成分与含量的检测（精选7篇）
科标检测与青岛科技大学合作专业提供农药成分分析，含量检测。
专业检测机构---资深专家团队---精准分析服务----先进仪器设备
科标检测技术服务--浙大站--专业成分分析专家
农药是为保障促进作物的成长,所施用的杀虫、除草等药物的统称。农业上用于防治病虫以及调节植物生长、除草等药剂。根据防治对象，可分为杀虫剂、杀菌剂、杀螨剂、杀线虫剂、杀鼠剂、除草剂、脱叶剂、植物生长调节剂等。根据原料来源可分为有机农药、无机农药、植物性农药、微生物农药。此外，还有昆虫激素。根据加工剂型可分为粉剂、可湿性粉剂、可溶性粉剂、乳剂、乳油、浓乳剂、乳膏、糊剂、胶体剂、熏烟剂、熏蒸剂、烟雾剂、油剂、颗粒剂、微粒剂等。大多数是液体或固体，少数是气体。
农药产品剖析一般采用红外光谱（FTIR）、核磁共振（1H NMR）、质谱（MS）、X衍射分析（XRD）、ICP-MS、X荧光光谱分析、离子色谱分析等手段。通过这些测试手段可以很好的解析农药的配方，对农药中的成分作用有详细的了解，更方便各个企业进行研发，把握市场动态。
食品营养标签主要包括营养成分含量、营养声称和作用声称三方面内容, 其中营养成分含量的标示是后两种声称的基础。我国现行食品营养成分标示方法包括范围值、平均值或最高 (低) 值三种, 根据北京市场常见包装食品营养成分标示情况的调查结果, 婴幼儿配方食品是目前我国营养成分标示率最高的一类食品, 这与其强制性技术要求有关。本研究希望通过对婴幼儿配方乳粉和米粉主要营养成分标示情况的对比分析, 对食品营养标签标示方法的合理性进行探讨。
1 材料和方法
1.1 样品
在全国范围10个省市地区内开展婴幼儿乳米品样点分析调查, 其中, 奶粉被抽查企业共计60家, 样品198个。米粉被抽查36个品牌, 样品128个。蛋白质控物选择采用了两个品种, 即小麦粉 (GBW 08503b) 、乳粉 (GBW08509a) , 而其他的钙铁等微量元素的测量则使用了猪肉粉 (GBW 08552) 为控物, 经检测, 他们品质都符合国家标准。
1.2 方法
1.2.1 标签记录对所有被抽查的样品信息进行全面细致的台帐登记, 包括产品的品牌名称、生产日期、保质期、生产批次等, 尤其要产品配方的微量元素包括蛋白质、维生素A、钙、铁等的成分含量和标示量进行一一记录。
1.2.2 营养成分分析以GB 5413) -1997为参考依据, 进行内部各种元素的测量, 得出所标示值度的差异。
1.3 结果判定
1.3.1 非标样品的判定依据
以乳品种类为标准, 一般情况下, 对适宜人群进行了如下分类, 婴儿阶段 (一周以下) , 较大婴儿阶段 (半周~三周之间) , 以及谷物类食用阶段 (四月以上) , 按照政府曾颁布的实施标准即GB10767-1997和GB13432-2004, 对婴儿奶粉营养元素含量进行了具体规定。不合格分类和状况有三种, 一、标示不合格 (即未按上述国家标准进行配方) ;二, 检测值不合格, 一般是指某一类元素严重超标现象。即奶制品内各类成份均值与国标差异值必须保持在规定的区间内, 如蛋白质、脂肪元素波动不得超过15%, 维生素一般不得超过80%, 矿物质类差距不得大于20%。而元素若以区间形式标示时, 含量不得超过最大值。若以最小值标示时, 检测含量不得低于该值。第三, 质量不合格属于严重违规行为, 即标示量与检测值都不合规现象。
1.3.2
最大允许偏差评估调整偏差定义是指, 各类营养元素允许单位的最大值P与最小值的比值。为了确保计算的有效性, 必须保证评估基准的统一。计算实施依据为:若是平均值标示方式, 最大值不得超过1。若以范围标示方式, 其数值为高低比值等等。
1.4 质量控制
对抽检对象实施平行测定的方式, 以各种微量元素, 如蛋白质、钙铁锌等以控物为依据, 用测量结果实施质量监控。考虑到维生素A元素的特殊性, 必须采用已经实施了不少于10次的测量过程的试验品作为控物, 且它们的标准差不得高于5%。
1.5 统计分析
1.5.1 不合格率的计算经过分析, 得出该计算公式p=r/n×100%, 其中, r代表超标样品数量, n代表样品用量, p代表两者的比值大小。但注意, 凡是从不同地区抽取的相同样品只能按一次计算。
1.5.2标示方法间检测不合格率差异的分析首先要把所有样品内不符合标准的产品全部筛选掉, 依据该公式分别列出各类营养元素的超标情况, 根据行x列表V2的参数进行验证, 和分割V2检验的结果对两者的超标的差值大小情况。
1.5.3 统计软件建立Excel表格, 将各类营养元素的标示和检测结果一一录入其中, 编制IF判断方程式, 设定合格值为0, 不合格1, 。最终统计出所有不合格品的数量。然后将结果作用SPSS软件进行智能分类分析, 样品类型间和营养元素等的超标情况, 使用V2进行结果验证, 凡是P<0105的都代表效果显著意义。
2 结果
标示方法的实施表述通过上述计算, 结果显示, 有效样品的总数为276个, 其中乳粉类占到156个, 米粉类为120个。由于产品类型的不同, 标示方式也存在很大差异。例如, 乳粉类中, 几大主要营养元素, 如蛋白质等, 通常使用均值和区间的方式标明。而米粉类的普遍采用最小值方式标明。维生素片A的表述方式两类产品基本一致。营养元素钙的表述方式, 乳品业内基本都才用了最小值和区间的方式, 后者则部分采用了均值方式。铁锌元素, 乳品多数为区间标示法, 粉类品多采用最小值法。
不合格率的判定及分析该文以GB10767-1997为研究的实施标准, 针对所有样品的营养含量和标示方式开展了综合论述, 得出结果, 被抽检对象中, 所有乳品的蛋白质和脂肪元素大部分都达标, 而相对来说, 微生素A元素则超标现象比较多, 且米粉类的又普遍高于乳粉类。最终表明, 成品的达标率受到样品的制造商和营养特性影响较大。
3 结语
作为食品企业, 应以科学合理的检测方法来向公众展示出食品的营养成分。通过平均值得标示方法来标示营养成分是比较透明的, 从透明的角度来说, 建议食品企业采用这种方法来进行产品营养成分上午含量标示。检测的营养成分的数据和标示中的营养成分数值并不完全一致, 有一个合理的误差范围, 能量的实际检测出来的数值也是由计算法获得的, 但标签中标示的能量数值允许有个误差范围, 这个数值如果与标示的数值的计算法得来的不一致, 但在允许误差范围内, 也是合格的。为保证营养检测的合理性和可信性, 建议有关部门在组织调研基础上针对食品种类和特性制定可操作性更强的判断标准。
参考文献
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[3]冯悦红, 杨月欣, 石磊, 等.北京市场常见包装食品营养成分标识的调查[J].中国卫生监督杂志, 2012, 9 (6) :332-335.
