色谱（共9篇）
免疫亲和色谱-高效液相色谱法测定土壤中氯磺隆残留
采用碳酰二咪唑(CDI)将Sepharose CL-4B活化并与纯化的抗氯磺隆抗体共价偶联,合成免疫亲和吸附剂并制备对氯磺隆具有特异性亲和力的免疫亲合色谱(IAC)柱.对IAC条件进行优化,选择0.02 mol・L-1 pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,80%(体积分数)甲醇水作洗脱剂.结果表明,在实验条件下,IAC柱对氯磺隆的.动态柱容量达2.6 μg・mL-1床体积.当标样溶液中氯磺隆含量为2.0 ng・mL-1时,经IAC柱富集后浓度提高近250倍.土壤中添加氯磺隆0.10 μg・g-1、5.0 ng・g-1,提取液以IAC柱分离富集,洗脱液采用高效液相色谱(HPLC)法测定,5次重复实验的平均回收率分别为92.9%、94.8%,相对标准偏差分别为8.46%、8.41%.成功建立了氯磺隆IAC-HPLC分析技术并用于土壤中痕量残留氯磺隆的测定.
作 者：冯大和 邵秀金 韦林洪 刘曙照 FENG Da-he SHAO Xu-jin WEI Lin-hong LIU Shu-zhao 作者单位：扬州大学环境科学与工程学院,江苏,扬州,225009刊 名：农业环境科学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF AGRO-ENVIRONMENT SCIENCE年，卷(期)：25(6)分类号：X592关键词：免疫亲合色谱(IAC) 高效液相色谱(HPLC) 土壤 氯磺隆
1 实验部分
1.1 试剂
实验试剂有高纯氢 (99.99%) 、高纯氮 (99.99%) 、异辛烷 (色谱纯) 。
1.2 仪器
实验仪器包括高效液相色谱系统的二极管矩阵检测器、600泵、watersMillennium32色谱数据管理软件, 岛津GC-14B气相色谱仪以及分液漏斗等。
1.3 分析步骤
首先进行样品预处理, 如果样品中有机械杂质, 需经过0.45μm滤膜过滤后供色谱分析用。
1.3.1 气相色谱分析
确定校正系数, 分别称取不同质量的联苯和联苯醚标样, 配成联苯比联苯醚 (M1∶M2) , 联苯和联苯醚的质量百分比在26.5±1.0∶3.5±1.0范围内。
吸取0.4μL配好的道生油标样进入进样口, 启动积分仪, 结束后得联苯含量为A1, 联苯醚含量为A2, 则联苯系数为μ1=M1∶A1。然后对样品进行分析。
吸取0.4μL配好的道生油样品进入进样口, 启动积分仪, 结束后得联苯含量为C1。
对所得结果按下式计算:
联苯含量 (%) =C1×μ1;
联苯醚含量 (%) =100%-联苯含量。
1.3.2 液相色谱分析
将流动相异辛烷用超声波脱气后置于高压泵进液管, 对标样联苯及联苯醚含量分析、制作标准曲线。
用异辛烷稀释纯的联苯和联苯醚标样, 配制的不同浓度的标准溶液见表1、联苯含量与对应峰面积见表2、联苯含量标准曲线见图1。
用与制作标准曲线相同的色谱条件进样分析样品 (由于联苯及联苯醚在紫外响应值很大, 所以道生油样品需要稀释进样) 。所得联苯醚含量与对应峰面积见表3, 联苯醚含量标准曲线见图2。
由图1、图2可知联苯、联苯醚其线性方程分别为:
Y联苯=24.955 X-4.1 383, 相关系数为0.9 999;
Y联苯醚=380.47 X+10.505, 相关系数为0.9 996。
其相关系数高, 线性好。
同理, 在设定色谱的条件下, 用液相色谱分析已处理好的样品, 得到联苯和联苯醚的峰面积, 根据标准曲线线性方程计算出其中道生油含量。同时根据标准曲线线性方程计算出相应联苯和联苯醚的含量。
联苯的含量:M联苯 (mg/kg) =24.955 X-4.1 383
式中:X-联苯相应的峰面积 (×106) ;
联苯醚的含量:
M联苯醚 (mg/kg) =380.47 X+10.505。
式中:X-联苯醚相应的峰面积 (×106) 。
2 结果与讨论
2.1 道生油组成精密度试验
精密度试验是评价分析方法准确度的重要手段, 在相同的试验条件下, 标准偏差或变异系数越小, 分析方法的精密度越高。为了比较气相色谱法与液相色谱法分析道生油组成的精密度, 取原料道生油样品连续5针进样, 经计算后得到气相色谱分析结果见表4。由于联苯及联苯醚的紫外响应值很大, 所以道生油必须稀释后进样, 取经稀释后的道生油样品连续5针进样, 经计算后得到液相色谱分析结果见表5 (以联苯醚含量代表道生油组成计算相对标准偏差和变异系数) 。
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由表4、表5可知, 两种分析方法的标准偏差及变异系数都较小, 能满足分析要求。但液相色谱分析法有更小的标准偏差及变异系数, 分析结果表明液相色谱分析法精密度更高。
2.2 道生油组成回收率试验
分析中常用回收率来评价分析方法的准确性, 回收率无限接近100%是最好的结果。在实际分析中, 只要回收率在规定范围内 (一般90%～105%) , 即认为该分析方法能满足分析的需要。为了比较气相色谱法与液相色谱法的回收率, 向原料道生油中加入不同量的联苯醚, 用选定的色谱条件进行分析, 每批样品进样两次, 经计算后分别得到液相色谱分析结果和气相色谱分析结果分别见表6、表7 (以联苯醚含量代表道生油组成分析结果) 。
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%
由图6、图7可知, 两种分析方法的收率都能满足分析要求, 但液相色谱分析法收率更好, 分析结果表明液相色谱分析法准确度更高。
2.3 道生油组成分离度比较
为判断相邻两组份在色谱柱中的分离情况, 可用分离度R作为色谱柱的分离效能指标。分离度是色谱柱将两个相邻峰分开的能力, 相邻两组份色谱峰保留值之差与两个组份色谱峰低宽度总和之半的比值即为色谱分离度。分离度计算如下。
液相色谱分离度计算:
气相色谱分离度计算:
其中:tR (1) 为联苯的相对保留时间 (min) ;
tR (2) 为联苯醚的相对保留时间 (min) ;
w1/2 (1) 为联苯的半峰宽 (min) ;
w1/2 (2) 为联苯醚的半峰宽 (min) 。
由色谱分析理论可知, 为了确保相邻两峰能完全分离, 其分离度要大于1.5。本试验液相色谱分离度为3.48大于1.5, 气相色谱分离度为0.78小于1.5, 液相色谱联苯及联苯醚可完全分离, 而气相色谱联苯及联苯醚不能完全分离。因此, 定性和定量分析道生油样品, 用液相色谱分析更加准确可靠。
2.4 道生油组成在工艺上的运用比较
在烷基苯生产工艺中, 一旦发生道生油泄漏, 可能对从原料煤油到中间产品抽余油及成品烷基苯等造成污染, 引发质量事故。常规的道生油、煤油、烷基苯等组成分析是用气相色谱, 由于气相色谱法定性和定量分析的主要依据是各组分的保留时间及其峰面积 (或峰高) , 所以能否准确对每个化合物进行定性和定量就变得十分关键。但少量道生油泄漏到煤油或抽余油中, 由于样品组成复杂, 则很难定性和定量分析。同时, 由于煤油组分多, 峰形复杂, 联苯、联苯醚与煤油的一些组份的分离度很小 (或峰重合) , 也很难进行定性和定量分析, 而联苯和联苯醚在紫外区域响应值比较大, 选择合适的色谱柱, 如果有足够的分离度, 用液相色谱定性定量分析是可行的。
