白细胞五分类技术（精选7篇）
这种方法最初只能进行细胞计数，美国科学家库尔特采用电子阻率与电子技术相结合，设计出了世界第一台电阻抗三分群血液细胞分析仪，第一次将白细胞分为了大细胞群、中间细胞群、小细胞群，并应用于临床，开创了血细胞分析的新纪元。三分类的方法中大细胞相当于中性粒细胞，中间细胞相当月嗜酸、嗜碱及单核细胞，小细胞相当于淋巴细胞。这种技术只起到了筛选的作用。随着科学技术的迅速发展，三分群血细胞分析技术在临床实践中的局限日益明显，因此，对血液白细胞进行五分类的仪器开始出现。1982年，Technicon公司生产的H6000型血液细胞分析仪器是第一部具有白细胞五分类能力的仪器。同时代的日本日立公司推出的图像分析法的白细胞分析仪HITACHI8200型，仅仅可以完成白细胞血片分类并没有其他血细胞计数分析能力。1990年前后，欧洲和题本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器。
目前已有的白细胞分类技术仪器按原理主要有三种类型：第一类是物理法，第二类是物理——化学法，第三类是图像分析法。1.物理法 1.1 VCS法
Beckman-Coulter公司生产的血细胞分析仪将电学与光学结合，该方法称为体积、电导、激光散射血细胞分析法（VCS）。V是利用电阻抗法测定细胞体积；C是利用高频电磁波，根据各种细胞核浆的电导性不同测理细胞内部结构、核浆比例；S是利用光散射原理测量细胞内颗粒的大小密度等结构特性。计算机根据3种技术得到的资料综合分析，将中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞一一分开，以白细胞分类散点图显示这些细胞，并提示异常淋巴细胞、幼稚细胞、有核细胞、抗溶血红细胞等信息。1.2 多角度偏振光激光散射技术
美国ABBOTT推出的五分类血细胞分析仪，采用了多角度偏振光散射技术（MAPSS）。MAPSS原理：血标本在特殊鞘液的作用下，红细胞内血红蛋白游离出细胞外，红细胞变得透明，而白细胞的内部结构和膜结构基本保持自然状态。当细胞悬液的鞘流经过检测器时，仪器从4个不同的角度得到每个细胞的光信号，这4个角度分别为0°前向角光散射测定细胞的大小；7°～10°狭角光散射测定细胞内部结构及其复杂特征；90°垂直光散射测定细胞内部颗粒和胞浆成分；90°消偏振光散射利用嗜酸性细胞内颗粒特有的消偏振特性，将嗜酸性细胞直接分离。计算机综合4个角度的光信号，将白细胞分类，并提供提示信息和相关图谱。2.物理——化学法
2.1 流式细胞法、激光散射和细胞化学染色技术相结合技术
日本Sysmex公司全系列五分类血液细胞分析仪均采用此技术，这也是现在国内应用最广泛的仪器。这种方法通过连续流动的系统，将待测细胞经处理或染色后压入流动室，不含细胞的缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样鞘液就能被包绕着样品高速流动组成一个圆形的流束，待测细胞单行排列依次通过检测区域，通过光电效应将电信号转换为可被计算机识别的数字信号，经处理，可分析出血细胞中白细胞总数，各分类细胞的百分率和绝对值，细胞体积大小和内部信息，并且显示在屏幕上。2.2 激光散射和过氧化物酶染色相结合技术
西门子公司的全自动血液分析仪采用了这种技术。血标本进入仪器，在一系列的预处理液和白细胞过氧化物酶染色后流经检测器。每个细胞在激光束的照射下，各类细胞因过氧化物酶含量不同，具有不同的光吸收信号；根据每个细胞的前向角大小可以得到细胞的体积数据，同时仪器有单独的嗜碱性细胞直接计数通道，计算机根据这些信息得出细胞分类结果。2.3 双鞘流技术和细胞化学染色法
ABX公司生产的血细胞分析仪采用了双鞘流（DHSS）分析法。标本首先在第一鞘流液中经过电阻抗测定分析，得到细胞体积测定结果．然后通过第二鞘流引导再行光吸收率分析．对细胞内容物进行测定，最终将细胞测定信息在散射图相应的位置表现出来。2.4 迈瑞激光散射和细胞化学染色技术
深圳迈瑞（Mindray）公司是国内最早生产五分类血细胞仪的厂家，采用半导体激光散射技术和细胞化学染色技术，配合改良的流式分析装置对白细胞进行精确的五分类分析。激光散射分析技术是五分类法常用的分析技术。由于细胞的物理特性，当激光照射到细胞时，会有不同角度的散射光出现。低角度(1°～5°)散射光可反映细胞体积大小信息；中高角度（10°～20°）。散射光可反映细胞颗粒的复杂性信息。综合这两个角度散射光的信息．结合其他特殊技术来完成自细胞的五分类测定。3.图像分析法
近年来，瑞典CellaVision AB公司开发出一种新型自动影像血细胞分析系统。国内南昌百特公司也已经研制出了新一代同类数字化血细胞形态分析仪。其工作原理模仿人“脑——眼”系统的智能识别过程，运用计算机图像处理和模式识别，将从显微镜与摄像机得到的数字化细胞图像进行自动处理分析和分类。这种仪器的主要特点是运用图像处理分析技术提取细胞形态，色彩，纹理等方面的多种特征信息，并用模式识别技术进行细胞分类。
1 血细胞五分类技术的原理
1.1 流式细胞术
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对高速流动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的方法。
首先,待测细胞经处理或染色后被压入流动室,与此同时,不含细胞的缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样鞘液就能被包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在包绕下单行排列,依次通过检测区域,在激光束的照射下产生散射光和激发荧光,这两个光源信号分别反映了细胞体积的大小和内部的信息,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号,经计算机处理,可将分析结果显示在屏幕上。
