检验科标准操作规程
1、医务人员
1每1-2年做体检一次并接受乙肝疫苗接种。
2每1—2年检查乙肝病毒抗原抗体水平发现乙型肝炎者应进行隔离治 疗。
3检验人员进入实验室应穿好工作服不允许在实验室进食和吸烟。
4检验人员在工作前后和被污染后应用肥皂和流水清洗必要时由消 毒液浸泡双手每季度抽查检验人员的手并做细菌培养一次。
2、环境消毒隔离
1实验室应分为清洁区和操作区清洁区要注意保护不受污染。操作有 气溶胶可能的标本应配置生物安全柜及其它防护设置如紫外线灯排气 扇等操作区的工作台及地面每日用消毒液擦拭一次有污染时随时消毒 每周大扫除一次。
2采血室每日操作前用清水擦拭操作台一次采血结束用消毒液擦拭操 作台、桌子和地面一次紫外线每日照射消毒一次每月空气细菌培 养一次紫外线强度定期测定。并做记录。
3、各种检验标本的收集送检必须用相应指定的容器留取不得外溢污染。
4、静脉及末稍采血应严格执行消毒隔离措施静脉抽血做到一人一针一筒 一巾一带一消毒所用止血带及纸垫每日消毒末稍采血一人一片一管 杜绝交叉污染。
5、一次性医用器具包括采血针注射器、尿杯、血红蛋白微量吸血吸管应 严格做好领发登记注射器先浸泡消毒后由供应室一对一调换统一处 理其余一次性器具浸泡消毒后装入污物袋送焚烧炉焚烧。
6、检验人员在进行静脉抽血时应严格遵守无菌操作技术操作前必须洗手必 须戴好帽子与口罩操作台和手被污染时应用肥皂和流水认真洗手必要 时用消毒液浸泡双手酒精、碘酒瓶每周更换消毒两次。
7、凡是肝炎病人和透析病人的血液标本及疑有黄疸的血标本都视为肝炎的 污染标本应贴上红色危险标记放在规定区域内引起警惕和防止扩大 污染面。
8、溢出试管外的血液应立即用碘酒棉签擦拭干净注意防止玻璃碎片刺伤 手并注意试管有无破裂。
9、当针头和碎玻璃刺伤手时,用流水冲洗,挤出血水,应立即用碘酒消毒局部。
10、实验室操作时应戴上手套。吸取标本离心振荡等应严格按操作规程防 止自身和实验室受污染。
11、已检查标本与容器分别浸泡于施康1号消毒液(2000mg/L)中两小时后标 本倾弃一次性容器送焚烧重复使用的经清洗消毒和灭菌后再使用均 要有记录。有毒化学试剂和放射性试剂使用后要经无害化处理防止污染 环境。
12、菌种、毒种按《传染病防治法》进行管理。
13、三级医院必须设置清洁区污染区操作有气溶胶可能的标本应配置生物 安全柜及其它防护设置如紫外线灯排气扇等。
14、非科室工作人员不准进入实验室外来人员参观需经科主任同意方可进入
二 质量管理制度
1、各专业实验室根据省临检中心的有关规定开展实验室内的质量控制并 制定有关措施。对室 內质控应每日有记录对失控情况有纠正方法有预 防性措施对于目前尚无完整的室内质控体系的实验室应积极创造条 件建立室内质量控制体系。
2、各专业实验室必须参加部、省的各次室间质控活动对每次质控评价应有 记录。
3、计量仪器包括分析天平天平、分光光度计等应定期校正每年一 次。
4、大型分析仪器必须专人负责有使用维修记录。
5、商品化的试剂盒的申购由各专业室的组长负责申报每月一次报科主任审 批不得使用过期无批准文号的劣质试剂进货统一由科室管理自配 试剂须严格校正后方可使用。
6、各专业实验室必须建立完整的操作程序并应严格按程序执行。
7、当日发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人员严格审核后方可发 出。
8、科室在完成严格的室内、室间质量控制体系的同时应逐步建立全面质量 控制体系对标本的采集运送保存等纳入严格的管理之中。每日送检 的标本应签收。
9、急诊检验应严格按照急诊制度执行。
三 安全制度
1、菌种、毒种、剧毒品及贵重仪器物品指定专人保管、有防盗措施建立帐 册记录进出数量定期检查制度。剧毒药品专人保管由科室主任主 管试剂的同志负责放保险柜领用时须有主管同志在场作好领用登 记。
2、易燃物品专柜存放普通试剂按常规分类存放并由科室主任和主管试剂 同志负责注意用电安全特别是电炉子、大烤箱、火焰光度计由各科 使用同志负责安全严防火灾。
3、对工作中可能发生的触电、失火、玻璃割伤、针头刺伤、烧伤、不慎中 毒、传染性标本的污染各实验室应有应急处理的方法有关人员均应熟 悉。
4、用电设备、电源线路、CO2气体、给排水系统的安全性符合使用要求不 能带电检修仪器。
5、使用强酸碱腐蚀品时应在适当的环境下正确操作防止腐蚀、灼伤、中 毒、火灾和爆炸等事件发生。
6、注意安全随手随时关门下班时要做好水电门的安全保卫工作防 火防盗防水。
7、科室安全保卫负责郑军
四
试剂管理制度
1、各专业实验室应根据各自的工作需要按月向科主任申报所购试剂并应 做到及时盘存清点入库做到心中有数。
2、所有试剂的申请进货一律由科室统一管理严格按市卫生局招标要求执 行做到三证齐全。无三无产品。
3、各专业实验室应对试剂库存定期检查不使用过期变质的试剂。
4、自配试剂须以严格校正后方可使用。
5、试剂的保存应严格按照要求以保证有效期内能有效地使用杜绝浪费现 象。
6、试剂外借一律须经科主任同意方可执行。
7、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责保存放保险箱内使
7、用时应有两人在场并做好登记。
8、易燃易爆试剂应分开存放远离火源和电源。
9、供应商所送的试剂必须先经药库清点才能接受检验科人员清点后必须在
10、货单上签字有出入者必须向科主任或试剂管理员、组长报告再将货单
11、交给试剂管理员以便月底结帐。
12、科室试剂管理员钟梁
13、六标本管理制度14、15、一、标本采集 16、1、按每个项目要求告诉病人、病房护士或本室采血人员最佳采血时间、采血
17、前空腹或饮食注意、用药情况、活动情况、体位等。18、2、明确抗凝剂种类、抗凝剂与血的比例、抽血 19、3、体液、分泌物、细菌培养标本按要求留足量、及时送检。
20、二、标本运送 21、1、运送过程中原则上带盖不能用棉花等吸水物品以防倒翻和溢出或雨
22、淋。凡含传染源的标本必须带盖外套尼龙袋以防溢出而污染环境。23、2、不能剧烈振荡以防标本溶血和有形成分破坏。24、3、必须及时送检。
25、三、标本接收 26、1、必须认真核对标本上病人姓名、病区、床号、联号与申请单符合。27、2、必须观察标本的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块、细菌培养标本是否符
28、合无菌要求。是否有明显溶血或脂浊。29、3、不符要求的标本必须及时填写退回理由单及时反馈临床。
30、四、标本检测 31、1、在检测每一过程中都应复核标本接收过程中的每一步骤。32、2、在标本足够的情况下不能浪费、随意丢弃或损坏标本。
33、五、标本储存 34、1、当天不能完成的标本必须分离血清按要求储存在2℃-8℃或-20℃。35、2、当天检测完成的标本血常规储存在2℃-8℃1天以上生化免疫储在2℃-36、8℃7天以上脑脊液、胸腹水等重要标本储存在2℃-8℃7天以上。37、3、特殊标本按要求保存。
38、六、标本处理
39、检验标本先用含2-3g/L有效氯消毒灵浸泡半小时再煮沸清洗试管烘 干备用。用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医
用垃圾处统一处理。并做好登记。
一、检验科检测项目标准操作规程
A、临检室
A1、血常规检验标准操作规程
A2、嗜酸性粒细胞直接计数标准操作规程
A3、红细胞沉降率测定标准操作规程
A4、血型鉴定标准操作规程
A5、尿常规标3准操作规程
A6、一小时尿沉渣计数标准操作规程
A7、尿乳糜定性检查标准操作规程
A8、大便常规标准操作规程
A9、虫卵及包囊浓缩检查标准操作规程
A10、隐血试验标准操作规程
A11、脑脊液检验标准操作规程
A12、浆膜腔积液检查标准操作规程
A13、精液检查标准操作规程
A14、前列腺液检查标准操作规程
A15、阴道分泌物检查标准操作规程
A16、胃液检查标准操作规程
A、检室
A1、血常规检验
1标本
用EDTA-K 2 0.2ul抗凝静脉血1ml,门诊病人在CD-1700仪器上做三分类 测定,住院病人在COULTER HMX仪器上做五分类测定。
2试剂及仪器
COULTER HMX五分类血球分析仪及配套试剂质控用COULTER 4C PLUS 全血质控品COULTER HMX五分类血分析仪及配套试剂质控用 COULTER 5C 全血质控品。血液细胞自动化分析仪介绍
3操作
1门诊
a)收到血常规标本后查看核对检验项目立即编号放混匀器上混匀 3分钟。
b)如有血型立即用玻片法和试管法测定血型输入电脑。
c)血标本在ABBOT CD-1700上检测结果入库。
d)对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类对于血小板等图形不 好或结果异常较大的应手工复查。
e)结果核对后在半小时内报告。
2病房
a)采集血常规标本后立即编号试管加盖后放于专用试管架上放入 HMX上自动混匀 b)如有血型用玻片法和试管法测定血型输入电脑。
c)血标本在COULTER HMX上机检测结果入库。
d)对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类对于血小板等结果 图形不好或结果异常较大的应手工复查。复查条件
e)结果核对后签发报告单。如果急诊则电话报告有血型的话通知 病房来拿报告单。血液项目
5特殊规定
在检验血常规时,科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,务必 作登记,复查和及时报告,以备查询。
1.血红蛋白低于100g/L.2.白细胞低于3000/ul.3.血小板低于8万/ul.4.发现白细胞分类异常图形时.5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.6临床意义
61WBC计数
参考范围
4-10 ³ 10 9 /L
1、增加
(l)生理性初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动 后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。
5特殊规定
在检验血常规时,科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,务必 作登记,复查和及时报告,以备查询。
