食品卫生微生物检验实验室操作要求

食品卫生微生物检验实验室操作要求（精选8篇）

食品卫生微生物检验实验室操作要求 篇1

食品微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。

一、无菌操作要求

1.接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。

2.进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。

3.接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。

4.进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。

5.从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。

6.接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。

7.接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。

8.吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。

二、无菌间使用要求

1.无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7m2的小窗，以备进入无菌间后传递物品。

2.无菌间内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。

3.无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。

4.处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。

5.在无菌间内如需要安装空调时，则应有过滤装置

三、消毒灭菌要求

微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。

（一）干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法

1．灭菌前准备

（1）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。

（2）装培养基的三角瓶塞，用纸包好，试管盖好盖，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。

2．装放

（1）干热灭菌器：装放物品不可过挤，且不能接触箱的四壁。

（2）大型高压蒸气锅：放置灭菌物品分别包扎好，直接放入消毒筒内，物品之间不能过挤。

3．设备检查

（1）检查门的开关是否灵活，橡皮圈有无损坏，是否平整。

（2）检查压力表蒸气排尽时是否停留在零位，关好门和盖，通蒸气或加热后，观察是否漏气，压力表与温度计所标示的状况是否吻合，管道有无堵塞。

（3）对有自动电子程序控制装置的灭菌器，使用前应检查规定的程序，是否符合于进行灭菌处理的要求。

4．灭菌处理

(1)干热灭菌法：此法适应于在干热情况下，不损坏、不变质、不蒸发的物品、较常用于玻璃器皿、金属制品、陶瓷制品等的灭菌。

① 器械器皿应清洗后再干烤，以防附着在表面的污物炭化。

②灭菌时安放物品不能过挤，不要直接接触底和箱壁，物品之间留有空隙。

③菌时将箱门关紧，接上电源，先将排气孔打开约30min，排除灭菌器中的冷空气，温度升至160℃调节指示灯，维持1.5 –2h。

④ 灭菌完毕后或温度升温过程中，须在60℃以下才能打开箱门。

(2)手提式高压锅或立式压力蒸气灭菌器的使用应按下列步骤进行：

①手提式高压锅在主体内加入3L清水，立式高压锅加水16L（重复使用时应将水量补足，水变混浊需更换）.②手提式压力锅将顶盖上的排气管插入消毒桶内壁的方管中（无软管或软管锈蚀破裂的灭菌器不得使用）。

③盖好顶盖拧紧，勿使漏气；置灭菌器于火源上加热，立式压力锅通上电源，并打开顶盖上的排气阀放了冷气（水沸腾后排气10-15min）。

④关闭排气阀，使蒸气压上升到规定要求，并维持规定时间（按灭菌物品性质与有关情况而定）。

⑤达到规定时间后，对需干燥的物品，立即打开排气阀排出蒸气，待压力恢复到零时，自然冷却至60℃后开盖取物，如为液体物品，不要打开排气阀，而应立即将锅去除热源，待自然冷却，压力恢复至零，温度降到60℃以下再开盖取物，以防突然减压液体剧烈沸腾或容器爆破。

(3)卧式压力锅蒸气灭菌器的使用按下列步骤进行：

① 关紧锅门，打开进气阀，将蒸气引入夹层进行预热，夹层内冷空气经阻气器自动排出。

②夹层达到预定温度后，打开锅室进气阀，将蒸气引入锅室，锅室内冷空气经锅室阻气器自动排出。

③ 待锅室达到规定的压力与温度时，调节进气阀，使保持恒定至

④自然或人工降温至60℃再开门取物，不得使用快速排出蒸气法，以防突然降压，液体剧烈沸腾或容器爆破。

⑤使用自动程序控制式压力蒸气灭菌器，在放好物品关紧门后，应根据物品类别按动相应开关，以便按要求程序自动进行灭菌，灭菌时必须利用附设仪表记录温度与时间以备查，操作要求应严格按照厂家说明书进行。

5．灭菌温度与时间(1)干热灭菌器灭菌温度160℃，1.5-2h。(2)压力蒸气灭菌锅灭菌温度与时间

（二）间歇灭菌方法

1.灭菌方法系利用不加压力的蒸气灭菌，某些物质经高压蒸气灭菌容易破坏，可用此法灭菌。

（1）将欲灭菌物品置于锅内，盖上顶盖，打开排水口，使器内余水排尽。

（2）关闭排水口，打开进气门，根据需要消毒10～20min。

（3）灭菌完毕关闭进气门，取出物品待冷至室温温度，放入37℃温箱过夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可达到灭菌目的。

2．血清凝固器使用方法，培养基中含有血清或鸡蛋特殊成份时，因高热会破坏其营养成份，故用低温，可使血清凝固，又可达到灭菌目的。

(1)在使用该法灭菌的血清等分装时，需严格遵守无菌操作，试管、平皿也经灭菌后使用。

(2)将培养基按要求使成斜面或高层，加足水后，接上电源，升温75～90℃1h灭菌，放37℃温箱过夜，再如此灭菌三次。

3．煮沸消毒：可用煮锅或煮沸消毒器，水沸腾后再煮5～15 min，也可在水中加入2﹪石炭酸煮沸5min，加入0.02﹪甲醛, 80℃煮60 min均可达到灭菌目的, 但选用煮沸消毒的增消剂时, 应注意对物品的腐蚀性.4．灭菌处理:灭菌后物品,按正常情况已属无菌,从灭菌器中取出应仔细检查放置,以免再度污染。

(1)物品取出,随即检查包装的完整性,若有破坏或棉塞脱掉,不可作为无菌物品使用。

(2)取出的物品,如为包装有明显的水浸者,不可作为无菌物品使用。

(3)培养基或试剂等,应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态,未达到者应废弃。

(4)启闭式容器,在取出时应将筛孔关闭。

(5)取出的物品掉落在地或误放不洁这处,或沾有水液,均视为受到污染,不可作为无菌物品使用。

(6)取出的合格灭菌物品,应存放于贮藏室或防尘柜内,严禁与未灭菌物品混放。

(7)凡属合格物品,应标有灭菌日期及有效期限。

(8)每批灭菌处理完成后,记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。

四、有毒有菌污物处理要求

微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处理，一律不得带出实验室。

1.经培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或铁丝筐内，并集中存放在指定地点，待统一进行高压灭菌。

2.经微生物污染的培养物，必须经121℃30min高压灭菌。

3.染菌后的吸管，使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡24h（消毒液体不得低于浸泡的高度）再经121℃30min高压灭菌。

4.涂片染色冲洗片的液体，一般可直接冲入下水道，烈性菌的冲洗液必须冲在烧杯中，经高压灭菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24h后，煮沸洗涤。做凝集试验用的玻片或平皿，必须高压灭菌后洗涤。

5.打碎的培养物，立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液喷洒和浸泡被污染部位，浸泡半小时后再擦拭干净。

污染的工作服或进行烈性试验所穿的工作服、帽、口罩等，应放入专用消毒袋内，经高压灭菌后方能洗涤。

五、培养基制备要求

培养基制备的质量将直接影响微生物生长。因为各种微生物对其营养要求不完全相同，培养目的的不同，各种培养基制备要求如下：

1．根据培养基配方的成分按量称取，然后溶于蒸馏水中，在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。

2．PH测定及调节：PH测定要在培养基冷至室温时进行，因在热或冷的情况下，其PH有一定差异，当测定好时，按计算量加入碱或酸混匀后，应再测试一次。培养基PH值一定要准确，否则会影响微生物的生长或影响结果的观察。但需注意因高压灭菌可影响一些培养基的PH降低或升高，故不宜灭菌压力过高或次数太多，以免影响培养基的质量，指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完PH后再加入。

3．培养基需保持澄清，便于观察细菌的生长情况，培养基加热煮沸后，可用脱脂棉花或绒布过滤，以除去沉淀物，必要时可用鸡蛋白澄清处理，所用琼脂条要预先洗净晾干后使用，避免因琼脂含杂质而影响透明度。

4．盛装培养基不宜用铁、铜等容器，使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。

5．培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的，又要注意不因加热而降低其营养价值，一般121℃15min即可，如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等，则应采用低温灭菌或间歇法灭菌，一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等，待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加入。

6．每批培养基制备好后，应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。如果是生化培养基，使用标准菌株接种培养，观察生化反应结果，应呈正常反应，培养基不应贮存过久，必要时可置4℃冰箱存放。