为了保证细胞单个排列地逐一通过检测区域,鞘流技术在流式细胞术中被广泛应用。根据层流理论,由于两种液体的流速和压力不同,在一定条件下样品溶液与包裹它的鞘液在流动中可以保持相互分离并且同轴。同时鞘液流可以加速样品溶液中颗粒的流动并迫使他们的流动轨迹保持在液流的中轴线上,使细胞单排列地逐一通过检测区域,这便是所谓的液流聚焦原理。
1.2 阻抗法
根据库尔特原理,将不良导体血液按一定比例稀释于等渗的电解液中,在小孔电极的两侧加一恒流源,在负压作用下,使稀释的血细胞通过小孔。当细胞通过截面时会由于电阻增大产生相应的脉冲,其脉冲的幅度与细胞的体积成正比,脉冲的频度与细胞的数量成正比。这便是著名的库尔特原理或称变阻脉冲原理。利用库尔特原理可以有效地区分淋巴及单核细胞。
1.3 激光散射法/多角度偏振光散射技术
根据光散射理论,当激光照射到流动室内流过的每一个细胞时,由于细胞的物理特性,部分光线从细胞上经不同的角度散射。其中,前向小角度散射光的光强可以反应细胞体积;大角度散射光的光强可以反应细胞核/浆复杂度和细胞颗粒的信息;而侧向散射光的光强可以反应细胞膜、核膜、细胞质的变化。因此,可以依据细胞表明光散射的特点对细胞进行分类。用激光光源产生的单色光束直接进入计数池的敏感区,在不同角度(10°~70°)对每个细胞进行扫描分析,测定其散射光强度,从而提供细胞结构、形态的光散射信息。由于粗颗粒细胞的散射强度比细颗粒细胞更强,故光散射对细胞颗粒的构型和颗粒质量具有很好的区别能力。
多角度偏振散射技术用偏振激光束射照单个排列细胞,并进一步分辨细胞。该技术采用了10°窄角和偏振加消偏振检测法,分辨能力有所提高。它首先测试中性/单核细胞,用0°~90°的散射数据,再测得90°D的衍射差,将嗜酸性和中性细胞分开,而嗜碱性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞则按其大小和内部结构不同的复杂性,所产生的散射光也各异,用可调较的门限加以区分。其采用特定程序自动储存分析数据,并经计算机软件处理,在屏幕上显示6个散点图和2个直方图。
1.4 各种细胞化学特性应用技术
利用五种白细胞自身不同的化学性质,应用相应的化学试剂加以区分。
由于嗜酸性(或嗜碱性)粒细胞均有较强的碱性(或酸性),因此在特殊的溶血剂作用下,经过特定时间及温度的孵育,可使除嗜酸性(嗜碱性)粒细胞之外的所有细胞溶解或萎缩,经处理之后的细胞根据阻抗脉冲计数法,可得相应嗜酸性(嗜碱性)细胞有效数值。
利用五种白细胞过氧化物酶活性的差异对白细胞进行染色,测定其酶反应强度,对白细胞进行分析。血液中五种白细胞的过氧化物酶活性排列顺序为:嗜酸性粒细胞>中性粒细胞>单核细胞。淋巴细胞和嗜碱性粒细胞均无过氧化物酶。将待测血液加入清洗剂和甲醛的等渗液体内经孵育,再加入过氧化氢(H2O2)和四氯-萘酚,细胞内过氧化酶分解产生(O)-,使四氯-萘酚显色并沉淀,并定位于酶反应部位。根据酶反应强度的不同,利用光电检测技术测定相应吸光度值的方法,用以区分嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞。
1.5 电导/射频法
与早期的三分类血液分析仪利用库尔特原理不同的是,它在内外电极上加了一个RF射频发生器。RF是射频电流的简称,它是一种高频交流变化电磁波。按照工作频率的不同,RF可以分为低频(LF)、高频(HF)、超高频(UHF)和微波等不同种类,不同频段的RF工作原理不同,LF和HF频段一般采用电磁耦合原理,而UHF及微波频段的RF一般采用电磁反射原理。在血液分析仪中多采用高频电磁波,其原理是交变电流通过导体时,会在导体周围形成交变电磁场,形成电磁波。因导体的密度及导电性质等差异,其周围所形成的电磁场也不相同。因此当射频电流穿透细胞膜透入胞内时,由于核的大小、化学组分、颗粒多少以及浆核比例的不同,使RF信号发生不同的变化。借此可以将体积大小相同但内部结构不同的细胞区分开来,如淋巴细胞与嗜碱性细胞。
1.6 荧光法
利用不同细胞的细胞膜、胞内因子以及胞内DNA、RNA、胞内离子钙等不同染色特性,选用具有特异性抗原或抗体的荧光染料载体,使待分离的细胞分别标记相应的荧光物质,经过特定波长的激光照射激发出不同波长的荧光,利用各种PMT管检测荧光信号的个数,可以完成待检细胞的计数。如进一步分析计数淋巴细胞或网织红细胞等。
2 血细胞五分类技术的应用及展望
2.1 五分类血液分析仪的现状
全自动五分类血细胞分析仪是多学科相互交叉、渗透、综合的产物,涉及技术领域包括电子技术、计算机技术、传感器技术、信号处理技术、生物化学、临床医学、精密机械、光学、自动控制、流体力学等领域。绝大多数“五分类”分析仪采用了流式细胞分析方法,而联合检测法则代表了五分类血细胞分析仪的最新发展趋势。
BECKMAN COULTER GENS全自动五分类血球分析仪[4]采用其独特的VCS技术,其中V(体积法)用于分析细胞体积;C(电导法)用于分析细胞核型;S(散射法)则用于分析细胞的颗粒特性。测试时,患者标本经过分血片等样本分配系统进入搅拌杯中,再加入溶血剂搅拌,溶血,完全破坏红细胞,剩下的白细胞在样本压力作用下进入流式通道。运用VCS联合检测方法,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞,进行逐个的、同时的、三重的检测以及三维分析,以确定其亚群性质。