【摘要】目的：本文以新疆产瓦松作为研究对象，采用比色法，测定瓦松有效成分总三萜的含量。方法：以齐墩果酸作为对照品，以5%香草醛-冰醋酸、高氯酸作为显色剂，在540nm波长处处测定样品吸收度。结果：齐墩果酸在4～16μg／ml线性范围内，线性关系良好，其回归方程为：A=0.1082C+0.1105，r=0.9981，所测瓦松中总三萜成分为1.51％,RSD=1.31%。
【关键词】瓦松;总三萜;比色法
【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)10-0011-01
黄花瓦松(Orostachys spinosa (L.) C.A. Mey.)为景天科瓦松属(Orostachys)二年生肉质草本植物，又名昨叶荷草、向天草，为我国传统用药[1]。其性味酸、苦、凉（《唐本草》等），归肝、肺、脾经（《本草再新》），具有清热解毒、凉血止血、利湿消肿、抗菌消炎等功效，中国药典(2005年版)对其进行了收录。瓦松属植物全世界约有13种，主要分布于温带地区，我国约有10种，在新疆也有着广泛的分布（新疆药用植物志第三册）。经研究表明，萜类化合物是其主要有效化学成分之一。为了更好地利用和开发其药用成分，本实验以齐墩果酸为对照，采用5%香草醛-冰醋酸、高氯酸显色的方法，首次对瓦松中总三萜类成分的含量进行测定，为其进一步开发利用提供了可靠的鉴定依据。
1试药及仪器
试药：所用试剂均为国产分析纯，黄花瓦松采自新疆农九师165团。齐墩果酸对照品购于武汉卓康科技发展有限公司。仪器：水浴锅（SB-1000上海爱明仪器有限公司）、分光光度计（722N型上海精密科学仪器有限公司）
2方法[2~5]及结果
2.1对照液的制备精确称取齐墩果酸对照品20mg，置于100ml容量瓶中。加甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，备用。
2.2测定波长的选择将齐墩果酸对照品加显色剂后，于分光光度计上扫描，得吸收光谱图，结果如图1，齐墩果酸在540nm处有一吸收峰，故确定540nm为测定波长。
2.3显色剂用量及条件选择
2.3.15％香草醛-冰醋酸溶液用量的选择取齐墩果酸对照品溶液1.0ml5份，水浴挥干，分别加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml，各加入高氯酸1.4ml，置70水浴加热15min，冰浴冷却后，转移至10ml容量瓶中加乙酸乙酯稀释至刻度。摇匀，在540nm波长处测定吸收值，结果见表1。结果表明5%香草醛-冰醋酸用量为0.4ml时最佳。
2.3.2高氯酸的用量的选择取齐墩果酸对照品溶液1.0ml5份，水浴挥干，分别加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸1.0、1.2、1.4、1.6、1.8ml，置70℃水浴加热15 min，冰浴冷却后，转移至10ml容量瓶中加乙酸乙酯稀释至刻度。摇匀，在540nm波长处测定吸收值，结果见表2。结果表明，高氯酸用量为1.6ml时最佳。
2.4对照曲线的制备精确吸取对照液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml，分别置具塞试管中，挥去溶剂，准确加入5%香草醛-冰醋酸0.4ml、高氯酸1.6ml，混匀，置7O℃恒温水浴中加热15min，冷却至室温，并转移至10ml容量瓶中加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，在540nm波长处测定吸收度，以不加对照品溶液而直接加5%香草醛-冰醋酸0.4ml，高氯酸1.6ml，用乙酸乙酯稀释至刻度的混合溶液为空白对照，并以A对浓度C回归得方程：A=0.1082C + 0.1105，r =0.9981，线性范围在4～16μg/ml。
2.5供试品溶液的置备精确称取瓦松25mg。置25ml容量瓶中。加乙醚15ml。超声提取3O分钟，再添加乙醚至刻度。精密吸取15.0ml，置于25ml容量瓶内，挥干溶剂，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
2.6含量测定方法精确称取供试液溶液3ml，加入10ml容量瓶内，挥干溶剂，加乙酸乙酯至刻度，再从中精密吸取4ml溶液加入10ml容量瓶内，挥干溶剂后，加入5%香草醛-冰醋酸0.4ml、高氯酸1.6 ml，混匀，并由乙酸乙酯稀释至刻度，按样品测定项下操作。代入标准曲线方程，计算含量。结果表明总三萜类成分含量为1.51%(n=5)，RSD=1.31%。2.7稳定性试验同一份样品按上述方法处理，在1日之内，隔1h测定，共测6次，得平均含量为1.50，RSD为1.58%，结果说明显色反应在6h基本稳定。
