：40—11：30分享美食。6、11:30活动结束，自行离开。
活动内容：
ABC阳光国际幼儿园香蕉班的宝贝们，早上好，今天是2014年10月18日，星期六。今天早上我们在金花茶公园举行《秋天的画卷》亲子秋游活动。在这里非常感谢爸爸妈妈和宝贝们，来到这里跟我们一起扑进大自然，捕捉金秋的美。给自己鼓鼓掌.....！
下面我们开始进行《秋天的画卷》亲子活动的第一个环节的第一个游戏“大脚踩小脚”，我们将会分成三个组比赛。看看比赛到最后，哪个组的人数最多就赢咯，那么输的那两组就需要给我们唱一首歌。选组的规则是：那一组戴泽孩子最快走到终点再返回起点，哪一组就赢。游戏朱老师组织。游戏结束后，我们开始玩第二个游戏啦，我们今天在金花茶公园的国际幼儿园所有的家长和孩子一起举行这个游戏。请大家站在自己的组队上，跟着老师一起来到预科班集合地。好，朱老师带队请先走，李老师带队跟上队伍，好，我们跟上队伍。好，宝贝们，玩了这么好玩的游戏之后，请大家稍作休息，我们下面将进行我们的主题活动《秋天的画卷》。请宝贝们告诉我，你们看到的秋天是什么样子的？引导：金黄色的，落叶，枯萎，凉风吹等。这个主题是需要大家用你们的慧眼金睛去发现秋天的美，然后用大家一会收集到的落叶和现有的工具在我们的画卷上表达出金秋的美的样子。
现在请大家观察我，叶柄（手指，如下也是），叶脉，叶子的正面，叶子的反面。我们将会有20分钟的时候去搜集金秋的落叶，10点的时候，请大家回到文娱大草坪，来到我们的画卷旁边作画。三个家庭为一组，按先后顺序往下排列。作画时间为：10:00—10:40。
现在作画时间结束，请大家在各自的作品下面写下你们的宝贝的名字哦，然后将自己的物品归位。然后就可以欣赏一下我们班金秋画卷哦。
现在是我们的美食分享环节啦，请大家寻找一个舒适的地方，一起分享美食啦。
香蕉的种类多种多样，我们常见的有:千层蕉、青蕉、牛角蕉、芝麻蕉等，下面就让我向你们介绍一下我最喜欢的芝麻蕉吧!
一天，妈妈买回来一些芝麻蕉。我取下一根仔细地端详着它。只见它的外皮上有许多芝麻大的小黑点。难怪人称“芝麻蕉”呢!香蕉的外形像月牙、像小船、又像一座拱形桥，让人看得忍不住“口水直流三千尺”。
撕开它的外皮，乳白色的果肉立刻呈现在你的眼前。像一个白白胖胖的小娃娃，可爱极了!轻轻地咬一口，软软的、滑滑的，一股清香的味道在嘴里蔓延开 来，直浸心脾。香蕉虽然没有苹果那样惹人喜爱，没有草莓那么浪漫，也没有樱桃那么艳丽，但是在众多水果之中，我还是最喜欢香蕉。它那甜而不腻的味道令人回 味无穷!