1.血红蛋白低于100g/L.2.白细胞低于3000/ul.3.血小板低于8万/ul.4.发现白细胞分类异常图形时.5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.6临床意义
61WBC计数
参考范围
4-10 ³ 10 9 /L
1、增加
(l)生理性初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动 后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。
A3、红细胞沉降率测定
[标本]
200ul枸橼酸钠抗凝静脉血1.1ml颠倒混匀。[原理]
离体抗凝血液置于特制刻度测定管(魏氏法血沉管)内垂直立于室 温中一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。
[仪器及试剂]
MONITOR JI血沉仪、专用血沉管
109mmoIL(32g/L)枸橼酸钠溶液取含二分子结晶水的枸橼酸钠(分子量29412)328用蒸馏水溶解稀释至100ml。此液在室 温保存不得超过2周。
[操作]
1专用血沉管1支加抗凝剂02ml。
2静脉采血后取下针头加血至刻度颠倒混匀。
3用血沉管(300mm³25mm)吸取上述混匀血液至“0”刻度处拭去管外 附着的血液将血沉管直立在血沉架上。MONITOR JI操作
4记时室温中静置lh读出血沉仪上的读数即是血沉值。
[参考值]
男:15mm60min 女20mm60min [附注]
1红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质血浆中脂类的量 和质红细胞的大小与数量是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁 度、放置位置是否垂直室温高低等因素都有关系。
2要求
(l)标本采集时避免脂肪血。
(2)血液和抗凝剂比例要准确。
(3)血沉管内径要标准(25mm)放置要垂直。
(4)做血沉的标本要在采集后3h内测定并充分混匀。
3室温过低、过高和贫血时对结果都有影响。为此血沉应尽量 放在18—25℃室温下测定。室温过高时血沉加快可以按温度系 数校正。室温过低时血沉减慢无法校正。
A4、血型鉴定
1ABO血型鉴定
根据红细胞上有或无A抗原或和B抗原将血型分为A型、B型、AB型及O型 4种。可利用红细胞凝集试验通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定 型是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或和B 抗原所谓反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或 和抗—B。
[试剂和材料]
1抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清制备方 法见本节附注
25A、B及O型试剂红细胞盐水悬液制备方法见本节附注
3受检者血清
4受检者5红细胞盐水悬液制备方法见本节附注。
[方法] 2玻片法
(1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块)用蜡笔划成方格标明抗-A、抗-B 和抗-A十B分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴 于标明的方格内再各加受检者2红细胞悬液1滴混和。
(2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)用蜡笔划成方格标明A细胞、B细胞和O细胞用滴管各加受检者血清1滴再分别用滴管滴加 A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。
(3)将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动使血清与细胞充分混匀连续约 15min以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。如以玻片作试验时也 可用低倍镜观察结果。附注]
1分型血清质量性能符合要求用毕后应放置冰箱保存以免细菌污染。
2试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和用生理盐水洗涤1次以除 却存在于血清中的抗体及可溶性抗原。
3试管、滴管和玻片必须清洁干燥防止溶血。
4操作方法应按规定一般应先加血清然后再加红细胞悬液以便容易核实 是否漏加血清。
5按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强但为了防止 冷凝集现象的干扰一般仍在室温(20—24℃)内进行试验37℃可使反应 减弱。
6离心时间不宜过长或过短速度不宜过快或过慢以防假阳性或假阴性结 果。
7观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。
8判断结果后应仔细核对、记录避免笔误。A5、尿常规
1尿液标本处理
[收集]
1应留取新鲜尿以清晨第一次尿为宜较浓缩条件恒定便于对 照。急诊患者可随时留取。
2使用清洁有盖容器(一次性容器为好)。
3容器上应贴上检验条码。
4尿标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。此外还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入。
5标本留取后应及时送验以免细菌繁殖、细胞溶解等。
6尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱。
[防腐与保存]
1冷藏防腐剂随检验目的而定一般放4℃冰箱可保存6h。
2甲醛用于管型、细胞的防腐按400g儿甲醛05ml100ml尿加 入。由于甲醛具有还原性不适于尿糖等化学成分检查。
3甲苯(或二甲苯)用于尿糖、尿蛋白的防腐按甲苯05ml100m1 尿加入。
4麝香草酚用于检查尿中化学成分及细菌的防腐剂每100ml加入 018。
[标本处理]
收到门诊标本后核对检验项目后倒入普通长试管内。液面距管中约1cm
检验后处理]
标本检验后必须经过消毒处理后才能排放入下水道内。所用盛尿容器及 试管等须经30—50g儿漂白粉澄清液或10g/L次氯酸钠液中浸泡2h也可 用5gL过氧乙酸浸泡30—60min再用清水冲洗干净。
2常规检查
(一)、尿 量
随气候、出汗量、饮水量等不同而异一般健康成人约为10—15L 24h即1m1(h/kg体重)小儿按k8体重计算尿量较成人多3—4倍。
(二)、颜 色
根据尿的颜色进行报告淡黄色、深黄色、褐黄色、红色、乳白色、深红 如浓茶、红茶色、乳白色
(三、透明度
分为透明、微浑、浑浊、明显浑浊、乳糜状等。
3生化检查
[仪器及试剂]
仪器
盈东URISCAN
试剂
盈东尿十一联试纸
[操作]
把试纸条全部浸没于尿液中约3-5秒后取出放于盈东URISCAN的试纸条架上测定。A8、大便常规
1标本采集
1采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别如一般检验留取新鲜 指头大小(约5g)即可放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送 检标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒便于检查后焚毁。血吸虫毛 蝴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。细菌检查的粪便标本应收集于灭 菌封口的容器内勿混入消毒剂及其它化学药品。
2检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子在清晨排便前由肛门四周拭取标 本也可用棉拭子拭取但均须立即镜检。
3检查阿米巴滋养体应于排便后立即检查。冬季需采取保温措施迅 速送检。
4不应该采取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液可使柔弱 的原虫致死。用白明胶膜法检查粪便中的胰蛋白酶活性时可因尿液 中存在溶解白明胶的物质而导致其检查结果错误的增高。粪便标本中 也不可混入植物、泥土、污水等因腐生性原虫、真菌抱子、植物种 子、花粉易混淆实验结果。
5盛粪便标本的容器必须有盖有明显标记。粪便标本应选择其中脓血 粘液等病理成分若无病理成分可多部位取材。采取标本后应在 一小时内完成检查否则可因9H及消化酶等影响而使粪便中细胞成 分破坏分解。
6检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数应收集24h粪便送验。
7隐血试验应嘱患者收集标本前3日禁食动物性食物。连续检查3 天并选取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检查以免因长 时间放置使隐血反应的敏感度降低。
8粪胆原定量检查应收集二天的粪便混合称量从其中取出约20g送 验。查胆汁成分的粪便标本不应在室温中长时间放置以免阳性率减 低。
9脂肪定量检查时应先食定量脂肪食每天进食脂肪50—1508连续 6天。从第三天起收集72h粪便也可定时口服色素(刚果红)作为 留取粪便的指示剂将收集的粪便混合称量从中取出608左右送 检。简易法为在正常膳食情况下收集24h的全部粪便混合称量 从其中取出约60g送检测脂肪含量。
10细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。
15、阴道分泌物检查
阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体其中主要是由阴道分泌的液体。
1PH值
收到标本干棉拭子先用PH试纸测PH值并记录。
2清洁度
15、阴道分泌物检查
阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体其中主要是由阴道分泌的液体。
1. 萌芽期