7．目前各种干燥培养基较多，每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察，各种培养基用相应菌株生长试验良好后方可应用，新购进的或存放过久的干燥培养基，在配制时也应测PH，使用时需根据产品说明书用量和方法进行。

8．每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等应做好记录，以备查询。

六、样品采集及处理要求

1．所采集的检验样品一定要具有代表性，采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在。

2．根据食品的种类及数量，采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。

3．采样应注意无菌操作，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新洁尔灭、酒精等消毒药物灭菌，更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物，以避免杀死样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可应用。

4．样品采集后应立即送往检验室进行检验，送检过程中一般不超过3h，如路程较远，可保存在1～5℃环境中，如需冷冻者，则在冻存状态下送检。

5．检验室收到样品后，进行登记（样品名称、送检单位、数量、日期、编号等），观察样品的外观，如果发现有下列情况之一者，可拒绝检验。

(1)样品经过特殊高压、煮沸或其他方法杀菌者，失去代表原食品检验意义者。

(2)瓶、袋装食品已启开者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形状者（食物中毒样品除外）。

(3)按规定采样数量不足者。

对送检符合要求的样品，检验室收到后，应立即进行检验，如果条件不具备，应置4℃冰箱存放，及时准备创造条件，然后进行检验。

6．样品检验时，根据其不同性状，进行适当处理。

(1)液体样品接种时，应充分混合均匀，按量吸取进行接种。

(2)固体样品，用灭菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml灭菌生理盐水或其他溶液中，用均质器搅碎混匀后，按量吸取接种。

(3)瓶、袋装食品应用灭菌操作启开，根据性状选择上述方法处理后接种。

七、记录和报告的要求

1．检验室收到样品后，首先进行外观检验，及时按照国家标准检验方法进行检验，检验过程中要认真、负责、严格进行无菌操作，避免环境中微生物污染。

2．样品检验过程中所用方法、出现的现象和结果等均要用文字写出试验纪录，以作为对结果分析、判定的依据，记录要求详细、清楚、真实、客观、不得涂改和伪造。

八、特殊样品检验时的前处理

1.食品微生物检测需用灭菌蒸馏水进行稀释的样品有酱腌菜、酱油 2.对食醋样品的前处理是用20%-30%灭菌碳酸钠溶液调PH至中性

3.袋装鲜奶样品进行微生物检验时的处理用无菌手续吸取25mL检样+225mL稀释液 4.碳酸饮料等样品的前处理应开盖后将气体待充分排出，用无菌手续吸取25mL检样+225mL稀释液

食品卫生微生物检验实验室操作要求 篇2

1 加强质量控制管理

质量控制是指在质量体系进行的各项操作技术和活动, 以确保各种试验活动能满足质量要求[2]。质量控制是全面质量管理内容的重要部分, 此阶段的影响因素很多, 因此, 要严格对各关键点进行管理, 建立质量控制体系。

1.1 检验标准

微生物的危害包括有害的细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体。食品中的生物危害既有可能来原于原料, 也有可能来自于食品的加工过程。一般而言, 酵母、霉菌不引起食品中的微生物危害 (某些霉菌产生有害的毒素—化学危害) , 只有细菌、病毒、原生动物引起食品的微生物危害, 造成食品的不安全[3], 食品中重要微生物的控制见表1。

在颁布了《食品卫生检验方法微生物学部分》之后, 我国的食品卫生微生物检验逐步走上了标准化的发展轨道。除此之外, 我国还颁布有各类国家标准、行业标准及卫生行政部门颁布的检验方法等。卫生检验应严格遵从这些标准和规范, 确保检测数据准确可信。食品中微生物的快速检测方法可参考文献[4]。

1.2 质量管理制度

实验室应制定严格科学完整的管理制度, 包括操作质量保证、菌毒种管理、废弃物处理、仪器设备使用、样品管理、消毒隔离、试剂管理以及生物安全管理等制度。规定不同岗位的岗位职责, 每个检验人员熟悉应自己的职责和任务并严格遵守。对各种检验过程建立标准操作程序, 并且随着检验技术的不断发展及时更新和标准化。

2 室内质量控制

2.1 实验室建设与检验环境

微生物实验室主要分为无菌实验室、净化实验室、生物安全实验室等。应根据实验室的不同定位和要求, 科学合理地布局和安排, 防止对人员的危害和样本的污染。实验室要求内外环境整洁, 严格区分办公区域和操作区域, 洗涤室、培养室、消毒间和无菌室应分开, 设有专室。对实验室的空气质量要定期监测, 以保证检测结果的可靠性、有效性和准确性。无菌室要设有套间或缓冲间。微生物实验室应有完善合理的卫生管理制度, 工作人员每天做好环境卫生工作, 定期对操作环境进行消毒, 废弃物应投入指定的容器内, 经无害化处理才能排放, 防止病原微生物的散布传播。

2.2 实验室仪器设备

微生物检验室应配备足够检验工作需要的仪器设备和器材, 建立起一整套规范化的仪器设备管理的档案和操作程序, 对每台仪器的有关原始资料和技术资料建档, 并由专人负责保管。微生物实验室常用的仪器设备主要有:冰箱、培养箱、高压灭菌器、净化台、显微镜、蒸馏设备等。严格按照仪器SOP操作。对于连续工作的仪器如冰箱、培养箱, 每天都应进行温度监控和记录并定期维护, 以保证仪器处于良好的工作状态。需要强制性定期检定的仪器和设备, 经符合资历的计量部门校准合格后方可使用[5]。

2.3 检验培养基、试剂的质控

2.3.1 培养基

食品微生物学检验用干粉培养基必须由专业厂家生产, 产品质量必须符合有关的质量标准。为保证干粉培养基质量指标, 在实际工作中应注意:加强包装的密封性能;使用时尽量缩短开盖时间;一般干性培养基放在低温干燥的环境中保存, 对于易受潮的品种启用后宜放入干燥器中保存。培养基的配制应严格按照GB4789.28-89规定的方法进行操作并作好原始记录。为保证培养基质量, 在配制时应注意:制备培养基必须在玻璃容器、搪瓷缸或铝锅中进行, 如用铜、铁器皿, 会对微生物生长有毒害作用。配制的培养基应进行无菌试验, 并有无菌试验记录。基础培养基要求细菌能生长良好, 并能使细菌充分表现出其典型特征;选择性培养基按不同细菌的生长条件要求而选择不同的培养基。此外, 还要选择不同的阳性对照菌株作质控, 以检验培养基的质量。配制和倾注培养基时, 应注意控制培养基的p H值, 因为p H值对细菌的生长影响较大。不同培养基应按不同培养要求, 接种相应菌种, 按细菌的生长抑制、形态、色素、溶血环等特征, 判断培养基的质量。培养基的储存应按照其说明的储存条件来保存, 不同批号的培养基不能混合使用。

2.3.2 检验试剂及药品

检验药品、试剂须在分析纯 (A R) 级以上。在利用药品、试剂配制标准溶液、染色液、缓冲液及其他试剂时应注意:按要求选取溶剂;用带塞的试剂瓶盛装;易分解的试剂宜用棕色瓶;挥发性的试剂瓶口应予密封;如发现溶液有变质现象, 应停止使用;标准溶液应定时标定。实验室内保存的试剂应定期进行清点, 超过有效期的试剂应清除。诊断血清必须贮存于4℃冰箱内, 用毕即存入冰箱, 防止污染;使用前应检查血清有否生霉染菌, 有则不用, 并注意在有效期内使用。

2.3.3 参考菌株及其保存

参考菌株可以从国际菌种保存中心如ATCC或室间质控活动中获得。准确鉴定过的分离株也可使用。实验室要准备好足够种类和数量的参考菌株, 满足培养基、试剂盒和试剂质量测试的需要。保存菌株要定期传代, 经传代数次后应进行生物学性状鉴定, 检查其是否发生变异。应设专人妥善保管, 菌株保存箱应加锁放置适宜环境, 应建立出入册单, 基本项目应包括菌种名称、分离来源、分离日期、传代日期、保存方法、主要性状、保管者、领用者等。