2.8加样回收率试验精密称取已知含量的瓦松粉末0.2g，6份，精密加入齐墩果酸对照品1mg，照供试品溶液制备方法制成10ml样品液，各吸取0.1ml，依法显色后测定吸收度，见表3，计算回收率，得平均回收率为98.718%，RSD=0.8644%。
3讨论
三萜类化合物为药用植物中主要的有效化学成份之一，对药用植物黄花瓦松中总三萜成分的测定未见文献报道，本文所得结果表明黄花瓦松中三萜类成分含量较高，作为我国的传统用药，可对其进行更深入的研究与开发。比色法是测定三萜类化合物常用方法，本文探讨了显色条件以及反应后放置时间对含量测定的影响，结果表明，香草醛-冰醋酸溶液以及高氯酸用量等因素的影响较为显著，反应后的放置时间在6h内基本稳定，此方法简单可行，
其结果较稳定，重现性好，为测量瓦松中活性成分总三萜类成分提供了一种有效可靠的分析方法。
参考文献
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1 仪器与材料
安捷伦1200B型高效液相色谱仪(G1312B型二元泵,G1315C型DAD检测器,ChemS tation化学工作站);电子天平:BP211D(Sautoris,德国)d=0.1mg/0.01 mg,max=210 g/80 g;超声波清洗器:KQ5200DB型,昆山市仪器有限公司。
乙腈(迪马公司,色谱纯)、水为重蒸水,磷酸等其他试剂均为分析纯。试药:芍药苷对照品(批号:110736-201337)购于中国药品生物制品检定所;芍药内酯苷对照品(P/N:ABF-378105)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:C18柱(phenomenex公司,250 mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(25∶75);检测波长为230 nm;柱温:30℃;流速为1.0 mL/min。
2.2 药材及加工处理方法
取同一种植基地3年生亳芍30株,分为3组,各10株。洗净,去除杂质、芽孢、须根,保留主根和根茎。(1)将主根和根茎去除外皮,分别煮制15分钟,晒干。(2)将主根和根茎分别煮制15分钟,晒干,得白芍主根、根茎。(3)将主根和根茎去除外皮,直接晒干,得白芍去皮主根、根茎。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取芍药苷和芍药内酯苷对照品适量,加稀乙醇分别制成每1 mL含芍药苷83.2μg和芍药内酯苷34.4μg的混合对照品溶液。
2.4 供试品溶液的制备
2.4.1 提取溶剂的选择
取白芍主根粉末0.1 g,共三份,置50 mL量瓶中,分别加入稀乙醇、95%乙醇、甲醇35 mL,超声处理30分钟,放冷,再分别加稀乙醇、95%乙醇、甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。结果表明:稀乙醇提取的芍药苷和芍药内酯苷含量最高,故选择稀乙醇为提取溶媒。具体见表1。
2.4.2 提取方法的选择
取白芍主根粉末0.1 g,共两份,置50 mL量瓶中,各加稀乙醇35 mL,分别进行浸渍处理和超声处理30分钟,放冷,分别加稀乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。结果表明:超声提取比浸渍提取含量略高,故选择超声提取方法。具体见表2。
2.4.3 提取时间的选择
取白芍主根粉末0.1 g,共三份,置50 mL量瓶中,各加稀乙醇35 mL,分别超声处理15分钟、30分钟、45分钟,放冷,再加稀乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。结果表明:超声30分钟即可提取完全,故选择提取时间为30分钟。具体见表3。
2.5 方法学考察
2.5.1 专属性试验
按2.4项下供试品制备方法制备阴性对照溶液和供试品溶液。吸取阴性对照溶液和供试品溶液两种溶液及芍药苷和芍药内酯苷混合对照品溶液各10μL注入高效液相色谱仪。结果阴性对照色谱图中无峰无干扰。见图1。
2.5.2 线性关系考察
精密吸取芍药苷和芍药内酯苷混合对照品溶液2、6、10、14、20μL进样,测定峰面积,以进样量(μg)为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。得回归方程,芍药苷:Y=1042X-2.129,R2=1;芍药内酯苷:Y=912.8X+6.2729,R2=0.9999。结果表明芍药苷和芍药内酯苷分别在0.1664~1.664μg,0.0688~0.688μg范围内线性关系良好。