雅培公司新推出的CELL-DYN Ruby全自动血液分析仪运用合并流式细胞术及多角度偏振散射分离技术检测白细胞。其采用多角度偏振散射技术对白细胞进行区分和按序分离,通过四个角度的光学检测进行白细胞分析。其中,0°用于区分细胞体积大小;10°用于区分细胞的复杂性;90°用于区分细胞核的分叶性;90°D用于区分细胞的颗粒性。通过90°偏振和90°去偏振区分嗜酸性粒细胞和嗜中性粒细胞,同时通过多个散点图分析来鉴别和分类未成熟细胞和干扰物质。
拜尔公司的ADV IA120利用化学特性中过氧化物酶活性与激光散射技术结合原理进行白细胞五分类测定。该仪器有4个测量通道:血红蛋白测量通道、红细胞/血小板测量通道、嗜碱性粒细胞测量通道、过氧化物酶测量(白细胞分类)通道。其利用五种白细胞过氧化物酶活性的差异对白细胞进行染色,测定其酶反应强度,对白细胞进行分析。在测试过程中,每个细胞产生2个信号:组化染色结果与光散射结果。以X轴代表吸光率(组化染色酶反应强度),Y轴代表光散射(细胞大小),一起定位于细胞图上(cytogram)。计算机系统对存储资料进行分析处理,并结合嗜碱性或分叶细胞通道结果计算出白细胞总数及分类。值得一提的是,该设备对RBC及PLT的测定也摒弃了传统的阻抗法,而是采用激光法对其进行测定的。
希森美康(SYSMEX)公司五分类血液分析仪的检测原理按生产时间的先后可分为三大类:多通道阻抗与射频联合检测技术,代表机型有SE-9000;激光流式细胞检测结合细胞组化染色技术,代表机型有SF-3000;激光流式细胞检测结合核酸荧光染色技术,代表机型有SF-2100。
SYSMEX XE-2100[5,6,8]全自动血细胞分析仪是综合了前向散光、侧向散光和侧向荧光三种光学检查技术,结合电阻抗技术来进行白细胞分类的。直流电阻抗法(DC)用于测量细胞体积大小。激光散射产生的前向散射光、侧向散射光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况(细胞核以及颗粒情况),侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。综合各个测量方法,得到白细胞五分类的图形和数据。SYSMEX XT-2000i全自动血液分析仪运用核酸荧光染色技术,配合激光流式分析系统,保证了精确的WBC五项分类结果。
HORIBA ABX公司生产的Pentra系列五分类血液分析仪采用独有的双鞘流通道,结合阻抗法、化学染色技术及吸光度法对白细胞进行精确的分析。流式通道内有两个检测装置,60μm的鞘流微孔用于阻抗法体积检测,42μm的光窗用于吸光度测定分析细胞内容物。实现对大量细胞进行的顺序、快速、准确地分析与测定。
以上所介绍的几种血液分析仪是目前我国医疗机构常见的具有代表性的几种测定白细胞五分类的机型。另外,日本光电公司生产的MEK-8222K在中国的拥有量也较大,因其工作原理与雅培公司的CELL-DYN Ruby相似,也是采用半导体激光法和多角度激光散射技术,只是试剂的配方有所区别,因此不再赘述。
国内迈瑞公司生产的BC-5500的白细胞分类[7]结合了液流聚焦技术、激光散射技术和化学染色技术。其光源采用半导体激光系统,通过多角度的激光散射,提供细胞的大小、细胞核、细胞颗粒大小及复杂性的信息,并结合试剂对嗜酸性细胞和嗜碱性细胞的特异处理,将嗜酸性细胞和嗜碱性细胞区分开来,同时筛选出各类异常细胞,实现精确的五分类检测结果。
由于不同仪器的检测原理及相关试剂的差异,各类设备均有其相应的特点。总体来讲,光学检测法结合特种化学试剂如染色物质等,由于其针对某一被检物质的特异性,因此其测定及分析结果较电阻法精确度要高,但相应的试剂成本加大,同时对操作人员及环境的要求也会有所提高。
2.2 五分类血液分析仪的展望
从五分类血液分析仪的发展进程可以看出,临床对血细胞的分析已不满足于简单的对WBC、RBC、PLT的计数,而是更倾向对于其各类细胞及其亚群的进一步分析,包括从细胞内部的DNA,RNA及免疫等方面进行分析。因此,血细胞分析仪已从对细胞的简单的物理性能的研究转向对细胞内部化学性质及免疫性质的研究方向发展,即从细胞学向分子生物学,从分子生物学向免疫学方向发展。同时,随着工业科技的进步,仪器的精度、速度、集成化、一体化的程度会更高,相信在不久的将来会有更先进的血液分析系统面世。
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摘要：白细胞分类计数方法（DLC）包括手工法白细胞分类计数、血细胞仪三分群法白细胞分类计数、血细胞仪五分类法白细胞分类计数的操作方法及临床意义进行分析。白细胞分类计数（DLC）主要用于血液造血系疾病、感染性疾病、过敏性和嗜酸细胞增多性疾病诊断、辅助诊断和筛查，非特异性防御功能和感染性疾病预后评价。
关键词：白细胞分类计数；临床意义
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602（2015）06-0116-01
白细胞分类计数是把血液制成薄血涂片，按照形态特征分类计数白细胞，得出相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义[1]。
1标本来源
均为我院门诊患者及健康体检者50例，其男27例，女23例，年龄最小4岁，最大63岁。
2 计数方法
2.1手工法白细胞分类计数
2.1.1标本采集 可使用毛细血管采血法所取的样本或静脉血EDTA·K2抗凝样本。
2.1.2试剂 瑞氏染液。
2.1.3操作 将血液滴加在洁净的玻片上，用推片将其推成薄血涂片。自然干燥后用蜡笔在血涂片两头划线以防染液溢出，然后将血涂片平放在染色架上。加瑞氏染液于血涂片上，使之覆盖整个血涂片，固定0.5～1min。滴加等量的缓冲液与染液混匀，染色5～10min。用清水冲去染液，待自然干燥后或用吸水纸吸干即可镜检。
