克隆论文(精选9篇)
于是,他想着,他如果能克隆,就一定要克隆出他的母亲,一个上班,一个陪伴在他身边。虽然他没因失去母爱而颓废,却为失去母爱而伤悲;虽然他没因失去母爱而自暴自弃,却为失去母爱而忧伤。他虽然不是折翼的天使,却是独脚的稚鹰,要停得稳就只能比别人更辛苦、更努力。
没有什么爱比母爱更重要,没有了母爱,就像幼苗没了春雨的抚摸,所以,他想着,他如果能克隆,就一定要克隆出他的母亲。这就是母爱的力量,给你信心,给你力量,让你留恋。
乌托邦的生活虽然一切井井有条,但自然和自由更令人向往。所有基地的居民都盼望着一个抽签的机会,幸运者将被送到星球上最后一个未被污染的地方,即一个叫“The Island”的世外桃源。而这一次,获得这个机会的是林肯6-E的女朋友,美丽的乔丹2-D。
由于基地管理者的疏忽, 一只外面世界的飞蛾飞进了这座封闭已久的地下城市,它的出现令林肯6-E疑窦顿生,因为按照基地管理者的说法,所有的生物都在核战中灭绝了。在飞蛾的带领下,林肯6-E来到了基地的中心,在那里,他看到自己从前被选中前往“The Island”的朋友斯塔克威泽。基地的科学家正为斯塔克威泽施行手术,他的器官被取出送出基地。至此,林肯6-E终于明白:自己的生活其实是一个巨大的谎言,他们都是被克隆组织控制的克隆人,他们存在的意义只是为本体提供新鲜健康的器官,他们死后的价值远比生前更高。
得知真相的林肯6-E带着乔丹2-D逃离基地, 进入他们从未涉足的现实生活之中。他要前往洛杉矶找到自己的本体,解开关于自己身世的最后的秘密。而此时,国家特工和基地组织的杀手已将他们锁定为最危险的目标,一场猎杀和抗争、追逐与逃脱拉开了序幕……林肯6-E与乔丹2-D只有一个目标,那就是活下去……
(选自豆瓣电影,本刊有删改)
鉴赏空间
这是一部科幻电影,它不禁使我们想起《奇妙的克隆》结尾处所说的:“科技进步是一首悲喜交集的进行曲。科技越发展,对社会的渗透越广泛深入,就越有可能引起许多有关的伦理、道德和法律等问题。”如果有一天真的可以克隆人,那会是一个怎样的情景呢? 我们该如何对待克隆人呢?
[读有所思]
也许有不少人对克罗恩病这个名词很陌生。克罗恩病英文名为Crohn‘s diease,过去将发现此病的医生名字Crohn译为“克隆”,故称为克隆病,近两年来,国内专家为了避免与生物工程技术的克隆相混淆,将其改称为克罗恩病。原先认为克罗恩病较多见于欧美国家,亚洲国家少见,但是近年来发现克罗恩病在我国呈明显增多趋势。
克罗恩病是一种病因尚未明确的慢性肠道炎性肉芽肿性疾病,俗称“烂肠子”。病变可侵犯消化道的任何一个部位,但以回肠末端、结肠、肛门、直肠等部位多见。本病多见于20~30岁,女性略多于男性。有资料报道,克罗恩病在社会经济地位较高的人群、少动和室内工作的人群中发生率较高,也有专家认为克罗恩病与吸烟有一定关系,但到目前为止,克罗恩病的病因和发病机制仍不十分清楚。
克罗恩病患者一般有以下症状:①腹痛,且呈痉挛性阵痛,反复发作,进餐后疼痛加重,排便后暂时缓解。②发热、腹泻,有时还有右下腹痛,甚至自己可摸到包块,容易被误诊为阑尾炎而行手术治疗。③有时还伴有顽固性肛裂,肛门直肠周围瘘管、脓肿形成。病变较重者可出现肠穿孔、肠梗阻等。④病程较长者还可出现贫血、营养障碍,儿童可出现生长发育迟缓。⑤少数患者伴有骨关节炎、骨质疏松症、肝脾肿大、肝功能异常、慢性胆管炎、慢性肾炎等。因此,一旦出现上述症状,建议患者应立即到大医院的消化专科门诊进行彻底检查,尽快明确诊断。目前最可靠的检查方法是结肠镜检查,此外,X线检查也是协助诊断的重要手段之一。
克罗恩病迄今缺乏有效的治疗方法,但如能尽早明确诊断、及时用药,大多数患者可以明显缓解症状。目前,首选的药物有水杨酸偶氮磺胺吡啶(简称SASP)或5-氨基水杨酸以及类固醇激素,如泼尼松等。若经上述药物治疗无效,还可选用免疫抑制剂,如硫唑嘌呤(又称依木兰)。据国外报道,还有一种抗肿瘤坏死因子的单克隆抗体对该病也有较好疗效。克罗恩病的基本治疗主要依靠内科治疗(包括药物、营养支持疗法等),但有时也需外科手术,手术目的主要是解除肠梗阻、治疗腹腔内脓肿、难治性瘘或窦道等,但手术后仍需内科维持治疗,防止复发和并发症。十多年来,我们对克罗恩病的治疗坚持采用内科和外科相结合、个体化的治疗原则,使许多重危患者的病情得到了控制和长期缓解。
佐匹克隆常规剂量具有镇静催眠和肌肉松弛作用。其作用于苯二氮卓受体,但结合方式不同于苯二氮卓类药物。佐匹克隆是安全性较高的催眠药,能延长睡眠时间,提高睡眠质量,减少夜间觉醒和早醒次数。特点为次晨残余作用低。那么,要注意的是佐匹克隆片不可长期服用。
佐匹克隆片可以长期服用吗?治疗失眠佐匹克隆片是许多患者寻求多的治疗方法,但女性长期使用,会引起月经不调,并影响排卵;怀孕的初期服用佐匹克隆片,可能引起胎儿先天性畸形。
慢性肾上腺功能不全症患者,服用本品时,可能促发肾上腺危象。重症睡眠呼吸暂停综合症不宜服用佐匹克隆片,因为佐匹克隆片具有抑制呼吸中枢的作用,可促使呼吸变浅、次数减少,从而加重缺氧反应。
专家建议,治疗失眠长期服用佐匹克隆片对身体可能产生较大副作用,可以服用百艺舒中药逐渐减停,先共同吃段时间,当睡眠达到七个小时,睡眠质量满意后,再将佐匹克隆一次停1/4片,半个月为一个周期逐渐减停,大概坚持了小半年吧,就彻底把吃了几年的佐匹克隆停掉了,而且一直睡得很好很甜。
佐匹克隆迅速由血管分布至全身,分布容积为100L。血浆蛋白结合率均为45%,消除半衰期约5小时。连续多次给药无蓄积作用。本品在体内广泛代谢(主要是经P450酶系统生物转化),主要代谢产物为N-氧化物(对动物有药理活性)和N-脱甲基物(无活性)。代谢物主要经肺脏排出(约占剂量50%),其余由尿液排出。仅剂量的4~5%以原料随尿排出。老年人半衰期约7小时。肝硬变者因脱甲基作用减慢,血浆消除能力明显降低,应调整剂量。
但是要切记,佐匹克隆不可长期服用。因为长期服用,体内会产生抗体,令药物不易被身体吸收。偶见思睡、口苦、口干、肌无力、遗忘、醉态,极少数人出现异常的易恐、好斗、易受刺激或精神错乱、头痛、乏力,但大多较轻微。
教学目标:
知识目标:
1、学习阅读科普文章,了解克隆知识。
2、初步了解一些说明文的知识,掌握有条理地说明事物和举例说明的方法。
3、能正确、流利、有感情地朗读课文。
4、学会本课生字,理解由生字组成的词语 能力目标:
1、整体感知课文,能按照要求概括文章要点,逐步提高学生阅读科普文章的能力。
2、理清文章的说明顺序,探究事理说明文的写作技巧,引导学生有条理地说明事理。
3、揣摩语言,体会本文语言准确严谨、生动优美的特点,增强语言感悟力,并学习
运用生动的语言说明事物。情感、态度、价值观目标:
了解克隆技术的发展、成就和意义,激发学生勤于思考、热爱科学的情操。
教学重难点:
1、体会“克隆”的含义及其奇妙。
2、了解克隆技术的发展、成就和意义,激发学生勤于思考、热爱科学。
教学时间:2课时
教学过程:
第一课时
一、激发兴趣,导入新课。
1、导入:我的导语是这样设计的:假如你是球迷,你肯定希望世上再多一个罗纳尔多;假如你是音乐爱好者,你当然愿意再拥有一个帕瓦罗蒂;再有一个爱迪生、爱因斯坦也是许多人所梦想的。古希腊有位哲学家曾经说过“世上不可能有两片相同的叶子”,换句话,以上的梦想都只能是空想,没有实现的可能。但是,现在情况却有了变化,有一种新兴生物技术“克隆”,或许可以做到这一点。那么,克隆是什么呢?它奇妙在哪里呢?今天,就让我们一起走进“奇妙的克隆”
2、看课题,同学们有什么问题?(克隆是什么,奇妙在哪里,克隆有什么作用?)