(1) 浇透芽前水, 施好芽前肥, 整修树盘此期追肥以速效肥为主, 盛果期树施控释肥1~1.5 kg/株, 中庸树施用优质生物有机肥或其他优质有机肥料, 3 kg/株左右。同时推广应用起垄覆盖、沟灌、生草技术。在距树干两旁1~1.5 m处, 沿行向挖宽30 cm、深20~30 cm的灌水沟, 并将土培在树干基部, 形成高15~30 cm、上部宽30~50 cm、下部80~100 cm的土垄。垄上覆草或覆膜, 行间种植三叶草或豆科矮秆草类, 草长到20 cm高时收割, 覆盖在树盘内。每次灌水于沟内, 土壤浸湿较均匀, 减少肥料流失和提高肥效。
(2) 及时检查、刮治腐烂病等树干病虫害刮后及时涂药, 用腐必治、杀菌优等药剂, 连涂2次, 间隔7 d, 涂抹要均匀、严密, 刮下的病皮等残留物及时带出果园, 集中烧毁或深埋 (80 cm以下) , 防止病斑扩展。发芽前刮除枝干老翘皮, 刮至大枝露白, 铲除越冬病虫。刮后涂质量分数10%杀菌优300倍液, 重点喷涂枝干。在春季也可用下列办法治疗腐烂病, 在病疤处用快刀划1 cm道 (略切病部) 抹1遍843康复剂或农抗120, 干后再抹1遍, 再涂3~4 cm稀泥, 用塑料布包裹。
(3) 萌动期全园喷1次波美5°石硫合剂或农抗120、铲除越冬病源。为了提高药效可适时晚喷, 以5%左右的芽体露绿时为宜。
(4) 浇开花前水开花前10~15 d, 如遇干旱天气要浇开花前水。浇小水, 避免大水漫灌, 为了提高水的利用率, 保持土壤水分稳定, 大力推广使用抗旱保水剂, 以利于坐果和幼果期细胞分裂。同时喷质量分数20%三唑酮1 500倍液或质量分数10%吡虫啉3 000~4 000倍液, 预防白粉病、蚜虫等。为了促进开花和提高坐果率, 加喷质量分数0.3%~0.5%的优质硼肥。
(5) 花前复剪做好开花前复剪、疏除旺枝和多余弱枝、弱花及过密枝的工作。开花前复剪时辨别清花芽与叶芽, 调整花芽与叶芽比例, 减少养分消耗。
2. 开花期
(1) 人工授粉以中心花为主, 最好授当天开放的花, 避开中午高温时间, 在上午9时—12时、下午2时—5时进行, 若大风天气更应注意授粉质量。也可进行果园放壁蜂进行授粉 (在开花前5~7 d放置) 。
(2) 疏花、蔬果疏花时将腋花芽、边花、弱花及时摘除, 只保留中心花, 每隔20 cm留1个花序, 其余花序全部疏除。蔬果时将残果、小果等疏除。蔬果按间距留果, 25 cm的上下空间留1个果, 小果型品种留2个果, 只保留中心果, 花谢后30 d内完成, 越早越好。及时疏除多余弱梢、过密新梢, 以利于通风透光, 减少养分消耗。
(3) 喷药花期喷生物类药剂质量分数3%克菌康、质量分数10%的宝丽安及质量分数1.5%的多抗霉素, 防治霉心病。为了提高坐果率, 于落花期喷1~2次质量分数0.3%的优质硼肥。
3. 开花后至果实膨大期
(1) 开花后追肥盛果期施优质有机肥、无机复混肥1.5 kg/株, 在5月上中旬施, 可沟状施或穴施。
(2) 浇好花后水根据墒情, 土壤相对含水量低于40%时, 在5月中下旬前后进行全园浇灌, 能促进新梢生长, 减轻生理落果。
(3) 病虫害防治花后5~7 d全园喷1遍进口代森锰锌+质量分数1.5%多抗霉素1 500倍液+质量分数1.8%阿维菌素8 000倍液+优质钙肥, 主治红蜘蛛及苹果瘤蚜等。开花后14~17 d喷质量分数50%多菌灵超微粉600倍液+质量分数10%吡虫啉2 000倍液+优质钙肥。
(4) 推广全园果实套袋技术套袋前疏好果、喷好药, 喷药要严密、周到, 并且及时补钙。套袋果的树体要健状, 通风透光良好。避开中午晴天高温时套袋, 最好上午9时—12时、下午2时—6时套袋。天气干旱时, 套袋前应浇1遍水, 以减少套袋果日灼。开花后至套袋前喷钙肥三四次, 套袋最好要选用质量过关的内红双层纸袋或双面压光内纸双层纸袋, 5月下旬—6月上中旬全部完成。
(5) 果实膨大期追肥在7月中旬—8月中旬追肥, 以有机肥为主, 每株施用1.5 kg。
(6) 夏季修剪夏季及时进行摘心、扭梢、拿枝、抹芽或喷施生长调节剂等修剪措施。
(7) 夏季病虫害的综合防治5月下旬—9月, 每隔10 d喷1次杀菌剂, 并重施波尔多液的应用, 也可与易保或福星等杀菌剂交替使用。根据园内的虫情, 加入高效低毒杀虫、杀螨剂。在喷药的同时, 适当加入叶面肥料, 叶面肥1年不少于5遍。
(8) 提倡叶面喷肥全年4~5次, 一般生长前期2次, 以氮肥为主;后期2~3次, 以磷、钾肥为主, 可补施果树生长发育所需的微量元素。在距果实采收期20 d以前喷施最后1次叶面肥。
4. 果实成熟至果实采收期
(1) 果实摘袋在9月下旬—10月上旬, 采收前15 d摘袋, 分2次进行, 第1次撕开纸袋, 隔3~5 d, 全部摘掉, 摘袋后及时喷多抗霉素等防治病害, 杀虫剂以高效低毒的水剂为主, 并及时摘叶。摘袋3~5 d后, 将果实周围挡光的叶片摘掉。果实阳面充分着色后, 将阴面转向阳面, 铺设反光膜, 促进果实全面着色。
(2) 果实采收根据果实着色和成熟度, 进行分期采收, 要轻拿轻放, 边采收剪除果柄, 及时进行预冷, 保证采收质量。
(3) 搞好果园秋施基肥以有机肥为主, 每0.067 hm2施肥5 000 kg以上, 实行配方施肥, 氮、磷、钾肥配合施用, 每产50 kg果施用尿素1 kg、过磷酸钙1~1.5 kg, 硫酸钾1 kg。适宜施肥期为9月中旬至落叶前, 此次施肥占全年的60%以上, 施肥后及时浇水。
(4) 秋季修剪苹果树秋剪的主要目的是减少局部的消耗, 促进整体积累, 改善通风透光条件, 从而达到提高果实品质的目的。时间为8月—11月。具体方法有:秋季 (8月上、中旬) 对新梢进行带帽修剪和轻剪, 在温度条件较适合时, 有缓和长势和促进二次枝成花的作用。采收后, 对过高、过长、过密的大枝进行疏、缩。对旺长梢在春秋梢交界处短截, 剪除病虫害严重的枝条。
(5) 检查病害检查刮治腐烂病、粗皮病等枝干病害, 刮后及时涂腐必治等药剂。
5. 休眠期
(1) 清理果园, 减少病虫越冬基数将园内杂草、落叶、病枝、病僵果等进行认真清理, 刮除树干及大枝老翘皮等, 深埋或烧毁, 轮纹病严重的地块, 要求在果树休眠季节用5°石硫合剂, 全园喷1遍杀菌剂, 铲除园内越冬病源。潜叶蛾发生严重的地块要特别注意扫清落叶。
(2) 浇防冻水12月上中旬封冻前浇防冻水, 灌水应充足, 便于果树安全越冬。
(3) 树干涂白为了防止果树冻害, 落叶后进行全园树干涂白。涂白剂配制方法是:生石灰6 kg, 食盐1 kg, 水18 kg。先用水将生石灰化开, 滤去残渣, 倒入已化开的食盐, 搅拌成浓糊状即可。
1、进入检验室后要随手关门，不允许在检验室或走廊内奔跑、玩笑，嘻戏，非本部门人员不得随便进出。
2、进入实验室人员不可移动、接触溶液,在不清楚物质的性质时，按危险品看待。
3、不允许在检验室内吃东西，喝饮料，抽烟。
4、禁止使用检验室的器皿盛装食物，也不要用茶杯、食具盛装药品，更不要用烧杯当茶具使用。
5、所用药品，标样，溶液都应有标签。绝对不要在容器内装入与标签不相符的物品。
6、在实验室工作的所有人员应保持高度注意，杜绝一切安全隐患。
7、开启易挥发液体试剂之前，先将试剂瓶放在自来水流中冷却几分钟。开启时瓶口不要对人，最好在通风的地方进行。
8、装过强腐蚀性、可燃性、有毒或易爆物品的器皿，应由操作者亲手洗净。
9、将玻璃棒、玻璃管，温度计等插入或拨出胶塞、胶管时均应垫有棉布，且不可强行插入或拨出以免折断刺伤人。
10、实验前应熟悉实验原理及注意事项，仔细检查仪器的安装是否良好。
11、实验中要集中精力按操作步骤进行，不要与人闲谈，使用分析仪器时严禁操作人员脱岗。
12、严格遵守检验设备标准操作规程。
13、用电应遵守安全用电规程。
14、检验室应具备有效的灭火器等消防器材，并应装在操作间门口附近，便于取用，并要定期检查，保持通道畅通。
15、每天下班前，应进行安全检查，离开时要关闭一切电源、水源，关好门窗，确保安全。
目录
第一章 体液标本的采集、运输、保存操作规程
一、尿液标本采集、运输、保存
二、脑脊液标本采集、运输、保存
三、浆膜腔积液标本采集、运输、保存
四、阴道分泌物标本采集、运输
五、分泌物革兰阴性双球菌检测标本采集、运输
六、精液标本采集、运输、保存
七、前列腺液标本采集、运输、保存
八、粪便采集、运输、保存
第二章
血液一般检验的标本采集、运输、保存操作规程
一、未梢血标本采集
二、静脉血采集、运输、保存
第三章
生化检验标本采集、运输、保存操作规程 第四章
免疫学检验标本采集、运输、保存操作规程
第五章
化学发光免疫分析项目标本采集、运输、保存操作规程 第六章
血气分析标本采集、运输、保存操作规程
第七章
凝血功能四项检测标本采集、运输、保存操作规程 第八章
微量元素检测标本采集、运输、保存操作规程 第九章
临床微生物学检验标本采集、运输、保存操作规程
第一节 尿液标本的采集、运输和保存
第二节 粪便标本的采集、运输和保存
第三节 上呼吸道标本的采集、运输和保存
第四节 痰标本的采集、运输和保存
第五节 化脓和创伤标本的采集、运输和保存
第六节 脑脊液标本的采集、运输和保存
第七节 胆汁标本的采集、运输和保存
第八节 胸水标本的采集、运输和保存
第九节 腹水标本的采集、运输和保存
第十节 生殖道标本的采集、运输和保存
第十一节 血液及骨髓标本的采集、运输和保存 第十章
液基薄层细胞学检查标本采集、运输、保存操作规程
前
言
在临床工作中，检验标本的分析结果是临床医生诊断疾病、制订治疗方案的重要依据，而标本采集及送检工作的合格与否直接影响检验结果的真实性，进而影响疾病的诊治工作。为了进一步提高检验结果的准确性和可靠性，除了要求检验科提高检验质量水平外，还要求临床医护人员正确采集标本。为确保标本的正确采集、运输和保存，检验科特编写了临床检验标本采集、运输、保存操作规程，要求医护人员严格按操作规程采集、运输和保存标本。
第一章 体液标本的采集、运输、保存操作规程
一、尿液标本采集、运输、保存
（一）检查项目
1．尿液干化学测定：尿液比重、pH 值、尿胆原、胆红素、潜血、酮体、蛋白质、白细胞、亚硝酸盐、葡萄糖、抗坏血酸。
2．尿液有形成份检测：包括红细胞及白细胞形态等。3．24小时尿总蛋白、尿肌酐、尿尿酸等。
4．其它：尿HCG、微量白蛋白、转铁蛋白、免疫球蛋白IgG、α1-微球蛋白、尿淀粉酶、尿蛋白酶原-
2、尿液红细胞显微镜形态分析。
（二）标本采集 【容器及采样量】
门诊病人由检验科提供专用塑料尿杯，采样量20-30ml。
住院病人使用清洁容器取尿，再将尿液倒入专用的试管内，量约5-10ml。
24小时尿液收集于清洁容器中，如小的带盖的塑料桶。【标本种类及适用人群或项目】（1）晨尿
即清晨起床后的第一次尿标本，为较浓缩和酸化的标本，血细胞、上皮细胞及管型等有形成分相对集中且保存得较好。
门诊患者可采集清晨第二次尿标本。