2.1.4参考值 中性粒细胞，杆状核0.01～0.05（1%～5%）分叶核0.50～0.70（50%～70%）。嗜酸性粒细胞0.005～0.05（0.5%～5%）。嗜碱性粒细胞0～0.01（0%～1%）。淋巴细胞0.20～0.40（20%～40%）。单核细胞0.03～0.08（3%～8%）。
2.2血细胞仪三分群法白细胞分类计数
2.2.1标本采集 静脉血EDTA·K2抗凝样本1～2ml。
2.2.2试剂操作 根据仪器不同使用其配套试剂。按仪器操作说明书进行操作。
2.2.3参考值 仪器的报告方式为小细胞、中间细胞及大细胞。小-细胞代表淋巴细胞，中间细胞包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胸及在病理情况下出现的原始及幼稚细胞，大细胞代表中性分叶核以及杆状核和晚幼粒细胞[2]。小细胞群（1.0～3.3）×109/L。中间细胞群（0.2～0.，7）×109/L。大细胞群 （1.8～6.4）×109/L。
2.3血细胞仪五分类法白细胞分类计数
2.3.1标本采集 静脉血EDTA·K2抗凝样本1～2ml。
2.3.2试剂方法 根据仪器不同使用其配套试剂。操作按仪器操作说明书进行操作。
2.3.3参考值 五分类法白细胞分类计数的报告方式同手工法，有淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞，故参考范围如手工法白细胞分类。虽然仪器法白细胞五分类采用了多种技术来保证结果的准确性，但由于仪器是依靠细胞的各种物理化学特性来进行细胞分类，与手工方法利用细胞的形态学特征进行分类不同，故在各种病理情况下准确性不如手工方法。手工方法仍然是白细胞分类计数的金标准。
3 白细胞分类计数的意义
3.1中性粒细胞 具有吞噬和激活补体功能，能吞噬细菌和组织细胞碎片，激活的补体成分（C3a、C5a、C567）具有粒细胞趋化作用。
3.1.1增多 ①反应性增多 见于：a.感染，细菌、病毒、真菌、螺旋体、立克次体、寄生虫，特别是化脓性细菌全身性或严重局部感染如败血症、肺炎、脑膜炎、阑尾炎、急性肾盂炎或肾盂肾炎、丹毒、蜂窝组织炎等。b.炎症，化学性如腐蚀性或刺激性化学品损伤、急性胰腺炎、化学性腹膜炎；免疫性如风湿热、类风湿性关节炎、结节性动脉周围炎、脉管炎等。c.急性中毒，化学品或药物中毒，自身代谢性中毒如尿毒症、酮症酸中毒或乳酸性酸中毒。d.急性失血，尤以内脏出血如肝、脾、宫外孕破裂出血；1～2小时开始升高，2～5小时达高峰。e.组织损伤或坏死，如心、肺、肾、脑等脏器梗死，肌肉挫伤、大手术后。f.排异反应。g.恶性肿瘤，尤其合并感染、坏死或骨髓转移时。②肿瘤性增多 见于骨髓增生性疾病如白血病特别是慢性粒细胞白血病、骨髓纤维化、原发性血小板增多症。
3.1.2减少 ①感染 某些病毒或杆菌感染如流感、伤寒、副伤寒、布鲁菌病，机体反应性降低时的严重感染。②造血功能障碍 缺乏造血组织如再生障碍性贫血、缺乏造血原料如巨幼细胞性贫血。③骨髓病 非白血性白血病、恶性组织细胞病、肿瘤骨转移、苯中毒、辐射损伤。④破坏过多 自身抗体如免疫性粒细胞减少症、脾功能亢进症等。⑤药物 多种抗肿瘤药物、氯霉素、头孢菌素、磺胺类、奎诺酮类、万古霉素、磺脲类、氨基比林、非那西汀、保太松、硫氧嘧啶和甲巯咪唑类、氯丙嗪、奎宁等药物使用。⑥特發性粒细胞减少症、Felty综合征。
3.2嗜酸性粒细胞 与过敏反应密切相关，受嗜酸细胞趋化因子调节，吞噬免疫复合物和异体蛋白。
3.2.1增多 ①变态反应性疾病，如支气管哮喘、血管神经性水肿、血清病、荨麻疹、药物过敏反应。②寄生虫病，尤其是肠道外感染如华支睾吸虫、血吸虫、肺吸虫、丝虫、包囊虫病。③某些皮肤病，如湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、银屑病等。④肿瘤性疾病，如肿瘤转移坏死时、肺癌、恶性淋巴瘤、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症[3]。⑤内分泌疾病，如垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减退症。⑥酸细胞浸润性疾病，如嗜酸细胞增多综合征、伴有肺浸润的嗜酸细胞增多症如L0f. fler综合征、嗜酸细胞性肺炎、热带嗜酸细胞增多症以及嗜酸细胞性心内膜炎、嗜酸细胞性肉芽肿等。⑦某些感染性疾病，如猩红热、传染病恢复期。⑧某些结缔组织病，如皮肌炎、结节性动脉周围炎。
3.2.2减少 见于急性严重感染如伤寒、肺炎、败血症，各种急性应激如创伤、大手术后，皮质醇增多症或皮质激素治疗，巨幼细胞性贫血等。
3.3嗜碱性粒细胞 表面有IgE的Fc受体，与IgE结合即被致敏，再受相应抗原攻击时发生颗粒释放反应，颗粒含有组胺、慢反应物、肝素、嗜酸细胞趋化因子、血小板活化因子。
3.3.1增多 见于骨髓增殖性疾病如慢性粒细胞白血病、骨髓纤维化，也见于慢性溶血、脾切除术后、淋巴瘤、骨髓转移癌、铅中毒、过敏反应。
3.3.2减少 未见有临床意义。
3.4淋巴细胞 免疫细胞，合成和释放淋巴因子，参与细胞免疫和体液免疫。
3.4.1增多 ①生理性增多，6岁前儿童期伴随免疫功能成熟过程。②感染，病毒感染如麻疹、风疹、水痘、流行性腮腺炎、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热等；细菌感染如百日咳、结核病、布鲁菌病；螺旋体感染如梅毒。病毒感染可见胞体大、核不规则、胞浆丰富或泡沫样的异型淋巴细胞。异型淋巴细胞增多有时也见于药物过敏、血液透析或体外循环。③急性传染病恢复期。④自身免疫性疾病、器官移植排异反应前。⑤淋巴细胞白血病、淋巴瘤。