二、初读课文,理清层次
1、读准宇音,认清生字字形,读顺每句话,把全文读通。
雌性 卓有成效 濒临灭绝 例如
马铃薯 嫁接 濒危 细菌 饲养 效率 诱人
2、自读课文,理解课文是按照什么顺序来介绍克隆的。(分析课文层次)1-2 介绍什么叫做克隆
3-5 分类介绍自然界的克隆现象 6-9 克隆技术诱人的前景
三、精读课文,分析理解 1-2自然段
1、默读第一自然段:什么是克隆?文中是怎样说明的? 神话引入、下定义(介绍说明方法,区分说明方法和修辞手法)
2、怎样读第一自然段,谁来试试?
3、默读第二自然段,边读边画出写动物的“有性繁殖”“无性繁殖”的句子,它们有什么区别?你是怎么理解的?小组交流,汇报。
理解有性生殖和无性生殖(老师图画表示)第二课时
一、复习引入
课文主要写了什么?按照怎样的顺序介绍克隆的? 读一读一二自然段。
二、精读课文 3-5自然段
①介绍了哪几类事物具有先天克隆的本领? ②学生挑自己喜欢的分类介绍:
植物: 文中介绍了哪几种植物的克隆
你读懂了省略号了吗?你能再举些例子吗?
植物有哪几种克隆方法?(扦插、分根、压条、嫁接)
单细胞微生物:繁衍快、数目多
高等动物:
1、注意开头的设问句
2、高等动物可不可以克隆呢?自读第五自然段,你读懂了什么?
3、第一只克隆羊叫什么?名字是怎样得来的?“多利”的诞生有什么意义 6-9自然段
1、克隆技术是怎样造福人类的?你读懂了什么?除书上的,你还了解哪些?(小组讨论交流)
从“„„可以„„也可以„„”体会克隆技术在培育优质、高产的粮食、蔬菜新品种,培育品质优良的家畜等方面的重要意义。
从“„„还可以„„,从而„„”体会克隆在保护生态方面的重要意义。
从“„„能够„„能够„„,一旦„„就能„„”体会克隆技术在医学上的意义。
2、教师引读
克隆技术正向人类展示它诱人的前景,那么,它在哪些方面,有什么样诱人的前景呢?请你联系生活实际,发挥想像。(小组讨论交流,再在全班交流)
三、总结课文,了解说明方法
1、齐读全文:课文写了什么,按照什么顺序写的?用了什么说明方法?
2、读了课文,你有什么想法?
师:克隆技术造福于人类,这是科学家们的巨大贡献,我们要学习科学家勤于思考,热爱科学的精神。
四、作业
练笔:以《假如我被克隆了》为题写一篇作文 板书设计
神奇的克隆
克隆是什么 神话 无性生殖
↓
事物的克隆技术
植物
单细胞微生物
高等动物
↓
造福人类
食物 畜牧 生态 医学
学科学
↓
教学目标:
1、能正确、流利地朗读课文。
2、学会本课生字,能够认读绿线格内的生字,理解由生字组成的词语。
3、了解克隆技术的发展、成就和意义,培养学生勤于思考、热爱科学的精神。
教学重点与难点:
1、了解“克隆”是什么以及克隆技术对人类的作用,培养学生勤于思考、热爱科学的精神。
2、初步了解说明文的一些基本写作特点。教学准备:
1、教学课件。
2、有关克隆的资料。
3、课前预习:画不懂的词语,联系上下文或借助工具书了解它们的意思,仍然不懂的请做上记号。教学课时: 两课时
第一课时
课时目标:
1、能正确、流利地朗读课文。
2、学会本课生字,能够认读绿线格内的生字,初步理解生词。
3、初步了解课文内容,知道文章从哪几个方面来介绍克隆的。教学过程:
一、谈话引入:
1、同学们,你们喜欢看动画片吗?你们喜欢看哪些动画片呀?(让学生自由发言,然后引出《西游记》),你们喜欢《西游记》中哪些人物?(自由发言),你们喜欢孙悟空吗?他有哪些本事?孙悟空可真神了,一根毫毛就变出了许多小孙悟空来。这是多么神奇有趣啊!这个神话引发了人类复制自身的幻想,孙悟空能复制自身的本领,就是现代科技领域研究的“克隆”(板书“克隆”)。
2、克隆技术到底是怎样的技术?真的像神话中描绘的那么“神奇”吗?(今天,我们就来学习——教师板书课题:神奇的克隆)
3、从课题看,“神奇”是什么意思呀?(非常奇妙)那么克隆技术到底奇妙在哪里?认真阅读课文之后,我们应该能够找到答案。
二、初学课文
1、自由读文,要求:
(1)读准字音,看清字形;(2)读顺句子,读通课文。
2、检查自读:
(1)指名分段读文,达到读通读顺;
(2)指名板演“薯”、“率”,检查对生字的识记(其他同学描红生字,加强识记效果)。
(3)检查,朗读生词: 马铃薯 嫁接 细菌 饲养 效率 诱人 雌性 濒危 卓有成效
3、默读课文:要求:画出不懂或有疑问的词句,联系上下文或查找工具书试着自己解决,如自己解决不了的做上记号。
4、归纳汇总学生提出的有价值的问题,联系读文、生活,借助工具书解决问题。
三、理清层次,初探写作顺序。
1、读课文,想想,课文围绕“克隆”写了哪几方面内容?
克隆是什么、克隆羊“多利”的意义和克隆技术造福人类
2、交流。
第一段(1-2)介绍了什么叫做克隆。指名说说什么叫做克隆。
第二段(3-5)分类介绍自然界的克隆现象。指名说说自然界中有哪些克隆现象。
第三段(6-9)神奇的克隆技术正向人类展示它诱人的前景。指名说说哪些
四、学习第1、2自然段。
1、自读第1、2自然段,想想,什么叫克隆?
2、交流。
结合第2自然段的相关句子,体会无性繁殖与有性繁殖,并知道无性繁殖就是克隆。
(在这里相机介绍说明方法:下定义)
3、朗读第1、2自然段。
五、指导书写生字
1.独立观察并书写1-2个字。2.(投影)自我展示,自我评价。3.钢笔描红、临写,教师巡视指导
六、作业
1、看拼音写词语
kâ lïng fán zhí xiān tiān jià jiē hōng dîng
()()()()()jiā chù sì yǎng xiào lǜ zhuāng pâi yîu rãn()()()()()
2、比一比再组词。
诱()
例()
饲()
薯()透()
列()
伺()
暑()
3、留心生活,观察身边的人或事物,如果你会克隆,你觉得你能做点什么?
第二课时 课时目标:
1、能正确、流利地朗读课文。
2、理解“嫁接、诱人、例如”等生词。
3、了解克隆技术的发展、成就和意义,培养学生勤于思考、热爱科学的精神。教学过程:
一、复习导入:
1、看拼音写词语,集体订正。
2、什么叫克隆?
二、精读课文:
过渡:本文原来的题目叫克隆之谜,但是编者却更名为“神奇的克隆”。这节课咱们就来走进课文,看看这克隆如何神奇。自己读课文3--9自然段,边读边想,你从哪儿感受到了克隆的神奇。(可以把你的想法简要的写在书上)交流重点:
(一)第3、4自然段:
1、扣住中心句“植物都有先天克隆的本领”,说说文中介绍了哪几种植物的克隆?(渗透说明方法:举例子)结合省略号再举些例子。植物:扦插 压条 嫁接
(相机补充葡萄、桂花、桃树等植物的克隆方式。)
b、低等生物:分裂(补充视频,感受细菌的分裂繁殖)看着不太舒服,但读文字还好,谁来读一读。齐读。
(二)第5自然段:
1、高等动物的克隆很神奇。
克隆多利的方法很复杂,但说白了,就是用一只羊身上的一个细胞培育成一只羊。小羊多利是世界上第一个利用体细胞克隆成功的动物。它被美国《科学》杂志评为1997年世界十大科技进步的第一项。科学家们普遍认为,多莉的诞生标志着生物技术新时代来临。继多莉出现后,克隆,这个科学术语变得广为人知。克隆猪、克隆猴、克隆牛„„纷纷问世,似乎一夜之间,克隆时代已来到人们眼前。
(三)第6-8自然段:
1、克隆的神奇还表现在它能造福人类。
2、交流。
a、优质高产的粮食蔬菜 优良的家畜。
(补充微型莲藕:取下一片小小的莲藕藕尖,运用克隆技术,两年内可培育出200支微型种藕,按传统方式,每亩藕地用种量达200公斤,而采用克隆种藕,每亩仅需50公斤,易于运输并且不带病毒。)b、挽救濒危物种。(欧洲盘羊 野牛 熊猫)c、医学上:植皮,制造人体“配件”——器官
除书上的,你还了解哪些?(小组讨论交流搜集的资料)
3、教师引读
(四)学习第九自然段:
师:克隆技术正向人类展示它诱人的前景。“诱人”什么意思?
三、写话练习:假如你会克隆,你想克隆什么?为什么?
四、读了课文,你有什么想法?
师:克隆技术造福于人类,这是科学家们的巨大贡献,我们要学习科学家勤于思考,热爱科学的精神。
五、作业设计:
1、在括号里填上合适的词语。
()的克隆
()的成就
造福()()的研究
()的技术
提高()()的前景
()的动物
利用()
2、根据课文内容把四字词语补充完整。
()()关头 一()一()繁殖()()一()()二()()成效 品()优()濒危()()免()()运
3、根据课文内容填空。
1)克隆也叫____,也就是不经过____直接繁衍后代。它是一项可以造福于______的科技成果。课文先写__________,接着写________,最后写________________。
2)许多植物都有先天克隆的本领:例如______;_____„„ 3)_____年,____国科学家成功地克隆出了世界第一只克隆羊,名字叫_________。
4、写话练习。
如果你掌握了克隆技术,你想克隆什么来造福人类?为什么?
