宁波甬蓝检测（共2篇）
石敏1-7-7-1-5-8-2-8-7-0-7欢迎咨询
所谓“相”就是合金中具有同一化学成分、同一结构和同一原子聚集状态的均匀部分。不相之间有明显的界面分开。合金的性能一般都是由组成合金的各相本身的结构性能和各相的组合情况决定的。合金中的相结构大致可分为固溶体和化合物两大基本类型。
所谓“金相”就是金属或合金的相结构。
金相检验（或者说金相分析）是应用金相学方法检查金属材料的宏观和显微组织的工作。
金相学：狭义的金属学，也就是研究合金相图，用肉眼观察，在放大镜和显微镜的帮助下，研究金属和合金的组织和相变的学科。
1材料与方法
1.1标本来源
自2008年以来,设立宁波地区开展肠道传染病门诊监测的11个县(市)区疾控中心为感染性腹泻病原菌为主动监测点。利用肠道门诊监测标本,于每年的5-10月进行感染性腹泻病原菌检测,共采集检测腹泻病人粪便标本9 256份。
1.2培养基与主要仪器
TCBS琼脂、SS琼脂等为 英国OXOID公司产品;碱性胨水、GN肉汤、SF增菌液、mEC肉汤、营养琼脂、碱性蛋白胨 水、麦康凯、KIA等培养基 为青岛海博微生物 试剂有限 公司产品;显色培养 基为法国 科玛嘉公司产品;沙门菌诊断血清、志贺菌诊断血清为兰州生物品所 产品;肠道致病 性大肠艾 希氏菌由 宁波天润生物药业有限公司生产;副溶血弧菌“O”分群血清由日本生研力生株式会社生产;MH琼脂、18种抗生素药敏纸片和ESBL表型确证药敏纸片为英国OXOID公司产品;API20E生化鉴定 试剂条和VITEK32全自动微生物分析系统为法国生物梅里埃公司生产;耐药基因引物参照GenBank Access设计, 由上海生物工 程技术有 限公司合 成;DNA提取试剂、PCR反应试剂均购自大连宝生物公司,均在有效期内使用;PCR扩增仪为Eppendorf公司的Mastercycler梯度PCR仪。
1.3检测项目
沙门菌、志贺菌、致泻性大肠杆菌(致病性大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、产毒性大肠杆菌、肠聚集性大肠杆菌、出血性大肠杆菌O157等5种)致病性弧菌(副溶血性弧菌、霍乱弧菌等10种)、致病性气单胞菌(嗜水气单胞菌、温和气单胞菌等8种)、变形杆菌、类志贺邻单胞菌及金黄色葡萄球菌等。
1.4菌株分离与鉴定
病人大便标本采用直接分离与增菌分离相结合的方法,鉴定采用从分离平板上挑取可疑菌落,转种于营养琼脂平板分纯,用氧化酶归类和生化筛检。沙门菌、志贺菌、致泻性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌筛检参照GB方法[2];致病性弧菌筛检参照文献方法[3,4];致病性气单胞菌、变形杆菌和邻单胞菌筛检参照全国临检规范[5,6],最后用API20E或VITEK32全自动微生物分析系统确定细菌类别。对沙门菌、志贺菌、致泻性大肠杆菌、O1群和O139霍乱弧菌和副溶血性弧菌等病原菌进行血清分型。
1.5药敏试验
采用WHO推荐的K-B法进行,药敏试验的质控方法和结果判定按照2008版美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)抗菌药物敏感性试验执行标准[7]执行;ESBL表型确证用CLSI推荐的纸片扩散法,头孢噻肟30μg、头孢他啶30μg、头孢噻肟/克拉维酸30/ 10μg、头孢他啶/克拉维酸30/10μg;质控菌株为大场埃希氏 菌 (ATCC25922)、金黄色葡 萄球菌 (ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC27853);检出的耐药性菌株用PCR检测11种耐药基因。
2结果
2.1检出情况
从9 256份腹泻病人粪便标本检出沙门菌、志贺菌、致病性弧菌(副溶血弧菌、非O1群霍乱弧 菌、拟态弧菌、河流弧菌等4种)、致病性气单胞菌(啫水气单胞菌、温和气单胞 菌、豚鼠气单 胞菌、易损气单 胞菌、威隆气单胞菌等5种)、致泻性大肠杆菌(出血性大肠杆菌O157:H7、致病性大肠杆菌等2种)、类志贺邻单胞菌、变形杆菌和金黄色葡萄球 菌等8类16种病原菌,共3 473株,检出率为37.52%,其中有60份标本同时检出2种及上病原菌,未检出O1群霍乱弧菌、O139群霍乱弧 菌、梅氏弧菌、美人鱼弧 菌、溶藻弧菌、创伤弧菌等 致病性弧 菌;简达气单 胞菌、舒伯特气单胞菌、中间气单胞菌等致病性气单胞菌;侵袭性大肠杆菌、产毒性大肠杆菌、肠聚集性大肠杆菌等致泻性大肠杆菌,各地的检出情况见 表1;检出的病原 菌以副溶 血性弧菌 最高,占检出病 原菌的55.95%,其检出率与 其病原菌 差异有统 计学意义 (χ2=21.68,P<0.01),病原菌分布情况见表2。致病性弧菌、致病性气 单胞菌和 致泻性大 肠杆菌的 种类与分布,见表3。