3.4.2减少 主要见于皮质醇或烷化剂治疗，辐射损伤、免疫缺陷综合征、先天性免疫球蛋白缺乏症。
3.5单核细胞 吞噬细胞，具有吞噬细菌、清除坏死细胞和异物、向T细胞传递免疫信息功能。
3.5.1增多 ①病毒、立克次体感染，如麻疹、水痘、风疹、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、斑疹伤寒。②慢性细菌、螺旋体或寄生虫感染，如结核病、麻风病、亚急性细菌性心内膜炎（SBE）、梅毒、疟疾、黑热病等。③急性传染病或急性感染恢复期。④恶性淋巴瘤、恶性组织细胞病、单核细胞白血病。
3.5.2减少 未见有临床意义。
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吕冰峰
博士生资格考试综述（2005年10月24日）
细胞死亡的分类
吕冰峰
北京大学基础医学院免疫学系分子免疫实验室
北京大学人类疾病基因研究中心
摘要：细胞死亡是多细胞生物生命过程中重要的生理或病理现象。细胞死亡有很多种，基于不同的分类标准，其分类结果也不一样。细胞死亡有程序性和非程序性之分，后者即坏死。程序性细胞死亡按其发生机制不同可以分为凋亡、自吞噬性程序性细胞死亡、Paraptosis、细胞有丝分裂灾难、胀亡等。也有很多学者按照死亡时细胞的形态特征进行分类：按照细胞核形态可以分为凋亡、凋亡样程序性细胞死亡、坏死样程序性细胞死亡和坏死；按照Clarke形态学分类，程序性细胞死亡分为I、II、III类。形态学分类与机制分类有很大的重叠，我们总结了它们的对应关系。
关键词：程序性细胞死亡，凋亡，自吞噬，Paraptosis，细胞有丝分裂灾难，胀亡，坏死
一、前言
多细胞生物的发育及生存依赖于其细胞分裂增殖和死亡之间的平衡，一旦这种平衡被打破，就会发生胚胎发育异常、退行性疾病以及癌症等。所以在进化过程中，多细胞生物逐渐拥有了复杂而精密的调节机制维持这种平衡。
细胞的死亡形式多种多样，在过去的150年其分类主要基于形态学[1]。而在最近的30年里，由于死亡分子机制方面的研究取得长足进步，使得死亡的分类更加科学化。但是，由于认识的局限性，细胞死亡分类的现状是形态和机制并存，甚至给人一种混乱的感觉，本文将对现有的细胞死亡分类加以综述，并尽量将形态学分类与机制分类联系起来。
二、非程序性细胞死亡
程序性细胞死亡的共同点在于它们是细胞主动的死亡过程，能够被细胞信号转导的抑制剂阻断，而非程序性细胞死亡则是细胞被动的死亡过程，不能被细胞信号转导的抑制剂阻断[2]。
非程序性细胞死亡即坏死，是指细胞在受到环境中的物理或化学刺激时所发生的细胞被动死亡[3]。其主要形态学特点是胞膜的破坏，细胞及细胞器水肿（胞2018-10-7
8（1）综述：细胞死亡的分类
吕冰峰
浆泡化），但染色质不发生凝集。细胞死亡后，细胞内容物及前炎症因子释放，趋化炎症细胞浸润引起炎症，以去除有害因素及坏死细胞并进行组织重建。哈佛大学医学院的袁均英教授和她的研究小组通过高通量的筛选，找到了一种化学小分子Necrostatin-1，能够抑制Fas/TNFR引起的坏死。该分子能专一性地阻断细胞坏死，但对凋亡没有抑制作用，这种死亡方式被他们命名为Necroptosis[4]。他们的研究还指出，坏死也能由细胞信号通路介导。所以说，坏死不都是非程序性的，很多信号通路介导坏死的发生，其原因可能是由于认识的局限性，很多和坏死形态相似的死亡被误认为是坏死，因此应该把传统意义的坏死分为两类，即坏死和坏死样程序性细胞死亡[5]。
三、程序性细胞死亡
程序性细胞死亡的分类方式大致有两种，即基于死亡机制的分类和基于形态学的分类。基于机制可以将程序性细胞死亡分为两大类：Caspase依赖的和Caspase非依赖的。前者即典型的凋亡，后者包括自吞噬性程序性细胞死亡、Paraptosis、细胞有丝分裂灾难、胀亡等。基于形态学的分类又有两种：一种将程序性细胞死亡分为凋亡、凋亡样程序性细胞死亡和坏死样程序性细胞死亡；另一种则分为I类、II类和III类程序性细胞死亡。
（一）基于机制的程序性细胞死亡分类
1.凋亡
1972年Kerr从形态学的角度描述了细胞的生理死亡，并将其命名为凋亡[6]。凋亡的形态学特征为染色质凝集、边缘化，细胞皱缩，细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸外翻，细胞出泡形成凋亡小体。细胞凋亡受到一系列相关基因的严格调控。根据凋亡信号的来源可以将细胞凋亡信号转导通路分成两条：外源性通路（死亡受
[7]体通路）和内源性通路（线粒体通路）。两条信号通路汇集于下游的效应Caspase。效应Caspase在细胞凋亡的执行阶段能够直接引起重要蛋白质的降解和核酸酶的激活并最终导致细胞凋亡。也有一些凋亡不依赖于Caspase，而是通过AIF等分子发挥效应，其形态学变化属于凋亡样程序性细胞死亡。2.自吞噬性程序性细胞死亡
1966年Duve和Wattiaux在发现溶酶体的同时发现了细胞的自吞噬现象[8]，1977年Mortimore和Schworer发现肝细胞在处于饥饿状态时，自吞噬对其维持自身的稳态发挥着至关重要的作用[9]。自吞噬细胞形态学上最主要的特征是细胞内出现大量泡状结构，即双层膜自吞噬泡，吞噬泡内为胞质及细胞器。调控自吞噬的细胞转导信号有很多，其中相对比较清楚的是PI3K和mTOR。PI3K对于早期吞噬泡的形成至关重要，而mTOR则对吞噬泡的形成及成熟起抑制作用[10]。另2018-10-7
8（2）综述：细胞死亡的分类