用外标法可以进行定性和定量分析, 这是气相色谱无法做到的。所以液相色谱分析法在帮助装置查找漏点, 及时、准确制定工艺处理方案方面发挥了积极的作用。
3 结论及应用
通过以上试验发现, 从精密度试验和收率可判断出用液相色谱分析道生油的组成是准确、可靠的, 可以取代气相色谱法。液相色谱分析道生油的组成, 分析时间短 (每个样品分析时间约25 min) , 准确性高。利用液相色谱法分析油品中微量道生油的方法在协助查找漏点, 及时进行工艺处理方面也起到了很大的作用。
摘要：道生油组成测定传统的分析方法是气相色谱法, 定量方法是归一法。道生油主要组份为联苯和联苯醚, 联苯和联苯醚的紫外响应值比较大, 可以选择合适的检测器和色谱柱, 通过液相色谱用外标法来分析道生油的组成。本实验通过比较2种分析方法, 得出如下结论:液相色谱分析道生油组成变异系数小、收率高, 相对于气相色谱法, 液相色谱法更加快捷、准确、可靠, 特别是在查找道生油管线漏点上能起到至关重要的作用。
关键词：联苯,联苯醚,归一法,外标法
参考文献
[1]于世林.高效液相色谱方法及应用 (第二版) [M].北京:化学工业出版社, 2005.
关键词 农药 ；残留 ；在线凝胶色谱-气相色谱质谱 ；菠菜
分类号 S482.4
Abstract Method for the determination of 55 pesticide multiresidues in spinach by On-line GPC-GC/MS was developed. The sample was extracted with acetonitrile，and cleaned by PSA powder after salting out. The final purified extract was analyzed by GPC-GC/MS. The average recoveries of 55 kinds of pesticide at three spiked concentration levels （0.025，0.05 and 0.10 mg/kg） ranged from 81.3～106.2% with the relative standard deviations （RSDs） below 10.3%. Good linearity which correlation coefficient was greater than 0.995 3 was observed in the range of 0.01 to 0.5 μg/mL. The limits of detection （LODs） of 55 pesticides were 0.005～0.5 μg/kg. The method is easy， fast， and more sensitive. It also indicated that this method can meet the requirements for determination of 55 pesticide multiresidues in spinach.
Keywords pesticide ； residues ； on line gel permeation chromatography coupled with gas chromatography-mass spectrometry （GPC-GC/MS） ； spinach
目前，国内外报道的农药残留检测多采用气相色谱法、气相色谱-质谱联用法等[1-2]。由于气相色谱法一般只能同时分析检测一类化合物，难以满足多类多残留分析的发展趋势[3-4]；传统的气相色谱-质谱联用仪，由于进样体积的限制，检出限比较高[5]。在线凝胶色谱串联气相色谱质谱技术是由GPC纯化前处理装置与GC/MS在线联接组成，采用微型GPC色谱柱的分离能力与新开发的GC/MS大体积进样法，实现了农药残留多组份同时快速分析。杨惠琴[6-8]利用在线凝胶色谱串联气相色谱-质谱技术对食品中的杀菌剂进行了分析，检出限为0.01 μg/kg；郑健琨等[9]通过在线凝胶色谱串联气相色谱-质谱技术，对土壤中36种农药进行了研究。但这类文献往往仅限于几种或一类农药残留进行分析检测[10-16]，通过在线凝胶色谱串联气相色谱-质谱技术分析蔬菜中的多类农药残留，至今未见报道。
本研究采用在线凝胶色谱串联气相色谱-质谱（GPC-GC/MS）同时对菠菜中的55种有机磷、有机氯及除虫菊酯类农药残留进行定性、定量研究。建立了高效、灵敏、可靠的GPC-GC/MS同时测定菠菜中55种农药多残留的快速分析方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品与试剂
丙酮、环己烷（均为HPLC级，Merk）；乙腈，正己烷，乙酸乙酯等均为分析纯（广州化学试剂厂）；无水硫酸钠，氯化钠（140℃烘烤4 h，放入干燥器中冷却备用）；PSA固相萃取填料。百菌清、三唑酮、氯氰菊酯等55种农药标准溶液均购自天津环境保护科学研究所，纯度大于98%。农药混合标准储备溶液浓度为100 μg/mL（丙酮溶液），于4℃冰箱保存，混合基质标准工作液根据需要用空白菠菜样品净化定容液逐级稀释成工作液，现用现配。GPC-GCMS为在线凝胶渗透色谱-气相色谱质谱联用仪（岛津）；离心机为UNIVERAL 32R（Hettich公司）。
1.1.2 仪器工作条件
GPC条件：色谱柱为Shodex CLNpak EV-200（2.1 mm×150 mm）；流动相为丙酮/环己烷（体积比3∶7，下同）；流速0.1 mL/min；柱温40℃；进样量10 μL。
GCMS条件：色谱柱为惰性石英管5 m×0.53 mm；预柱Rtx-5 MS，5 m×0.25 mm×0.25 μm；分析柱Rtx-5 MS，25 m×0.25 mm×0.25 μm；PTV进样口温度120℃；柱温程序82℃（5 min）～8℃/min～300℃（7.75 min）；载气为氦气；不分流进样时间7 min；溶剂延迟9.7 min；接口温度300℃；离子源温度230℃；采集方式选择离子监测模式。
1.2 方法
nlc202309031508
称取10.0 g 菠菜样品，于50.0 mL聚丙烯塑料离心管中，加入5.0 mL去离子水，浸泡10 min，加入20.0 mL乙腈，15 000 r/min均质2 min，均质后加入5.0 g氯化钠和5.0 g无水硫酸钠，9 000 r/min离心10 min，吸取上清液5 mL于离心管中；在离心管中加入PSA填料50 mg，涡旋2.0 min后，9 000 r/min离心10 min，吸取上清液于10 mL试管中；45℃水浴，氮气吹至近干；用1 mL丙酮/环己烷定容，经0.2 μm微孔有机滤膜过滤，供分析。
2 结果与分析
2.1 样品前处理的优化
由于菠菜样品中富含色素，这类物质是导致样品基质复杂的主要因素。为有效提取菠菜样品中的55种农药，本文分别考察了乙腈、正己烷、乙酸乙酯作为提取溶剂时55种农药的加标回收率。在样品净化前，分别对所提取的样品进行吹干，然后用1 mL丙酮/环己烷定容，过膜，进行GPC-GC/MS上机分析（图1）。结果表明，正己烷与乙酸乙酯的回收率相当，难以满足菠菜样品中55种农药残留检测要求；乙腈作为提取溶剂时，回收率满足方法要求，且提取出来的色素杂质相对较少。因此，本文选择乙腈作为菠菜样品的提取溶剂。