板书设计:神奇的克隆
植物 下定义
低等生物 举例
大多数病毒复制时会产生dsRNA,dsRNA能被TLR3有效识别,随后通过信号传导途径诱导核因子NF-kB转位和干扰素IFN-α、IFN-β表达,促进前炎症因子及辅助刺激因子释放,调节机体细胞非特异性防御反应[9]。研究发现, TLR3基因沉默直接影响鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上复制及释放,这从翻译水平证实鸡Toll样受体3(chTLR3)参与IBDV感染CEF的免疫过程[10]。因此,研究chTLR3基因的结构和功能对揭示鸡重要传染病的发生和传播机制以及天然免疫的调理机理具有重要意义。 本研究通过对chTLR3参考序列基因组进行预测,从雏鸡法氏囊中克隆出TLR3胞外区主要功能区域基因片段,并制备多克隆抗体,为近一步研究chTLR3的结构和功能,以及阐明其参与禽类免疫反应机制提供重要的物质基础。
1 材料
1.1 菌株、载体和试验动物
大肠杆菌菌株JM109、Rossata(DE3)及pET30a(+)载体,由东北农业大学动物医学学院病理解剖实验室保存;纯种雄性新西兰大白兔,购自某实验动物中心;雏鸡,购自某饲养场。
1.2 主要试剂
M-MLV反转录酶、Taq DNA聚合酶、限制性内切酶,购自宝生物工程(大连)有限公司;辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG,购自北京中衫金桥生物技术有限公司;其他试剂均为国产分析纯。
1.3 标准参照物
DL-2 000 Marker、蛋白质Marker,购自宝生物工程(大连)有限公司;Trans 2K PlusⅡ DNA Marker,购自北京全式金生物技术有限公司。
2 方法
2.1 雏鸡法氏囊组织中总RNA的提取
用Trizol法提取雏鸡法氏囊组织总RNA,反转录合成cDNA,-20 ℃保存,备用。
2.2 重组质粒pET30a-chTLR3的构建和鉴定
根据已发表的chTLR3基因mRNA序列(GenBank登录号为NM_001011691),用Oligo 6.0软件设计1对特异性引物扩增chTLR3基因,上游引物为5′-GGGGGATATCTTATCAGACACAGCAATTCAGA
ACC-3′(下画线处为EcoRⅤ酶切位点),下游引物为5′-GGGGCTCGAGTTATATCAAAATGCAACACCAGAGTA CC-3′(下画线处为XhoⅠ酶切位点),预计扩增片段长1 317 bp,引物由哈尔滨博仕生物技术有限公司合成。以反转录的cDNA为模板,进行chTLR3的RT-PCR扩增,反应体系:cDNA 2 μL、上下游引物各 0.5 μL、dNTP 2 μL、10×PCR Buffer 2.5 μL、rTaq酶0.5 μL,用超纯水补足25 μL。反应条件:94 ℃ 5 min;94 ℃ 1 min,53.3 ℃ 1 min,72 ℃ 1 min,共30个循环; 72 ℃再延伸 10 min,并用0.1 g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR结果。将PCR产物和pET 30a(+)载体同时用EcoRⅤ、XhoⅠ进行双酶切;采用凝胶回收,将酶切chTLR3片段和载体按照4∶1比例混合,加入T4连接酶,16 ℃连接过夜;连接产物转化至大肠杆菌JM109感受态细胞中,挑取单个菌落培养12~15 h;提取质粒,进行PCR以及双酶切鉴定;将鉴定为阳性的重组质粒命名为pET30a-chTLR3,并对质粒进行测序鉴定。
2.3 重组蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化
将重组质粒转化至大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞中,挑取经PCR和双酶切鉴定均正确的单个阳性菌落,接种在含50 μg/mL 卡那霉素的LB液体培养液中,37 ℃ 振荡培养至OD600值达到0.6~0.8 时,加入诱导剂IPTG至终浓度为1 mmol/L进行诱导表达;诱导表达 0,1,2,3,4,5,6小时时取菌夜1 mL,离心取菌体,加入SDS-PAGE上样缓冲液混匀煮沸10 min进行SDS-PAGE鉴定;6 h后收集离心后的菌体,用PBS重悬后超声破碎,离心;分别取上清液和沉淀进行SDS-PAGE鉴定,分析目的蛋白是以可溶性还是包涵体形式存在。重组蛋白的纯化采用切胶纯化的方法,对适量包涵体进行还原型SDS-PAGE鉴定,电泳结束后取下凝胶,在预冷的0.25 mol/L KCl溶液中浸泡10 min,蛋白条带呈乳白色,准确切割下含有融合蛋白样品的凝胶;研碎凝胶加入 0.01 mol/L PBS(pH值为7.5)使之充分溶解,混匀后反复冻融3次;高速离心,吸取上清液后-20 ℃ 保存,备用。对纯化后的蛋白进行SDS-PAGE鉴定。
2.4 试验动物的免疫、多克隆抗体的制备
健康新西兰大白兔饲养1周后进行首次免疫。首免剂量为 2 mg纯化后的重组蛋白,与等体积弗氏完全佐剂完全乳化后皮下多点注射。2周后进行第2次免疫,免疫剂量为1 mg纯化后的重组蛋白,与等体积弗氏不完全佐剂完全乳化后皮下多点注射。此后每隔1周免疫1次,剂量与方法同第2次免疫。4免后第4天耳缘静脉采血,检测抗体效价。抗体效价达到一定数值后进行加强免疫,免疫剂量为1 mg纯化后的重组蛋白,耳缘静脉注射。加强免疫后第7天,颈动脉采血,离心制备血清,分装后于-20 ℃保存。
2.5 兔抗chTLR3多克隆抗体效价及特异性检测
2.5.1 间接ELISA方法测定多克隆抗体效价
用重组蛋白包被ELISA板,1 μg/孔,于4 ℃过夜;应用PBST配制5 % 脱脂乳,37 ℃封闭2 h,PBST洗涤3次;将兔抗chTLR3多克隆抗体按照1∶2的比例稀释,37 ℃ 孵育1 h,PBST洗涤3次;以羊抗兔IgG/HRP作为二抗,37 ℃孵育45 min,PBST洗涤3次后加入邻苯二胺(OPD)避光显色;最后加硫酸终止反应,应用酶标仪在波长为490 nm处读取OD490值。
2.5.2 Western-blot 检测多克隆抗体特异性
融合蛋白经SDS-PAGE分析后,使用电转槽将凝胶以15 V电压30 min电转移至NC膜上,5 % 脱脂乳室温封闭1 h,TBST洗涤3次;以制备的多克隆抗体作为一抗(按照1∶800比例稀释),室温孵育1 h,TBST洗涤3次;以羊抗兔IgG/HRP作为二抗(按照1∶1 000比例稀释),室温孵育1 h,TBST洗涤3次;四氯萘酚显色。
2.5.3 PVAX-chTLR3重组质粒构建及体外瞬时转染表达检测多克隆抗体特异性
用Oligo 6.0软件设计1对特异性引物,上游引物为5′- GGGGGATATC
GCCACCATGGTATCAGACACAGCAATTCAGAACC-3′;下游引物为5′-GGGGCTCGAGTTATATCAAAATGCA
ACACCAGAGTACC- 3 ′,其中在上下游引物分别引入EcoRⅤ和XhoⅠ限制性酶切位点(下画线部分)和Kozak序列(斜体部分),预计目的片段长度为1 317 bp,引物由哈尔滨博仕生物技术有限公司合成。以pET30a-chTLR3质粒为模板,参照2.2中的方法进行PCR扩增,连接到PVAX载体并进行鉴定。将鉴定为阳性的重组质粒命名为PVAX -chTLR3,并对质粒进行测序鉴定。
按照PEI转染剂说明书操作,将重组质粒PVAX-chTLR3转染至长满单层的幼仓鼠肾细胞(BHK)中,转染24 h 后用多聚甲醛固定,以所制备的兔抗chTLR3多克隆抗体为一抗,FITC标记的羊抗兔IgG为二抗进行间接免疫荧光试验。
3 结果与分析
3.1 chTLR3原核表达载体的构建和序列分析
经PCR扩增获得长度为1 317 bp的特异性条带(见图1),与预测结果一致。上述PCR产物经EcoRⅤ、XhoⅠ双酶切后,与同样酶切的pET30a(+)载体连接,获得重组原核质粒pET30a-chTLR3。进一步测序显示,插入基因长度为1 317 bp,编码439个氨基酸。重组质粒双酶切后,得到长度分别为1 317 bp(目的条带)和5 422 bp(载体条带)2条片段(见图2),证实重组原核表达质粒构建成功。