2.2血清学分型
501株副溶血弧菌分为6个血清群,其中21株未定型,分型率为95.81%,见表4;369株沙门菌分为17个血清型,其中26株未定型,分型率为92.95%,见表5;175株志贺菌分为3个血清分型,A群2株,D群56株,B群117株,见表6;68株致泻性大肠埃希菌分为2个血清群,分别是O157:H7出血性大肠埃希菌和致病性大肠埃希菌,见表7。
2.3药敏试验
对530株副溶血性弧菌、369株沙门菌、318株气单胞菌、205株类志贺邻单胞菌菌、175株志贺菌、68株致泻性大肠杆菌、71株金黄色葡萄球菌和100株变形杆菌进行药敏试验,抗生素耐药率以氨苄西林最高,哌拉西林次之,结果详见表8。检出耐多重耐药菌45株,其中气单胞菌23株、志贺菌8株、致泻性大肠杆菌8株、金黄色葡萄球菌3株、变形杆菌2、伤寒沙门菌1株,占测定总菌株数的2.45%(45/1836),耐抗生素最少3种,最多5种,进一步作耐药基因测定,36株带β-内酰胺酶bla-TEM耐药基因,30株带磺胺类耐药基因sull,25株带氨基糖苷类耐药基因aacc,阳性模式见图1。
注:R 为耐药株数;%为耐药率。
3讨论
检测发现宁波地区感染性腹泻病人的食源性病原菌由副溶血性弧菌、非O1群霍乱弧菌、拟态弧菌、 河弧菌等致泻 性弧菌;嗜水气单 胞菌、温和气单 胞菌、豚鼠气单胞菌、易损气单胞菌和威隆气单胞菌等致泻性气单胞 菌;O157出血性大 肠杆菌、致病性大 肠杆菌等致泻性大肠杆菌以及沙门菌、志贺菌、类志贺邻单胞菌、变形杆菌、金黄色葡 萄球菌等8类16种病原菌构成,其中许多是引起严重食物中毒、传染性疾病等公共卫 生突发事 件的病原 菌。9 256份标本中病原菌的检出率为37.52%,高于屈飞飞等25. 8%的报道[8],但仍有60%多的病人标本未检出病原菌,除病毒等引起外,存在服用 抗生素后 采样,标本送检不及时,检测方法欠灵敏,也不排除实验人员由于检测病原菌种类多,工作量大,挑选可疑菌不细仔等原因,因此,寻找简便、快速、灵敏的方 法,进一步提高检出率,是今后开 展食源性 病原菌谱 研究的关 键。结果提示本 地区的感 染性腹泻 由多种病 原组成,构成比较复杂,病人的发 病多数与 饮食相关,并有聚集性现 象,夏秋季是 发病高峰,与流行规 律一致。因此,研究感染性腹泻病原菌,对防控食源性疾病,提出针对性防控措施和预警,降低感染性腹泻的发生,保障食品安全具有重要意义。
本文检出最多的 病原菌是 副溶血性 弧菌,沙门菌次之,气单胞菌 第三。副溶血性 弧菌检出 率明显高于其它致 病菌,是本地区 腹泻病人 中最主要 的流行优势株,本市以往 食物中毒 病原菌谱 也佐证该 论点[9],由此认定,控制副溶 血性弧菌 的发生,能有效减少当地食源性腹泻的发病率。O:3群副溶血性弧菌是国内外公认的致病菌株,血清分型显示,病人中检出O:3群副溶血性弧菌的构成比明显高于与其它血清群,与国内外报 道一致[10,11],因此,血清分型 在鉴别副溶血性弧 菌致病性 方面有重 要意义,副溶血性弧菌在本地区高发的原因可能与临海的地理环境 和居民普遍喜食海 产品的生 活习惯有 关;检出的沙 门菌分出17个血清型,以甲型副伤寒沙门菌比例最高,达44.99%,与本市以 往报道一 致[12],由此可见 甲型副伤寒沙门 菌仍是引 起本市沙 门菌病的 优势菌。有26株沙门菌不能被分型,反应出国产诊断血抗体效价低,凝集质量 差,造成判定 困难等质 量问题,应引起生产单位 注意,提高血清 质量,保障使用 单位诊断的可靠性;检出的志贺菌分出痢疾志贺菌、 宋内志贺菌和福氏 志贺菌3个血清群,其中以福 氏志贺菌最多,占66.86%,并发现福 氏1C、4C、2C志贺菌的3个亚型,有进一步 探讨志贺 菌血清型 变迁的必要,以防止新菌型引起的疾病暴发;在感染性腹泻病人中气单胞菌和类志贺邻单胞菌有较高的检出率,分别列病原菌 的第3位和第4位。一般认为 气单胞菌和类志贺 邻单胞菌 是一类条 件致病菌,当免疫力低下时才引起机会感染,其致病性在上 世纪70 -80年代得以确认,而且在日常感染性病 原菌监测 中,均不检测该类细 菌,所以,平时对其 了解和关 注甚少。由于气单胞 菌和类志 贺邻单胞 菌分布广 泛, 通常存在于水环境 中,通过水、鱼及贝类 感染人类, 可引起腹 泻、食物中毒、脑膜炎和 败血症等 疾病[13,14],但近年来,由该菌引起的感染性腹泻和食物中毒的报道 在增加[15,16],本地也曾 发生过[17],加上气单胞菌具有天然抗药性,一旦感染,在治疗上增加困难,提示今后应加 强对该菌 的检测和 致病性监 测和研究。