2.4 检验过程的质控

检验过程的质控包括: (1) 微生物检验样品的采集必须具有代表性, 根据具体情况制定相应的抽样方案, 样品的数量应满足检验、复验、复查的需要; (2) 一般应采取完整未开封的样品, 如是散装样品, 采集必须在无菌操作下进行, 采样的用具应预先经灭菌处理; (3) 样品送到食品微生物检验应越快越好, 尽量缩短采集到检验的过程时间, 特殊要求的样品在送检中要有特殊运送条件; (4) 当样品送到检验室时检验人员根据送检单要求的检验项目逐次核对, 验收样品的外观、包装状态及样品有无破损、流失、变质、污染; (5) 微生物检验必须按无菌操作要求进行; (6) 瓶装检样处理时可用点燃的乙醇棉球烧灼瓶口灭菌。袋状样品应用75%乙醇棉球消毒袋口后进行检验; (7) 检验原始记录应及时记录, 格式要求有足够的信息量, 并具有可朔源性; (8) 检测结果应准确、清晰、明确、客观地在检验报告中表达, 经有资格的审核人员检查签字, 并加盖印章后生效。

2.5 检验专业技术人员的素质

微生物检验专业技术人员要具备的基本素质有: (1) 立足本职, 敬业爱岗; (2) 严肃认真, 实事求是的科学态度和良好的职业道德; (3) 较高的食品化学分析基础知识和正确熟练的操作技术; (4) 食品微生物检验基础知识和基本操作技能; (5) 一定的科研能力[6]。除此之外, 还应自觉遵守卫生要求, 做到保持衣帽整洁、重视操作卫生、培养良好的卫生习惯等[3]。针对上述要求, 管理者要对实验室人员定期组织培训和进修学习, 积极参加学术交流, 使他们及时掌握新理论、新技术、新方法并定期对检验人员进行专业知识和操作熟练程度的考核, 来提高检验人员的素质[6]。

3 室间质量控制

室间质量评价是为了客观比较实验室的测定结果与靶值的差异, 由外单位机构采取一定的方法, 连续客观地评价实验室检验结果, 发现误差并进行校正, 使各实验室之间的结果具有可比性。质量评价是质量保证体系的重要组成部分, 是对实验室水平和能力的综合判断, 也是对实验室内质量控制效果的检验。因此, 要积极参加各级各部门举办的各种室间质评活动, 及时了解实验室检测能力和发现存在的不足。

4 小结

食品是人类赖以生存和发展的物质基础, 而食品质量安全是关系到人类健康和国计民生的大事情。保证食品的质量安全, 就是要保证人类摄入食品不含有对人身有害的物质。食品中有害微生物的检测是食品安全监督工作的重要内容之一。食品微生物检验的质量控制涵盖实验室内所进行的所有活动, 只有各方面均建立起完善的质量保证体系, 微生物的检验质量才能得到保证, 才能为疾病预防控制及采取相应措施提供科学的数据和技术支撑, 才能满足社会对卫生检验的需求。

参考文献

[1]陈丽仙.探讨食品安全问题的根源[J].中国食品, (China Food) , 2010, 7:68.

[2]张红梅.卫生微生物检验的质量管理[J].实用预防医学, 2007, 4 (2) :584.

[3]张妍, 张甦.食品安全管理体系内审员培训教程[M].北京:化学工业出版社, 2008:11.

[4]王林, 王晶, 周景洋.食品安全快速检测技术手册[M].北京:化学工业出版社, 2008:224～277.

[5]周静.调味品微生物检验的质量控制与方法[J].中国调味品, 2010, 35 (7) :90～92.

食品卫生微生物检验实验室操作要求 篇3

关键词：中职教学；食品微生物检验技术；综合能力

我国的中职食品专业中职学生在走向社会之后，多在食品企业的一线生产线或岗位上工作，在研发部门工作的技术人员较少。因此在“食品微生物检验技术”中，除教师的理论讲解之外，应在这一过程中适当得与实践相结合，从根本上提升学生的技术水平。因此，中职“食品微生物检验技术”实验教学改革就显得十分必要。

一、食品微生物检验技术开设综合实验的必要性

当前的中职食品微生物检验技术课程的教学实验在手法上比较单一，以单纯的实验操作为主，过程中没有针对性，导致学生掌握的基础知识不牢固，对其中实际知识点的认识严重不足。在课堂中，教师为学生进行操作演示，学生照本宣科地将过程记下来，完成得比较机械化。可以说，目前中职教育中，该专业的实验缺少思考性，无法将理论知识与实践完美结合。在社会实际工作中，学生无法独立完成工作，微生物的培养以及各个方面的操作水平都存在较大的瓶颈。传统的实验模式只能教会学生某一项特定的技能，并不能将学生与实际的综合工作结合在一起，因此也就存在很大的不足之处。基于此类情况，应提升学生的综合社会工作能力，根据学科的特点开展综合性质的实验教学，从各个方面培养食品微生物专业型人才，并将理论与实践有机结合。

二、实验教学的改革措施

1.选择适当的实验题目

在食品微生物检验技术的实验教学中，学生应当自主独立地完成实验任务。在这一过程当中，题目的选择也尤为关键。实验的题目需要具有基础性与先进性，能够提高学生的综合意识，并且可以有效地激发学生的学习兴趣。如在饮料的细菌测定环节中，对各类不同种类的细菌含量的检测项目，学生在分析此类项目时，能够与自身的实际生活情况相结合。因为饮料是日常生活中常见的食品之一，因此也就使得学生意识到这是一项比较实用的任务，能够应用于日常生活之中，也就有效地激发出了学生的学习兴趣，提高了学生的实践水平。

2.设计实验方案

首先，实验开展的第一项准备就应该是实验方案的设计。在总结理论知识的基础之上，学生应根据所选题目的特点，利用网络资源及图书馆文献资料等各种不同形式的资源撰写实验方案。实验方案中应包含实验的目的与原理，所需的实验仪器与材料，并重点突出记录步骤、注意事项等实施阶段应该注意的问题。实施过程中，要严格根据预先制订好的实验方案进行试验。

3.实施方案

实施过程主要包括实际样品的处理、培养基的配制与灭菌、倒平板、接种、培养与观察等实验过程，将样品处理、样液的稀释、恒温培养、菌种鉴定等方面与实践教学完美结合。在所有的步骤完成之后，学生需要对实验数据进行实际分析处理，全面分析实验结果，从过程中得出实验结论，独立自主地完成实验报告的编写，对学生预先制订好的设计方案以及遇到的重点难点进行归纳分析，整理数据，从被动地编写实验报告向主动完成发展，杜绝抄袭等不良行为。通过这些实际措施的实施，将最大限度地提升学生的实践能力。

三、食品微生物检验技术的实验教学效果展望

1.提高中职学生的学习自主性

当前我国的中职学生缺少学习的自主性，通常是被动学习。通过实验教学改革后，可将食品微生物专业的学生学习的自主性大大提升。因实验过程均为学生自主独立完成，所以能够提高学生的自主学习能力，有助于学生对知识的探索，并提高学生的知识思维，进而将学习化被动为主动。

2.提高学生的动手操作能力

食品微生物技术多以实践操作为主，但目前的中职学生专业实践能力较弱。综合实验的设计能够启发学生的思维能力，强化学生的基本实践技能，培养学生的分析解决实际问题的能力，并可以将理论知识与实践有机结合，使学习效果得到提升。

综上所述，“中职食品微生物检验技术”的实验教学的开展是十分必要的。但目前我国的中职食品微生物检测教学实验改革中还存在着很多不成熟的地方。将这其中的问题改善，是我国相关部门应面对的首要问题，对我国的食品检测技术与中职教育教学水平来说意义重大。

参考文献：

[1]周艳朵.微生物检验技术实验教学改革的探索与实践[J].学园，2015（13）：181.

[2]陶冶.中职微生物检验技术实验教学改革研究[J].现代职业教育，2015（3）：64.