2.5.3 精密度试验
分别精密吸取芍药苷和芍药内酯苷混合对照品溶液10μL,连续进样6次,测定各峰面积。结果:芍药苷和芍药内酯苷的RSD分别为0.23%、0.09%,精密度良好。
2.5.4 重复性试验
取同一批样品6份,精密称定,按2.4项下供试品溶液制备方法制成供试品溶液,分别测定芍药苷和芍药内酯苷峰面积,计算含量,计算RSD。结果:芍药苷的平均含量为1.25%,RSD为1.05%;芍药内酯苷的平均含量为3.42%,RSD为1.79%。
2.5.5 稳定性试验
取同一供试品溶液,分别于0、4、8、16、24小时进样10μL,测定供试品溶液的峰面积,计算RSD。结果:芍药苷和芍药内酯苷的RSD分别为0.33%、0.11%,二者稳定性良好。
2.5.6 加样回收率试验
取已知含量的样品约0.05 g,共6份,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别精密加入各对照品适量,按照2.4项下供试品制备方法制备加样回收供试品溶液,精密吸取10μL注入液相色谱仪,计算加样回收率。结果:芍药内酯苷平均回收率为97.02%,RSD为1.93%;芍药苷平均回收率为97.61%,RSD为1.46%,加样回收率良好。
2.6 样品含量测定
按2.2项下药材及加工处理方法处理药材,分别取3组样品粉末0.1 g,精密称定,按照2.4项下供试品制备方法操作,10个批次,每个批次平行2份,测定白芍主根和根茎部分中芍药苷和芍药内酯苷的含量。结果:经过煮制后的白芍去皮主根或根茎芍药苷和芍药内酯苷总含量低于未煮制。无论是否煮制,白芍根茎中芍药苷和芍药内酯苷的含量均高于主根。具体见表4。
白芍的主根和根茎部分去皮后芍药苷和芍药内酯苷总含量高于未去皮的方法。其中芍药苷的含量去皮的方法高于未去皮,而芍药内酯苷的含量则低于未去皮的方法,说明在皮中可能芍药内酯苷的含量较高。无论是否去皮,白芍根茎中芍药苷和芍药内酯苷的含量均高于主根。具体见表5。
3 讨论
本文对白芍中主要成分芍药苷和芍药内酯苷的色谱方法进行优化,对色谱柱型号、流动相的选择、流速、柱温等进行筛选,最终建立了含量测定方法,此方法所测成分色谱峰与其他成分分离良好。实验结果显示:白芍主根或根茎经过煮制后的芍药苷和芍药内酯苷低于未煮制的总含量;白芍的主根和根茎部分去皮后芍药苷和芍药内酯苷总含量高于未去皮相同部位;无论是否煮制,是否去皮白芍根茎中芍药苷和芍药内酯苷的含量均高于主根,与相关文献报道一致。吴雄壮等[2]实验结果显示:相同生长年限的白芍其根茎部位的芍药苷含量比主根部位明显偏高,不同生长年限的白芍根茎部位的芍药苷含量相差不大。周学刚等[3,4]实验结果显示:白芍地下各部分芍药苷含量差异明显,均呈现根茎>须根>主根。《中华人民共和国药典》(一部)规定白芍药用部位为根,加工方法为置沸水中煮后除去外皮或去皮后再煮,晒干。但从本实验不同药用部位的白芍主要成分芍药苷和芍药内酯苷含量可以看出,采集部位建议保留根茎。实验仅以亳芍为样本,未对不同产地的白芍加以比较,且仅对主要成分芍药苷和芍药内酯苷进行测定,需进一步研究白芍根茎和主根HPLC指纹图谱之间的成分差异。
摘要：目的 采用高效液相色谱法检测亳芍不同的样品处理方法下主根和根茎部分芍药苷和芍药内酯苷的含量。方法 采用高效液相色谱法,色谱条件:C18柱(phenomenex公司,250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(25:75);检测波长为230 nm;柱温:30℃;流速为1.0 m L/min。结果经过煮制后的白芍去皮主根或根茎所含芍药苷和芍药内酯苷的总含量低于未煮制;白芍的主根和根茎部分去皮后芍药苷和芍药内酯苷总含量高于未去皮的主根和根茎;无论是否煮制,是否去皮,白芍根茎中芍药苷和芍药内酯苷的含量均高于主根。结论 白芍根茎有作为药用部位的基础。
关键词：白芍根茎,芍药苷,芍药内酯苷,高效液相色谱法
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2015:105.
[2]吴雄壮,王美芳,杨思沅,等.不同部位和不同生长年限白芍中的芍药苷含量测定[J].中国现代应用药学杂志,2006,23(4):291-293.
[3]周学刚,张丽萍,王艳芳,等.煮制对白芍中芍药苷含量的影响[J].医药导报,2011,30(1):82-85.