M.DL-2 000 Marker;1.chTLR3基因PCR产物。
M.Trans 2K PlusⅡ DNA Marker;1.pET30a-chTLR3 双酶切产物。
3.2 重组蛋白在大肠杆菌Rosseta(DE3)中的表达和纯化
将重组质粒pET30a-chTLR3转化到大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导蛋白表达,分别收集诱导前菌液及诱导后的全菌液、上清液和超声破碎后的菌体沉淀,经10 % SDS-PAGE电泳后进行考马斯亮蓝染色。结果显示,在IPTG诱导后的菌体和超声破碎沉淀中有1条分子质量约为 55.8 ku的明显条带(见图3),与pET30a-chTLR3融合蛋白理论分子质量相符。对融合蛋白进行大量诱导表达,加入诱导剂诱导3 h 后菌体超声破碎,收集含有重组蛋白的菌体沉淀,备用。
1.超声破碎后上清液;2.超声破碎后沉淀;3.空载体; M .蛋白质Marker;4~9. 诱导0~5 h后样品。
3.3 兔抗chTLR3多克隆抗体的鉴定及效价测定
将pET30a-chTLR3重组蛋白与制备得到的兔抗chTLR3多克隆抗体进行Western-blot 分析,结果显示,在55.8 ku处成功转印出融合蛋白片段,且条带单一无杂带,见图4,表明已成功获得兔抗chTLR3多克隆抗体。间接ELISA法测定兔抗chTLR3多克隆抗体效价为1∶32 768。
1. IPTG诱导重组蛋白;M.蛋白质Marker。
3.4 PVAX-chTLR3体外瞬时转染表达
以pET30a-chTLR3质粒为模板,PCR扩增出长为1 317 bp的特异性条带,扩增产物长度与预测长度相同,见图5。对目的片段与载体进行双酶切和连接,获得重组质粒PVAX-chTLR3。重组质粒经双酶切鉴定得到长度为1 317 bp(目的条带)和3 000 bp(载体条带)2条片段,见图6。对质粒进一步测序鉴定,与参考序列同源性达99%,证实重组质粒构建完成。采用细胞免疫荧光技术,使用兔抗chTLR3多抗检测重组质粒PVAX-chTLR3体外瞬时转染BHK的表达情况,结果发现,重组质粒PVAX-chTLR3体外瞬时转染的BHK细胞内可见特异性的绿色荧光信号,且主要分布在胞浆,转染PVAX空载体、未转染质粒的BHK细胞都未见明显的荧光信号,见图7。表明所制备的兔抗chTLR3多克隆抗体具有良好的特异性。
1. chTLR3基因PCR扩增产物;M.DL-2 000 Marker。
M.Trans 2K PlusⅡ DNA Marker;1.PVAX-chTLR3双酶切产物。
A.兔抗chTLR3多克隆抗体检测重组质粒 PVAX-chTLR3 的体外转染 ;B.BHK细胞对照;C. PVAX空载体对照。
4 讨论
TLR3是一种重要的天然免疫受体,通过抗原识别功能区特异性识别双链RNA病毒,通过跨膜区将信号传导给胞内区,最终由胞内区将信号级联放大,激活天然免疫细胞,从而引发天然免疫反应;同时,TLR3又是连接天然免疫和获得性免疫之间的重要纽带。目前,对于chTLR3参与相关疾病免疫反应机制的研究较少。
对Toll样受体分子功能的研究,有必要得到其相应的抗体。目前,在抗体的制备方面,无论是单克隆抗体还是多克隆抗体都可以得到商品化的产品。但是市场上针对鸡TLR3的商品化抗体较少。因此,根据实验室的具体情况,本试验自行制备了兔抗chTLR3多克隆抗体,作为研究chTLR3分子功能的工具。本研究采用大肠杆菌原核表达系统表达重组蛋白,虽然原核表达系统不能对表达的蛋白进行翻译后修饰,但是该系统蛋白表达量大,成本较低。
制备高效价抗体是示踪基因表达和研究基因功能的前提。多克隆抗体虽然在特异性、稳定性方面不如单克隆抗体,但其制备简便、成本低、具有多个与抗原决定簇结合的位点,使其被大量应用于免疫学研究之中。试验通过将纯化的重组蛋白与佐剂混合免疫新西兰白兔,获得兔抗chTLR3多克隆抗体,经间接ELISA测定抗体与重组蛋白的效价为1∶32 768;Western-blot分析表明,具有良好的反应性和特异性;间接免疫荧光试验结果显示,研究所获得的多克隆抗体在转染了PVAX-chTLR3重组质粒的BHK细胞中可以检测到真核表达的chTLR3蛋白。 研究为进一步研究chTLR3分子功能及在病毒感染过程中的作用奠定了试验基础。同时,真核表达chTLR3蛋白量较少及chTLR3在病毒感染中具体的变化等问题仍需在进一步的研究中得到解决和验证。
参考文献
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关键词:克隆人 科幻小说 存在困境
中国传统神话女娲抟土造人,西方《圣经》神话中上帝取男子亚当的一根肋骨造成女人夏娃的故事,都表达了人类复制自身的幻想。人造人的愿望由来已久,文学作品中也经常呈现。第一部科幻小说《弗兰肯斯坦》中的科学怪人、《浮士德》玻璃器皿中的人造人,以及阿西莫夫的机器人都不同程度的体现了人类对自身改造和创造的愿望。克隆人是指依靠体细胞核移植技术诞生的人,通俗而言即无性繁殖的人,克隆小说就是以这个“基因复制”的新型生命体为题材的科幻作品。科技发展已经改变了“人”的传统定义,如今,人类从自然选择的人发展为科技介入后非纯粹的生物人,而克隆人等新型人类使科学、伦理、社会与人的关系变得更为复杂。对于克隆人存在问题的反思也是诸多文学作品中不断讨论内容。
一.克隆人的身份认知困境?
科学技术的进入,给人们带来了越来越便利的生活。生物科技的发展不仅帮助人们抵抗了多种疾病,更让人们越来越清楚的认识自己。对于克隆人,在传统观念上还不能接受,很大程度上就是因为其打乱了人类自身的伦理规则,克隆人与被克隆人之间的关系也有悖于传统的由血缘确定亲缘的伦理方式。所有这些,都使得克隆人无法在人类传统伦理道德里找到合适的安身之地。
小说《我是克隆人》讲述了一位天赋极高的女作曲家Iris患了绝症,为了使自己的天赋在这个世界上延续,她决定克隆一个自己做女儿。她的愿望终于实现,科学家提取她的细胞克隆出一个与她一模一样漂亮而又有才华的女儿Siri。作为母亲Iris的克隆体,Siri的生活是从她出生前就制定好了的,惟一的使命就是使母亲的才华永生,但是她也爱上了她母亲所爱的男人。她与母亲之间产生了极大的矛盾冲突和心理差异。小说的不断的通过Siri进行反问:我是谁?将小说的人格认知问题的内涵展露出来。
主人公Siri从小就知道自己是克隆的,她为自己来到世界的方式感到苦恼。二年级时,她在学校登记学生情况表时没有填父亲一栏。老师说:每个人都有爸爸,你可以用一个简略记号在父亲栏里标注一下,以表明你的父亲是未知还是父母离婚。Siri说:我没有父亲,我是被克隆出来的,我母亲是无性繁殖。从此,同学们把她视作异类多加嘲笑。身份的问题给她带来了极大的苦恼,她不断的反观镜中那个和母亲一模一样的自己,一颦一笑都是母亲的“复制品”,她虽然叫Iris母亲,但心里不知道该怎么把自己和母亲的关系纳入到现有的伦理体系。特别是,在外婆听到她天才般的钢琴演奏后,没有发出任何对她技艺和天分的惊叹,取而代之的评价是“魔鬼”,这无形加剧了她对自我认知的危机。外母将她视作“魔鬼”,把她定义为非人的范畴。她到底是什么?是母亲的“复制品”?是实验室里的“试验品”?她不断的为自己寻找存在的合理身份,就像着魔似的寻找各种资料。在迷幻与现实之间痛苦的挣扎,在母亲为她定制的人生里,她找不到自我存在的价值。这种认知上的危机使他对母亲的爱转为怀疑、讨厌、和仇恨,甚至在失去理智时试图杀死她的母亲。
《镜舞》中迈尔斯的克隆人,也被称为迈尔斯的弟弟马克冒充迈尔斯,率领一支雇佣军对巴罗普乔的克隆人教养院发动了突袭。迈尔斯在营救马克时不幸中弹,尸体不知去向。懊恼自责的马克在迈尔斯父母的安慰和支持下,踏上了寻找迈尔斯的征程。但是,当他终于找到接受了复活治疗的迈尔斯时。却再次落入巴罗普乔的陷阱之由,斗争也自此不断加剧。