食品卫生微生物检验实验室操作要求 篇4

1、熟练掌握各种细菌和真菌的药敏试验的原理、结果解释、影响因素。熟悉常见耐药菌的耐药机制及其检测方法。熟悉联合药敏试验的适应症、结果类型。了解体液中抗菌药物浓度测定的适应症及方法。

2、掌握室内质控、室间质控、质量控制失控的分析及处理。

3、熟练掌握临床微生物学检验常见微生物的生物学性状、鉴定分离技术、生化反应原理和结果及其他相关检验技术，对少见的微生物也应有一定的了解。

4、对各种抗菌、抗病毒药物的分类、作用、副作用、药理及药代动力学和药效学应有一定的了解。

5、熟练掌握各类临床标本的送检指征、采集和运送的方法及注意事项，掌握不同标本的常见病原菌种类、临床意义、不同标本的实验室处理方法、检验流程、结果的报告方式及解释。

6、微生物学基本检验技术试验方法的原理、操作方法、相关试剂的配制及应用。掌握：（1）动物实验菌种的保存与管理（2）真菌感染、病毒感染的实验诊断（3）分子生物学技术

7、熟悉临床微生物实验室的安全与防护，各项措施及规章制度。各种消毒灭菌的方法、原理、应用及效果监测。

8、熟悉各种常见的感染性疾病、病因、发病机制、诊断、鉴别诊断及治疗方法。了解本专业危重病人的诊断，治疗及并发症处理工作。

食品微生物检验采样方法 篇5

按照上述采样方案,能采取最小包装的样品就采取完整包装,必须拆包装取样的应按无菌操作进行。

不同类型的食品应采用不同的工具和方法: 1.液体样品：充分混匀,以无菌操作开启包装,用100mL无菌注射器抽取,注入无菌容器。2半固体样品：以无菌操作拆开包装,用无菌勺子从几个部位挖取样品,放入无菌容器。3.固体食品：大块整体食品应用无菌刀具和镊子从不同部位割取,割取时应兼顾表面与深部,注意样品的代表性;小块大包装食品应从不同部位的小块上切取样品,放入无菌容器。若为检验食品的污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质的情况，应从深部取样。4.冷冻食品：大包装小块冷冻食品按小块个体采取;大块冷冻食品可以用无菌刀从不同部位削取样品或用无菌小手锯从冻块上举取样品,也可以用无菌钻头钻取碎屑状样品,放入容器。固体食品和冷冻食品的取样还应注意检验目的,若需检验食品污染情况,可取表层样品;若需检验其品质情况,应取深部样品。5.生产工序监测

(1)车间用水。自来水样从车间各水龙头上采取冷却水;汤料等从车间容器不同部位用100mL无菌注射器抽取。

(2)车间台面、用具及加工人员手的卫生监测。用5cm2孔无菌采样板及5支无菌棉签擦拭25cm2面积。若所采表面干燥,则用无菌稀释液润湿棉签后擦拭;若表面有水,则用干棉签擦拭,擦拭后立即将棉签头用无菌剪刀剪入盛样容器。

良好的微生物实验室操作规范 篇6

简介

在微生物实验室中，良好的实验室操作规范是基于很多原则，包括以下活动：无菌技术、培养基的控制、菌种的制备、仪器设备的管理、细致的记录和数据的评估、人员的培训。众所周知，微生物测定数据的可变性、可靠性和重现性是基于公认方法的使用和坚持良好的实验室操作规范。

微生物菌种的维护

生物样本是最灵敏(delicate)的,因为他们生存能力和特性是依赖于适当的处理和贮存。菌种的处理和贮存的标准是使用者的实验室制定的，采用减少污染的机会和减少生长特性变更。小心一致的处理贮存用菌种是微生物测试结果一致性的重要因素。按药典方法方法使用的菌种应该取自国家菌种保藏中心。可以包括冷冻的、冻干的、斜面培养的或是马上使用的形式。在质量控制测试使用前应进行菌种纯度的确定和菌种的鉴别。马上使用的菌种要求确定纯度、鉴别、接种体大小。鉴定的确认，对通常用的实验室菌种，理想的是进行基因水平的分析（如：使用合适的经过验证的探针进行DNA指纹,RNA基因排序,PCR光电导继电器）

菌种的制备和复壮应该参照供应商的说明书或采用己验证批准的方法。种子批技术被推荐用于贮备用菌种的保存。

从国家菌种保藏中心得到的初始菌种在合适的培养基被复壮、培养。部分的贮备菌种（第一次接种或是传代）是悬浮在抗冷冻培养基中，分装至小瓶中，在零下30°或更低的温度下冷冻，直到使用。如果冷冻在零下70°，或是冻干形式，菌种可以持续的保存。这些冷冻的贮存菌种可以每月或每周接种用作工作菌种。一旦打开，制备了工作悬浮液，不能再冷冻。不能用的部分应该丢弃，以减少繁殖能力损失带来的风险和贮存污染带来的风险。

工作用菌种的接种量应该记录，以防止过量接种增加表型变种。一代的定义是从具有繁殖能力的菌种接种微生物到一新鲜制备的具有促微生物生长能力

和培养基中。任何形式的接种都被当做是一次转移传代。

实验室仪器的维护

多数的仪器（培养箱、水浴、灭菌锅）必须遵从标准验证程序包括安装确认、操作确认和性能确认。另外还要求有定期的校验（通常每年一次）。新的设备，实验室关键的，应该根据QCU 批准的方案进行确认。

用于微生物实验室仪器（如：pH计和分光光度计）应按规定的进度表进行定期的校验和测试，以保证其性能。校验的频率和性能的确认是基于仪器的型号的不同和能产生实验室数据的设备的重要程度的不同。

实验室的布局和操作 实验室的布局和设计应考虑良好的微生物操作和安全。本质是最大程度的减少微生物菌种的交叉污染，微生物样本的处理环境也是重要，因为环境也能引起也污染的可能。

一般情况下，实验室应分成洁净区、无菌区和阳性室。如果可能，处理和培养灭菌产品的周围的环境区域应与阳性区完全分离。但是要将阳性和洁净区完全分开是不可能的，那么有必要采取隔离和无菌操作来减少可能的意外污染。这些隔离包括：防护衣、清洁、消毒程序和仅用于洁净无菌的生物安全柜。对于活的菌种引起的溢出和灾祸的程序应放在现场，所有相关技术人员进行上述方法的培训。

部分样品会出现微生物的生长，要求进一步分析来确定污染源。当发现有菌生长，样品应从洁净区立即转入阳性区。接种，着色、菌种鉴定或其它的调查操作应在实验室的阳性室操作。如果可能，发现有菌落生长的样品在实验室的洁净区是不能被打开的。小心隔离污染的样品和原料将减少假阳性结果。

正在进行取样操作活动的人员不能进入阳性室或在阳性室操作处理除非特别小心，包括穿防护服和手套，退出后仔细清净手。理想状态，受权人员进行样品取样操作时，特别是无菌过程的，不能在阳性操作室附近工作。同样，所有微生物样品都应采用无菌取样技术，包括非无菌样品的取样。如果可能，在规定的完全无菌的条件的取样区域进行操作。

要重点考虑的是样品的污染，它能导致假阳性的出现，除非在过程中特别注意无菌操作。取样间应设计好，这要原料和辅料的取样就可以在受控条件下进行，包括无菌衣和无菌取样设备。对于公用系统的取样，如水系统，在完全无菌的条件下是不太可能的；然而，当样品未采用无菌技术取样时应有记录，其可靠性不可避免的下降。

环境监测的取样方法要求对取样的设备（负载或未负载）进行最小化的无菌处理。如果可能，在对取样环境进行取样时，取样的设备应同时配备培养基。

实验室中所有的测试，对关键的测试操作，如：最终剂型的无菌测试，散装产品，生物产品用菌种培养，或是生物产品用细胞培养都应在受控的条件下进行，隔离技术也是可以采用的，无菌的微生物测试。己在显示，隔离技术比人为的洁净区域具有更低的环境污染水平，因此，更能减少假阳性结果的产生。隔离系统的验证是重要的，既能保证环境的完整又能防止假阴性结果的产生，假阴性的结果是由化学消毒物质带入。

实验室记录的维护

合适的数据记录和研究对成功的微生物实验室是重要的。最重要的原则是按照SOP规定操作，SOP应是书面化的，并能反映测试的实际操作是如何进行的，实验室笔记本应能提供所有详细的记录，并保证记录的完整。实验室书写至少应包括以下内容：

日期；

测试物料

微生物测试人员名称

操作程序记录测试偏差 参数的记管理员，的号码 的结果

录（使用的设备，使用微生物菌种，培养基的批号）第二个复核人签名

每一台关键仪器的使用都应在台帐上记录，所有都应根据SOP的要求记录在校正进度表和维护记录上。日志和其它记录形式对实验室记录本起到支持和帮助。设备的温度（水浴，培养箱，灭菌锅）应有记录并可以追踪。

