大花酢浆草的组织培养与快速繁殖

大花酢浆草的组织培养与快速繁殖

菠萝组织培养与快速繁殖(简报) 篇1

关键词：菠萝；组织培养；快繁

中图分类号：S59.043 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2011）-04-0110-1

菠萝（Ananas comosus(L.)Merr.）属凤梨科凤梨属多年生常绿草本果品植物。常规的繁殖方法多用植株分生的芽进行无性繁殖，繁殖系数低，受时间、气候等因素限制，繁殖材料用量大，往往不能满足生产需要，尤其是在稀有良种的推广中。应用组织培养方法，无时间、土地、气候等条件的限制。本文从选用不同部位的芽体出发，进行了菠萝组织培养与快速繁殖技术的研究。

1 材料与方法

1.1 外殖体及其消毒处理

取菠萝坐果期间生长的冠芽、裔芽、吸芽，采用相同的处理方法：先用自来水冲洗，然后用75%酒精浸60-90s，再用0.2% HgCl2消毒20-22min，最后用无菌水涮洗5次，在超净工作台上将芽体切成长约0.5cm，带2-3个苞叶。

1.2 培养条件

基本培养基为MS培养基。（1）诱导愈伤组织培养基：MS + BAP 1.5 + NAA 0.2；（2）诱导分化培养基：MS + BAP 2.5 + NAA 0.1；（3）继代培养基1/2MS + BAP 0.2+ NAA 0.1；（4）生根培养基1/2MS + NAA0.45；（5）二次生根培养基1/2MS + NAA0.5+IBA2.8。上述培养基均加入0.6%琼脂，2%蔗糖，pH均调至5.9，在121.3℃高温高压湿热下灭菌20min。培养温度（28±2）℃，光照2000lx，12h.d-1。

1.3 无菌实生苗的培养

将消毒处理后的冠芽、裔芽、吸芽同时接种到（1）号诱导愈伤组织培养基上。50d后，转接到（2）号诱导分化培养基上。30d后，自然分取培养基（2）中分化的不定芽，保留2-3个单芽为转接材料，转接到（3）号继代培养基上，约45-60d继代一次。不定根的诱导，不定芽高5-8cm，转接到（4）号生根培养基上，进行生根诱导。二次生根采用（5）号培养基进行生根培养。

2 结果与分析

2.1 愈伤组织的诱导

冠芽接种7d左右开始膨大生长，15d左右开始出现有颗粒状绿色愈伤，40d左右愈伤生长最旺盛，诱导率达100%；裔芽接种12d后开始膨大生长，但颗粒状绿色愈伤的形成较冠芽少，诱导率为66.7%；吸芽几乎不形成颗粒状绿色愈伤。来自菠萝不同部位的芽体对愈伤组织的诱导有很大的差异。很明显冠芽是诱导愈伤组织的最佳培养材料，裔芽次之。吸芽不考虑作为诱导愈伤组织接种材料。

2.2 丛生芽的分化及继代

愈伤组织转接到（2）上，15 d后冠芽生长点开始萌发，其周围愈伤开始形成10-15个芽原基，30d后生长点已形成无根壮苗，芽原基也形成大量的不定芽，不定芽的周围又形成新的愈伤；裔芽的生长点也同时萌发，愈伤形成的不定芽周围也形成新的愈伤；吸芽生长点也萌发，但由愈伤形成的不定芽偶见1-2个。约45-60d继代一次，可以5-10倍的速度增殖。继代2次后就不再有愈伤出现了。

2.3 不定根的诱导

不定芽高5-8cm时，转接到培养基（4）上，45d后生根率13.4%。菠萝不定根的诱导较难，常需进行二次生根诱导，将无根苗转接到培养基（5）上进行生根培养，此时生根率可达76.8%。有的还是不能生根，但已有根原基，假植也能成活。

3 讨论

菠萝冠芽、裔芽、吸芽作为组织培养外殖体，冠芽较为理想，裔芽差一些，不提倡用吸芽。尽管繁殖系数较高，由于繁殖周期较长，尤其是生根困难，假植成活率低，于是生产成本较高，不利于工厂化生产。但对于稀有珍贵新品种提供了短期扩大推广的一条途径。另若能做到试管外生根，生产成本将大大降低，同时提高移栽成活率。

参考文献

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