香蕉不仅外形独特，味道鲜美，它还有许多妙用呢!香蕉炖冰糖可以治久咳，香蕉煮酒可以做食疗，可以减肥还可以防治高血压，起到润肺止咳的功效。
关键词：香蕉 秋水仙素 过氧化物酶
1 概述
1.1 香蕉生产概况
香蕉是热带、亚热带地区的重要水果，也是华南四大名果之一其果实质地柔软清甜芳香，营养价值高。每百克果肉中含碳水化合物20g，蛋白质1.2g，脂肪0.6g，粗纤维0.4g，磷28mg，钙18mg，铁0.5mg，维生素C24mg，维生素B10.08mg等。每百克果肉的发热量为90千卡，因此也是热带地区重要的粮食作物。发展香蕉生产有着广阔的前景[4]。
1.2 秋水仙素
秋水仙素是诱变多倍体效果最好的药剂之一。秋水仙素（C22H25O6N）是1937年发现的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶，易溶于冷水、酒精和氯仿，难溶于热水、乙醚等，熔点155℃。一般多使用它的水溶液。实验证明，有效的诱变浓度是0.0006-1.6%，以0.2%的浓度诱变效果最好。
1.3 过氧化物酶
过氧化物酶广泛存在于植物体中，是活性较高的一种酶。本实验是以邻甲氧基苯酚（即愈创木酚）为过氧化物酶的底物，在该酶存在下，H2O2可将邻甲氧基苯酚氧化成红棕色的4-邻甲氧基苯酚，该红棕色的物质在波长470nm处有最大光吸收，故可通过测470nm处的吸光度变化来测定过氧化物酶的活性。
1.4 本文研究的内容和目的
随着我国农业结构的调整，包括香蕉产业在内的果品业在农村经济中的地位愈来愈重要。在这种形势下，广大香蕉生产者需要有新的品种和新的技术来提高市场竞争力。香蕉已是三倍体，用秋水仙素处理能否使它的染色体进一步加倍，进而使它的产量、质量或抗逆性得到提高，这个问题值得研究，由于秋水仙素有毒，秋水仙素处理后往往会造成植物伤害，甚至死亡。本研究采用秋水仙素不同剂量对香蕉组培苗进行处理，观察记载香蕉组培苗生长情况，并对叶片中的过氧化物酶活性和丙二醛含量进行测定分析，并初步探讨秋水仙素对香蕉组培苗的作用效应。
2 材料与方法
2.1 供试材料
威廉斯蕉组培苗
2.2 供试药剂
MS培养基、6-BA、秋水仙素（0.1%、0.2%、0.3%、0.4%浓度）、pH6.8磷酸液冲液，反应液（100mlpH6.8磷酸液冲液+0.5ml愈伤木酚+1ml30% H2O2），10%三氯乙酸（TCA），0.6%硫代巴比妥酸（TBA）。
2.3 试验方法
2.3.1 不同剂量的秋水仙素处理香蕉
选取生长良好，长势均匀（大概是4cm高）的威廉斯蕉继代苗，切取基部1cm的单芽，进而在MS+6-
BA2mg·L-1+糖30g·L-1的培养基上培养，培养10天以后，用不同剂量（浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%）的秋水仙素（经过40umol/L的滤膜过滤）对威廉斯蕉继代苗的芽顶尖滴加一滴，处理天数为1、2、3、4、5天，共20个处理，每处理12瓶，每瓶有4颗继代苗，两个月后，观察总结。
2.3.2 香蕉叶片过氧化物酶活性测定
过氧化物酶活性的测定利用动力学分析法测定，酶提取：称取剪碎的试材0.25g，放入研钵，加入石英砂少许及5mlpH6.8磷酸液冲液，研磨成匀浆，洗入25ml容量瓶，以缓冲液定容，摇匀，取一定量离心（8000r/min）15分钟，取上清液。酶活性测定：取反应液3ml，置试管中，加入酶提取液0.2ml，迅速摇匀，倒入光径1cm比色皿，分光光度计470nm处，在UV-2800型分光光度计上直接以动力学分析法，测定出△A/min。酶活性计算：酶活性（△A470·g-1FW·min-1）=△A470·酶提取液总量（ml）/反应吸取酶液量（ml）/样品鲜重（g）。