己签发的SOP及其版本应有清楚的记录。数据的改变应用单钱划去并签上日期和缩写。初始的数据不应抹去或复盖。

测试结果应包括初始记数，允许复核者根据最终结果重新计算。数据的分析方法在SOP中应详细描述。

所有的实验室记录应存档避免遗失，现场中应有正式的记录保存和查阅程序。

检验结果的解释

微生物试验结果难以解释，因为下列原因：

微生物是普遍存在于自然界中的，又存在于通常的环境污染，由人类支配的很多类型的特殊的有机物。

实验室分析人员在样品分析和操作中可能引入微生物污染。微生物可能不是均匀的分布在样品和环境中。微生物的分析结果存在相当大的可变性。

因此，从预期结果中获得的微小的不同是没有多大意义的。

因为微生物分析的这些特性，实验分析应非常小心以避免外来的污染，正如本章前面讨论的。同样重要的，从主要微生物观察考虑，结果必须要解释。不仅包括假定污染的种类，而且包括药物成分、辅料或测试环境中存在的有机物。另外，其微生物的生长特性也应该考虑。

当出现的结果与药典正文或其它建立的质量标准不一致时，就应该进行调查。没有满足标准要求的微生物污染，通常有两个明显的原因：可能是实验室的错误或是实验环境产生无效的结果，也可能是产品有一定污染或其它形式的污染使得超出规定的标准或限度。另外一种情况，实验室操作，在多数情况下，应立即通报。

应该对围绕结果的所有情况进行全面的评估。所有实验条件和因应充分考虑，包括数据的漂移，与建立的限度和标准比较。重要的是根据结果的可变性知道观察的统计意义。

实验室环境，对现场取样的保护装置，测试条件下物料的历史数据，物料的种类，特别注意物料中微生物的存活和繁殖在调查中应被考虑。另外，与实验员进行讨论，分析中的实际操作可以得到有价值的信息。来决定结果的可靠性和决定采取和措施。如果可以确定得到不一致结果的明确原因，那么应该采取纠正措施，并记录问题所在。跟踪正式批准和执行的纠正措施，并进行仔细的检查。

食品卫生微生物检验实验室操作要求 篇7

关键词：实验课教学,自主实验教学,模式实践

《中共中央国务院关于深化教育改革全面推进素质教育的决定》指出:“高职教育要重视培养学生的创新能力、实践能力和创业精神, 普遍提高大学学生的人文素质和科学素质。”要想培养出市场经济体制下经济建设需要的高素质创新人才, 高校教师应该更新教育思想, 转变教育观念, 改变多年来习以为常的教学方法, 将创新教学的思想与方法落实到日常教学工作中, 体现在教学的每一个环节上。为此, 作为一名食品营养与检测专业的专业课教师, 笔者根据几年来的教学实践及往届毕业生反馈回来的信息, 针对所教授《食品微生物检验》课程传统实验课教学中存在的问题, 结合社会实际需要等, 对《食品微生物检验》课程实验教学进行了自主实验模式的探讨与实践, 取得了一定成效, 深受同学们欢迎。

一、传统实验课教学存在的主要问题

(一) 对食品微生物检验实验课教学重视不够。

从我国高等教育的发展历史来看, 实验课在实践教学环节中是不受重视的。反映在食品微生物检验实验教学中主要有三方面:第一, 实验经费投入不足, 实验设备总量不足, 实验室条块分割, 配套程度差;第二, 课程设置大都以理论课为主干, 把实验课当成是理论课的附属, 食品微生物检验实验课时较少, 并且实验课也往往成为课时被压缩挤占的对象;第三, 实验课缺乏严格统一的考核标准和制度。实验报告、实验考试 (笔试+操作) 所占比例没有统一标准。

(二) 实验教学指导思想不适应培养学生创新能力的要求。

传统的食品微生物检验实验教学的目的多是为了使学生加强对有关理论知识的理解和掌握, 忽视了对学生动手、创新能力的培养, 使他们充分认识学习该门课程的必要性和应用性。且我们在实际教学中很多课时是在为微生物实验补课, 这个过程中以演示性、验证性实验为主, 对培养学生动手能力、解决问题、创新能力的综合性、设计性、研究性实验几乎没有。因此很难提高食品微生物检验实验的教学质量。

(三) 教材内容陈旧, 已不适合时代的发展。

食品检验专业在我国高校设立较少, 食品微生物检验目前还没有国家统编教材。我们现在所使用的教材大都是农业院校的动物卫生检验或医学院校的卫生检验的教材。针对食品检验专业, 只有一些由国家颁布的实践操作的章程或规范而编辑实验指导书, 很难适合教学的需要。检验方法比较陈旧单一, 只介绍国内目前使用的方法, 而没有国际通用的方法和国际快速分析方法。

(四) 教学方式简单、机械, 忽视了学生积极参与的作用。

在以往的食品微生物检验实验教学中, 是由教师做好预备实验, 课前准备好实验材料后, 学生按照教师在实验前的讲解、演示及实验讲义中规定的方法、步骤按部就班地进行实验, 得出预知的实验结果, 写出一份雷同的实验报告。这种实验教学方法固然有其可取之处, 但由于仪器设备不足, 实验时为多人一组, 要在规定的时间内完成, 使得很大一部分学生为完成任务而草草结束实验, 或抄袭别人数据, 或编造数据, 以吻合课本中的结果, 根本起不到实验教学应有的作用, 这样使学生更加轻视实验课。

(五) 教学手段单一, 不利于学生对理论知识的整体把握。

实验课教学与理论课教学区别较大, 它既受理论教学的一定限制, 又受到课时及试验室具体条件的限制, 有限的课时, 大量的教学内容, 学科的不断发展, 这几方面均存在着矛盾。对于实验周期长或无法用实验手段直接观察的实验, 以往只能选择不做。因此, 必须增加一些新的教学手段, 学习先进院校的一些新思路, 来提高教学效果, 紧跟时代的发展。

二、自主实验教学模式及其运行

食品微生物检验实验课中, 课程安排的所有实验均由学生自己设计、自己准备、自己讲解、自己实验、自己读取结果并对结果进行分析, 整个实验过程中鼓励同学们提问题。老师针对同学们提出的问题以及实验设计、准备、实验过程中的重点、难点等提出问题, 组织同学们进行讨论, 找出解决问题的方法, 最终形成共识。具体做法为:上实验课之前, 老师先将要做的实验告诉同学们, 但实验程序是开放式的, 学生自己进行实验设计, 并列出设计时遇到的自己解决不了的问题, 一并交与老师, 使老师对学生设计的实验及实验中的难点心中有数;上课时, 老师针对同学们的实验设计提出一些共性的问题, 然后留出10分钟左右的时间, 让同学们带着问题进一步思考、熟悉自己所设计的实验, 之后请1~3位同学上台讲解并解答问题并组织大家讨论, 澄清问题;对于某些同学的个别问题, 老师实验中个别交流;最后, 同学们根据自己的实验需要, 向老师索取实验所需器材、试剂等进行准备、实验等。这种教学模式的宗旨是突出实验课上同学们的主体地位, 培养他们的主人翁意识, 锻炼他们的独立工作能力、发现问题与解决问题的能力以及积极思考能力和语言表达能力等。

三、自主实验教学模式的可行性

食品微生物检验是食品质量与安全专业的专业课, 在学习这门课程之前, 同学们已学习了基础微生物学课程、生物化学课程等, 对于在食品微生物检验过程中所要用到的基本技术, 如无菌操作技术、涂片染色技术、分离培养技术等同学们都已学过, 再结合本课程理论知识的学习, 他们完全应该能够独立进行实验的设计、准备和操作。如果连这一点都做不到, 那么培养大学生创新能力、实践能力和创新精神, 提高大学生人文素质和科学素质就成了一句空话。可见, 自主实验教学模式不仅可行而且势在必行。

四、自主实验教学模式的运行效果

自主实验教学模式我们已在2010~2011级食品营养与检测专业中连续进行了两年的尝试, 根据问卷调查同学们反馈回来的信息得知效果很好, 有99%的同学赞同这种实验课教学法, 并列举出了其诸多优点, 归纳起来有四点:一是实验的主体发生了转换。在整个实验过程中, 同学们始终是实验的主体, 教师只起引导、辅导、顾问的作用, 使同学们认识到什么是真正的、完整的实验。二是调动了同学们课堂上的积极性和主观能动性。学生普遍感到“自己动手”更有思考的乐趣, 有助于开动脑筋。三是提高了同学们独立思考问题、分析问题与解决问题的能力, 锻炼了胆量, 增强了自信心。四是加强了教学与生产实践的结合, 增强了同学们的主人翁意识。实验课中同学们所检测的食品样品有的来自食品生产企业、有的来自大型超市、有的来自个体摊贩等, 对这些样品检测出来的结果, 直接关系到食品企业的产品或超市、摊贩经营的食品卫生质量是否符合国家卫生标准要求以及对这些食品采取什么样的处理措施等, 因此试验过程中, 同学们的责任心增强了、主人翁意识提高了。

自主实验教学模式虽然得到了同学们的赞同, 但还有一些不足之处, 如实验经费有限、实验器材少, 必须以小组进行, 还不能完全让每个同学独立进行;同学们渴望多做实验, 但由于受课时限制, 所开的实验较少;课堂时间的分配上还有或多或少的问题等。笔者认为, 随着老师和同学们的共同努力、教学条件的不断改善和教学改革的不断深入, 食品微生物检验技术的实验课教学一定会“百尺竿头, 更进一步”。

参考文献

[1]康仲远.大学生潜能开发与素质提高研究[J].中国高等教育, 2000.1.