2.2 空白实验
取空白蔬菜（菠菜）样品1份（不添加55种农药标准溶液），称取10.0 g，按照1.2的操作步骤，提取、净化蔬菜样品，用GPC-GCMS测定，所得的检测图谱在55种农药标准品的出峰保留时间出处未出现色谱干扰峰（图2）。
2.3 回收率与精密度
准确称取空白菠菜样品10.0 g（精确至0.01 g），加适量55种农药标准工作液，使加标水平分别为0.025、0.05、0.10 mg/kg，按1.2的方法处理后进行质谱分析。每个浓度做5 份重复，以外标法计算菠菜样品中农药残留量。回收率及精密度计算结果见表1。在3个添加水平，55种农药的回收率在81.3%～106.2%，相对标准偏差为0.5%～10.3%。典型空白菠菜样品添加55种农药的总离子流见图3。
2.4 方法线性与检出限
准确配制6个浓度梯度（0.010、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5 μg/mL）的55种农药基质匹配标准溶液进样，以溶液质量浓度为横坐标，以相应的峰面积为纵坐标作出标准曲线，测得55种农药的回归系数见表2。在0.010～0.5 μg/mL浓度范围内，55种农药的相关系数均大于0.99，线性关系良好。以3倍信噪比计算方法检出限，55种农药的检出限见表2，菠菜样品中55种农药的检出限远低于植物性食品中55种农药所规定的最高残留限量。
2.5 GPC与GC-MS在线化的效果
传统的GC-MS进样量不超过2 μL，在线凝胶色谱-气相色谱质谱系统的进样量可以达到10 μL，是普通气质联用仪的5倍，该系统提高了检测药物的灵敏度，降低了检测组分的检出限，结果见表2。由于在线凝胶色谱系统在样品提取、净化后，能够进一步去除样品中的干扰物质，减少55种农药基质效应影响，降低背景干扰、改善峰形，从而更好地实现菠菜样品中55种农药定性与定量。
2.6 实际样品测定
采用本方法对采自广东湛江的批发市场、大型超市和农贸市场的菠菜10个样品中55种目标物进行检测，高效氯氟氰菊酯在2个蔬菜样品中被检出，检出率为20%，检出浓度最高为0.12 mg/kg，其它农药均未检出。
3 结论
本实验建立了在线凝胶色谱-气相色谱质谱法测定菠菜中55种农药的分析方法。该方法的灵敏度、精密度和检出限都能满足日常检测分析的要求，具有快速、灵敏度高的特点，适合于菠菜样品中55种化合物的分析。运用所建立的方法对实际样品进行了检测，共检测菠菜10个样次，其中2样次检出。
参考文献
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国有资产管理处： 采购原因
设备简述厂家报价 XXXXX准备利用XXXXX的分析需要利用。
1、XXXX公司的XXXX仪采用XXXX，XXXXX系统，报价XXXX元。
2、XXXX公司的XXXX仪采用XXXX，XXXXX系统，报价XXXX元。
3、XXXX公司的XXXX仪采用XXXX，XXXXX系统，报价XXXX元。XXXX公司XXXXX仪在XXXX各公司联系人和联系方式如下：
1、XXX公司联系人：XXX
电话：XXXXX手机：XXXXXXXXX传真:XXXXXE-mail：XXXXXXXXX2、XXX公司联系人：XXX
电话：XXXXX手机：XXXXXXXXX传真:XXXXXE-mail：XXXXXXXXX3、XXX公司联系人：XXX
电话：XXXXX手机：XXXXXXXXX传真:XXXXXE-mail：XXXXXXXXX 基于以上调研情况，报请国有资产管理处安排仪器的招标工作。
XXXX(电话)
单位
2012年X月XX日
所谓方法验证(validation，又叫认证)就是要证明所开发方法的实用性和可靠性。实用性一般指所用仪器配置是否全部可作为商品购得(实验室自己制造的仪器部件就欠实用)，样品处理方法是否简单易操作，分析时间是否合理，分析成本是否可被同行接受等。可靠性则包括定量的线性范围、检测限、方法回收率、重复性、重现性和准确度等。下面就简单讨论这几个可靠性参数。
1．方法的线性范围
即检测器响应值与样品量(浓度)成正比的线性范围，它主要由检测器的特性所决定。原则上。这一线性范围应覆盖样品组分浓度整个变化范围。线性范围的确定通常是采用一系列(多于3个)不同浓度的样品进行分析，以峰面积(或峰高)对浓度进行线性回归。当相关系数大于0．99时，就可认为足线性的，小于0．99时，就超出了线性范围。一个好的GC定量方法，其线性范围(以FID检测器为例)可达10；，线性相关系数等于或大于0．9999。
2．方法的检测限
检测限(DL)是指方法可检测到的最小样品量(浓度)。一般的原则是按照3倍信噪比计算，即气样品组分的响应值等于基线噪声的3倍时，该样品的浓度就被作为最小检测限，与此对应的该组分的进样量就叫做最小检测量-此外。忆验证定量方法时，还将10倍信噪比所对应的样品浓度叫做最小定量限，当用于法规分析时，这一数据应等于或低于法规方法所要求的实际样品中待测组分的最低允许浓度。
检测限的测定可用一个接近检测限浓度的样品进行分析，据所得色谱峰的峰高来计算。设此时浓度为c、相应的峰高为h(信号强度单位)、基线噪声为N(与h的单位相同)，则检测限可按下面公式计算：
c／h＝DL/3N；即DL＝3Nc／h 噪声的大小与仪器的性能，特别是检测器及其电子电路的稳定性直接相关，也与载气的纯度、色谱柱的性能及操作条件有关。噪声的测定是在正常操作条件下，仪器稳定时，将信号放大(降低衰减或放大纵坐标)来测量，一般是测定样品出峰前后1min的基线噪声。
作为分析方法，检测限无疑是越低越好。为此，应选择灵敏度高的检测器，使用高纯度的载气和辅助气，同时要定期维护仪器，保持进样口和检测器的清洁，保持色谱柱的性能。此外，仔细优化分离条件、适当加大进样量(如采用大体积进样技术)也是降低检测限的常用方法。
3．方法回收率
即方法测得的样品组分浓度与原来样品中实有浓度的比率。如果样品未经任何预处理，则回收率一般可不考虑。只有当某些样品组分被仪器系统不可逆吸附时，回收率才是需要考虑的问题。如果样品经过了预处理，如萃取工艺，那就必须考虑整个方法的回收率。一般要求回收串大于60％，越接近100％越好。
回收率可用下述简单方法测定：配置一定浓度的标准样品，将其两等分，其中一份按方法步骤进行预处理，然后用GC分析。另一份则不经颈处理而直接用GC分析。两份样品所得待测组分峰面积的比率乘以100即是该组分的回收率。有时实际样品很复杂，特别是样品基质对预处理的回收率影响较大时，就必须用空白样品基质(确信不含待测物)制备标准样品，比如测定废水中有机农药残留量时，就要采用不含农药的水作空白基质，在其中加入已知量的农药标准品，然后进行处理和分析。处理后测得的组分含量与处理前加入量的比率乘以100就得到了回收率。
很显然，回收率太低时会影响方法的检测限。当样品处理过程较复杂时，应分步测定回收率，最后针对回收率最低的步骤进行方法改进，以期提高整个方法的回收率。
4．方法重复性和重现性