适用：住院病人、可疑或已知泌尿系统疾病的动态观察及早期妊娠试验等。（2）随机尿（随意一次尿）
即留取任何时间的尿液。本法留取方便，但易受饮食、运动、用药等影响，可使低浓度或病理临界浓度的物质和有形成分漏检，也可能出现饮食性糖尿或药物如维生素C等的干扰。
适用：门诊和急诊病人。（3）24h尿
于第当天8∶00 排空膀胱弃去此次尿液，然后收集至次日8∶00 全部尿液。在第一次尿液排到收集容器后，将10ml二甲苯防腐剂倒入容器中并摇匀。每升尿中加入10ml二甲苯。以后每次排尿到收集容器后均要摇匀尿液，并盖好盖，以防尿液蒸发。
尿液收集完毕，混匀，用量筒准确测量尿液毫升数，并记录在检验申请单上。用注射器针穿过防腐剂层抽取尿液10毫升，注入干净试管送检。
适用：24小时尿总蛋白、尿肌酐、尿尿酸及其它尿液化学成份定量检测。（4）其他
包括留取中段尿（女病人易受阴道分泌物污染，应采集中段尿）、导尿、耻骨上膀胱穿刺尿等。【注意事项】
（1）避免阴道分泌物、月经血、粪便等污染，女性病人应采集中段尿，尽量避免经期做尿常规检查；
（2）避免干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入；
（3）住院病人送检的标本要标上病人姓名，门诊病人的标本和检验申请单放在指定的标本收集盘上。
（4）尿标本采集后应避免强光照射，以免尿胆原等物质因光照分解或氧化而减少。
（三）标本运输及保存
标本采集后应尽快送检，1时内须送达检验科，2小时内完成检测。采集24小时尿液可不用防腐剂防腐，放4℃冰箱保存即可。
（四）拒收标准
细菌污染、样本量不足的标本拒收。
二、脑脊液标本采集、运输、保存
（一）检查项目
脑脊液常规、细菌培养、生化检查等。
（二）标本采集
脑脊液标本由医生采集。脑脊液采集一般用腰椎穿刺术（腰穿）获得，必要时用小脑延髓池穿刺术（池穿）或侧脑室穿刺术。
脑脊液应采集三管。第一管用于细菌培养（无菌操作），第二管用于常规检查，第三管用于生化检查。每管1-2毫升。蛋白浓度高时可用EDTA盐抗凝。样品管上应标明病人姓名，在检验申请单上注明采样时间。
（三）标本的运输及保存
脑脊液标本采集后应立即送检。用于微生物检验的标本应室温保存，不可置冰箱保存。
三、浆膜腔积液标本采集、运输、保存
（一）检查项目
浆膜腔积液常规、细胞学、细菌培养等检查。
（二）标本采集
由医生采集。经行胸腔穿刺术、腹腔穿刺术，心包腔及关节穿刺术采集标本。应采集三管，第一管用于细菌培养（无菌操作），第二管用于常规检查，第三管用于生化检查。每管2-20毫升。样品管上应标明病人姓名，在检验申请单上注明采样时间。
（三）标本的运送及保存
标本采集后立即送检。不能及时检测的标本放置4℃冰箱保存。用于微生物检验的标本应室温保存，不可置冰箱保存。
四、阴道分泌物标本采集、运输
（一）检查项目
阴道分泌物清洁度、真菌、滴虫、细菌性阴道炎检查等。
（二）标本采集
由临床医生采样。用无菌拭子从阴道后穹隆处取分泌物。所用窥阴器不可用润滑剂，只能用少量无菌等渗盐水润湿。采样后马上将样本放入洁净试管送检。
（三）标本的运输及保存
取样后应立刻送检。避免因放置时间太久影响滴虫活动力或虫体破坏，使检查结果受到影响。
五、分泌物革兰阴性双球菌检测标本采集、运输
（一）检查项目
分泌物找革兰阴性双球菌
（二）标本采集
1、尿道分泌物
①男性：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，采取从尿道口溢出的脓性分泌物，如无脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按摩，促使分泌物溢出，或用无菌男性拭子插入尿道内2～4厘米旋转取出分泌物。拭子置于干净试管内送检。
②女性：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，然后从阴道内诊压迫尿道，或从尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出，用无菌女性拭子采集分泌物。无肉眼
可见脓液时，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内，旋转拭子采集标本。拭子置于干净试管内送检。
2、阴道分泌物：用窥器扩张阴道，用无菌女性拭子采取阴道口内4厘米内侧壁或后穹隆处分泌物送检。拭子置于干净试管内送检。
3、宫颈分泌物：用窥器扩张阴道，先用无菌棉球擦去宫颈口分泌物，再用女性拭子插入宫颈管2厘米采取分泌物，转动并停留10～20秒钟，让拭子充分吸附分泌物，拭子置于干净试管内送检。
4、前列腺按摩液：用前列腺按摩法采集前列腺液。前列腺液滴于玻片上或试管内，立即送检。
5、精液：受检者应5天以上未排精。清洗尿道口，采用手淫法体外排精，射精于干净容器内送检。
6、溃疡分泌物：先用生理盐水清洗患处，用无菌棉拭子取其边缘或其基底部的分泌物，置干净试管内送检。
（三）标本的运输
采样后应及时送检，避免标本干结。
六、精液标本采集、运输、保存
（一）检查项目
精液常规检查，包括精液量、液化时间、酸碱度、精子总数、精子活动力、精子存活率、精子畸形率。
（二）标本采集 【采集前注意事项】
采集精液标本前必须禁欲。一般情况下，25 岁以下禁欲 3 天，25～35 岁禁欲 5 天，35～45 岁禁欲 7 天（禁欲亦包括无遗精手淫）。【容器及采样量】
收集精液标本的容器要求是清洁、干燥。可用一次性带盖塑料杯留取精液。收集排出的全部精液。【标本采集及注意事项】
精液标本一般由患者通过手淫法留取。将一次射出的全部精液直接排入清洁塑料杯内。不能用乳胶避孕套采集，因避孕套内含有的滑石粉会影响精子活力。
准确记录采集时间，并写在申请单的空白处。
（三）标本的运输及保存
精液标本留取后应立即送检。在运送过程中，标本温度应保持在 25～35℃。冬天运送标本时，最好将标本放在内衣口袋内保温，注意防止瓶子倒置。
（四）拒收标准
精液收集不全、被尿液污染、有溢漏、超过 2 小时送达的标本。
七、前列腺液标本采集、运输、保存
（一）检查项目
前列腺液常规检查。
（二）标本采集
由临床医生采用前列腺按摩术采集前列腺液于清洁玻片上或容器内。
（三）标本的运输及保存
要求立即送检，室温运输，不宜久置。
（四）拒收标准
久置干结的标本。
八、粪便采集、运输、保存
（一）检查项目
大便常规、大便潜血试验、大便找寄生虫、人类轮状病毒抗原检查。
（二）标本采集 【采集前注意事项】
医生应向患者讲清楚收集粪便标本前应禁止服用的食物和药物，化学法检测潜血禁止服铁剂，素食三天后留取标本。【标本容器及取样量】
容器：一次性带盖塑料便盒，标明患者姓名。采样量：取少量标本（指头大小）。【采集方法】
自然排便。选取有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常及粪便潜血检测标本须从表面、深处、粪端多处取材。
检查阿米巴滋养体时，应于排便后立即从脓血性或稀软部分取样，立即送检。检查蛲虫卵需用拭子于晚上12时或清晨排便前自肛门周围皱裂处取样，并立即送检。
注意避免尿液污染。住院病人标本盒上标明患者姓名，门诊病人标本与申请单一起放于标本收集盘内。
（三）标本的运输及保存
标本采集后要盖紧，室温下及时送检，1小时内完成检测。
（四）拒收标准
标本量不足、含有尿液的或送检时间超过1小时的标本拒收。
第二章
血液一般检验的标本采集、运输、保存操作规程
一、未梢血标本采集
（一）检查项目及适用人群：适用于门诊病人做血常规、C-反应蛋白、ABO和Rh血型、疟原虫检测等项目。
（二）操作步骤：
1.血常规：一般选择无名指，先用酒精棉球消毒，然后用一次性采血针穿刺，让血液自然流出，用消毒棉球轻拭去第一滴血后，将血液收集在0.5毫升离心管(EDTA-K2抗凝管)内，约0.2-0.4毫升，混匀，马上上机检测。
婴幼儿可自拇指或足跟两侧采血。烧伤患者可根据情况选用皮肤完整的肢体末端。采血部位应无炎症或水肿。末梢采血不可用力挤压。
2.C-反应蛋白：采集20微升指血放入专用的含定量稀释液的反应杯中。
3.ABO或Rh血型：采用玻片法检测。用未梢血涂片做血型鉴定。4.疟原虫检查：最好在寒战初期采血。用未梢血制成厚、薄涂片。
二、静脉血采集、运输、保存
（一）检验项目
血常规：标本用于上血细胞分析仪检测，项目包括白细胞计数及五分类、红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞体积分布宽度、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、平均红细胞体积、血小板计数、血小板体积分布宽度、血小板压积、网织红细胞计数与分类等。
交叉配血试验；ABO或Rh血型；红细胞沉降率（ESR）；血液粘度检查；NT-proBNP。
（二）标本采集
1．血常规、ABO或Rh血型、交叉配血试验、NT-proBNP：用含 EDTA-K2 抗凝剂的真空采血管采集2毫升静脉血，颠倒5-6次混匀；
2．红细胞沉降率（ESR）：用含枸橼酸盐抗凝剂的专用ESR真空采血管采集静脉血至两条采血量标识线之间，颠倒5-6次混匀.3.血液粘度检查: 一般宜清晨空腹安静状态下采血。血液粘度测定需同时抽取静脉血常规管、血沉管和肝素抗凝血（5ml）三份样本，颠倒5-6次混匀.4.静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码” ；门诊病人为“采血管上标明序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。
5.在检验申请单上写上采血时间.(三)标本运输及保存
静脉血液标本采集后应在2小时内送达检验科，4h内完成检测。室温下保存，不能及时检测的标本置4℃冰箱保存.(四)标本拒收标准
凡不按血量：抗凝剂比例抽血、从输液管抽血、明显脂血标本、明显溶血标本、有凝块、标识不清、抗凝剂不对及血量不足的标本一律拒收。
第三章
生化检验标本采集、运输、保存操作规程
一、检查项目
肝功能检查：总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基转氨酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、总胆汁酸(TBA)；
肾功能检查：尿素(UREA)、肌酐(CREA)、尿酸（UA）、β2-微球蛋白（β2-MG）、胱抑素C（Cys-C）；