[2]陈玉科, 郑立亮.如何培养大学生的创新思维[J].中国高等教育, 2000.4.

[3]龚放, 岳晓东.强化问题意识造就创新人才[J].高等教育, 2000.1.

[4]朱向群, 胡朝晖.改革实验教学培养学生实践能力[J].实验技术与管理, 2001.18.

[5]田洪涛.食品微生物学实验课教学改革初探[J].微生物学通报, 2002.29.

食品卫生微生物检验实验室操作要求 篇8

实验室仪器使用规程

目录

一、微生物实验室操作规程 „„„„„„„„„„„„2

二、无菌间使用规程 „„„„„„„„„„„„3

三、传递窗使用规程 „„„„„„„„„„„„4

四、净化工作台使用规范 „„„„„„„„„„„„5

五、手提式高压灭菌锅使用规范 „„„„„„„„„„ 6

六、全自动高压蒸汽灭菌器使用规程 „„„„„„„„7

七、冰箱使用规程 „„„„„„„„„„„„8

八、天平操作规程 „„„„„„„„„„„„9

九、光学显微镜使用规范 „„„„„„„„„„„„10

十、恒温干燥箱使用规程 „„„„„„„„„„„„11

十一、恒温培养箱使用规范 „„„„„„„„„„„12

十二、霉菌培养箱使用规程 „„„„„„„„„„„ 13

十三、电子恒温水浴锅操作规程 „„„„„„„„„„14

十四、真空干燥箱使用规程 „„„„„„„„„„15

十五、PH计使用规程 „„„„„„„„„„„„16

十六、糖度计的使用规程 „„„„„„„„„„„„17

十七、pHS-3C型酸度计操作规程„„„„„„„„„„18-19

十八、DDS-307型实验室电导率仪操作规程 ………20 1

微生物实验室操作规程

1、工作人员加强有菌观念，无菌操作。

2、每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。

3、入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。

4、实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。

5、非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。

6、做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前，请勿丢弃标本。

7、标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。

8、实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于 3%来苏儿溶液中 5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用 1:1000高锰酸钾溶液或 3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。

9、实验过程中，如污染了实验台或地面，应用 3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。

10、使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。

11、所有微生物培养物，不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。

12、取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。

13、若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。

14、工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。

15、离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。

16、爱护仪器设备，遵守仪器使用规范，经常清洁，注意防尘和防潮。每天观察培养箱、冰箱、干燥箱的温度，并做好记录。

17、发出的微生物报告应认真复审，分析报告、评价报告。

无菌间使用规程

一、目的建立无菌室管理使用规程，保证操作者正确使用。

二、范围

适用于无菌室操作。

三、责任者

操作人员、无菌室管理人员。

四、内容

4．1无菌室应严禁放置杂物，无关人员严禁入内。

4．2 无菌室应严格保持整洁，防止污染，定期用甲醛熏蒸消毒（每月一次），使用前用0.1%新洁尔灭控式消毒净化工作台。

4．3 实验人员进入无菌室，必须更换无菌衣、帽、鞋等，操作前用0.1%新洁尔灭菌或75%酒精进行手消毒。

4．4 使用前开启紫外灯照射60分钟，同时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理，再开紫外灯照射30分钟。

4．5 检验过程严格按照无菌操作规程操作，爱惜室内用具，使用完毕，整理检品及各种用具并清洁工作台面。

4．6 接种环在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可接种培养物。4．7 所有带菌实验用品，须经有效的消毒灭菌处理后再洗刷。严禁污染下水道。4．8 无菌室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开肉汤琼脂平皿30分钟，经37℃培养48h），100级平均菌落数不得过1个/皿，如超过应进行清洁消毒。

传递窗的使用规程

一、目的：保证待处理样品的可靠性传递，尽量避免各区间的空气污染

二、适用范围：每个区的传递窗。

三、职责：所有工作人员在工作中必须严格遵守。

四、步骤：

4.1标准操作：实验人员在所在实验区处理好样品后，欲将样品传递到下一区域时，打开传递窗门，放入欲传递的样品，关闭传递窗门。

4.2 维护

每次实验结束后用1﹪的施康溶液对传递窗内部进行清洁，然后打开传递窗内的紫外灯消毒30分钟，并记录紫外灯照射时间，累计10000小时后报废，更换新的紫外灯。

净化工作台使用规范

一、目的 规范净化工作台操作与维护工作，确保仪器正常运作。

二、适用范围 本实验方法适用于净化工作台操作与维护管理。

三、操作及维护规程

1、操作规程

（1）使用工作台时，应提前50分钟开机，同时开启紫外杀菌灯，处理操作区内表面积累的微生物，30分钟后关闭杀菌灯（此时日光灯即开启），启动风机。（2）对新安装的或长期未使用的工作台，使用前必需对工作台和周围环镜先用超静真空吸尘器或用不产生纤维的工具进行清洁工作，再采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。（3）操作区内不允许存放不必要的物品，保持工作区的洁净气流流型不受干扰。

（4）操作区内尽量避免作用明显扰乱气流流型的动作。（5）操作区的使用温度不可以超过60℃。

2、维护规程及维护方法

（1）根据环境的洁净程度，可定期（一般2～3个月）将粗滤布（涤纶无纺布）拆下清洗或给予更换。（2）定期（一般为一周）对环境周围进行灭菌工作，同时经常用纱布沾酒精或丙酮等有机溶剂将紫外线杀菌灯表面擦干净，保持表面清洁，否则会影响杀菌效果。

（3）操作区平均风速保持在0.32-0.48m/s范围内。

手提式高压蒸汽灭菌锅使用规范

一、操作规程

1、准备：首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的去离子水或蒸馏水，使水面与三角搁架相平为宜。

2、放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

3、加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。

4、加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间（在温度或者压力达到所需时（一般为121°0.1MPa），需要切断电源，停止加热。当温度下降时，再开启电源开始加热，使温度维持在恒定的范围之内。

5、灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。

二、注意事项：

1、灭菌物品不能堆得太满、太紧，以免影响温度均匀上升。

2、降温时待温度自然降至60℃以下再打开箱门取出物品，以免因温度过高而骤然降温导致玻璃器皿炸裂。

3、在灭菌过程中，应注意排净锅内冷空气。

4、由于高压蒸汽灭菌时，要使用温度高达120℃、两个大气压的过热蒸汽，操作时，必须严格按照操作规程操作，否则容易发生意外事故。

5、不同类型的物品不应放在一起进行灭菌。

6、在未放气，器内压力尚未降到“0”位以前，绝对不允许打开器盖。

全自动高压蒸汽灭菌器使用规程

一、操作规程

1、在设备使用中，应对安全阀加以维护和检查，当设备闲置较长时间重新使用时，应扳动安全阀上小扳手，检查阀芯是否灵活，防止因弹簧锈蚀影响安全阀起跳。

2、设备工作时，当压力表指示超过0．165Mpa时，安全阀不开启，应立即关闭电源，打开放气阀旋钮，当压力表指针回零时，稍等1-2分钟，再打开容器盖并及时更换安全阀。