重现性(reproducibility)足指同一方法在不同时间、地点、不同型号仪器、不同操作人员使用寸所得结果的一致性。与此近似的另一个术语是重复性(repeatability)，常指同一个人在同一台仪器上重复进样所得结果的一致性。事实上，文献中二者常常混用，多数人不做严格区分。但大多数欧洲学者会严格区分二者的不同。我们认为对现代仪器来说，分析重复性是容易实现的，而重现性则是更重要的，也是方法验证所必须考察的。重现性和重复性都用多次分析所得结果的相对标准偏差(RSD)来表示。
方法的重现性应包括多次连续进样分析的重复性、不同时间(天与天之间)分析的重复性、不同型号仪器之间的重现性和不同实验室之间的重现性。作为方法开发人员，首先应测定重复性，即在相同条件下连续进样5—10次，统汁待测组分的保留时间和峰面积(或峰高)的RSD，一般要求保留时间的RSD不大于1％，峰面积的RSD不大于5%。文献报道的最佳重复性数据为保留时间的RSD小于0.1%，峰面积的RSD小于1%。
如果样品要经过预处理，还应测定同一样品多次处理的重复性。即同一样品取3—5份做平行处理，看最后测定结果的重复性。这一RSD值应不大于5％。当然，有些工业分析要求不大于10％即可。至于天与天之间的重现性也不应大于10%、当上述重复性满足要求后，说明该方法在你的实验室是可靠的。要将此方法作为标准方法推广使用，还必须测定不同仪器、不同实验室之间的重现性。当这些重现性(RSD)都能满足要求时。这一方法的可靠性就得到了较为满意的验证。
方法的线性关系及检测限
准确称取 7种目标物的标准品, 用甲醇稀释配制成 7种目标物的标准溶液, 根据需要用甲醇分别稀释配制成 5级标准工作溶液, 浓度范围如表 3所示,在选定的色谱条件下,分别进样分析。以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标作回归方程,结果见表 3 , 回归方程的相关系数 R2均大于 0.9999,线性关系良好。以最低浓度标样重复进样 5次, 取其 3倍标准偏差为检测限, 10倍标准偏差为定量限, 根据样品处理过程将结果换算为ug /g , 得到该方法的检测限和定量限
方法的回收率和重复性
采用标准加入法测定方法的回收率。取一种已知目标物含量的样品(7 #),加入与其含量相当的混合标
准溶液,重复 5次,测定其加标回收率和重复性, 结果如表 5所示。5次重复实验的 RSD范围为 1.3 % ~3.1 %, 回收率范围为 97.0 % ~ 99.6 %, 可以满足定量需要。
——引自《RP-HPLC法测定烟用香精香料中的7种防腐剂》
内标法方法学注意事项（引自网页论坛）
选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组分），然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液，进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中，进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。
内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。选择内标物有4个要求：1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；2.它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；3.加入内标物的量应接近于被测组分；4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。内标法的优点是测定的结果较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量，有时寻找合适的内标物也有困难。外标法简便，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。
那么内标法的方法学研究就是将过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值，也就是一个比值，来进行一些精密度、准确度、线性之类的研究。
具体就是配制不同浓度的标准溶液，记录样品和内标峰面积，计算样品/内标峰面积比值R样品/内标，利用样品浓度C对比值R样品/内标作直线回归，得回归方程，作为标准曲线。精密度、准确度也如此。
首先你要了解何为内标法
内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。化学方面的因素包括：
1、内标物在样品里混合不好；
2、内标物和样品组分之间发生反应，3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变，这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠，而色谱固看来也是正常的话，应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是：面积比可变，而峰高比保持相对恒定，在用内标法做色谱定量分析时，先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析，测量峰面积，做重量比和面积比的关系曲线，此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致，因此，在制作标准曲线时，不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等)，还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时，各点并不完全落在直线上，此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差，在使用过程中应定期进行单点校正，若所得值与平均值的偏差小于2，曲线仍可使用，若大于2，则应重作曲线，如果曲线在铰短时期内即产生变动，则不宜使用内标法定量。
所以，当你确定应用内标法之后，就不需要进行这些实验的。因为你在加内标时它就是一个已知浓度了。做方法学的时候，内标和待测物标准品(比如你的白三烯待测物）要分别单独进样，然后再做标液的色谱图（含有内标和样品），然后再是提取或者回收后的样品（如血浆或者一些细胞，组织提取物等等），最后比较两者的封面积。
色谱（Chinese Journal Chromatography）,中文杂志，双月刊, 1984年创刊
Journal of Chromatography(色谱杂志), 国际杂志，30多卷/年，1-3 期/卷，主要以英文发表，1958年创刊
Journal of Chromatographic Science(色谱科学杂志),国际杂志，1963年创刊 Chromatographia(色谱法), 国际杂志，以英、法、德文发表，1968年创刊
Journal of Liquid Chromatography(液体色谱杂志), 国际杂志，主要发表高效液相色谱研究报告，1978年创刊
Journal of High Rwsolution Chromatography and Chromatography Communications(高分辨色谱和色谱通讯), 1978年创刊 主要色谱文摘杂志：