心肌酶谱：乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、a-羟丁酸脱氢酶(HBDH)；
血脂检查：总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A1（APO-A1）、载脂蛋白B（APO-B）
糖尿病相关检测项目：葡萄糖（GLU）、糖化血红蛋白（HbA1c）、糖耐量试验；
电解质检测：钾（K）、钠（Na）、氯（Cl）、钙（Ca）、无机磷（Pi）、铁（Fe）；
心肌早期损伤三项：cTnI/Myo/CK-MB定性或定量（化学发光法）检测； 其它：淀粉酶、总铁结合力。
二、标本采集及注意事项
1．要求空腹 8-12小时后采静脉血，以早晨空腹为佳。应避免跑步、骑自行车、爬楼等剧烈运动。过度精神刺激和剧烈运动可使肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等不同程度升高。2．急诊病人查急诊项目可随机采血。
3．血脂检查要求抽血前3天保持正常饮食。采血前一天的晚餐应避免饮酒、高脂肪和高蛋白饮食。餐后采血容易出现“ 饮食性脂血”。饮酒可使TG、TC和HDL-C增高。
4．患者应取坐位或卧位静脉采血，止血带结扎时间应少于 1 分钟。禁止在输液管处或输液肢体同侧采血。
5．采血前应核对好姓名和检验项目，明确标本要求。
6．用含促凝剂的干燥管（生化管）或分离胶-促凝剂采血管采集静脉血标本（血糖和糖化血红蛋白标本除外），采血量4-5ml。
7.糖化血红蛋白（HbA1c）测定：不要求空腹，随机采血。用EDTA-K2抗凝管采集静脉血标本，采血量2毫升。采血后立即轻轻颠倒5-6次，使血液与抗凝剂充分混匀。
8．血糖测定：用含氟化物抗凝剂真空采血管采血2ml，颠倒5-6次混匀。9.糖耐量试验（OGTT）
（1）试验前每天碳水化合物摄入量不少于150g，有正常的体力活动至少3天。
（2）过夜空腹10－14小时。
（3）试验前禁用酒、咖啡、茶，保持情绪稳定。
（4）用含氟化物抗凝剂真空采血管采血2ml，颠倒5-6次混匀。
（5）上午8：30以前抽空腹血，然后饮用含75克葡萄糖的水250-300毫升,5分钟内饮完.（若空腹血糖＞15.0mmol/L或1型糖尿病，有酮症倾向者以100克面粉馒头替代，10-15分钟内吃完）。
（6）分别于饮糖水或吃完馒头后0.5小时、1小时、2小时、3小时各抽血一次，测定血糖值。
10．静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码”，门诊病人为“采血管上标明阿拉伯数字序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。
11．在检验申请单上写上采血时间。
三、标本的运输及保存
要求标本采集后及时送检。如标本不能及时检测，应放置 4℃冰箱保存。血糖管2-8℃冰箱保存可稳定48小时，其余项目可稳定3-7天。检测胆红素的标本应避光保存。
血清钾（K）/钠（Na）/氯（Cl）检测应在标本采集后1小时内送达检验科，2小时内完成检测。如不能及时检测，应离心分离血清后放置 4℃冰箱保存，可稳定24小时。
四、标本拒收
拒收明显溶血、乳糜血、血量不足、标识不清的标本。溶血标本不能用于检测钾、钠、氯。
第四章
免疫学检验标本采集、运输、保存操作规程
一、检查项目
免疫蛋白检查：补体（C3）、补体（C4）、免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）。
风湿三项：抗“0”溶血素（ASO）、类风湿因子（RF）、C-反应蛋白（CRP）；
肝炎系列：甲型肝炎病毒IgM（HAV-IgM）、乙肝5项（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb），丙型肝炎抗体（Anti-HCV），戊型肝炎抗体（Anti-HEV）；
优生优育五项（ToRCH）：弓形虫IgM、疯疹病毒IgM、巨细胞病毒IgM、单纯疱疹病毒1型IgM、单纯疱疹病毒2型IgM。
其它：梅毒螺旋体抗体检查（TRUST、TRUST滴度、TPPA）；人类免疫缺陷病毒抗体（Anti-HIV）；肺炎支原体抗体IgM；肥达氏试验和外斐氏试验。
二、标本采集及注意事项
1.患者不需特殊准备。用含促凝剂的干燥真空采血管采集静脉血，采血量 4-5ml。
2.静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码”，门诊病人为“采血管上标明阿拉伯数字序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。
3.在检验申请单上写上采血时间
三、标本的运输及保存
要求标本采集后及时送检，如标本不能及时检测，可放置 4℃冰箱保存，稳定 7天。
四、标本拒收
明显溶血、标本量不足、标识不清的标本。
第五章 化学发光免疫分析项目标本采集、运输、保存操作规程
一、检查项目
肿瘤筛查项目：甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、糖类蛋白抗原125（CA125）、人绒毛膜促性腺激素β亚单位（β-HCG）；
性激素六项：雌二醇（E2）、促黄体生成激素（LH）、促卵泡生成激素（FSH）、孕酮（P）、泌乳素（PRL）、睾酮（Testo）；
甲功五项：T3、T4、TSH、FT3、FT4；
贫血三项检验：维生素B12（VitB12）、铁蛋白（sFe）、叶酸（FA）； 糖尿病相关项目检验：胰岛素、C-肽； 骨疾病相关项目检验：甲状旁腺素（PTH）； 心梗三项：cTnI、Myo、CK-MB。
二、标本采集
1.静脉血标本采集前应避免运动。要求患者静坐休息15min 后再采血。用含促凝剂的干燥真空采血管采血，采血量4-5ml。
2.激素标本采集时机由开单医生根据临床需要决定，并由开单医生告知患者。
3．静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码”，门诊病人为“采血管上标明阿拉伯数字序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。4．在检验申请单上写上采血时间
三、标本的运输及保存
要求标本采集后及时送检，如标本当天不能检测，可放置 4℃冰箱保存，留待第二天检测。如果24小时内无法进行检测，可离心后分离血清置－20℃冰箱保存，可稳定7天。
四、标本拒收
明显溶血、标识不清、标本量不足的标本。
第六章
血气分析标本采集、运输、保存操作规程
一、检查项目
血气分析。
二、标本采集
【采集前注意事项】
1.受试者应保持情绪稳定。
2.如正在输氧，应在检验申请单上记录当时的氧流量。3.在检验申请单上记录病人当时的体温。【标本采集器材】
使用专用的干式肝素化血气分析采样器。【采集方法】
1．采集动脉血，量约1.0毫升。桡动脉最理想，其次为股动脉。采集时动脉血应随着动脉搏动顺利地流入针筒，否则可能将气泡带入采样器中，导致结果不准。
2．注意隔绝空气。采血后应即封闭针头。如针筒内有气泡，应将气泡排出后再封闭针头。
3．采样后应水平和垂直旋转混匀约1分钟，以免血液凝固。
三、标本的运输及保存
1、血气标本采集后必须密封隔离空气，10分钟内送达检验科。
2、如出现仪器故障等情况，导致标本不能在15min 内完成检测时，必须将标本置于0～4℃冰箱中保存，但保存时间不得超过60 分钟，因为标本放置30 分钟后PO2下降2%，60 分钟后约下降8%，pH 值也同时下降，PCO2 上升，白细胞高的标本（白血病）改变更明显。
四、标本拒收
标本没有隔离空气、有凝块、溶血、有气泡、标本量不足等拒收。
第七章 凝血功能四项检测标本采集、运输、保存操作规程
一、检查项目
凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量（FIB）、凝血酶时间（TT）。
二、标本采集及注意事项
1.用专用的含枸橼酸钠的真空采血管（内含0.2 ml抗凝剂）采集静脉血，枸橼酸钠是通过与血中钙离子螯合而起抗凝作用。
2.标本量=1.8ml静脉血+0.2 ml抗凝剂，要求标本量尽量控制在1.8－2.2 ml范围内。
3.采血后立即颠倒混匀5－6 次，避免用力振摇.4.止血带的压力要小；结扎时间要<1分钟；采血要尽量一针见血；不能在淤血部位采血；不要从输液管处采血；不要拍打采血部位；避免产生凝血、溶血、气泡和组织液污染；不要让患者反复做握拳动作。
5.在检验申请单上记录采样时间。
三、标本运送及保存
标本采集后应尽快送检验科。要求1小时内送达检验科，2小时内完成检测。如不能及时送检，标本存贮的条件和稳定时间为 ：2－8℃，＜4小时。标本放置时间过长，检测结果会受影响。
四、标本拒收标准
凡不按血量与抗凝剂比例采血、从输液管抽血、脂血标本、溶血标本、有凝块、抗凝剂不对、血量不足、标识不清、采样后至标本送达检验科时间超过2小时的一律拒收。
第八章
微量元素检测标本采集、运输、保存操作规程
一、检查项目
血铅、镉、铜、锌、镁、钙、铁、钠、钾。
二、标本采集前注意事项
1.病人准备：原则上要求早上空腹采血。
2.采血人员应经专门培训，知晓微量元素标本极易受到污染及技术操作要求。为保证检测结果准确，采血人员在采血过程中应按以下要求操作。
2.1采血时不要戴乳胶手套(对锌有污染)，可使用塑料手套，或不戴手套把手清洗干净。
2.2采血时彻底清洁穿刺部位的皮肤，用酒精清洁取血区皮肤。
2.3 保证采血场所的清洁，不要在采血室使用风扇降温。
2.4 用肝素抗凝管采集2－3ml静脉血，轻轻颠倒5-6次混匀，采血后不要开盖。
2.5 送检时将采血管口封严，以防渗漏。如不能及时送检，置于2-8℃冰箱保存。
三、标本采集
1．严格按照操作规程要求用碘酒、酒精清洁取血部位后采集静脉血，或用酒精清洁手指取血部位后采集未梢血；
2．成人用含肝素抗凝剂的采血管采集静脉血2-3毫升，立即颠倒5-6次混匀；婴幼儿采集未梢血40微升，立即加入到专用的标本稀释液，混匀。
3．标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上贴上采血管条码，注明标本采集时间等。
四、标本运输及保存
采集标本后应及时送达检验科。不能及时送检的标本应置4℃冰箱保存，可保存7天。
第九章
临床微生物学检验标本采集、运输和保存操作规程
第一节 尿液标本的采集、运输和保存
一、检查项目
尿液细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集