关键词：体脂；脑血流速度；经颅多普勒；InBody身体成份分析仪
中图分类号：G804.21文献标识码：A文章编号：1007-3612(2008)07-0941-03
随着人们生活水平和社会文明程度的逐步提高，人们的生活方式发生了明显变化，身体活动大为减少，静坐、肥胖人群大为增加。体脂是人体正常的组成成份，对于保证人体正常生理功能起着重要作用。但体脂过多会增加胰岛素阻力［1］、引起高血压［2］、脂肪代谢障碍、冠心病［3］、呼吸疾病［4］等。据国内外研究报道［5］，随着年龄增长，脑血流速度递减。同样也有研究表明［6］，随着年龄增长，身体活动减少，去脂体重（瘦体重）特别是骨骼肌减少，体脂却增加。那么随着年龄的变化，脑血流速度的降低和体脂的增加，这两者之间是否存在内在联系,是否有因果关系呢,有关这方面的文献报道尚不多见。因此，本研究运用CBS-II经颅多普勒诊断系统，检测了20名男女大学生安静时大脑中动脉的血流速度，同时采用InBody 人体成分分析仪对其身体成分进行了评估分析，然后又进行了相关分析，以便探讨体脂与CBFV之间的内在联系及体脂对CBFV的影响。
1研究对象与方法
1.1研究对象
20名北京体育大学武术学院2005级健康大学生，男、女各10人，年龄19～22岁，平均年龄(19.80±1.01)岁，身高151～176 cm，平均身高(163.60±6.39)cm，体重45.10～68.10 kg，平均体重(58.32±6.00)kg。所有受试者都自愿参加本研究，均无心脑血管和精神疾病史，无服用影响精神状态的药物。要求所有受试者检测前12 h内不食用或饮用任何含咖啡因的食品或饮料。
1.2经颅多普勒（TCD）参数的检测
1.2.1脑血管的选择选择大脑中动脉（middle cerebral artery, MCA）作为检测TCD各项参数的血管，理由是：1) 大脑皮层的血液供应主要来自MCA；2) MCA的超声窗为颞窗，便于固定多普勒超声探头；3) MCA特殊的解剖结构，使得它是经颞窗检出率最高、频谱最清晰而又稳定的血管［7］。
1.2.2大脑中动脉多普勒参数的检测大脑中动脉的多普勒信号用手持式探头通过颞窗定位，在44～55 mm的深度探测，即MCA的近端段，透射角为探头向上、向前方向。每位被测者超声探测的深度范围和角度在整个测试过程中保持恒定。参考他人研究的结果［8］，同一受试者的左右两侧大脑中动脉的血流速度非常接近，无显著性差异，故本次测试的血流速度仅以左侧的大脑中动脉作为代表。在每一次测试过程中都要尽可能确保探头位置和角度固定不变。
整个测试在专门的脑功能实验室进行。受试者坐在一张舒适的椅子上，尽可能减少焦虑，不允许他们想任何问题、说话或活动，也不允许和他们说话。采用EDAN仪器有限公司产CBS-II经颅多普勒诊断系统，用标准的血管超声检查方法［9］，选用2MHzPW探头，经左颞窗探测颅内左侧MCA，探测深度为44～55mm。调整获得理想信号后，冻结频谱，记录MCA的Vp、Vd 、Vm 和PI。
1.3身体成份的测定测试在专门的身体成份分析实验室进行。先将韩国产In Body 人体成份分析仪开机、预热、自检达规定要求，然后将被测者的一些基本数据按规定输入分析仪。要求每个被测者脱去外套，尽可能少穿衣裤，赤脚站在人体成分分析仪上，脚跟、脚掌要站在电极的中央，双手分开持上手部电极，大拇指轻轻按住金属部件，保持放松、安静状态，按下开始按钮开始分析检测，并将检测结果自动打印出来。
1.4统计分析
所有数据均用SPSS12.0软件包进行统计分析。安静时测得的身体成分各指标值与大脑中动脉的血流速度各参数测得值进行相关分析，并进行显著性检验。数据一律用X±S表示，显著性水平选为P<0.05，非常显著水平选为P<0.01。
2结果
男女受试者MCA的Vm 、Vp、Vd 和PI及其体脂（bodyfat）、体脂百分数（% bodyfat）和体重指数（BMI）的测试结果分别见表1和表2。
不论男女受试者MCA的Vm、Vp和Vd分别与其body fat、% body fat和BMI呈显著负相关,分别见表3、表4和表5，无论男女受试者MCA的PI都与其body fat、% body fat和BMI呈显著正相关，见有表6。结果表明：体脂对脑血流速度有显著的负面影响作用，体脂增加，CBFV降低。
3分析与讨论
TCD技术是利用超声波来探测血管的血流速度。我国自20世纪80年代末期引进TCD技术以来，一直用于检测颅内血管血流速度。血流速度包括收缩期峰速度（Vp）、舒张期末峰速度（Vd）和平均峰速度（Vm）。其中Vp是心脏收缩，血流通过主动脉进入脑动脉所能达到的最高血流速度，主要受血压的影响；Vd是心脏舒张末期脑动脉维持的最低血流速度，与血管阻力有较大的关系；Vm是通过血流频谱的Vp 与Vd几何面积计算法所获得的血流速度均值，是较Vp 与Vd相对稳定的血流参数［10］，Vm代表搏动性血管的供应强度［11］。由于国内外学者的研究证实颅底动脉的血流速度与局部脑血流量有良好的相关［12］，因此，Vm尚可用来评价局部脑血流量的变化。
PI值取决于多普勒Vp值与Vd值之差及Vm值的高低。在体循环无改变时，PI值可反应血管顺应性或弹性，并可提示供血动脉病理生理特征。PI值增大，说明脑血管阻力增高，反之亦然。随着年龄的增长，PI值逐渐增大，反映了随年龄的增加脑动脉顺应性减退和外周阻力增大。