从生物学角度上看,克隆人属无性繁殖,跟自己的母体并非母子/女的亲缘关系。这必然导致家庭结构和个人身份的疑虑。《镜舞》中的马克就存在这样对自我认知的困境。马克拥有的是迈尔斯的遗传信息,也就是说,迈尔斯作为供体为马克的出生提供了体细胞核。这个过程是在一个星际斗争的阴谋中秘密发生的。当时,迈尔斯6岁,正值科玛人抵制贝拉亚帝国征服的关键时刻,科玛人为了打击征服者也就是迈尔斯的父亲,设计偷走了放在贝拉亚帝国实验室里的迈尔斯的组织样本,克隆出了马克。小说当中,马克一直被称为迈尔斯的弟弟,迈尔斯的父亲也是马克的父亲。但实际上,如果一定要为马克确定一个父亲的话,那应该是迈尔斯,因为马克身上全部的遗传基因都直接来自迈尔斯。马克自己对这一称呼也是心存疑虑。他穿上迈尔斯的衣服,模仿迈尔斯走路的方式,说话的口气,对任何都小心翼翼生怕被他们发现自己并非是迈尔斯,同时又憎恶着自己对于迈尔斯的模仿,憎恶自己没有自我,只是一个模仿者的身份。他从对自我身份的困惑发展到痛恨自己的克隆母体迈尔斯,马克最后也终于在瑞瓦尔人手中被当作迈尔斯而遭到疯狂的报复,非人的折磨使得他出现了人格分裂。
二.克隆人的存在价值困惑
2005年,日本作家石黑一熊出版了以克隆人与“正常”人之间的关系为题材的长篇小说《千万别丢下我》对冰冷残酷的科学论断给出了最悲惨的人性诠释。小说描绘的是20世纪90年代末英格兰黑尔舍姆寄宿学校学生的生活。学校的学生过着与世隔绝的生活,得到了“全面照顾”,他们整日忙于学校的各种仪式和安排,以致没有时间去思考那些似乎很遥远的成年期的事情。在这些鲜活的生命背后隐藏的是黑暗现实的紧张与恐怖。学校养育他们的唯一目的是为正常人捐献器官,原来他们都是克隆人。因为他们是克隆人,所以就被理所当然被认为是“实验品”而豢养起来。他们的生命并非是自由的存在,他们也没有作为“人”的尊严。他们被当作试验品随意处理,随意宰割。如果客户有需要,他们会立马被拉上手术台切除掉身体的任何部位为客户牺牲。小说中的克隆人作为无法掌握自己的弱势群体,处处弥漫着感伤,忧郁、阴暗的的特质。
在小说《镜舞》中克隆人更是沦为一种商业交易的产品,是根据顾客要求定做的奴隶。巴罗普乔王朝是从事克隆人商业活动的推手——生命延长或买卖,以克隆人年轻、强健的体魄替换原身因衰老或疾病所困的身体,而克隆人的头脑则会被作为手术垃圾处理掉。而一些被怀疑可能产生变异的孩子从一开始便会被处死。而那些为了拥有一个强健体魄的身体的雇主,则会要求把普王朝根据他们的需求对克隆人的身体进行整形、改良,遭受种种痛苦之后,他们坐享其成克隆人的身体。作为复仇工具的克隆人马克,为了在各方面都比较相像胎儿时被下毒导致后来身材矮小,身体畸形、新陈代谢紊乱的迈尔斯,组织着对各方面都很健康的马克进行非人的训练:暴饮暴食,高强度训练、电击、殴打、专门致畸的整形,甚至裁掉他健康的双腿换成塑料的腿,以达到和迈尔斯想象的目的。
《追捕克隆人》进一步强化了人类对于克隆人的虐待导致克隆人奋起反抗的故事。公元2099年,西伯利亚"精英"研究院发生了不堪受虐的克隆人集体暴动事件,联合国紧急要求各国追剿。一股强悍的克隆人劫持了装备核弹的巡舰逃往大洋,并向美国发射了一枚核导弹,当他们悲壮地自爆了巡洋舰后,舰上核弹库发生大爆炸,引发了可怕的特大海啸。不久,那股克隆人又出现在南极洲,依托冰下城"反围剿"。在外星人帮助下,他们逃离南极,经殊死激战后夺取了太空机逃往火星,途中用"死光"发生仪将全球核武器与核电站变成一堆废铁,并扬言将向人类复仇!可见克隆人并非按照人类的想象按部就班的遵照人类的意愿生活,他们也都是具有人性的“生物”,遭遇到非人的压迫和虐待之后也会设法反抗人类的统治。就像小说《弗兰肯斯坦》中的故事一样,哪怕克隆人是本性纯良的“好人”,也同样会因为人类对其的隔离而产生怨怒。故事讲述的是一位名叫年轻的科学家弗兰肯斯坦的年轻科学家为追求和利用当时的生物学知识,从停尸房等处取得不同人体的器官和组织,拼合成一个人体,并利用雷电使这个人体拥有了生命。巨人虽然天性善良,向往美好,渴望感情,但是,由于面貌丑陋,被社会视为怪物,当作巨大的威胁,处处碰壁。他要求弗兰肯斯坦为自己制造一个配偶,答应事成后与其双双远离人间。弗最初应允了怪物,但在接近成功之时,担心怪物种族从此危害社会,于是毁去了女性怪物。苦苦企盼的怪物疯狂报复,杀死弗的未婚妻等几个亲人。弗发誓毁掉自己的作品,追踪怪物一直到北极地带,受尽折磨后病逝,而怪物亦自焚而死。
三.有关克隆人的人性反思
随着科技的进步,人类已经不仅仅把脚步停留在对自我的认知上了,人类渴望通过“克隆”呈现已知的更加完美的自我,并要自我在克隆体身上得以延续。所以对于克隆人在造福人的同时,也在不断的探寻和扩展着人类的黑暗面。就克隆技术而言,它造福了人类。“治疗性克隆”将会在生产移植器官和攻克疾病等方面获得突破,给生物技术和医学技术带来革命性的变化。比如,当有人需要骨髓移植而没有人能为他提供;当一个家庭失去挚爱的孩子无法摆脱痛苦;当有人想养育自己的孩子又无法生育等问题上克隆给人类社会带来了福音。但是治疗性克隆的研究和完整克隆人的实验之间是相辅相成、互为促进的,治疗性克隆所指向的终点就是完整克隆人的出现,如果加以正确的利用,它们都可以而且应该为人类社会带来福音。又可能给人类带来祸害。正如上文中所提到的文本中呈现的一系列问题。
文学是人学,文学作品中呈现的内容虽然大多是想象,但反映和表现原始的人性和人类的伦理与情感是文学艺术的重要内容。但现在,由于生命科学技术的发展,克隆人的出现,人类的生命奥秘被无情的解构,人类在自我的认同种出现了伦理和情感的双重挑战。上述所例举的一系列文学作品都呈现出的问题值得人们进一步反思。但是,正如中科院院士何祚庥所言:“克隆人出现的伦理问题应该正视,但模拟克隆人没有理由因此而反对科技的进步”。科学从来都是一把双刃剑。某项科技进步是否真正有益于人类,关键在于人类如何对待和应用它。克隆技术确实可能和原子能技术一样,既能造福人类,也可祸害无穷。所以文学作品只是呈现给人类一个思考的维度,通过虚构的想象让人类对克隆人这一技术进行尽可能的全面的思考。
正如文学大师普鲁斯特所说:每个读者只能读到已然存在于他内心的东西。书籍只不过是一种光学仪器,帮助读者发现自己的内心。希望文学可以作为一面镜子呈现出人类对于克隆人的真正有温情的反思,并对克隆人技术进行深刻的思考,审慎使用。
参考文献
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2.聂真钊:“文学伦理学批评:基本理论与术语”,《外国文学研究》,2010
3.马向真:“自我同一性危机及道德选择多元化”,《伦理学研究》,2004
4.邱仁宗:《生命伦理学》,上海人民出版社,1987年
5.蔡贤浩,《克隆技术的伦理学思考》,《学术论坛》,2004(7)
谢谢主席!主席,评委,各位同学,大家晚上好!首先请容我在此为大家解释一下什么是克隆人,克隆人是指利用克隆技术来复制出一个和被复制的人基因相同的一个人或者部分组织。而我方认为克隆人对人类的发展是利大于弊的,其标准是克隆人能使人类发展指数提高。我方所引用的联合国发布的人类发展指数包含人均预期寿命和人均GDP的对数等。我方将就此来阐述观点:
第一、人均预期寿命度量了人类的健康状况。克隆人是治疗性克隆所指向的终点。治疗性克隆在生产移植器官和攻克疾病等方面获得的突破将给生物技术和医学技术带来革命性的变化。再者药物经过试验将更加安全,器官也不再会有排斥现象。但凡事都有两面性,相同的基因可能会使病毒更容易地转播,可这都抵挡不了克隆人所带来的巨大利益。生物技术和医学技术水平提高了,人均预期寿命自然而然的也将提高。所以我方认为克隆人对人类的发展利大于弊。
第二、人均GDP的对数是衡量经济发展综合水平的指标。虽然克隆人类或许会对环境承载量带来一定的压力,但就目前技术而言还不能肯定其会构成威胁。克隆人作为治疗性克隆的最终指向带来了实用性强、效果明显、副作用少的医疗方式,这种方式投入市场将带来不可估计的庞大利润。克隆人所创造的经济价值,对人均GDP的对数做出的贡献真是令人佩服。所以我方认为克隆人对人类的发展利大于弊。