【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集标本。【采集容器】
无菌试管或无菌尿液标本留取容器。【标本采集】
1、一般采集晨起第一次尿液送检。
2、留取清洁中段尿标本：嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排去，接取中段尿约 10-20ml 于无菌容器中，立即送检.收到标本后1小时内接种。该方法简单、易行，是最常用的尿培养标
本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。
3、耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。
4、直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可减少尿液标本的污染，准确地反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。
5、留置导尿管收集尿液：利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液，操作时应防止混入消毒剂，不能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿管患者，应在更换新尿管时留取尿标本。6．标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本的运输及保存
标本采集后应立即送检。标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
四、拒收标准
1没有用指定容器保存的标本。标本量不够或者违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。
第二节 粪便标本的采集、运输和保存
一、检验项目
霍乱弧菌培养、沙门氏菌和志贺氏菌培养和鉴定、真菌培养及鉴定。
二、标本采集 【采集前注意事项】
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。做好并保持肛门部位清洁。【采集容器】
一次性无菌便盒，或无菌试管。【标本采集】 采集时间：应在急性期采样，以提高检出率。自然排便采集法：自然排便后，挑取有粘液脓血部位的粪便，标本量约花生米粒大小，液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内（约1-2ml）,或置于保存液或增菌液中送检。直肠拭子法：如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可采用直肠拭子方法采集，取出后置于灭菌容器内送检。
4．标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本的运输及保存
应立即送检。标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。
第三节 上呼吸道标本的采集、运输和保存
一、检验项目
上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【采样材料】
咽拭子或鼻咽拭子。【标本采集及注意事项】
1.采集时间：时间上无严格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，晨起后采集为佳。.标本采集：嘱患者用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，拭子要避免接触口腔和舌粘膜。.标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本的运输及保存
应立即送检。标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。
四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。
第四节 痰标本的采集、运输和保存
一、检查项目
痰液的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【采集容器】
一次性无菌留痰盒。【采集方法及注意事项】
1、以晨痰为好。多数病人清晨痰较多，易于采集。且清晨痰含有的病理成分较多，可增加培养的阳性率。
2、采集方法：
(1)自然咳痰法：咳痰前，先用清水或漱口液反复漱口（为减少口腔正常菌群污染标本），然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内（来自于下呼吸道分泌物）。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃ 10％NaCL水溶液，使
痰液易于排出。对咳痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽。合格的痰标本要求是镜下WBC>10个/LP，上皮细胞<25个/LP。
(2)气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。
(3)小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。
3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本运输及保存
采集后应立即送检。真菌培养的标本如不能及时送检，可放 4℃保存，以免杂菌生长。
标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。
四、拒收标准
1没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。
第五节 化脓和创伤标本的采集、运输和保存
一、检验项目
脓汁和创伤部位分泌物的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【采集容器材】
无菌拭子和无菌试管。【采集方法及注意事项】 开放性感染和已溃破的化脓灶：先用灭菌生理盐水冲洗表面的污染菌，用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。注意尽量取化脓组织与正常组织交界处 的脓汁，因为脓汁中心的细菌大部分已死亡，交接处的活菌较多，会提高阳性率。对于慢性感染，因污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织，研磨成组织匀浆接种于培养基。闭合性脓肿：一般采用穿刺或手术引流的方法采取.采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤。标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本运输及保存
应立即送检，如不能送检，应放 4℃保存，淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌培养的标本除外，后者应室温保存。
标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。
四、拒收标准
1没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。
第六节 脑脊液标本的采集、运输和保存
一、检验项目
脑脊液的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、墨汁染色查新型隐球菌、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【收集样本容器及采样量】
无菌试管或小瓶。如果用于检测细菌或病毒，脑脊液量应大于或等于1ml，如果用于检测真菌或抗酸杆菌，脑脊液量应大于或等于2ml。【采集方法】
用腰穿的方法采集脑脊液。
标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本运输及保存
收集标本后，室温下15分钟内送到检验科。脑脊液标本不可放冰箱保存，这样做会导致某些细菌死亡（如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和嗜血杆菌）。常温下可存放24小时。
标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。标本量不足或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。
第七节 胆汁标本的采集、运输和保存
一、检验项目
胆汁标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药1－2天后采集标本。如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【标本收集容器及采样量】
无菌试管或无菌容器。尽可能多采集标本，且不少于1ml。【采集方法】
1、采集时间：怀疑感染存在时,尽早采集。
2、用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，标本放入无菌试管或无菌容器内。
3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本运输及保存
应在室温下15分钟内送到检验科。在常温下标本可保存24小时。做真菌培养的标本如不能及时检验，应放4℃保存。
标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。标本量不足或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。
第八节 胸水标本的采集、运输和保存
一、检验项目
胸水的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药后1-2日采集。如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【标本收集容器及采样量】