Gas and Liquid Chromatography Abstracts Gas Chromatography –Mass Spectrometry Abstracts Chemical Abstracts Analytical Abstracts 色谱学权威参考书
色谱学导论，达世禄编著，武汉大学出版社，1999 现代液相色谱，朱彭龄等编著，兰州大学出版社，1994 高效液相色谱法，邹汉法，张玉奎，卢佩章编著，科学出版社，2001 实用高效液相色谱法，（英）C.F.辛普森，许征帆译，中国建筑工业出版社，1979 痕量物质分析气相色谱法，梁汉昌编著，中国石化出版社，2000 汪正范等编著，色谱联用技术，化学工业出版社，2001 常用中草药高效液相色谱分析，王慕邹等编，科学出版社，1999 药物分析方法与应用，马广慈主编，科学出版社，2001 室内环境质量及检测标准汇编，中国标准出版社，2003 国际上知名研讨会
International Symposiumon Column Liquid Chromatography, 1973年开始，两年一次，现在每年一次
对苹果、番茄、水稻、马铃薯和棉花等多种作物的炭疽病、霜霉病及白粉病等病害具有较好的防效[2]。其主要作用机理是妨碍病原真菌的呼吸过程。目前有关克菌丹多种色谱分析法的比较尚未见报道。本文采用气相色谱法和高效液相色谱法, 分别对有效成分进行分析和定量, 结果都满足农药分析方法验证的要求, 都适用于克菌丹原药及其制剂的分析。两种方法各具特点, 因此在检测时可根据实际情况进行选择。
1 实验部分
1.1 气相色谱分析法
1.1.1 材料与试剂
甲苯:色谱纯 (CNW) ;克菌丹标样 (纯度98.5%±1.0%, 德国Dr.Ehrensorfer公司) ;50%克菌丹可湿性粉剂试样。
1.1.2 仪器与设备
分析天平:梅特勒-托利多XP205;气相色谱仪:Thermo Trace 1310GC-ECD;检测器:ECD;亲水PTFE针式过滤器:滤膜孔径为0.22μm。
1.1.3 气相色谱操作条件
色谱柱:1701 (规格:30m×0.25mm×0.25μm) ;进样口温度:250°C;进样模式:不分流 (衬管去掉玻璃棉) ;恒流:1.5m L/min;ECD检测器温度:280°C;升温程序:80°C保持1min, 以30°C/min升至260°C保持5min;流速:1.5m L/min;进样体积:1.0μL;保留时间:9.147min;气相色谱图详见图1。
1.1.4 实验溶液配制
称取克菌丹标样0.02g (精确至0.0001g) , 置于100m L容量瓶中, 用甲苯溶解并定容至标线, 摇匀, 即为标样溶液。
称取50%克菌丹可湿性粉剂试样0.02g (精确至0.0001g) , 置于100m L容量瓶中, 用甲苯定容至标线, 摇匀, 即为试样溶液。
1.2 液相色谱分析法
1.2.1 材料与试剂
水:超纯水;甲醇:色谱纯 (CNW) ;磷酸:色谱纯 (CNW) ;克菌丹标样 (纯度98.5%±1.0%, 德国Dr.Ehrensorfer公司) ;50%克菌丹可湿性粉剂试样。
1.2.2 仪器与设备
分析天平:梅特勒-托利多XP205;高效液相色谱仪:Thermo Ulti Mate 3000;检测器:紫外检测器 (UV) ;亲水PTFE针式过滤器:滤膜孔径为0.22μm。
1.2.3 液相色谱操作条件
色谱柱:ZORBAX Eclipse Plus C18 (规格:4.6×100mm, 粒径:3.5μm) ;流动相:0.1%磷酸溶液:甲醇=40.0:60.0 (V:V) ;流速:0.800m L/min;检测波长:220nm;柱温:30.0℃;进样体积:10μL;保留时间:约3.25min;高效液相色谱图详见图2。
1.2.4 实验溶液配制
称取克菌丹标样0.02g (精确至0.0001g) , 置于100m L容量瓶中, 用甲醇溶解并定容至标线, 摇匀, 即为标样溶液。
称取50%克菌丹可湿性粉剂试样0.02g (精确至0.0001g) , 置于100m L容量瓶中, 用甲醇定容至标线, 摇匀, 即为试样溶液。
2 结果与讨论
2.1 气相色谱分析法
2.1.1 分析方法的线性相关测定
配制克菌丹浓度均为0.00200mg/L、0.00500mg/L、0.0100mg/L、0.0500mg/L、0.100mg/L的一系列标样溶液, 在上述操作条件下进行测定, 以标样溶液浓度为横坐标, 以峰面积的值为纵坐标, 建立坐标系进行线性分析, 克菌丹的线性方程:Y=5.87195X+0.00395, 相关系数r:0.9999 (详见图3) 。
2.1.2 分析方法的精密度试验
对浓度为0.100mg/L的标样进行6次重复测定, 在0.100mg/L浓度下, 克菌丹的标准偏差为0.00555, 相对标准偏差为0.874%。
2.1.3 分析方法的准确度试验
于空白样品中分别加入不同浓度的克菌丹标准品, 按照本文的方法和操作条件进行重复测定, 测得克菌丹回收率为84.4%~92.8%。
2.2 液相色谱分析法
2.2.1 分析方法的线性相关测定
配制克菌丹浓度均为0.500mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L的一系列标样溶液, 在上述操作条件下进行测定, 以标样溶液浓度为横坐标, 以峰面积的值为纵坐标, 建立坐标系进行线性分析, 克菌丹的线性方程:Y=0.0109X-0.0006, 相关系数r:0.9992 (详见图4) 。
2.2.2 分析方法的精密度试验
对浓度为10.0mg/L的标样进行6次重复测定, 在10.0mg/L浓度下, 克菌丹的标准偏差为1.91, 相对标准偏差为1.95%。
2.2.3 分析方法的准确度试验
于空白样品中分别加入不同浓度的克菌丹标准品, 按照本文的方法和操作条件进行重复测定, 测得克菌丹回收率为86.7%~91.2%。
2.3 气相色谱法与高效液相色谱法的比较
分别用气相色谱法和高效液相色谱法检测分析克菌丹的含量, 并将两种分析方法进行线性相关、精密度、准确度试验, 从结果看出两种方法的线性相关系数、相对标准偏差、回收率均符合农药分析方法验证的要求。证明这两种方法都可用于克菌丹原药及其制剂的分析。
此外, 气相色谱法的检出限:0.000971mg/L, 定量限:0.00324mg/L;高效液相色谱法的检出限:0.170mg/L, 定量限:0.568mg/L。证明气相色谱法的检出限与定量限均明显低于高效液相色谱法, 灵敏度较高。
由图1、图2看出, 气相色谱法和高效液相色谱法的保留时间分别是9.147min和3.25min, 证明高效液相色谱法出峰时间更短, 检测效率较高。
3 结语
本文采用了优化的气相色谱条件和高效液相色谱条件, 建立了能有效检测克菌丹的气相色谱法和高效液相色谱法。综上所述, 气相色谱法检出限与定量限都较低, 灵敏度较高, 样品含量低也能检出;高效液相色谱法出峰时间较短, 检测效率较高, 节约时间。两种方法各具特点, 因此生产企业与质检机构在对克菌丹原药及其制剂进行质量监督与控制时可根据实际情况进行选择。
参考文献
[1]李智文.克菌丹在苹果及土壤中的残留动态及最终残留研究[D].杨凌:西北农林科技大学农药学, 2003.