二、注意事项

1、堆放灭菌物品时，严禁堵塞安全阀的出气孔，必须留出空间保证其畅通放气。

2、每次使用前必须检查外桶内水量是否保持在灭菌桶搁脚处。

3、当灭菌器持续工作，在进行新的灭菌作业时，应留有5分钟的时间，并打开上盖让设备有时间冷却。

4、灭菌液体时，应将液体罐装在硬质的耐热玻璃瓶中，以不超过3／4体积为好，瓶口选用棉花纱塞，切勿使用未开孔的橡胶或软木塞。特别注意：在灭菌液体结束时不准立即释放蒸汽，必须待压力表指针回复到零位后方可排放余汽。

5、对不同类型，不同灭菌要求的物品，如敷料和液体等，切勿放在一起灭菌，以免顾此失彼，造成损失。

6、取放物品时注意不要被蒸气烫伤(可戴上线手套)。

冰箱使用规程

一、操作程序

1、开机：冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，确定其在正常供电状态下。

2、物品的放置

3、将冰箱调节到所需功能。

4、打开冰箱相应功能的箱门，将所需放置/取出的物品，放置/取出在冰箱、冰柜内。

5、物品放置好/取出后，将箱门关严，通过屏幕显示确定其在正常供电情况。

二、安全使用注意事项

1、严禁贮存或靠近易燃、易爆、有腐蚀性物品及易挥发的气体、液体，不得在有可燃气体的环境中存放或使用。

2、实验室使用冰箱内禁止存放与实验无关的物品。储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。

3、放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。

4、箱体表面请勿放置较重或较热的物体，以免变形。

5、保持冰箱出水口通畅。

6、在清洁/除霜时，切不可用有机溶剂、开水及洗衣粉等对冰箱有害的物质。

天平操作规程

1、使用天平前应先观察水准器中气泡是否在圆形水准器正中，如偏离中心，应调节地脚螺栓使气泡保持在水准器正中央，单盘天平（机械式）调整前面的地脚螺栓，电子天平调整后面的地脚螺栓。

2、天平使用前应首先调零，电子天平使用前还应用标准砝码校准。

3、天平门开关时动作要轻，防止震动影响天平精度和准确读数。

4、天平称量时要将天平门关好，严禁开着天平门时读数，防止空气流动对称量结果造成影响。

5、电子天平的去皮键使用要慎重，严禁用去皮键使天平回零。

6、如发现天平的托盘上有污物要立即擦拭干净。天平要经常擦拭，保持洁净，擦拭天平内部时要用洁净的干布或软毛刷，如干布擦不干净可用95%乙醇擦拭，严禁用水擦拭天平内部。

7、同一次分析应用同一台天平，避免系统误差。

8、天平载重不得超过最大负荷。

9、被称物应放在干燥清洁的器皿中称量，挥发性、腐蚀性物体必须放在密封加盖的容器中称量。

10、电子天平接通电源后应预热2小时才能使用。

11、搬动或拆装天平后要检查天平性能。

12、称量完毕后将所用称量纸带走。

13、称量完毕，保持天平清洁，物品按原样摆放整齐

光学显微镜使用规范

1、取镜和放置：右手紧握镜臂，左一手托住镜座取出。（特别禁止单手提显微镜，防止目镜从镜筒中滑脱）。放置桌边时动作要轻。一般应在身体的前面，略偏左，镜筒向前，镜臂向后，距桌边7～10 ㎝处，以便观察和防止掉落。然后安放目镜和物镜。

2、对光：用拇指和中指移动旋转器，使低倍镜对准镜台的通光孔。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察(右眼睁开)，同时调节反光镜方向，直到视野内的光线均匀明亮为止。

3、低倍镜的使用方法

（1）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。

（2）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。

4、高倍镜的使用方法

（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。

（2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。

（3）调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)

恒温干燥箱使用规程

一、目的

建立恒温干燥箱的操作规程，保证操作人员正确操作。

二、范围

适用于样品的干燥、玻璃仪器的烘干。

三、职责

操作人员对本规程的实施负责。

四、操作程序

1、接通电源，打开电源开关。

2、设置加热温度

3、待温度达到设置温度并无异常情况，稳定后放入样品，开始记时至所需干燥程度。

五、注意事项

1、设置温度时，通常将温度设置稍低于实验温度，待温度达到设置温度后，再设置到实验温度。

2、新购电热恒温干燥箱应校检合格方能使用，所有电热恒温干燥箱每年由计量所校检一次。

3、干燥箱安装在室内干燥和水平处，禁止震动和腐蚀。

4、使用时注意安全用电，电源刀闸容量和电源导线容量要足够，并要有良好的接地线。

5、箱内放入试品时不能太密，散热板上不能放试品，以免影响热气向上流动。

恒温培养箱使用规范

一、目的：建立恒温培养箱标准操作及维修保养规程，用以保证实验仪器操作的一致性。

二、操作前准备：对箱体内清洁，消毒合格后，执行如下程序。

三、操作过程

1、接通电源，开启电源开关。

2、调节调节器按钮，至调节温度档，并调节至所需温度，点击确认按钮，加热指示灯亮，培养箱进入升温状态。

3、如温度已超过所需温度时，可将节器按钮调至调节温度档，并调节至所需温度，待温度降至所需温度时，即将调整至红灯指示灯自动熄灭点，好能自动控制所需温度。

4、箱内之温度应按照温度表指示为准。

四、维修保养及注意事项

1、恒温培养箱必须有效接地，以保证使用安全。

2、在通电使用时忌用手触及箱左侧空间内的电器部分，或用湿布揩抹及用水冲洗。

3、电源线不可缠绕在金属物上或放置在潮湿的地方。必须防止橡皮老化以及漏电。

4、实验物放置在箱内不宜过挤，使空气流动畅通，保持箱内平均受热，在实验时，应将顶部适当旋开，使湿空气外逸以利于调节箱内温度。

5、箱内外应每日保持清洁，每次使用完毕应当进行清洁。

6、若长时间停用，应将电源切断。

霉菌培养箱操作规程

一、目的：建立霉菌培养箱的操作规程，保证正确使用。

二、操作规程

1、通电：将本机电源插头插入电源座中，按面板上电源开关，开关指示灯亮，表示电源已接通。

2、按动面板上照明开关，开关指示灯亮，同时箱内照明灯点亮。再按一下灯熄灭。

3、控温仪菜单操作：按照使用说明书调节。

4、培养箱应经常保持清洁，切忌用酸、化学稀释、汽油、苯之类的化学物品清洗箱内的任何部件。

5、在使用过程中，遇到突然停电时，应及时将电源插头拔下，至少待5分钟后方可重新通电启用。

6、开机正式使用前，清楚操作程序后方可开机使用。

7、外壳必须有效接地，以保证使用安全。

8清洁：每月对培养箱内部进行清洁，用消毒液进行擦拭消毒，用干净的微湿的抹布将外表面擦拭干净。

三、注意事项

1、仪器必须安放在坚固平整的地面上，以免运转时产生不必要的麻烦。电源应有可靠接地确保安全。

2、培养箱的门不宜经常打开且不宜长时间打开

3、培养箱放置的空间要足够大

电子恒温水浴锅使用规程

一、操作规程

1、将水浴锅放在固定的平台上，电源电压必须与产品要求的电压相符，电源插座应采用三孔安全插座，必须安装地线。

2、使用前先将水加入箱内，水位必须高于隔板，切勿无水或水位低于隔板加热，以防损坏加热管。

3、插上电源，打开开关，将控温设定旋钮调至所需要的温度刻度。绿灯亮表示升温，红灯亮表示定温。

二、注意事项

注水时不可将水流入控制箱内，以防发生触电，不用时将水及时放掉，并擦干净保持清洁，以利于延长使用寿命。

真空干燥箱的使用规程

一、操作过程：

1、需要干燥处理的物品放入真空干燥箱内，将箱门关上，并关闭放气阀，开启真空阀，在开启真空泵电源开始抽气，使箱内达到真空度-0.1MPa，关闭真空阀，在关闭真空泵电源开关。

2、把真空干燥箱电源开关拨至开处，选择所需的设定温度，箱内温度开始上升，当箱内温度接近设定温度时，加热指示灯忽亮忽熄，反复多次，一般120min以内搁板层面进入恒温状态。

3、当所需工作温度较低时，可采用二次设定方式，如所需工作温度60℃，第一次可先设定50℃，等温度过冲开始回落后，再第二次设定60℃，这样可降低甚至杜绝温度过冲现象，尽快进入恒温状态。