无菌试管或无菌容器。尽可能多采集标本，且不少于1ml。【采集方法】
1、采集时间：怀疑感染存在时,尽早采集。
2、用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，并放入无菌试管或小瓶内。为防止凝固，可在试管中先加入灭菌肝素。
3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本运输及保存
应在室温下15分钟内送到检验科。标本在常温下可保存24小时。如果做真菌培养，只能放4℃保存。
标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
四、标本拒收标准 没有用指定容器保存的标本。标本量不够或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。
第九节 腹水标本的采集、运输和保存
一、检验项目
腹水的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药1－2天后采集标本。如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【收集容器及采样量】
无菌试管或无菌容器。尽可能收集多的标本，且不能少于1ml。【采集方法】
1、采集时间：怀疑感染存在时，尽早采集。
2、用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，放入无菌试管或无菌容器内。为防止凝固，可在试管中先加入灭菌肝素。
3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。
三、标本运输及保存
应在室温下15分钟内送到实验室。在室温下可保存24小时。如做真菌培养的标本不能及时检查，应放4℃保存。
标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
四、拒收标准
1没有用指定容器保存的标本。
2标本量不够或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。
第十节 生殖道标本的采集、运输和保存
一、检验项目
生殖道标本的细菌、真菌、淋球菌，解脲脲原体和人型支原体培养；沙眼衣原体抗原检查；淋球菌涂片；细菌性阴道病相关检测、真菌涂片。
二、标本采集 【采集前注意事项】
病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【标本采集器材】
无菌试管、无菌男性拭子、无菌女性拭子。【采集方法】
1.尿道分泌物
(1)男性：取样前至少1小时内不要小便。清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，用男性拭子采取从尿道口溢出的脓性分泌物或将男性拭子插入尿道内 2～4 厘米取出分泌物。如无脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按摩，促使分泌物溢出。当无肉眼可见的分泌物时，可将灭菌男性拭子轻轻深入尿道内2～4 厘米，转动并停留 10～20 秒钟采集标本。采样拭子置入灭菌试管内送检。
(2)女性：取样前至少1小时内不要小便。清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，然后经阴道内诊压迫尿道，或从尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出，用无菌女性拭子采样。无肉眼可见的分泌物时，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内，转动并停留 10～20 秒钟采集标本.采样拭子置入灭菌试管内送检。
2.巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后压迫腺体，使分泌物溢出，用无菌拭子采样。
3.阴道分泌物：用窥器扩张阴道，用灭菌女性拭子采取阴道口内 4 厘米内侧壁或后穹隆处分泌物。
4.宫颈分泌物：用窥器扩张阴道，先用无菌棉球擦除宫颈口分泌物，再用女性拭子插入宫颈管 2 厘米，转动并停留 10～20 秒钟，让拭子充分吸附分泌物，采样拭子置入灭菌试管内送检。
5.前列腺液：用前列腺按摩法采集前列腺液，标本置于灭菌容器内送检。6.精液：受检者应在 5 天内未排精。清洗尿道口，采用手淫法体外排精，精液置于灭菌容器内送检。
7.溃疡分泌物：先用生理盐水清洗患处，再用灭菌棉拭子取其边缘或其基底部的分泌物，标本置于灭菌试管内送检。.标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等信息。
三、标本运输及保存
标本应在室温下 15 分钟内送到检验科。
标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。
四、拒收标准
1.没有用指定容器保存的标本。.违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。
第十一节 血液及骨髓标本的采集、运输和保存
一、检查项目
血液、骨髓液的细菌培养。
二、标本采集
（一）血液标本采集
【采集前注意事项】
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。抽血过程中应严格遵循无菌操作规程。
【采集方法及注意事项】
1、采用BACT/ALERT 3D血培养仪配套血培养瓶收集标本。
2、防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。
2.1 培养瓶消毒程序
2.1.1 用 70％酒精消毒培养瓶橡皮塞子。2.1.2 酒精作用 60s,待干燥后使用。
2.1.3 在血液注入血培养瓶之前，先确认培养瓶盖酒精已经风干，否则应用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，再将血液注入培养瓶中。
在采血前，先消毒培养瓶盖，紧接着进行皮肤消毒。2.2 皮肤消毒程序： 严格按以下三步法进行
2.2.1 用70%酒精擦拭静脉穿刺部位,作用时间30s。
2.2.2 用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤，从穿刺点向外画圈消毒,消毒区域直径应达3cm 以上，碘酊作用 30s，碘伏作用 90s。
2.2.3 用70％酒精脱碘。对碘过敏的病人只能用 70%酒精消毒，作用60s。穿刺部位酒精挥发干燥后再行穿刺采血。
3、培养瓶接种程序
用无菌注射器抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，防止血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严防将空气注入厌氧瓶中。如采血量少于推荐血量时，应首先接种需氧瓶，剩余血量再接种厌氧瓶。
4、采血量及采血部位： 4.1 成人
4.1.1 现我院做法---“单臂1套”：单臂(单一静脉穿刺点)采集1份血样，分注到两个血培养瓶(需氧+厌氧，即1套)中，每个血培养瓶的血量为5～10ml（在此范围内，随着血量增加检出率相应提高）,总量为10～20ml。4.1.2 推荐做法-----“双臂2套”: 同时或短时间间隔（10分钟内）从双臂（两个不同穿刺点）采集2份血样，注入两套血培养瓶中，即从一个部位采集1份血样接种到1套培养瓶中，再从另一部位采血接种到另1套培养瓶中.4.2 儿童---“双臂2瓶”：一般只做需氧培养,特殊患者才考虑厌氧培养.同时采集2次(不同部位，如双上肢)血样，注入需氧瓶中（2个需氧瓶），每个培养瓶的血量为 2～5ml。
4.3 婴幼儿：一般只需做一瓶需氧瓶培养。
5、将血培养瓶上的条码撕下，粘贴在检验申请单上，将患者姓名写在血培养瓶标签的空白处。在申请单上注明采集时间和部位、每瓶注入血量、病人用药等信息。
【标本采集的时机】
1、采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，如已经使用抗菌药物者，应在下次用药之前采血培养,并选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。
2、对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前 0.5～1h 采集血液，或于寒战或发热后 1h 采集。因为发热时血液中可能没有细菌。
3、特殊情况的血培养，如导管相关性血流感染、感染性心内膜炎（间隔30分钟，连续采3套血培养）等可咨询微生物室工作人员。
（二）骨髓液标本采集
1、严格按照无菌操作规程进行；
2、采集部位：（1）髂后上棘最常用；（2）髂前上棘较安全。
3、采集量：以注射器抽吸骨髓液1.0ml送微生物培养。骨髓液抽取后应立即涂片，否则会很快凝固，使涂片失败。标本量不宜过多,以免被外周血稀释而影响结果.4、标本采集完成后应即密封。在标本容器上注明患者姓名，在检验申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等信息。
三、标本的运输及保存
血培养标本应尽快送往检验科。从标本采集到送达检验科不得超过2小时。如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放,因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，从而使培养阳性率下降。
骨髓标本采集后应尽快送至检验科。
四、拒收标准
血培养瓶标识与检验申请单不符、血培养瓶渗漏、破裂或明显污染、血液凝固。
第十章
液基薄层细胞学检查标本采集、运输和保存操作规程
一、检查项目
宫颈液基细胞学（TCT）检查。
二、标本采集 【采集前注意事项】
1、检查的最佳时间：绝经前的妇女，月经中后期是最理想，应避开经期。
2、检查前24小时勿用阴道药膏和冲洗阴道。
3、检查前48小时内禁止性交、盆浴和阴道检查。【采集方法】 步骤一：采样
取样应在直接观察下进行，先用阴道窥器保证宫颈完全暴露，擦净白带，使视野清晰。再将扫帚状取样器的中央刷毛伸入宫颈管内，周边刷毛到达子宫颈，同向旋转5-10圈。注意：手法宜轻柔，避免来回旋转，采样过程中，宫颈出血明显时，应立即停止采样。步骤二：漂洗