【关键词】鲜汁饮；薄层色谱；地黄；蒲公英
Study on Quality Standard for Xianzhiyin Mexture
Wang MengliangZhao Jiali
【Abstract】Objective:To study the methods of identification of Xianzhiyin Mexture.Method: Using TLC to identify Rehmanniae ,Taraxaci. Results:The TLC identificationo of Rehmanniae ,Taraxaci was with good results ,high resolution and without feminine sample interferation. Conclusion: This method is rapid,simple ,and with good reproducibility .
【Key Words】 Xianzhiyin Mexture; TLC; Rehmanniae;Taraxaci
【中图分类号】R286.0【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2011）04-0110-01
鲜汁饮来源于我省名老中医之一，原安阳中医院院长，河南省中医学院特邀研究员孙一民主任医师的验方，属医院制剂。由鲜地黄等6味中药组成，均选用新鲜植物药，药鲜质纯，有效成份活性强，易吸收。具有清热解毒，养阴生津，凉血止血之功效。用于：①阴虚内热型血液病所致鼻衄、齿衄、咳血、吐血、尿血、便血、紫癜。②肿瘤放疗、化疗后所致阴虚内热者。③目赤肿痛、口舌生疮、口渴咽疼、尿赤便秘。④外感发热与内伤发热等症状。为了有效控制质量，确保用药安全有效，本试验增加了地黄、蒲公英的薄层鉴别。结果表明，该方法简便快捷，专属性强，结果满意。
1实验部分
1.1仪器、试剂与样品
KQ3200B型超声波清洗器TRANSILLUMINATOR2020D紫外透射仪
试剂均为分析纯
地黄对照药材、蒲公英对照药材（中国药品生物制品检定所，批号121180-200402、121195-200401）；样品由河南省卫辉市中医血液病医院提供
1.2薄层色谱鉴别
1.2.1地黄的TLC鉴别
供试品溶液的制备：取本品20ml微沸蒸干，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
地黄对照药材溶液的制备：取地黄对照药材1g，加甲醇20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液挥干，加甲醇5ml使溶解，作为对照药材溶液。
鲜地黄汁的制备：取地黄鲜汁10ml，微沸蒸干，加甲醇20ml使溶解，滤过即可。
阴性样品溶液的制备：按处方比例制备缺地黄的阴性样品10ml，同法制备阴性样品溶液。
照薄层色谱法［1］试验，吸取上述四种溶液各5ul。分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15︰40︰22︰10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，日光下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点，阴性样品无干扰，见图1。
1、供试品 （批号101102）；2、供试品（批号101128）
3、供试品（批号101129）4、鲜地黄汁（自备）5、阴性样品（院方提供）
6、地黄对照药材
1.2.2蒲公英的TLC鉴别
供试品溶液的制备：取本品25ml, 微沸蒸干，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解作为供试品溶液。
蒲公英对照药材溶液的制备：取蒲公英对照药材1g，加水100ml煮沸20分钟，倾取上清液，微沸蒸干，同法制成对照药材溶液。
阴性样品溶液的制备：按处方比例制备缺蒲公英的阴性样品，同法制备阴性样品溶液。
照薄层色谱法［1］试验，吸取上述三种溶液各5ul。分别点于同一：以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5︰3︰1︰1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点，阴性样品无干扰，见图2。
2讨论
2.1地黄中的代表性成分为梓醇、地黄素、甘露醇、多种糖类与氨基酸、维生素A样物质等。以地黄药材做对照，对处方中的地黄进行鉴别，效果良好。
2.2地黄的薄层色谱鉴别中，曾选用展开剂：用氯仿-甲醇-水（14︰6︰1）展开，样品色谱中与对照药材色谱相应位置上的斑点相一致，但斑点靠近前沿，故加入醋酸乙酯调节展开剂的极性，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（15︰40︰22︰10）10℃以下放置的下层溶液展开后，日光下观察即可显示清晰的黄色斑点，且Rf值适中，效果良好。
2.3蒲公英的薄层色谱鉴别中，曾选用展开剂：氯仿。显色剂：10%硫酸乙醇液，105℃加热，紫外光（365nm）下观察，效果不佳。故又改为本文的条件，效果良好。
参考文献
［1］中国药典2010年版一部附录Ⅵ B，P34～35。
摘要