人体的组成成分主要是水、脂肪和固体成分的蛋白质、矿物质和碳水化合物等，各种成分组成了人体的总重量，即体重。人体各成分的相对平衡，对人体正常的生命活动和维持健康水平是极为重要的。根据生理功效的不同，常把体重分为脂肪重（体脂）和去脂体重（瘦体重）［13］，体成分通常以体脂百分数来表示。通过身体成分的测量评价，对了解人体的营养状况、科学指导膳食和预防某些疾病均有重要的作用。
脂肪是人体正常的组成成分，对于保证人体正常生理功能起着重复作用。但体脂含量过多，即脂肪细胞内脂肪的过度积累，会发生肥胖。肥胖无益于健康，其主要的健康损害是非胰岛素依赖性糖尿病、冠心病、高血压、胆囊疾病、社会心理问题及某些癌症（如乳腺癌、子宫内膜癌等）［14］。研究表明，肥胖是致AS和CVD的重要的独立危险因素。长期的前瞻性研究表明，肥胖本身也是CHD发病和死亡有关的独立危险因素［15］。心脏本身的脂肪沉积，以及营养障碍等，使心肌收缩力减弱，心搏量减少，血流速度减慢。
本研究应用经颅多普勒技术，检测了20名男女大学生安静时大脑中动脑（middle cerebral artery, MCA）的Vm、Vp、Vd 和PI，同时采用In Body 人体成分分析仪评估分析了他们的身体成分，并对MCA的Vm、Vp、Vd 和PI的检测值与体脂、体脂百分数和BMI的测定值分别做了相关分析，且进行了显著性检验。结果表明，不论男女受试者，MCA的Vm、Vp和Vd 都分别与体脂、体脂百分数和BMI呈显著负相关，这提示体脂对脑血流速有显著的负面影响，即脑血流速度随体脂的增加而降低。同样不论男女受试者，MCA的PI与体脂、体脂百分数和BMI呈显著正相关，这表明体脂对脑动脉的搏动指数有显著的正面影响，即体脂增加，PI值增大。而PI值增大，说明脑血管阻力增高，反之亦然。其机制可能是体脂增加，引起高脂血症。而过多的血脂，尤其是低密度脂蛋白会在动脉内表面上聚积，形成粥样瘤或纤维——脂质斑块，即动脉粥样硬化，导致动脉管腔狭窄、血栓形成、动脉壁硬化增厚和钙化等变化。在人体的动脉中，以冠状动脉和脑动脉（及颅外颈动脉）最易受损，并相应地引起冠状动脉粥样硬化性心脏病（CHD）和缺血性脑血管病。在这一系列因素综合作用下，脑动脉血管的顺应性下降，PI值增大，血管内血流量减少，脑血管充盈度降低，脑血流速度减慢。从本研究的结果看，脑血流速度与体脂之间达到了显著的线性负相关，这在一定程度上表明它们之间有一定的关联作用，至少可以说随着年龄的增长，体脂的增加是引起脑血流速度下降的因素之一［16］。
4小结与建议
运用经颅多普勒检测技术，检测了20名男女大学生大脑中动脉的血流速度，同时使用InBody人体成分分析仪对其身体成分进行了评估分析。他们的大脑中动脑的血流速度和其身体成分相关分析的结果表明体脂对脑血流速度有显著负面影响作用，体脂增加，脑血流速度减慢，脑灌注压降低，脑血供减弱。因此，要维持大脑正常生理功能，保证有充裕的血液供应，就一定要确保人体各成分的相对平衡，防止体脂在人体内过度聚积，这样才有利于身体健康。
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关键词：蛹虫草；配方培养基；虫草素；腺苷；多糖；虫草酸
中图分类号：S567.3+50.1文献标志码：A文章编号：1002-1302（2014）11-0351-02
蛹虫草别称北冬虫夏草、北虫草等，是冬虫夏草的近缘种，也是虫草属真菌的模式种[1]，其活性成分和医疗保健功效与冬虫夏草相近。冬虫夏草由于生境特殊、寄主单一、产量较低，加之人工培育技术难以突破，市场价格高昂。蛹虫草可以进行人工培育，其主要活性成分有虫草素、腺苷、多糖、虫草酸，特别是虫草素含量远高于冬虫夏草[2]，在药理或临床试验中可作为冬虫夏草的替代品。蛹虫草人工培养方式有固体培养、液体发酵、有蚕培养、蛹培养，还有用大米、小麦代料栽培或添加微量元素等，并在一些地区形成规模，但培育的蛹虫草活性成分含量不高。目前，以提高蛹虫草活性物质含量为指标，对蛹虫草发酵条件的优化研究从未间断，也取得了很大进展[3-5]。本研究采用固体培养，以蚕蛹作为基础培养基，适量添加黄豆、玉米糁、蛋白胨，比较不同配方对蛹虫草中虫草素、腺苷、多糖、虫草酸含量的影响，以期为蛹虫草活性物质含量研究奠定基础。
1材料与方法
1.1材料与试剂
菌种：蛹虫草H-3麦粒菌种，江苏食品药品职业技术学院食品与营养工程学院食用菌课题组自行培育。
材料：蚕蛹（江苏省淮安市丝织厂），蛋白胨（生化试剂，国药集团化学试剂有限公司），黄豆、玉米糁购自江苏省淮安市农贸市场。
药品与试剂：磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钙、葡萄糖、D-甘露醇、高碘酸钠、乙酸铵、冰醋酸、无水乙醇、苯酚、98%浓硫酸、磷酸氢二钾、四氢呋喃等均为分析纯，培养用水为自来水，分析用水为双蒸水。虫草素对照品、腺苷对照品由上海化学试剂公司进口分装。
1.2仪器设备
培养设备：高压蒸汽灭菌锅，超净工作台，恒温培养箱；样品处理设备：电热恒温鼓风干燥箱，粉碎机，台式离心机，电子天平，微波炉等；检测设备：美国Waters高效液相色谱仪系统（600Epump，600controller，2487紫外检测器，In-lineDegasserAF在线脱气机，Empower色谱数据管理系统）。
1.3方法