众所周知,科学是一把双刃剑。其是否有益于人类,关键在于人类如何对待及应用它。所以人们不能因其暂时不合情理而因噎废食。火药技术如此、原子能技术如此当然克隆人技术也应是如此。我方认同克隆人对人类发展是有存在弊端的可能性,如对两性繁殖的威胁,血缘关系难以确定,身份和社会权利难以分辨等。可是请对方辩友冷静思考,今天的“克隆技术热”是否就仅仅只让我们看到它的利与弊呢?是否更多的是让我们对这个问题深思呢?人们面对应不应该克隆人类这一话题进行不断讨论。无论结果如何,这都将是人类在未来面对新生科技的宝贵经验。其对人类发展的利处将是深远而流长的,所以我方认为克隆人对人类的发展利大于弊。
到此我方已经从人类发展指数的两个方面来进行了分析并得出克隆人对人类的发展利大于弊。尽管人类发展指数还有不足的地方,不能够全面地衡量人类的发展,但克隆人问题所引发的思潮及经验将使我们更好地面对未来高新科技,这无疑将成为人类的伟大财富。所以我方坚决认为克隆人对人类发展利大于弊。
克隆
技术
“克隆”一词于1903年被引入园艺学,以后逐渐应用于植物学、动物学和医学等方面。广泛意义上的“克隆”其实是我们的日常生活中经常遇到,只是没叫它“克隆”而已。克隆是人类在生物科学领域取得的一项重大技术突破,反映了细胞核分化技术、细胞培养和控制技术的进步。克隆是英文clone的音译,意为生物体通过细胞进行的无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群,简称为“无性繁殖”。科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆,这门生物技术叫克隆技术。利用克隆技术可以在抢救珍奇濒危动物、扩大良种动物群体、提供足量试验动物、推进转基因动物研究、攻克遗传性疾病、研制高水平新药、生产可供人移植的内脏器官等研究中发挥作用,但如果将其应用在人类自身的繁殖上,将产生巨大的伦理危机。克隆技术在带给人类巨大利益的同时,也会给人类带来灾难和问题,但我们不能因为这项技术可能带来严重后果而阻止其发展,它的产生归根结底是利大于弊,它将被广泛应用在有利于人类的方面。我国计划利用克隆技术,使频危鱼类复生。通过采用低温保存细胞克隆技术,中华鲟等濒危鱼类有望死而复生。我国鱼类克隆专家、江汉大学医学与生命科学学院院长余来宁教授表示:国家自然科学基金项目——濒危鱼类低温保存细胞克隆技术研究目前进展顺利。
早在上世纪60年代,由我国童第周教授领导的研究小组已经在细胞核移植上取得了成功,大大地推动了鱼类克隆研究的进程,使我国在这一领域的科研水平处于国际领先地位。近几年来,我国开展鱼类克隆应用研究较少,国外研究水平已有超越我国的趋势。据余来宁教授介绍,濒危鱼类低温保存细胞克隆技术是利用现代生物技术,研究在细胞水平上保存和恢复白鳍豚、白鲟、中华鲟、长江鲟、胭脂鱼、鲟鱼等我国特有濒危珍稀生物,从而达到保护濒危物种的目的,项目计划在2006年完成。
余来宁教授表示,根据已有的研究经验,克隆鱼类技术成功率低。实验上千次,也许只有百分之一的实验符合要求,这也是阻碍该技术发展和应用的关键。目前研究人员主要围绕提高克隆成功率开展研究:优化核移植技术、筛选发育全能性较好细胞、供体核与卵配合问题和核质技术、研究重组胚胎的激活方式、鱼类细胞低温保存方法及克隆技术等。为了解决试验材料的难题,研究人员遴选了斑马鱼、泥鳅、带鱼、白鲢等常见物种作为科研试验的替代材料。
生物技术的范围很广,从基因组破译到转基因技术和克隆技术等等,但生物技术的核心目标是为人类自身特别是人类健康服务,正因如此,克隆技术的发展趋势是动物而不是植物。1997年2月英国罗斯林研究所宣布克隆成功的小羊多利,是用乳腺上皮细胞作为供体细胞进行细胞核移植的,它翻开了生物克隆史上崭新的一页,突破了利用胚胎细胞进行核移植的传统方式,使克隆技术有了长足的进展。自克隆小羊多利成功后,世界各国引起强烈的反响,有的看作福音,有的则视为祸水。生物克隆取得突破,最大的好处是培养大量品质优良的家畜,丰富人们的物质生活,使畜牧业的成本降低,效率提高,还可提供某些药物原料以提高人类免疫功能等等。利用克隆技术还可以大量复制珍稀动物,挽救濒危物种,调节大自然的生态平衡,为人类造福。当然,克隆技术也可能带来负面影响,一些克隆动物在遗传上是全等的,一种特定病毒或其它疾病的感染,将会带来灾难,如果无计划克隆动物,会扰乱物种的进化规律,干扰性别比例,这种对生物界的人为控制会带来许多意想不到的危害。但只要采取相应的研究对策,制订科学的克隆计划,这种负效应就可以避免。至于克隆人由于涉及伦理和人权问题,因此一直是社会各界争论的话题。有科学家指出克隆人是一个没有意义的研究课题:当代生物史证明,克隆技术只能复制出外貌特征相同的生物,不能克隆出被复制者原有的才能。人的思想才能受后天的制约。所以,即使有人能克隆出酷似历史上的伟大领袖、伟大科学家那样的人物,也仅在外貌上相同,却缺乏伟大领袖、伟大科学家那样的思想、气质、才能,试问这样的克隆具有什么意义?至于有人主张克隆人以取得人体器官,用于医学上人体器官的移植,这也是不可行的。因为克隆出来的人首先是一个公民,他享有人权,如果克隆人不肯捐赠器官,你发明者也不能侵犯人权。根据美国《时代》杂志和美国有线新闻网(CNN)上个月联合进行的民意调查显示,大多数美国人不赞成克隆人。但在问及有关具体细节时,很多人又表示,克隆技术的可行性得视具体情况而定。譬如,28%的被调查者认为,如果是为了拯救其他的生命,制造人类身体的重要器官将被视为合法;约21%的人赞同通过克隆人来挽救被克隆者的生命;20%的人觉得,可以通过克隆技术来帮助不育夫妇。虽然许多人有各种各样的理由反对克隆人,可是相当一部分人(约34%)将他们的宗教信仰作为最主要的理由。22%的人说,克隆技术同化了人们的特征和个性,另有22%的人担心克隆会被用作某些可疑的目的,譬如克隆优等人种甚至军队。总之,根据调查结果,69%的人认为克隆人冒犯了上帝的权威。将近一半(45%)的美国人认为,在未来10年内制造一个克隆人是有可能的。
我们所说的生物技术的利和弊主要指的是克隆,其利和弊是
利:1)克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦。
2)克隆实验的实施促进了遗传学的发展,为“制造”能移植于人体的动物器官开辟了前景。
3)克隆技术也可用于检测胎儿的遗传缺陷。将受精卵克隆用于检测各种遗传疾病,克隆的胚胎与子宫中发育的胎儿遗传特征完全相同。
4)克隆技术可用于治疗神经系统的损伤。成年人的神经组织没有再生能力,但干细胞可以修复神经系统损伤。
5)在体外受精手术中,医生常常需要将多个受精卵植入子宫,以从中筛选一个进入妊娠阶段。但许多女性只能提供一个卵子用于受精。通过克隆可以很好地解决这一问题。这个卵细胞可以克隆成为多个用于受精,从而大大提高妊娠成功率。
弊:1)克隆将减少遗传变异,通过克隆产生的个体具有同样的遗传基因,同样的疾病敏感性,一种疾病就可以毁灭整个由克隆产生的群体。可以设想,如果一个国家的牛群都是同一个克隆产物,一种并不严重的病毒就可能毁灭全国的畜牧业。
2)克隆技术的使用将使人们倾向于大量繁殖现有种群中最有利用价值的个体,而不是按自然规律促进整个种群的优胜劣汰。从这个意义上说,克隆技术干扰了自然进化过程.3)克隆技术是一种昂贵的技术,需要大量的金钱和生物专业人士的参与,失败率非常高。多莉就是277次实验唯一的成果。虽然现在发展出了更先进的技术,成功率也只能达到2-3%。
4)转基因动物提高了疾病传染的风险。例如,如果一头生产药物牛奶的牛感染了病毒,这种病毒就可能通过牛奶感染病人
5)克隆技术应用于人体将导致对后代遗传性状的人工控制。克隆技术引起争论的核心就是能否允许对发育初期的人类胚胎进行遗传操作。这是很多伦理学家所不能接受的。
6)克隆技术也可用来创造“超人”,或拥有健壮的体格却智力低下的人。而且,如果克隆技术能够在人类中有效运用,男性也就失去了遗传上的意义。
7)克隆技术对家庭关系带来的影响也将是巨大的。一个由父亲的DNA克隆生成的孩子可以看作父亲的双胞胎兄弟,只不过延迟了几十年出生而已。很难设想,当一个人发现自己只不过是另外一个人的完全复制品,他(或她)会有什么感受?