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外已知有十数种ATG分子参与了吞噬泡的形成。当细胞处于氨基酸饥饿、营养缺乏或生长因子去除时，细胞的mTOR就会受到抑制，从而发生自吞噬。自吞噬是细胞在处于恶劣环境时的一种生存机制，但持续的自吞噬会导致程序性细胞死亡[5]。3.Paraptosis 2000年Sperandio等在293T细胞系中超表达胰岛素样生长因子1受体（IGFIR）时发现一种与经典凋亡不同的死亡表型，并定义为Paraptosis[11]。Paraptosis的形态学特征是细胞浆空泡化，线粒体和内质网肿胀，但没有核固缩现象。现在Paraptosis的文献报道比较少，其机制有待于进一步深入研究。高剂量的IGF或胰岛素等营养因子可以通过IGFIR活化MAPK/ERK以及JNK通路引起Paraptosis的发生，并且可以被AIP1/Alix特异性地抑制[12]。我们实验室的王莺博士发现TNF受体超家族成员TAJ/TROY也可以诱导Paraptosis，并且可以被PDCD5加强[13]。4.细胞有丝分裂灾难
1989年，Lisa Molz等发现在酵母的一种对热敏感的突变株中，细胞分裂时染色体分离发生异常[14]。相应的一些学者便把这种在DNA发生损害时，细胞无法进行完全的分裂从而导致四倍体或多倍体的现象称为细胞有丝分裂灾难[15]。对于细胞有死分裂灾难的形态学特点描述并不是很完全，但主要是巨细胞的形成，内有多个小核，染色质凝聚[16]。有丝分裂灾难和凋亡的染色体固缩是否一样，现在看法并不一致。DNA发生损害时，如果细胞不能有效地阻断其细胞周期的进行，会导致染色体的异常分离，这些非正常分裂的细胞在下一轮有丝分裂中会继续导致细胞多倍体的形成从而成为癌变的基础。而细胞有丝分裂灾难作为一种死亡机制可以使这种非正常分裂的细胞死亡。细胞有丝分裂灾难由多种分子调控，如CDK1，P53及Survivin等，其死亡信号传递有很大一部分与凋亡相重叠[17]。5.胀亡
1910年，von Reckling-hausen在骨软化病中发现由于缺血而肿胀坏死的骨细胞，他把这种肿胀坏死叫做Oncosis。1995年Majno和Joris为与凋亡相区别，重新引入了Oncosis的概念[18]，把具有明显肿胀特点的细胞死亡命名为Oncosis，中文一般翻译为胀亡。胀亡的形态学特征是细胞肿胀，体积增大，胞浆空泡化，肿胀波及细胞核、内质网、线粒体等胞内结构，胞膜起泡，细胞膜完整性破坏[19]。胀亡细胞周围有明显炎症反应。对于胀亡发生的机制现有的文献阐述较少，有研究者认为胀亡只是坏死前的一个被动性死亡阶段[18]。但是近年来的研究更倾向于胀亡是一个程序性的死亡方式，如抗Porimin的单抗可以引起Jurkat细胞的胀亡；解偶联蛋白高表达的组织或细胞易发生胀亡，其原因是这些细胞缺乏ATP，故其膜上的离子泵功能丧失从而导致胀亡，而抑制解偶联蛋白可以抵抗胀亡却不能抵抗凋亡，提示胀亡可能有与凋亡不同的死亡机制[20]。
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（二）基于形态的程序性细胞死亡分类
1.基于细胞核改变的分类
细胞核在细胞死亡时变化比较明显，所以很多人以此为标准将细胞死亡分为凋亡、凋亡样程序性细胞死亡、坏死样程序性细胞死亡和坏死，其中前三种是程序性细胞死亡，坏死是非程序性细胞死亡。
如前所述，凋亡细胞核的特点是染色质凝聚，成球状或半月状。其它的形态学变化还有磷脂酰丝氨酸外翻、细胞皱缩、凋亡小体形成等。凋亡一般都会伴有Caspase尤其是Caspase3的活化。
凋亡样程序性细胞死亡核的特征是染色质凝聚的程度较低，比凋亡细胞的染色体疏松一些，同时可以有凋亡细胞其它方面的形态学的变化，多数文献中描述的Caspase非依赖的凋亡归于此类。
坏死样程序性细胞死亡一般无染色质的凝聚或者只有疏松的点状分布，一些特殊的Caspase非依赖的死亡归于此类[21]。
线粒体在细胞死亡中扮演着核心角色，其所释放的促进细胞死亡的分子大致有三类。第一类是细胞色素C，它与胞浆里的Apaf-1，ATP和Caspase-9前体分子形成Apoptosome，引起Caspase-9的激活，进而激活Caspase-3，引起典型的凋亡[22]。第二类是超氧自由基，可以使细胞发生坏死样程序性细胞死亡，且此效应剂可以被抗氧化剂所拮抗[23]。第三类是AIF，AIF可以切割染色体产生大的DNA片段（约50kB），而Caspase激活的DNA酶切割DNA产生的片段则很小（几十个碱基对），二者对细胞核形态的影响也不相同。AIF可以使细胞发生凋亡样程序性细胞死亡[24]。2.Clarke分类
1990年Clarke等补充了Schweichel和Merker对于细胞死亡的分类，将程序性细胞死亡分为I类、II类和III类[25]，至今仍被广泛引用。
I类程序性细胞死亡即是凋亡，形态学特征如上所述，这类死亡一般没有溶酶体的参与，且死后会被吞噬细胞所吞噬[26]。
II类程序性细胞死亡即是自吞噬性程序性死亡，如上所述，其主要的形态学特征是自吞噬泡的形成，自吞噬泡和溶酶体融合后被消化，而细胞残骸会被吞噬细胞吞噬。
III类程序性细胞死亡即是坏死样程序性细胞死亡，其主要的形态学特征是各种细胞器的肿胀、胞膜的破坏等，这类细胞死亡没有溶酶体的参与。III类程序性细胞死亡又分为两个亚类IIIA和IIIB，其中IIIB亚类胞膜破坏比较轻微，各类细胞器的肿胀表现比较明显，而且死亡后会被吞噬细胞吞噬[25]。
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上述两种分类方法都涉及坏死性程序性细胞死亡，但是两种方法所关注的形态学特征却并不一致。Clarke分类中的II类程序性细胞死亡如果按照细胞核形态分类应该属于坏死样程序性细胞死亡，因为它没有发生染色质凝聚[27]。
（三）形态学分类与机制分类的关系