1.3.1培养基配制配方1：蚕蛹200g（蚕蛹干质量100g，按50%折算，下同），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，5mL水。配方2：蚕蛹140g，黄豆30g（蚕蛹与黄豆质量比为7∶3），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，45mL水。配方3：蚕蛹120g、黄豆40g（蚕蛹与黄豆质量比为6∶4），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，60mL水。配方4：蚕蛹100g、黄豆50g（蚕蛹与黄豆质量比为5∶5），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，75mL水。配方5：蚕蛹140g、玉米糁30g（蚕蛹与玉米糁质量比为7∶3），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，30mL水。配方6：蚕蛹120g、玉米糁40g（蚕蛹与玉米糁质量比为6∶4），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，40mL水。配方7：蚕蛹190g、蛋白胨5g（蚕蛹与蛋白胨质量比为95∶5），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，10mL水。配方8：蚕蛹180g、蛋白胨10g（蚕蛹与蛋白胨质量比为9∶1），加1.5%硫酸钙，0.1%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁，2%红糖，20mL水。
1.3.2接种培养将配制好的培养基于115℃灭菌90min，冷却。在超净工作台上按无菌操作要求接入蛹虫草H-3菌种，每瓶接6粒麦粒菌种，置培养箱中于25℃下培养，培养结束后将培养物于60℃烘干，粉碎待测。
1.3.3样品处理采用微波法提取样品[6]。称取一定量样品粉末，用水作提取介质，料液比1∶100，经微波法辅助提取，并将提取液离心得上清液，備用。
1.3.4虫草素与腺苷测定采用HPLC法测定蛹虫草虫草素与腺苷[6]，上清液经0.2μm微孔滤膜压滤，色谱条件为：WatersNova-pakC18（3.9mm×300.0mm，4μm）；流动相为KH2PO4-K2HPO4+1%（体积分数）四氢呋喃缓冲液，pH值为6.86，流速为1.0mL/min，检测波长260nm。虫草素标准曲线回归方程为y=3.10×106x-1.34×104，r=0.9999；腺苷标准曲线回归方程为y=3.55×106x-5.72×103，r=0.9999；式中y为色谱峰面积，x为虫草素或腺苷的进样量。
1.3.5蛹虫草多糖测定蛹虫草多糖测定采用苯酚-硫酸法[7-8]。多糖在酸性条件下水解成葡萄糖等单糖，用葡萄糖配制系列标准溶液，于490nm处测定吸光度，得到葡萄糖含量（C葡萄糖）与吸光度（D）的回归方程：D=7.3542C葡萄糖+0.0532，r=0.9996。
1.3.6虫草酸测定采用高碘酸钠比色法测定虫草酸[9]。虫草酸的化学成分为D-甘露醇，用甘露醇配制系列标准溶液，于420nm处测定吸光度，得到甘露糖含量（C甘露糖）与吸光度（D）的回归方程：C甘露糖=104.5500D+0.3012，r=0.9999。
2结果与分析
2.1不同配方培养基对蛹虫草虫草素含量的影响
nlc202309032136
蚕蛹营养丰富，蛋白质含量高，而且蛋白质中氨基酸种类齐全，可直接作为蛹虫草生长的培养基。由表1可知，试验所用8种培养基均适合蛹虫草生长，虫草素含量也较高，其中配方5下蛹虫草虫草素含量最高，达4.75mg/g。配方5和配方6虫草素含量差异显著，配方5、6与配方1、2、3、4、7、8虫草素含量差异极显著。从表1还可见，配方5、6、7、8虫草素含量大于配方1，说明在纯蛹培养基中添加适量玉米糁、蛋白胨有利于虫草素积累；配方2、3、4虫草素含量小于配方1，说明在纯蛹培养基中添加黄豆未能提高蛹虫草虫草素含量。
2.2不同配方培养基对蛹虫草腺苷含量的影响
由表2可知，配方1下蛹虫草腺苷含量最高，达0.55mg/g，其次为配方5，配方8下蛹虫草腺苷含量最低。配方1、5與配方2、3、4、6、7、8腺苷含量差异极显著。试验表明，在纯蛹培养基中添加黄豆、玉米糁、蛋白胨均未能显著提高蛹虫草腺苷含量。
2.3不同配方培养基对蛹虫草多糖含量的影响
表3显示，配方4下蛹虫草多糖含量最高，达75.67mg/g，配方8下蛹虫草多糖含量最低。配方2、3、4和配方1、5、6、7、8多糖含量差异极显著，配方5、6和配方1、7、8多糖含量差异极显著，说明在纯蛹培养基中添加适量黄豆、玉米糁有利于蛹虫草多糖的产生和积累。
2.4不同配方培养基对蛹虫草虫草酸含量的影响
由表4可知，配方4下蛹虫草虫草酸含量最高，达76.73mg/g，配方3下蛹虫草虫草酸含量最低。配方4和其他配方下的虫草酸含量差异极显著。
3结论与讨论
本研究对不同配方培养基处理下的蛹虫草中虫草素、腺苷、多糖、虫草酸含量进行了比较。结果表明，配方5（蚕蛹与玉米糁质量比为7∶3）下蛹虫草虫草素含量最高，说明在纯蛹培养基中添加适量玉米糁可显著提高虫草素含量；在纯蛹培养基中添加适量黄豆、玉米糁有利于蛹虫草多糖的产生和积累；配方4（蚕蛹与黄豆质量比为5∶5）下蛹虫草虫草酸含量最高。综上，以纯蛹为基础培养基，添加适量黄豆、玉米糁、蛋白胨有利于蛹虫草虫草素、多糖、虫草酸含量的提高。但在该试验条件下，腺苷含量没有显著提高。如要提高腺苷含量，还须进一步研究。