所以说,科学技术有时就是一把双刃剑,有利也有没弊,没有标准答案!就看人们这样利用了!我们所说的生物技术的利和弊主要指的是克隆,其利和弊是
利:1)克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦。
2)克隆实验的实施促进了遗传学的发展,为“制造”能移植于人体的动物器官开辟了前景。
3)克隆技术也可用于检测胎儿的遗传缺陷。将受精卵克隆用于检测各种遗传疾病,克隆的胚胎与子宫中发育的胎儿遗传特征完全相同。4)克隆技术可用于治疗神经系统的损伤。成年人的神经组织没有再生能力,但干细胞可以修复神经系统损伤。
5)在体外受精手术中,医生常常需要将多个受精卵植入子宫,以从中筛选一个进入妊娠阶段。但许多女性只能提供一个卵子用于受精。通过克隆可以很好地解决这一问题。这个卵细胞可以克隆成为多个用于受精,从而大大提高妊娠成功率。
弊:1)克隆将减少遗传变异,通过克隆产生的个体具有同样的遗传基因,同样的疾病敏感性,一种疾病就可以毁灭整个由克隆产生的群体。可以设想,如果一个国家的牛群都是同一个克隆产物,一种并不严重的病毒就可能毁灭全国的畜牧业。
2)克隆技术的使用将使人们倾向于大量繁殖现有种群中最有利用价值的个体,而不是按自然规律促进整个种群的优胜劣汰。从这个意义上说,克隆技术干扰了自然进化过程.3)克隆技术是一种昂贵的技术,需要大量的金钱和生物专业人士的参与,失败率非常高。多莉就是277次实验唯一的成果。虽然现在发展出了更先进的技术,成功率也只能达到2-3%。
4)转基因动物提高了疾病传染的风险。例如,如果一头生产药物牛奶的牛感染了病毒,这种病毒就可能通过牛奶感染病人
5)克隆技术应用于人体将导致对后代遗传性状的人工控制。克隆技术引起争论的核心就是能否允许对发育初期的人类胚胎进行遗传操作。这是很多伦理学家所不能接受的。
6)克隆技术也可用来创造“超人”,或拥有健壮的体格却智力低下的人。而且,如果克隆技术能够在人类中有效运用,男性也就失去了遗传上的意义。
7)克隆技术对家庭关系带来的影响也将是巨大的。一个由父亲的DNA克隆生成的孩子可以看作父亲的双胞胎兄弟,只不过延迟了几十年出生而已。很难设想,当一个人发现自己只不过是另外一个人的完全复制品,他(或她)会有什么感受?
所以说,科学技术有时就是一把双刃剑,有利也有没弊,没有标准答案!就看人们这样利用了!
克隆技术造福人类
克隆技术会给人类带来极大的好处。例如,英国 PPL公司已培育出羊奶中含有治疗肺气肿的α-I抗胰蛋白酶的母羊。这种羊奶的售价是6000美元一升。一只母羊就好比一座制药厂。用什么办法能最有效、最方便地使这种羊扩大繁殖呢?最好的办法就是“克隆”。同样,荷兰PHP公司培育出能分泌人乳铁蛋白的牛,以色列LAS公司育成了能生产血清白蛋白的羊。这些高附加值的牲畜如何有效地繁殖?答案当然还是“克隆”。
母马配公驴可以得到杂种优势特别强的动物——骡,然而骡不能繁殖后代,那么,优良的骡如何扩大繁殖?最好的办法也是“克隆”。我国的大熊猫是国宝,但自然交配成功率低,因此已濒临绝种。如何挽救这类珍稀动物?“克隆”为人类提供了切实可行的途径。
除此之外,克隆动物对于研究癌生物学、研究免疫学、研究人的寿命等都有不可低估的作用。
不可否认,“克隆绵羊”的问世也引起了许多人对“克隆人”的兴趣。例如,有人在考虑,是否可用自己的细胞克隆成一个胚胎,在其成形前就冰冻起来。在将来的某一天,自身的某个器官出了问题时,就可从胚胎中取出这个器官进行培养,然后替换自己病变的器官。这也就是用克隆法为人类自身提供“配件”。
有关“克隆人”的讨论提醒人们,科技进步是一首悲喜交集的进行曲。科技越发展,对社会的渗透越广泛深入,就越有可能引起许多有关的伦理、道德和法律等问题。我想用诺贝尔奖获得者、著名分子生物学家J.D.沃森的话来结束本文:“可以期待,许多生物学家,特别是那些从事无性繁殖研究的科学家,将会严肃地考虑它的含意,并展开科学讨论,用以教育世界人民。”
克隆技术的应用大致有以下好处:
一是利用克隆等生物技术,改变农作物的基因型,产生大量抗病、抗虫、抗盐碱等的新品种,从而大大提高农作物的产量。
二是培育大量品种优良的家畜,如培养一些肉质好的牛、羊和猪等,也可以培养一些产奶量高,且富含人体所需营养元素的奶牛。
三是对医疗保健工作产生重大影响,如依靠分子克隆技术,搞清致病基因,提出疾病产生的分子生物学机制;将一头奶中含有治疗血友病的药物蛋白的转基因羊进行克隆,则可以较好地满足血友病人食疗的需要;为器官移植寻求更广泛的来源,将人的器官组织和免疫系统的基因导入动物体内,长出所需要的人体器官,可降低免疫排斥反应,提高移植成功率。
四是为保护环境和濒危动植物,以克隆技术再现物种。
五是为医学研究提供更合适的动物,大大提高试验的精确度和安全性。
六可以在短时间内培育出大量农作物,可以缓解粮食危机.克隆绵羊“多利”
1997年2月27日出版的英国《自然》杂志公布了爱丁堡罗斯林研究所威尔莫特等人的研究成果:经过247次失败之后,他们在1996年得到了一只名为“多利”的克隆雌性小绵羊。
“多利”绵羊是如何“创造”出来的呢?威尔莫特等学者先给“苏格兰黑面羊”注射促性腺素,促使它排卵。得到卵之后,立即用极细的吸管从卵细胞中取出核。与此同时,从怀孕三个月的“芬多席特”六龄母羊的乳腺细胞中取出核,立即送入取走核的“苏格兰黑面羊”的卵细胞中。手术完成之后,用相同频率的电脉冲刺激换核卵,让“苏格兰黑面羊”的卵细胞质与“芬多席特”母羊乳腺细胞的核相互协调,使这个“组装”细胞在试管里经历受精卵那样的分裂、发育而形成胚胎的过程。然后,将胚胎巧妙地植入另一只母羊的子宫里。到去年7月,这只“护理”体外形成胚胎的母羊终于产下了小绵羊“多利”。“多利”不是由母羊的卵细胞和公羊的精细胞受精的产物,而是“换核卵”一步一步发展的结果,因此是“克隆羊”。
“克隆羊”的诞生,在全世界引起了轰动。它的难能可贵之处在于换进去的是体细胞的核,而不是胚胎细胞核。这个结果证明:动物体中执行特殊功能、具有特定形态的所谓高度分化的细胞与受精卵一样具有发育成完整个体的潜在能力。也就是说,动物细胞与植物细胞一样,也具有全能性。克隆技术造福人类
克隆技术会给人类带来极大的好处。例如,英国PPL公司已培育出羊奶中含有治疗肺气肿的α-I抗胰蛋白酶的母羊。这种羊奶的售价是6000美元一升。一只母羊就好比一座制药厂。用什么办法能最有效、最方便地使这种羊扩大繁殖呢?最好的办法就是“克隆”。同样,荷兰PHP公司培育出能分泌人乳铁蛋白的牛,以色列LAS公司育成了能生产血清白蛋白的羊。这些高附加值的牲畜如何有效地繁殖?答案当然还是“克隆”。
母马配公驴可以得到杂种优势特别强的动物——骡,然而骡不能繁殖后代,那么,优良的骡如何扩大繁殖?最好的办法也是“克隆”。我国的大熊猫是国宝,但自然交配成功率低,因此已濒临绝种。如何挽救这类珍稀动物?“克隆”为人类提供了切实可行的途径。
除此之外,克隆动物对于研究癌生物学、研究免疫学、研究人的寿命等都有不可低估的作用。
不可否认,“克隆绵羊”的问世也引起了许多人对“克隆人”的兴趣。例如,有人在考虑,是否可用自己的细胞克隆成一个胚胎,在其成形前就冰冻起来。在将来的某一天,自身的某个器官出了问题时,就可从胚胎中取出这个器官进行培养,然后替换自己病变的器官。这也就是用克隆法为人类自身提供“配件”。
有关“克隆人”的讨论提醒人们,科技进步是一首悲喜交集的进行曲。科技越发展,对社会的渗透越广泛深入,就越有可能引起许多有关的伦理、道德和法律等问题。我想用诺贝尔奖获得者、著名分子生物学家J.D.?沃森的话来结束本文:“可以期待,许多生物学家,特别是那些从事无性繁殖研究的科学家,将会严肃地考虑它的含意,并展开科学讨论,用以教育世界人民。”
克隆”技术怎样造福人类
林月
●1997年2月27日,英国《自然》杂志刊文宣称:英国爱丁堡罗斯林研究所首次用“克隆”培育法成功地复制出世界上第一只“克隆羊”多利。此后,这头7个月大的小羊把生物界乃至全世界都搅得沸沸扬扬。
●多利的诞生,证明一个已完全分化成熟了的体细胞,还能完全恢复到早期的原始细胞状态,这对胚胎学、发育遗传学的意义,怎么估计也不算高。
●美国的克隆猴,以及其它的克隆猪、克隆山羊、克隆牛为什么没有引起世界震惊,因为它们都是用胚胎细胞进行的核移植,不是真正意义上的无性繁殖。
●克隆技术的经济效益十分巨大,它在选育良种、抢救濒危动物、建立疾病基因模型、生产药物、异种器官移植等方面,都能产生重大影响。
●人类能否复制自己?一下子变成了一个迫切需要回答的问题。科学这把双刃剑又一次锋芒毕露,面对利刃,人类说“不”!