在装有TCT保存液的小瓶内漂洗扫帚状取样器。上下反复地将扫帚状取样器推入瓶底，迫使刷毛全部分散开来，共10次；最后，在溶液中快速地转动扫帚状取样器以进一步的将细胞标本保存下来，然后将取样器的宫颈刷头留在保存液中，将取样器柄扔掉。步骤三：保存
紧瓶盖，直到瓶盖与瓶体突出圆环密合。记录：将标识患者样本的条码以垂直于瓶口方向贴在瓶体上（方便扫描），并把患者姓名写在瓶子标签上；将患者的个人资料和病程简历填写在液基薄层细胞学检验申请单上，字迹工整，尽可能提供相关临床信息，后将另一张相同条码贴在申请单上。将标本保存瓶和申请单统一管理，以便送往实验室。
三、标本的运输及保存
采样后应即置细胞保存液中保存，放置室温，及时送检。
四、拒收标准
一、布局流程
1、设置在相对独立的区域，与母婴室邻近，周围环境安静、清洁，无污染源。
2、分医疗区和辅助区，医疗区包括分娩室（隔离分娩室）、待产室（隔离待产室）、治疗室，辅助区包括无菌物品存放间、洗手池、办公室、更衣室、产妇接收室、污物间、卫生间。
3、墙壁、地面、天花板无裂隙，表面光滑，便于清洁与消毒。
二、人员管理
1、医务人员，包括辅助人员上岗前应接受相关医院感染预防与控制基础知识培训。
2、医务人员患有皮疹、腹泻、呼吸道综合征及传染病等感染性疾病时应离岗或调岗。
3、严格参观、实习和陪产制度，最大限度地减少人员流动，认真执行出入管理要求，减少产房感染。
4、诊疗过程中应遵循标准预防的原则，有体液暴露危险时应戴防护面罩、穿防护围裙和防护鞋。
5、接生或助产前应按照手术人员要求进行外科手消毒、戴口罩帽子、穿无菌手术衣、戴无菌手套。连续接生时，在接生前重复外科洗手。
6、非本室人员未经许可不得进入产房，所有人员入产房前应做好手卫生。
三、环境管理
1、保持空气清新，每日通风至少2次，每次不能少于30分钟，通风不良时可安装空气净化消毒器。
2、每台分娩后应湿式擦拭地面及产床周围的各种物体表面，有明显污染时使用清洁剂或消毒剂擦拭。清洁用具专室专用，标示清楚，使用后分开清洗消毒晾干备用。
3、窗台、墙面定期湿式擦拭，有明显污染时使用清洁剂或消毒剂擦拭。
四、物品管理
1、产床上的所有织物均应一人一换，感染性疾病患者和明确感染性物质污染的织物应分开收集、标识明确。不应在产房内和走廊里清点脏污的织物。
2、接触患者的所有诊疗物品均应一用一消毒或灭菌。
3、脐部护理使用的辅料及脐包应无菌，并在有效期内使用。
4、备皮用具首选一次性物品，否则应采取有效的消毒处理方法。
5、接送产妇的平车保持清洁，隔离产妇使用后应立即消毒。
五、隔离管理
1、对有潜在传染性疾病的产妇，应隔离待产、隔离分娩。尽可能使用一次性物品，根据感染种类和医院隔离条例规定，进行产后的清洁和消毒；医护人员采取相应隔离措施。
2、分娩结束后房间应严格进行终末消毒处理。
SOP是为了有效地实施和完成药物非临床安全性研究中的每一个工作环节或操作所制定的详细、标准的书面规程[2]。SOP可保证各种实验设施和仪器设备等实验条件符合GLP标准, 使实验动物的饲养管理和仪器的使用保养等制度化, 确保各项技术保障系统达到新药临床研究质量管理要求。用SOP指导实验方案的制订和实施、数据的收集和处理、结果的分析和总结、资料的撰写和归档等项工作, 可以确保研究结果的准确性和可靠性[3]。SOP的使用和不断完善是质量体系成功与否的一个重要组成部分, 因为它对每一个操作的实施都提出要求, 以保证操作的正确性和一致性。事实上, 不仅在GLP中要求制定并执行SOP, 在新药临床试验 (Good Clinical Practice, GCP) , 中草药的种植 (Good Agricultural Practices, GAP) , 药品的生产 (Good Manufacturing Practice, GMP) 和销售 (Good Supplying Practice, GSP) , 以及其他多种工作中, 为确保各项操作的正确性和一致性, 也都需要制定并执行相应的SOP。因此把SOP的理念融入到新药研究与评价实验教学中, 对于学生从事科研工作乃至将来走上工作岗位都具有重要的意义, 如提高学生的科研素养, 保证科学研究结果的真实性、可靠性和完整性;使科研工作制度规范化, 使操作的变异性降至最低, 尽可能的避免和降低实验中的各种误差;使各岗各位各尽其责, 互相衔接, 默契配合, 确保实验顺利进行, 增加科学研究资料的可信度。
新药研究与评价实验教学中, 融入SOP理念, 对科研习惯、操作技能和科学作风的训练和养成有着重要意义, 主要采取了以下措施:
1 结合管理制度相关SOP培养学生良好的科研习惯
GLP实验室中的SOP有一部分属于管理范畴, 包括动物管理、供试品和试剂管理、仪器管理、业务管理等, 这部分内容的培训有助于培养学生的良好的科研习惯。如: (1) 实验动物管理区域废弃物管理标准操作规程”中规定尖锐物品 (如针头、刀片、载玻片等) , 采取防护措施包装后移交给学校实验动物垃圾站处理; (2) 每次实验使用后剩余供试品应进行废弃处理, 须将剩余供试品装入一个贴有标签的容器内, 标签上注明废弃供试品名称、有无毒害; (3) 动物组织、器官和尸体首先要统一收集, 然后定期交到专门处理尸体焚烧的部门。我们在带教学生用新斯的明作为供试品开展小鼠急性毒性试验时, 首先把此项SOP给学生明确讲解, 然后要求每个小组在实验结束后把用过的注射器的针头和针筒分开, 针头放入专用利器盒, 剩余的新斯的明倒入贴有“新斯的明、无毒”标签的容器中, 小鼠尸体用塑料袋严密封装, 课后由两名同学将这些生物垃圾送往校实验动物垃圾站处理。
“药物临床前研究原始资料记录标准操作规程”规定所有数据的记录应做到及时、直接、准确、清楚和不易消除, 并应注明记录日期, 记录者还需签名。记录的数据需要修改时, 应保持原记录清楚可辨, 并注明修改的理由及修改日期, 修改者签名。为了培养同学的科研作风, 实验课中的记录也按照以上SOP规定。实验记录不得使用铅笔, 用字要规范, 并且字迹工整。实验记录不能随意删除、修改或增减数据。如必须修改, 须在修改处划一斜线, 保证修改前记录能够辨认, 不可完全涂黑, 并注明修改时间及原因。对于实验数据修改的规定, 同学开始时明显不能适应, 因为许多同学在记笔记时已经养成用涂改液修改或全部涂黑的习惯。经过教员耐心讲解和多次训练, 同学理解了保留原有记录对于科学研究的重要意义, 逐渐培养了良好的原始记录书写习惯。
2 结合实验研究相关SOP培养学生熟练的操作技能
在GLP实验室, 有大量关于动物操作方面的SOP, 包括给药操作、样本采集、临床检测、溶液配制、动物抓捕等。针对新药研究与评价实验课的特点, 给学生重点培训了动物编号、小鼠抓捕、溶液配制和给药操作方面的内容。如在开展药物急性毒性试验教学时, 由于多数学生是第一次接触新药研究和评价实验, 对动物的编号、抓捕和给药方法均不熟悉, 尤其是尾静脉注射给药, 能成功把药物给到静脉的比例很低, 这样容易造成实验现场比较混乱, 实验结果常难以解释, 有时会出现最高剂量组死亡动物数比低剂量组还少的现象。分析原因多是因为没有将药物给到动物静脉中, 大部分药物给到了皮下或者干脆没有进入动物体内。针对这种情况, 我们对实验课程进行了调整, 首先进行实验动物基本操作技术的培训, 每个实验组单独分配了动物基本操作技术练习的实验动物, 先进行灌胃给药、腹腔注射给药、皮下注射给药和尾静脉注射给药等实验技能训练, 再进行急性毒性试验。经过培训后, 学生的基本操作技能明显进步, 给进药物的比例大幅提高, 实验结果也与预期结果基本相符。
实验过程中很多学生没在配制后的供试品容器上贴任何标签, 导致不同浓度的供试品混淆, 影响实验结果的判断。发现这个不足后, 我们将“供试品和对照品的标识标准操作规程”中的相关规定引入了教学过程, 要求学生用不同颜色的标签对供试品进行浓度区分, 标签上注明课题编号、品名、浓度、配制日期、有效期、储存条件和配制人。通过多次强调以后, 学生基本上养成了分类标记的习惯, 并把这种好习惯融入到了本科实习的全过程。
3 结合数据处理相关SOP培养学生严谨的科学作风
GLP的目的是组织和管理科学技术人员的研究行为, 促进科研人员提高实验数据的质量和有效性, 保障实验结果的可靠性、可重复性、可审核性和可被承认, 从而帮助科研人员避免假阴性或假阳性结果出现, 改善我国药品非临床研究存在的问题, 消除新药研究的某些隐患, 保证人民用药安全[4]。GLP中的众多理念, 体现在相关的SOP中, 如动物随机分组标准操作规程、试验数据分析及综合评价标准操作规程、试验结果统计处理及评定标准操作规程、试验指标统计分析及数据处理标准操作规程。把这些SOP引入到实验教学中, 有利于培养学生科学严谨的作风和求真务实的态度。如在急性毒性试验中, 我们按照“动物分组方法标准操作规程”中的规定严格要求学生对小鼠按体质量随机分组, 而不是随便分组, 确保受试动物完全随机地分配到各个处理组。我们还按照“急性毒性试验数据分析及综合评价标准操作规程”中的规定要求学生严格根据所观察到的各种反应出现的时间、严重程度、持续时间等, 分析各种反应在不同剂量时的发生率、严重程度, 根据观察结果归纳分析, 判断每种反应的剂量-反应及时间-反应关系, 根据不同剂量组各种毒性反应及发生率、动物死亡情况等, 确定动物对受试物的无毒性反应剂量和严重毒性反应剂量, 最后还需说明所使用的计算方法和统计学方法, 提供所选用方法合理性的依据。经过训练, 大部分学生最后都能得到一个比较合理的半数致死量值和一份比较真实可靠的急性毒性结果。
4 结语
SOP在新药研发中占据非常重要的地位, 充分发挥SOP在GLP规范化管理过程中的作用, 是确保GLP实验操作一致性和准确性的主要手段, 从而确保研究结果的真实性和可靠性, 确保药物临床前安全性评价的质量, 保障上市药物的安全。通过把SOP理念有效融入实验教学, 学生不但掌握了基本的操作技能, 还培养了良好的科研作风, 为今后在科研工作中提高实验数据的准确性和有效性奠定基础。
参考文献
[1]张晓冬, 毛煜, 郑杰民, 等.运用信息化技术提升新药研究与评价教学[J].山西医科大学学报:基础医学教育版, 2009, 11 (6) :770-771.
[2]袁伯俊, 廖明阳, 李波.药物毒理学实验方法与技术[M].北京:化学工业出版社, 2007:178-189.
[3]陆国才、袁伯俊.新药研究与评价[M].上海:第二军医大学出版社, 2011:108-118.
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