啤酒的成分非常复杂，风味物质的种类相当多。除了一些挥发性成分外，许多物质是半挥发性和难于挥发的。由于啤酒本身的粘度较大，因此在运用气相色谱进行分析时，很少采用直接进样的方式。啤酒中的挥发性物质主要是一些醇、醛、脂类都能够被静态顶空法分析出来n}胆是许多对啤酒风味质量存在重要影响的物质，由于挥发性较低，需要经过蒸馏、萃取等前处理乡别。蒸馏可以将啤酒中的一些沸点在1oo℃以上的挥发性较低的物质吹出，萃取可浓缩样品。萃取溶剂最好用低沸点的溶剂，如石油醚、苯、乙醚、乙酸乙酷等。木文运用乙醚直接萃取和蒸馏一乙醚萃取两种方法，利用GC-M S对啤酒的风味物质进行了定性分析，共分离定性37种物质，关键词：气相色谱一质谱法;啤酒香味成分;萃取
一、实验目的与意义
啤酒产品的“风味”是消费者感官享受的主要内容，也是啤酒酿造者重要的研究对象，一个啤酒产品的风味定位，对产品在市场的活动有重要影响。啤酒中的风味物质就有数百种之多，对啤酒风味影响较大的通常有几十种，有些风味物质在一定含量范围内赋予啤酒特殊风味，但含量过高往往会给啤酒带来不良的风味影响。对啤酒中所含的风味物质进行分析，探究它们的形成原因，对于生产工艺数据化，有效控制啤酒质量具有重要的意义。
近年来随着分析技术和分析仪器的发展，人们越来越重视利用先进的样品处理技术与仪器分析结合，实现对复杂组分较准确的测定。啤酒风味是依靠所含的多种化学成分发挥作用的，因此仅凭某一种化学成分的定性和定量是无法对其进行正确评价的，因为任何单一的成分或 指标成分都难以有效地表征啤酒的风味特征。由于指纹图谱具有指纹特征分析、宏观推断分析等特点，故适合于分析复杂化学物质组成，可以成为啤酒的风味特征评价的有效手段。指
纹图谱能基本反映啤酒风味特征的全貌，使其质量控制指标由原有的单一成分的测定上升为对整个内在品质的检测，实现对啤酒风味物质内在质量的综合评价和全面控制，从而确保啤 酒品质的稳定。
啤酒的成分非常复杂，风味物质的种类相当多。除了一些挥发性成分外，许多物质是半挥发性和难于挥发的。由于啤酒本身难度较大，因此在进行分析时，很少直接金阳的方式。常用的提取方法有静态顶空技术（SHS）、水蒸气蒸馏、同时蒸馏萃取、溶剂萃取等。静态顶空技术是分析啤酒中的挥发物质最简便的方法，只需将啤酒样品蜜蜂在顶空瓶内，在一定的的温度下彭亨后便可近样，主要的醇、醛、脂都能够分析出来。但是许多对啤酒风味质量存在重要影响的物质，由于挥发性低，很难通过SHS平衡后进样。样品需要经过蒸馏、萃取等前处理。蒸馏可以将啤酒中的一些低沸点在100°C以上的挥发性较低的物质吹出，萃取可浓缩样品。萃取溶剂的选择要根据被萃取物质在此溶剂中的溶解度而定，同时要易于和溶质分开。
本实验选用同时蒸馏-萃取前处理方法，利用气相质谱联用仪对啤酒的风味物质进行了定性分析，获得啤酒的指纹图谱，为啤酒的质量控制提供理论依据。
二、实验部分 1.主要仪器与试剂
真空旋转蒸发仪，江苏金坛医疗仪器厂;气相色谱一质谱联用仪GC-M SQ P2010，日木岛津公司;乙醚（重蒸)、氯化钠、硫酸钠等(分析纯);高纯氮气(99．999％)；高纯空气(99．999％)； 高纯氢气(99．999％)；无水乙醇(≥99．8％，色谱纯)；氯化钠(≥99．8％，优级纯)；超纯水 ；标准品： 乙醛、乙酸乙酯、乙酸异丁酯、正丙醇、异丁醇、乙酸 异戊酯、异戊醇、己 乙酯、辛酸乙酯，色谱纯。啤酒样品:山东银麦啤酒。2.仪器工作条件
GC条件石英毛细管柱DB-5,30mX025mm，膜厚1Nm程序升温:40°C保持2mm，以10 °C加。的升温速度升至200°C，保持15min。进样口温度200°C;分流比10/1。
MS条件:E1源;电离电压:70 eV;离子源温度200°C;接口温度220°C;检测器电压:0.96 KV;扫描范围:45~350 m /z;扫描方式scan。3.啤酒风味成分的提取
乙醚直接萃取:取200 mL啤酒样品，加人30 g氯化钠，置于500 m L分液漏斗中.以50 mL/次乙醚萃取3次，合并乙醚层，得乙醚提取液，再用350 m L去离子水洗涤3次。向乙醚提取液中加人50 g无水硫酸钠进行十燥，静置过夜。转人旋转蒸发仪浓缩至10 mL以下，用乙醚定容至25 mL,制得样品溶液。取样品溶液1 uL直接进样进行GC/MS分析。
蒸馏一乙醚萃取:蒸馏200 m L啤酒，收集100 mL馏出液。取lOmL馏出液，加入lOmL乙醚进行萃取，向乙醚提取液中加人3g无水硫酸钠进行十燥。取萃取液luL直接进样进行GC/Ms分析。4.色谱条件的选择
1)色谱柱的选择：考虑到啤酒中低沸点的醛类、醇类、酯类的极性，根据相似相溶原理，选用HP-FAP，它不仅适于分离啤酒中低沸点风味物质，而且热稳定性好，高温不易氧化和流失；即便在高温操作，基线也只有很小的漂移。而且毛细管柱的柱径小，柱较长，因此柱效高，能使啤酒中低沸点风味物质在柱内进行反复分配，并得以分离。因此选用毛细管气相色谱法测定。
2)载气流量的设置：载气流量过低，会使谱峰的半峰宽增加，或出现拖尾峰；载气流量过高，又会使相邻的峰不能完全分离，甚至出现谱峰重合现象。分别考察了载气流量为0．
8、1．
3、1．
5、2．0mL／min时对组分响应值的影响，实验结果表明，流速在此范围内变化时，组分响应值没有太大变化，但是流速较慢会影响分析速度，综合考虑灵敏度和分析时间，选择载气流速为1．2mL／min时具有最佳分离效果，能准确地分离出啤酒的风味物质。3)温度条件的选择：实验表明，采用恒温分析，谱峰无法得到良好的分离，而采用程序升温的方法，可使各个组份按沸点高低依次分离。分别考察了20、30、40、50、60℃的平衡温度对应平衡时间为20、30、40、50、60min时对各组分峰面积的影响，结果表明提高温度可以缩短平衡时间，选择合适的样品平衡时间有助于提高分析的重现性。经过试验确定平衡温度为40℃，平衡时间为40min。分别考察了进样口温度和检测温度在150、200、220、240、260℃条件下对组分响应值的影响，确定进样口温度和检测温度均为200℃。