上述程序性细胞死亡分类似乎有些复杂，因为形态学分类与机制分类具有很大的重叠；所以，如果能够将二者联系起来，找出它们的对应关系，将有利于我们对于细胞死亡的理解（见表一）。
1、机制分类中的凋亡按核形态分类属于凋亡或凋亡样程序性细胞死亡；Clarke分类属于I型程序性细胞死亡。
2、机制分类中的自吞噬性程序性细胞死亡按核形态分类应该属于坏死样程序性细胞死亡，因为其没有明显的染色质凝聚；Clarke分类属于II型程序性细胞死亡。
值得注意的是，凋亡可以以自吞噬开始，而自吞噬可以以凋亡结束[28]，其机制为溶酶体的活化可以激活典型的内源性凋亡通路[29]。所以，很多自吞噬性程序性细胞死亡结果表现为凋亡，但也有文献报道有独立的自吞噬性程序性细胞死亡，同时又没有凋亡发生[30]。
3、机制分类的Paraptosis按核形态分类应该属于坏死样程序性细胞死亡，因其核没有明显的变化；Clarke分类属于III型程序性细胞死亡。
4、机制分类的细胞有丝分裂灾难严格来说应该归于凋亡，因为其表现出明显的染色体凝聚。但由于其诱因比较特殊，所以习惯上把它单独归于一类。
5、机制分类的胀亡按核形态分类应该属于坏死样程序性细胞死亡，因为其染色体可以形成散在的点状分布[31]；Clarke分类属于III型程序性细胞死亡。
表
一、形态学分类与机制分类的关系
基于机制的分类
凋亡
自吞噬性程序性细胞死亡
Paraptosis 细胞有丝分裂灾难
胀亡
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8（5）
基于细胞核改变的分类 凋亡，凋亡样程序性细胞死亡 坏死样程序性细胞死亡 坏死样程序性细胞死亡
凋亡
坏死样程序性细胞死亡
Clarke分类
I型 II型 III型 I型 III型 综述：细胞死亡的分类
吕冰峰
四、总结
随着近年来对于细胞死亡的深入研究，经典的“凋亡——坏死”的死亡分类模型已经显得过于简单。一般来说，某一种死亡刺激可能引起细胞多个死亡通路的活化，细胞最终发生什么样的死亡主要取决于被活化通路发挥作用的速度。多数情况下，Caspase通路发挥作用最快，因此程序性细胞死亡最常表现为凋亡。但是某些情况下，比如Caspase通路受阻时，Caspase通路不发挥作用或者速度慢于其它通路，细胞就会表现为凋亡样或坏死样程序性细胞死亡[32]。在某些Bcl-2高表达的肿瘤细胞系中，死亡刺激也往往引起凋亡样或坏死样程序性细胞死亡[33]。细胞具有多种死亡方式是有其进化必然性的[34]。多细胞生物在生命过程中会有大量“多余的”或“生病的”细胞死掉，单一的死亡方式对于生命来说是十分危险的，因为一旦此通路受到抑制，后果将不可想象。多种死亡方式的存在就像一个多重保险，会“千方百计”地使应该死亡的细胞死掉，即便是某些死亡通路受阻。现在对于细胞死亡的分类还有一些混乱，随着对于细胞死亡机制认识的不断深入，我们期待着一个更为合理的细胞死亡分类方法。
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时间：2013年10月14日 地点：本班教室
参与人员：五（3）班全体师生
主持人：班主任
活动目标：学习垃圾分类；懂得将垃圾放在指定的地方，爱护身边的环境。活动准备：有关垃圾的图片资料。活动过程：
一、什么是垃圾
垃圾就是没有用的、准备扔掉的东西
二、垃圾到哪里去了
我们每个人每天都会扔出许多垃圾，你知道这些垃圾它们到哪里去了吗？垃圾处理的通常方法大多处于传统的堆放填埋方式，占用上万亩土地；并且虫蝇乱飞，污水四溢，臭气熏天，严重地污染环境。人们大量地消耗资源，大规模生产，大量地消费，又大量地生产着垃圾。
三、了解垃圾的危害
出示有关垃圾危害的资料，请大家结合自己的经验谈谈垃圾的害处。
小结：垃圾气味难闻，破坏风景；垃圾侵占土地，使人们生活的地方越来越小；垃圾中的病毒、病菌会让人生病。
四、分类处理垃圾的优点
垃圾，只有在混在一起的时候才是垃圾，一旦分类回收就都是宝贝。垃圾分类就是在源头将垃圾分类投放，并通过分类的清运和回收使之重新变成资源。分类处理垃圾的优点：
1、减少占地：生活垃圾中有些物质不易降解，使土地受到严重侵蚀。垃圾分类，去掉能回收的、不易降解的物质，减少占地；
2、减少环境污染：废弃的电池含有金属汞、镉等有毒的物质，会对人类产生严重的危害；土壤中的废塑料会导致农作物减产。因此回收利用可以减少危害；
3、变废为宝：回收1500吨废纸，可免于砍伐用于生产1200吨纸的林木。生产垃圾中有30%—40%可以回收利用，应珍惜这个小本大利的资源。大家也可以利用易拉罐制作笔盒，既环保，又节约资源。
五、认识垃圾分类标记，学会垃圾分类 出示新型垃圾箱照片，说说它的外形特点。
如今中国生活垃圾一般可分为四大类：可回收垃圾、厨余垃圾、有害垃圾和其他垃圾。
可回收垃圾主要包括废纸、塑料、玻璃、金属和布料五大类。厨余垃圾包括剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。
有害垃圾包括废电池、废日光灯管、废水银温度计、过期药品等，这些垃圾需要特殊安全处理。
其他垃圾包括除上述几类垃圾之外的砖瓦陶瓷、渣土、卫生间废纸、纸巾等难以回收的废弃物，采取卫生填埋可有效减少对地下水、地表水、土壤及空气的污染。
（２）历史故事：完璧归赵（蔺相如）围魏救赵（孙膑）退避三舍（重耳）
毛遂自荐（毛遂）负荆请罪（廉颇）纸上谈兵（赵括）讳疾忌医（蔡桓公）
卧薪尝胆（勾践）杀妻求将（吴起）惊弓之鸟（更羸）高山流水（俞伯牙、钟子期）
一字千金（吕不韦）指鹿为马（赵高）焚书坑儒（秦始皇）
穷图匕见（荆轲）
悬梁刺股（苏秦、孙敬）四面楚歌（项羽）约法三章（刘邦）孺子可教（张良）
背水一战（韩信）破釜沉舟（项羽）手不释卷（吕蒙）金屋藏娇（刘彻）