2.4 实验数据
不同剂量秋水仙素处理香蕉叶片中的过氧化物酶活性
■
3 结果分析
3.1 同一秋水仙素浓度下处理不同天数的比较
图1为不同浓度、不同天数的秋水仙素处理的过氧化物酶活性。
从图中可以看出香蕉叶片中的过氧化物酶，各浓度处理的最高酶活性都与对照的非常接近，且都低于对照。尽管各处理的最高酶活性出现的时间不同，但都不是出现在处理的第一天，而是出现在第二、第三或第四天。从图中还可看出最高浓度处理的酶活性最低。
3.2 不同浓度之间过氧化物酶活性的比较
■
从表中不同秋水仙素浓度处理的香蕉在第一天测得的过氧化物酶活性比较表中可以看出，各浓度处理之间没有差异性。第二天测得的过氧化物酶活性比较表中可以看出，对照0.1%和0.3%浓度的香蕉叶片中过氧化物酶活性与0.2%浓度处理的没有显著差异性，但显著地高于0.4%浓度处理的。第三天测得的过氧化物酶活性比较表中可以看出，对照0.1%浓度秋水仙素处理的香蕉叶片中的过氧化物酶活性极显著地高于0.2%、0.3%、0.4%浓度的秋水仙素处理的。第四天测得的过氧化物酶活性比较表中可以看出，对照的与各浓度之间没有差异性。第五天测得的过氧化物酶活性比较表中可以看出，对照的香蕉其叶片中的过氧化物酶活性极显著的高于用秋水仙素处理的香蕉酶活性。
4 讨论
4.1 过氧化物酶活性
过氧化物酶（POD）是普遍存在高等植物体内的一类含铁卟啉辅基的酶，亦是木质素合成的主导酶。王同坤等发现，二倍体玫瑰香葡萄加倍成为四倍体后，成龄叶的过氧化物酶（POD）活性极显著降低。还有研究表明，过氧化物酶是一种与生长有密切关系的酶，它能氧化吲哚乙酸，抑制生长。本试验研究表明，不同浓度的秋水仙素处理下，香蕉叶片中的过氧化物酶活性都比对照的低，但同时各浓度处理之间的最大值都非常接近对照的，说明各浓度处理对香蕉都有一定程度的伤害；其中，0.1%、0.3%浓度处理时，香蕉叶片中的过氧化物酶活性呈现出先是上升，然后下降的趋势，而过氧化物酶活性升高的原因可能是因为香蕉体内0.1%、0.3%浓度的秋水仙素达到一定浓度时，膜脂过氧化作用增强，而使体内过氧化物增多，从而使过氧化物酶活性上升，但是随着处理天数的增加，秋水仙素对过氧化物酶造成伤害，因而过氧化物酶活性急剧下降；0.2%浓度处理的香蕉过氧化物酶，呈先是下降，后上升的趋势，原因可能是0.2%浓度的秋水仙素先是对过氧化物酶造成伤害，所以致使过氧化物酶下降，随着处理天数的增加，香蕉体内适应了0.2%浓度的秋水仙素，从而使体内活性氧自由基增多，诱导了体内过氧化物酶的合成，才导致过氧化物酶的上升；0.4%浓度处理的香蕉叶片中的过氧化物酶活性是最低的，对香蕉的伤害程度是最大的。总而言之，0.2%浓度的秋水仙素处理的香蕉叶片中的过氧化物酶表现是比较好的。
4.2 本研究不足之处
①诱导多倍体的化学药剂很多，本研究只用了秋水仙素对香蕉进行处理，没有使用其他化学诱变剂，如：甲基黄酸乙脂（EMS）、抗生素、羟胺、叠氮化合物、二氯代苯、吲哚乙酸等。
②处理时的温度对秋水仙素的作用亦有影响，直接关系到诱导的成功率，故必须在适宜的温度下进行处理。
③本次试验进行香蕉秋水仙素处理的目的就是选育出抗逆性强、果实大及植株结实的香蕉新品种。由于各方面的原因，不能有效的处理，在实际过程中还存在许多问题，所以还没有办法对其进行品质评价，其产量、营养价值等方面还有待于今后进一步的研究。
参考文献：
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