蚕蛹营养价值高，可直接作为蛹虫草的培养基，添加适量黄豆、玉米糁后培养基碳氮比更加合理，有利于蛹虫草活性物质产生和积累。如果再配合其他育种技术，会使活性成分总量得到进一步提高。在纯蛹培养基中添加其他成分能否进一步提高蛹虫草中虫草素、腺苷、多糖、虫草酸含量，还须深入研究。
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合作猪的第一个特性是个体矮小, 品种纯, 在个体矮小这一点上与我国有名的“小香猪”、“小耳猪”相比, 各项指标为最优, 同行称合作猪是我国小型猪种中优良的基因猪种。合作猪的第二个特性是肉质上乘, 皮薄肉嫩味鲜, 断奶仔猪肉无腥味或其它异味。由于春、秋放牧期间主要采食萎陵菜 (俗称蕨麻) 的根茎、嫩草茎叶, 所以其肉质特别鲜美, 皮薄肉香, 久负盛名, 所以将其称为“蕨麻猪”, 凡吃过这种猪肉的人无不称赞其美味, 现已是藏区宴席上的一道名菜。
1 材料与方法
1.1 试验材料及处理
分别取屠宰后的合作猪 (蕨麻猪) 和长白猪、金华猪、约克夏猪、杜洛克猪、八眉猪、民猪12-13胸肋处背最长肌测定肉色和大理石纹。取最后1胸椎处背最长肌测p H值;取头半刺肌在0~4℃条件下存放24 h后测p H值;取腰椎处背最长肌测定系水力, 取左右两侧腰大肌测定熟肉率。
1.2 脂肪
脂肪测定:采用索氏抽提法测定。
1.3 蛋白质
蛋白质测定:采用凯氏定氮仪测定。
1.4 氨基酸
氨基酸测定:制备的样品用岛津835-型氨基酸分析测定。
2 结果与分析
2.1 食用品质对比研究分析
见表1。
合作猪 (蕨麻猪) 肉色评分3为理想评分, 显著低于八眉猪 (P<0.01) , 说明蕨麻猪肉肉色鲜美, 不易形成变质肉;蕨麻猪肉p H值适中, 显著高于长白猪和约克夏猪 (P<0.05) , 而与其它猪种的p H值相近, 说明不易形成PES肉;蕨麻猪肉大理石纹评分为1.60, 极显著低于民猪、金华猪、八眉猪 (P<0.01) , 显著低于长白猪、杜洛克猪 (P<0.05) , 说明蕨麻猪肉大理石纹分布均匀;系水力比较, 蕨麻猪均高于其它猪种, 极显著高于长白猪、金华猪、杜洛克猪、八眉猪 (P<0.01) , 显著高于约克夏猪 (P<0.05) , 说明在生产性能上占有一定优势, 不易变为DFD肉;蕨麻猪熟肉率极显著高于金华猪和民猪 (P<0.01) , 且显著高于八眉猪、长白猪、杜洛克猪、约克夏猪 (P<0.05) ;甘南蕨麻猪肉嫩度极显著高于长白猪 (P<0.01) , 显著低于杜洛克和民猪 (P<0.05) , 与八眉猪、金华猪和约克夏猪无显著差异, 说明甘南蕨麻猪嫩度适口性好。因此就肉品食用品质而言, 甘南蕨麻猪具有颜色鲜美、肉色正常、大理石纹适中、嫩度好、口感细嫩、具有优良肉品质的特征。
2.2 肌肉营养成分对比分析
见表2。
合作猪 (蕨麻猪) 肌肉脂肪含量显著低于国外猪种杜洛克 (P<0.05) 和极显著低于国内猪种八眉猪 (P<0.01) , 与其它国外猪种长白猪, 约克夏和国内猪种金华猪、民猪的肌肉脂肪含量基本接近, 差异不显著性 (P>0.05) , 肌肉脂肪含量与肌肉的保水性有密切关系, 经研究发现, 随着屠宰体重的增加, 肌肉脂肪含量有增加的趋势, 水分都趋于减少, 适度的脂肪含量不能增加肉质的嫩度, 但对口感、风味都有影响;合作猪 (蕨麻猪) 蛋白质含量显著低于国外猪种约克夏 (P<0.05) , 而显著高于国外猪种杜洛克 (P<0.05) , 与其它猪种蛋白质含量不存在显著差异;合作猪 (蕨麻猪) 肉氨基酸总量极显著高于国外猪种长白猪、约克夏和杜洛克 (P<0.01) , 也显著高于国内其它猪种。尤其是人体所需的必需氨基酸含量丰富而且含量高于国外猪种长白猪、杜洛克猪。氨基酸是构成蛋白质的基本单位, 猪肉中氨基酸含量和组成比例是评价猪肉营养价值的重要指标, 也是影响猪肉品质的重要因素。肌肉中某些氨基酸 (如谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、甘氨酸等) 为鲜味氨基酸, 这些氨基酸的含量决定了肌肉的鲜美程度。从氨基酸总量和组成来看, 蕨麻猪肉中氨基酸为其肉品的营养丰富和肉味鲜美提供了一定的物质基础。
分、%
%
3 结论
3.1 甘南合作猪 (蕨麻猪) 属小型地方优良猪种, 产肉性能较国内外其它猪种较低, 但一致认为肉品质为上乘。通过采用较先进的分析方法, 测定了甘南蕨麻猪肉食用品质 (包括肉色、p H、大理石纹、系水力、嫩度、熟肉率) ;肌肉营养成分 (脂肪、蛋白质、氨基酸) 等指标, 并与国外猪种长白猪、约克夏猪、杜洛克猪和国内地方猪种金华猪、八眉猪、民猪相比较认为:甘南合作猪 (蕨麻猪) 肉营养丰富, 富含人体所需的氨基酸, 尤其是食用品质优于国外猪种, 具有脂肪适中, 大理石纹分布均匀, 汁多柔嫩, 口感细腻的独特风味。
3.2 近几年猪病的持续发生以及原材料价格上涨等因素, 很多散养户、小型养殖场由于饲养技术落后, 资金缺乏、抗风险能力较低, 一直处于亏损状态, 使他们的养猪积极性受到沉重打击, 以至影响到了我州农牧民群众的经济收入, 但是合作猪 (蕨麻猪) 独特而优良的肉质特性, 绝非其它猪种能有的品质, 建议农牧民群众扩大饲养量, 同时在放牧的基础上加以舍饲补饲, 提高日粮的质量和蛋白含量, 缩短合作猪 (蕨麻猪) 的饲养周期, 加快出栏周转, 快速增加农牧民的经济收入。
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