●21世纪将是生命科学的世纪,人类在发展自然科学的同时,应加强社会科
学的研究,以确保人类社会的健康发展。
2月27日,英国权威的科学家杂志《自然》刊登一篇文章,宣布人类首次用 “克隆”培育法,即用成年绵羊的细胞基因繁殖绵羊获得成功。幼羊继承了“母”体绵羊的全部基因特性,换句话说:“母”绵羊被百分之百地“复制”。在这篇文章正式发表之前,消息不胫而走,世界舆论为之震惊。
“克隆”,英文名称“Clone”。是由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系。这个细胞系中每个细胞的基因彼此是相同的,亦称无性繁殖细胞系。
“多利”的诞生
英国爱丁堡有个罗斯林研究所。“克隆羊”“多利”的诞生就是在这个研究所的伊恩·威尔莫特和基思·坎贝尔领导下进行的。
无性繁殖现象在低等植物中存在,而“多利”是标准的哺乳动物,它的出现打破了生物界中的自然规律。
威尔莫特研究小组操纵了“多利”的胚胎发育和诞生过程。他们利用药物促使母羊排卵,然后将未受精的卵取出放到一个极细的试管底部,再用另外一种更细的试管将羊卵膜刺破,从中吸出所有的染色体,这样就制成了具有活性但无遗传物质的卵空壳。接着,他们从“多利”的母亲———一只6岁的母羊的乳腺中取出一个普通组织细胞,使乳腺细胞与没有遗传物质的卵细胞融合,通过电流刺激作用使两者结合成一个含有新的遗传物质的卵细胞。这一卵细胞在试管中开始分裂、繁殖、形成胚胎,当胚胎生长到一定程度时,研究人员再将其植入母羊子宫内,使母羊怀孕并于去年7月产下“多利”。
“多利”是世界上第一个“克隆”出来的哺乳动物,它的特点在于它与它的母亲,即那头6岁母羊具有完全相同的基因,可谓是它母亲的复制品。“多利”的诞生意味着人们可以利用动物的一个组织细胞,像翻录磁带或复印文件一样,大量生产出完全相同的生命体。而哺乳动物界的自然规律是,动物的繁衍须由两性生殖细胞来完成,且由于父体和母体的遗传物质在后代体内各占一半,因此后代绝对不是父母的复制品。
白白胖胖、一身卷毛的“多利”虽然才7个月大,却已有45公斤重,它身体健康,活泼好动,跟一般的小羊没有什么区别。“多利”是威尔莫特用他喜欢的乡村歌手多利·帕顿的名字起的名。由于“多利”是利用功能已彻底分化的成年动物细胞“克隆”成的,是世界上第一个动物复制品,因此它具有重大的价值。它既不会像普通羊那样被卖掉,更不会被人吃掉。但为了防止意外,它无法离开羊圈到大自然中吃草和玩耍,也无法像它的小伙伴们那样过上正常的生活。
“多利”开辟了无性繁殖的新时代
继英国宣布获得了“克隆羊”后,世界上许多国家都声称早已获得了克隆动物或植物,如“克隆猴”、“克隆山羊”、“克隆猪”、“克隆鼠”、“克隆西红柿 ”等。但为什么这些克隆动物并未在世界上引起轰动呢?据科学家解释,这些克隆动物都是用胚胎细胞进行的核移植,同采用已高度分化的体细胞进行核移植的“多利”相比,是两个不同的概念。严格说来,前者不能说是“无性繁殖”,因为胚胎细胞本身是通过有性繁殖产生的,其细胞核中的基因组,一半来自父体,一半来自母体。而“多利”的基因组,全都来自单亲,这才是真正的无性繁殖。宽泛点讲,可以说它们的克隆技术低于“多利”,所以才没有像“多利”这样在世界上掀起轩然大波。
作为生物体广泛存在的繁殖传代方式之一,克隆并不神秘。据介绍,克隆的核心技术———细胞核移植技术,早在本世纪初人类就已经掌握。事实上,人们在日常生活中早已接触过克隆,如今一些蔬菜瓜果就是通过无性繁殖培育出来的。目前,在植物上运用克隆技术已经相当成熟。
现在,不少传媒过多地渲染了“人类复制”这一问题,使人们的兴趣都集中到这一方面。有一位科学家最近警告说:“放任对克隆技术不懂的新闻媒介对公众进行片面宣传,可以导致哥白尼式的悲剧,从而使伟大的科学发现停滞。”所以应该将“克隆”本身的科学价值宣传够,让克隆技术为人类造福。
克隆技术的经济效益十分巨大,它在选育良种、抢救濒危动物、建立疾病基因模型、生产药物、异种器官移植等方面,都能产生重大影响。
克隆技术可以大大加快育种的步伐,提高育种质量。培育一个品种,通过杂交这种途径至少要十年以上,还不能保证100%的纯度。但通过无性繁殖,就能产出相当纯的后代,其次,在动物杂种优势利用方面,与目前通常采取的方式相比,哺乳动物无性繁殖技术具有明显的优点,特别是费时少,而选育的种畜性状稳定;其次,它在抢救濒危珍稀物种、保护生物多样性方面可以发挥很大的作用。
另外,医学上需要建立动物基因模型。这种动物模型是很难做的。现在已经在做的基本上都是单基因突变的遗传变异模型,但实际上我们人的大部分疾病,无论是高血压、肿瘤,都绝不是某一个基因的改变引起的,而是多个基因综合作用的结果。因此,无性繁殖对建立医学模型有特别重要的意义。假如高血压与100个基因有关,通过无性繁殖就可以把这100个基因都拷贝下来。这是我们现在的转基因技术所不能做到的。今后,与成百上千个基因相关的疾病的动物模型,原则上我们都将可以建立。可见克隆技术可以福荫人类,前景广阔,是一座淘之不尽的金矿。
人类能否复制自己
白白胖胖、一身卷毛的“多利”悠然自得地在羊圈里玩耍,全然不知它已经把世界搅了个沸沸扬扬。它的出现从理论上宣告了人是可以复制自己的。这一下子引起了全世界的恐慌。
虽然从理论上讲人是可以复制的,但至今并无“克隆人”。而且从“多利”到 “克隆人”还有一个艰难的过程。“多利”的诞生就经历了近300次失败才成功的,更何况人?人体并不是每个细胞都是全能的。全能的仅仅是一部分体细胞,而且这种全能性的体现是要有一定环境的,一定要放在一个卵细胞里,经过一定时期的一定处理,需要很多外界条件,只有所有条件统统满足的情况下,克隆才会成功。唯此,“克隆羊”多利才会显得如此伟大。
如果人真的能被复制,那么“复制人”和被复制人是否一模一样呢?这是人们最关心的一个问题。
科学家说复制人和被复制人不会是一模一样的,因为是先天和后天相互作用的结果。他们虽然肉体上很像,但由于生活环境、所受教育不同,智力水平也会相距甚远,行为也会差异很大。
全球反对“克隆”人
从来没有任何一项科学突破能在世界上迅速引起如此巨大的反响,科学技术问题迅速演变成为政治、社会、道德和宗教问题。
世界卫生组织宣布克隆人有悖伦理道德,应予禁止,并将召开专家会议,商讨相应对策。
震动最大的当然是罗马教廷。梵蒂冈报纸《罗马观察家》发表社论,强烈呼吁世界各国立即制定一项法律禁止人类无性生殖,这篇文章称:“人类有权以人类的方式出生,而不是在实验室。任何一种反人类的方式都是令人难以接受的,因为这彻底违反了上帝的造人计划。任何性以外的生殖努力都将被认为是违反道德、人类生育和夫妻关系尊严的行为。”
以色列犹太教首席拉比以色列·劳说,用基因技术克隆人是“偏离”科学的作用,受到犹太教律令的禁止。犹太教法律允许医生治愈伤痛,但不允许侵犯造物主的作用,不得用非自然手段制造生命。
阿根廷总统卡洛斯·梅内姆颁布一项法令,禁止阿根廷在人的克隆研究方面做出任何努力,这项禁令将在两个月内提交议会批准。
欧洲制药业要求通过法律禁止克隆人,但对于全面禁止研究细胞克隆技术所产生的影响表示担忧。
日本文部省的机构学术审议会决定,将开始制定大学在研究有关制作遗传信息完全相同动物的克隆技术指导方针。关于把这种技术用于克隆人的问题,学术审议会决定当前不允许提供科研经费。政府设置的科学技术会议已决定着手研究伦理问题。文部省打算制定一部限制措施。
韩国的汉城街头发生示威,反对将克隆技术用于人类。
“克隆”术研制者如是说
培育出“多利”绵羊的研究小组负责人伊恩·威尔莫特说,这项技术并没有使他感到寝食不安,而且无论从何种角度说,遗传学还远远没有发展到可以制造人的阶段。
威尔莫特对前往位于爱丁堡附近的罗斯林研究所观看“多利”绵羊的新闻记者说:“我们已经表明———我们看不出人们进行制造人的临床研究的理由。这项技术具有巨大的潜在的效益„„核武器比这项技术危险的多。”
威尔莫特现年52岁,以他为首的罗斯林研究所的科学家们在无性繁殖的研究方面已经默默地工作了10年。“克隆羊”“多利”的诞生宣布他们的研究成功。
威尔莫特认为从技术角度来说将“克隆”法应用于人类是没有问题的,但他看不出“克隆人”的临床研究的医学理由。他认为,目前英国对人类胚胎研究的每一
步都有严格的法律控制,英国现在不存在“克隆人”的问题。他说:“我看不到‘克隆人’的医学意义何在。”
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