4)由于分析对象为啤酒中的微量组分，为使分析结果重复性好、准确性好、灵敏度高等，选用不分流进样。
5)通过多组试验，最终确定最佳试验条件为：①顶空条件：样品平衡时间：40rain；样品平衡温度：40℃；②色谱条件：载气：氮气(99．999％)，载气流量：1．2mI/min；进样口温度：200℃，进样方式：不分流；检测器温度：200℃；③升温程序：程序升温:40°C保持2mm以10 °C加。的升温速度升至200°C，保持15min。进样口温度200°C
三、结果与讨论 1.原理
将标准内标物和标准混合液各组份的含量以及内标物和混合液各组份的保留时间输入色谱工作站的数据应用程序，程序自动依据标准色谱图的峰面积进行校正即可得出每个组份对应的响应系数。当采集一个未知样品时，每个组份的峰面积与相应的响应系数比较，计算出每个组份的含量。2.组分的分离与定性结果
利用计算机标准数据库检索与人工推测识谱相结合的方法，共鉴定出37种成分的化学结构，采用而积归一化法测定了各成分的相对含量，啤酒样品溶液的总离子流色谱图见图1。啤酒样品的主要成分见表1 从上述分析中可以看到，脂类和醇类是构成啤酒香气的重要物质，甲酸异戊酷、甲酸异丙酷、苯乙醇、异戊醇,2-乙氧基丙醇等主要成分的含量约占总量的70%以上，有机酸类物质以辛酸含量最多。另外，还检测出少量苯并二氢吠喃、王草素及烯类、烷类、醚类和胺类等成分。
四、两种前处理方法的比较
样品经两种方式前处理后，再采用GC/MS进行分离分析，所得结果具有一定的差异。利用乙醚萃取方法定性得到25种化合物，8种醇类化合物、11种酷类化合物，1种酸类化合物，2种烯类化合物和1种烷烃类化合物。利用蒸馏一乙醚萃取法定性得到26种化合物，9种醇类化合物，10种酷类化合物，4种酸类化
合物，1种烯类化合物和1种烷烃类化合物，并且两种方法 都分离出香豆素类化合物一王草素。
五、减 少 误 差 的 方 法
在气相色谱法的定量分析时，为减少误差，要注意以下几点： 1.取样的代表性：采样时应取混匀后的样品，以免定量分析时造成误差。
2.进样量的大小：进样量的大小直接影响着分离与定性，也影响出峰保留值的变化，造成部分峰保留时间的错位，从而影响定量结果。
3.进样技术的影响：定量分析的精密度与准确度依赖于进样的重复性和操作技术。对于不同规格毛细管柱、不同的进样方法(柱上进样、分流／不分流进样)、插针的快慢、位置、深度和操作人员的熟练程度以及刻度读数的准确性，都直接影响着分析的准确性。4.标样的定期校正：为确保检测数据的可靠性，应定期进行仪器间的相互校正及标样的校验等。
5.定量响应因子的准确性：在定量分析时，往往引入相对响应因子进行计算，而定量响应因子的准确与否，直接影响到分析结果的可靠程度。若需求得有效的F值，原则上以组份含量相当为依据。6.硅胶垫的使用周期：硅胶垫的使用频率一般以进样次数作比较，当硅胶垫使用一定的次数后，应注意及时更换，同时擦净内衬管，否则易造成漏气使基线呈台阶，峰型出现异常等，影响分 析 结 果的可靠性。
六、总结
比较两种前处理方法的分析结果可以看出，啤酒经蒸馏处理后，虽然检出物质的种类差别不大，但构成香味物质的成分会发生变化。与直接乙醚萃取法相比，脂类物质有所减少，酸类和醇类物质有所增加，说明加热蒸馏对啤酒风味物质的检出有一定的影响，至于啤酒风味将会发生怎改变，尚待进一步研究。
利用气相色谱仪对啤酒中的风味物质成分进行分离、分析，其中含有脂类、醇类、有机酸类等化合物成分其中脂类可提高和改善啤酒香味；例如苯乙醇具有清甜玫瑰的气息，香气柔和，异戊醇在浓度较 小时具有酒香和果香 ；而有机酸则能改善啤酒粗劣而使其具有淡甜柔和的气味。它们共同构成了啤酒的挥发性香味成分的香味特点。研究啤酒的风味物质含量和消费者的口味和嗜好，利用有效的检验手段，把香味物质从模糊的感官品评提升为定量分析。
生产者研究自己生产啤酒的风味物质含量与所使用的麦芽品种、水质特点、酒花特点、酵母特点、发酵特点和酿造设备的关系，可以促使自己的产品风格类型更突出更能在市场竞争中使企业立于不败之地。参 考 文 献 吉林化学工业公司研究院气相色谱实用手册，化学工业出版社，1980．
2气相色谱检测方法，化学工业出版社，2000．
3王莉娜，周伟．顶空进样毛细管气相色谱法测定啤酒的香味组分 食品与发酵工业，2001，27(1)：50-53．
4王云川，李红，刘伟成，等．采用气相色谱—质谱分析啤酒中的风味物质 食品与发酵工业，2004，30(11)：90-93
读书的好处
1、行万里路，读万卷书。
2、书山有路勤为径，学海无涯苦作舟。
3、读书破万卷，下笔如有神。
4、我所学到的任何有价值的知识都是由自学中得来的。——达尔文
5、少壮不努力，老大徒悲伤。
6、黑发不知勤学早，白首方悔读书迟。——颜真卿
7、宝剑锋从磨砺出，梅花香自苦寒来。
8、读书要三到：心到、眼到、口到
9、玉不琢、不成器，人不学、不知义。
10、一日无书，百事荒废。——陈寿
11、书是人类进步的阶梯。
12、一日不读口生，一日不写手生。
13、我扑在书上，就像饥饿的人扑在面包上。——高尔基
14、书到用时方恨少、事非经过不知难。——陆游
15、读一本好书，就如同和一个高尚的人在交谈——歌德
16、读一切好书，就是和许多高尚的人谈话。——笛卡儿
17、学习永远不晚。——高尔基
18、少而好学，如日出之阳；壮而好学，如日中之光；志而好学，如炳烛之光。——刘向
19、学而不思则惘，思而不学则殆。——孔子