4、根据不同物品不同潮湿程度，选择不同的干燥时间，如干燥时间长，真空度下降，需要再次抽气恢复真空度，应先开启真空泵电机开关，再开启真空阀。

5、干燥结束后，应先关闭电源，旋动放气阀，解除箱内真空状态，再打开箱门取出物品。（解除真空后，因密封圈与玻璃门吸紧变形不易立即打开箱门，应稍等片刻等密封圈恢复原形后，才能方便开启箱门。

二、注意事项：

1、真空箱外壳必须有效接地，以保证使用安全。

2、真空箱不连续抽气使用时，应先关闭真空阀，在关闭真空泵电机电源，否则真空泵油要倒灌至箱内。

3、取出被处理物品时，如处理的是易燃物品，必须带温度冷却至低于燃点后，才能放入空气，以免发生氧化反应引起燃烧。

4、真空箱无防爆装置，不得放入易爆物品干燥。

5、非必要时，请勿随意拆开边门，以免损坏电器系统。

三、维护与保养：

1、真空箱应经常保持清洁，箱门玻璃应用松软棉布擦拭，切记用反应的化学溶剂擦拭，以免发生化学反应和擦伤玻璃。

2、如真空箱长期不用，应在电镀件上涂中性油脂或凡士林，以防腐蚀，并套好塑料薄膜防尘罩放在干燥的室内，以免电器件受潮而影响使用。

PH计的使用规程

一、使用方法：

1、测PH值：功能开关置PH档，调节温度补偿旋钮，使旋钮所指值和被测溶液温度一致，接上PH复合电极（或PH电极、参比电极）。用去离子水（或二次蒸馏水，下同）清洗电极，再用滤纸吸干，将电极插入被测溶液中，仪器显示被测溶液的PH值。

2、测离子浓度：功能开关置MV档，接上相应的离子选择电极，参比电极。用去离子水清洗电极，再用滤纸吸干，插入被测溶液中，仪器显示的即该离子浓度时的电极电位（MV值）。

二、维护和注意事项：

1、电极输入插头保持高度清洁，并保证接触良好（有污迹时可用99%工业酒精擦净）。

2、与仪器配套使用的有关电极的使用和维护保养，请务必参考有关电极使用说明书。

3、仪器不使用时请将选择电极插口保护帽套上。

糖度计的使用规程

一、糖度计的原理

利用手持式折光仪测定果蔬中的总可溶性固形物（Total Soluble Solid，TSS）含量，可大致表示果蔬的含糖量。光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象，且入射角正弦之比恒为定值，此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下（同一温度、压力）成正比例，故测定果蔬汁液的折光率，可求出果蔬汁液的浓度（含糖量的多少）。常用仪器是手持式折光仪，也称糖镜、手持式糖度计，通过测定果蔬可溶性固形物含量（含糖量），可了解果蔬的品质，大约估计果实的成熟度。

二、、操作步骤

打开手持式折光仪盖板(a)，用干净的纱布或卷纸小心擦干棱镜玻璃面。2.在棱镜玻璃面上滴2滴蒸馏水，盖上盖板。于水平状态，从接眼部（b）处观察，检查视野中明暗交界线是否处在刻度的零线上。

3.若与零线不重合，则旋动刻度调节螺旋，使分界线面刚好落在零线上。4.打开盖板，用纱布或卷纸将水擦干，然后如上法在棱镜玻璃面上滴2滴果蔬汁，进行观测，读取视野中明暗交界线上的刻度，即为果蔬汁中可溶性固形物含量（%）（糖的大致含量）。5.重复三次。

pHS-3C型酸度计操作规程

一、操作规程

1、接通电源，打开开关，并将功能开关置pH档，接上复合电极预热20min。2、复合电极用纯化水清洗干净，并用滤纸吸干，将复合电极插入一pH（接近待测溶液的pH）的标准缓冲溶液中；调节定位旋钮，使仪器显示的pH值与该标准缓冲溶液在此温度下的pH值相同。、把电极从此pH的标准缓冲溶液中取出，用纯化水清洗干净，并用滤纸吸干，插入另一pH（两个PH包含待测溶液pH）的标准缓冲溶液中，调节斜率旋钮，使仪器显示pH值与该溶液在此温度下的pH值相同。、把标准缓冲溶液中取出，用纯化水清洗干净，用滤纸吸干，插入被测溶液中，等仪器显示的pH值在1min内改变不超过±0.05时，此时仪器显示的pH值即是被测溶液的pH值。、对弱缓冲液（如水）的pH值测定，先用邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液校正仪器后测定供试液，并重取供试液再测，直至pH值的读数在1min内改变不超过±0.05为止，然后再用硼砂标准缓冲液校正仪器，再如上法测定二次pH值的读数相差不超过0.1，取二次读数的平均值为其PH值。、测量完毕，用纯化水冲洗电极，再用滤纸吸干；套上电极保护套（套中盛满电极保护液）。二 注意事项、测定前，按各品种项下的规定，选择二种pH值相差3个单位的标准缓冲液，使供试液的pH值处于二者之间。、取与供试液pH值较接近的第一种标准缓冲液对仪器进行校正（定位），使仪器示值与标准缓冲液数值一致。、仪器定位后，再用第二种标准缓冲液核对仪器示值，误差应不大于±0.02pH单位。若大于此偏差，则小心调节斜率，使示值与第二种标准缓冲液的表列数值相符。重复上述定位与斜率调节操作，至仪器示值与标准缓冲液的规定数值相差不大于0.02pH单位。否则，须检查仪器或更换电极后，再行校正符合要求。4、配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新滤过的冷蒸馏水，其pH值应为5.5～7.0。、标准缓冲液一般可使用2～3个月，如有浑浊、发霉或沉淀等现象时，不能继续使用。、电极玻璃很薄，使用时要小心保护。、电极插入溶液后要充分搅拌均匀（2~3min），待溶液静止后（2~3min）再读数。

8、复合电极的外参比补充液是3M的氯化钾溶液（55.9g分析纯氯化钾溶解于250ml去离子水中）。电极的引出端，必须保持干净和干燥，绝对防止短路。9、仪器标定好后，不能再动定位和斜率旋钮，否则必须重新标定。

DDS-307型实验室电导率仪操作规程

一、仪器正常工作条件 环境湿度：（5~40）℃； 相对湿度：不大于90% 供电电源：9V直流外接电源（内正外负）300mA 除地磁场外，周围无其他电磁场干扰。

二仪器的使用 1仪器的连接

先将电导电极连接到仪器后面板的测量插座上（插头 插座上的定位销对准后，按下插头顶部可使插头插入插座。如欲拔出插头，则捏其外套往外拔即可）。将随机所配直流电源连接到仪器后面板的9V插座上，直流电源的另一端连接到交流220V市电上。2 仪器的初始化

a．初次使用本仪器必须根据所配套电导电极的电极常数对仪器进行初始化 b．开机，按仪器的“电源”键，使仪器显示屏点亮，按“MOD”键。使仪器“常数”点亮并闪耀，同时显示上一次设定的电导电极常数值，仪器出厂时的设定值为1.000；

c．根据所配电导电极的电极常数，再按仪器的常数“▲ ▼”键，使仪器显示值与电导电极的电极常数值相一致。

d．按仪器的“ENT”键确认，仪器的电导电极常数设定完成，仪器自动进入温度补偿系数的设定，此时仪器“系数”点亮并且闪耀，同时仪器显示上一次设定的温度补偿系数，仪器出厂时的设定值为2.0 e．根据被测介质不同选择不同的温度系数，常规测量使用2.0，即温度补偿系数为2.0% f．按仪器的“ENT”键确认，仪器的温度补偿系数设定完成，仪器回到测量状态。如果不调电导电极，再下一次使用时没有必要对仪器进行初始化。直接开机进入测量即可。3电导率的测量

a． 开机，仪器自动进入测量状态。(如果仪器已初始化，就没有必要对仪器进行再一次初始化)； b． 按仪器的“▲ ▼”，此时仪器的温度符号“℃”闪耀，表明仪器处于温度调整状态，使仪器的温度显示值与被测介质的温度相一致，按仪器的“ENT”键确认，仪器返回测量状态；

c． 用蒸馏水清洗电导电极，再用被测试样清洗电导电极