暗渡陈仓（韩信）十面埋伏（项羽）投笔从戎（班超）马革裹尸（马援）
多多益善（韩信）鞠躬尽瘁（诸葛亮）三顾茅庐（刘备）
煮豆燃萁（曹植）
刮目相看（吕蒙）初出茅庐（诸葛亮）乐不思蜀（刘禅）七步成诗（曹植）
言过其实（马谡）七擒七纵（诸葛亮）宝刀不老（黄忠）才高八斗（曹植）
一身是胆（赵云）封金挂印（关羽）单刀赴会（关羽）望梅止渴（曹操）
万事俱备，只欠东风（周瑜、诸葛亮）入木三分（王羲之）闻鸡起舞（祖逖）
东山再起（谢安）洛阳纸贵（左思）水滴石穿（张乖崖）
草木皆兵（苻坚）
凿壁偷光（匡衡）画龙点睛（张僧繇）江郎才尽（江淹）
精忠报国（岳飞）
东窗事发（秦桧）胸有成竹（文与可）大公无私（祁黄羊）
常见歇后语50条
1.东吴招亲——弄假成真 2.张飞穿针——大眼瞪小眼 3.关公开刀铺——货真价实
4.白糖嘴巴刀子心——口蜜腹剑 5.茶壶里煮饺子——有货倒不出
6.窗户上的纸——一捅就破 7.打开天窗——说亮话 8.打破砂锅——问到底
9.丢了西瓜捡芝麻——因小失大 10.断了线了风筝——有去无回
11.鳄鱼流眼泪——假慈悲12.高射炮打蚊子——大材小用
13.狗咬吕洞宾——不识好人心
14.关公面前耍大刀——自不量力 15.心字头上一把刀——忍了
16.和尚打伞——无法（发）无天
17.上鞋不用锥子----真（针）好
18.鸡蛋里挑骨头——没事找事
19.姜太公钓鱼——愿者上钩
20.脚踩两只船——左右为难
21.孔圣人搬家——尽是输（书）
22.快刀斩乱麻——干脆
23.浪子回头——金不换
24.老鼠过街——人人喊打
25.六月天，孩儿脸——说变就变
26.萝卜青菜——各有所爱
27.门缝里看人——把人看扁了1
28.四月的冰河----开动（冻）了
29.泥菩萨过河——自身难保
30.骑驴看唱本——走着瞧 31.墙上画饼——中看不中吃
32.墙上的蒿草——随风倒
33.热锅上的蚂蚁——急得团团转
34.肉包子打狗——有去无回
35.十五个吊桶打水——七上八下 36.偷鸡不成——蚀把米
37.兔子的尾巴——长不了 38.外甥打灯笼——照旧（舅）
39.瞎子点灯——白费蜡 40.小葱拌豆腐——一清（青）二白
41.秀才遇到兵——有理说不清 42.哑巴吃黄连——有苦说不出
43.哑巴吃饺子——心中有数 44.榆木脑子——不开窍
45.芝麻开花——节节高 46.霜打的茄子——蔫了
47.司马昭之心——路人皆知 48.冲着窗户吹喇叭——名（鸣）声在外 49．擀面杖吹火----一窍不通 50．黄鼠狼给鸡拜年----没安好心
51.飞机上吹喇叭----想（响）得高 52.老虎拉车---谁敢（赶）
53.四量棉花----含有色彩词语的诗句谈（弹）不上。四大名著：
1、《三国演义》
⑴作者：（明）罗贯中
⑵主要内容：全书描写东汉魏（曹操）、蜀（刘备）、吴（孙权）三国从时局**、军阀纷争中崛起，一直到最后被西晋所灭的历史故事。
⑶精彩场面：桃园三结义、草船借箭、赤壁之战、曹操煮酒论英雄、三顾茅庐
主要人物：曹操、刘备、孙权、诸葛亮、周瑜、黄盖、吕蒙等。
2、《水浒传》
⑴作者：（明）施耐庵
⑵主要内容：全书描写北宋末年以宋江为首的一百零八人在山东梁山泊聚义的故事。
⑶精彩场面：武松景阳冈打虎、林教头风雪山神庙、鲁智深大闹五台山、鲁提辖拳打镇关西、智取生辰纲
(4)主要人物：宋江、鲁智深、林冲、武松、李逵等
3、《西游记》
⑴作者：（明）吴承恩⑵主要内容：全书记叙了三藏法师一行四人，历尽千辛万苦，经过九九八十一难，最终扫尽沿途妖魔鬼怪，取回真经的故事。
⑶精彩场面：孙悟空大闹天宫、三打白骨精、真假美猴王、孙悟空三借芭蕉扇、怒打假国丈 ⑸主要人物：唐僧、孙悟空、猪八戒、沙僧、观音菩萨、如来佛祖
4, 《 红楼梦》原名《石头记》
(1)作者:曹雪芹 朝代:清朝
(2)主要人物：贾宝玉，林黛玉，薛宝钗，王熙凤等
（3）主要内容：小说写贾宝玉、林黛玉、薛宝钗之间的爱情婚姻悲剧，从中表现了贾、王、史、薛四大家族的兴衰，揭示了封建社会末期渐趋崩溃的社会真实内幕，反映了那个时代对个性解放和人权平等的要求以及初步的民主主义精神.1、读书名言、1．一日无书，百事荒芜。---------陈寿
2.读书破万卷，下笔如有神。——杜甫
3.读书有三到，谓心到，眼到，口到。——朱熹
4.立身以立学为先，立学以读书为本。——欧阳修
5.读万卷书，行万里路。——刘彝
6.黑发不知勤学早，白发方悔读书迟。——颜真卿
7.书犹药也，善读之可以医愚。——刘向
8.发奋识遍天下字，立志读尽人间书。——苏轼
9.鸟欲高飞先振翅，人求上进先读书。——李苦禅
10.书到用时方恨少，事非经过不知难。——陆游
11.旧书不厌百回读，熟读精思子自知。——苏轼
12.读书百遍，其义自见。——《三国志》
13.读书之法，在循序而渐进，熟读而精思。——朱熹
14.书山有路勤为径, 学海无涯苦作舟。15.读书破万卷，下笔如有神
2、珍惜时间：
1，合理安排时间，就等于节约时间。——培根
2，今天所做之事勿候明天，自己所做之事勿候他人。——歌德
3，时间，就像海绵里的水，只要愿挤，总是有的。——鲁迅
4，一寸光阴一寸金,寸金难买寸光阴
5，失落寸金容易找,失落光阴无处寻。
6，少壮不努力,老大徒伤悲。
7，少年不知勤学苦,老来方悔读书迟。
8，光阴如同东流水，只能流去不能回。
9，河水泉源千年在，青春一去不再来。
10，时间就是知识，时间就是力量，时间就是生命。
11，世间最宝贵的就是今天，最容易丧失的也是今天。
12，冬去春又来，年华似水流。
13，一日无二晨，时间不重临。
14，有钱难买少年时。母爱的名言：
1.母爱是世间最伟大的力量。——米尔
2.母爱是一种巨大的火焰。——罗曼罗兰
3.“我很幸运有爱我的母亲” ——贝多芬
4，世界上的一切光荣和骄傲，都来自母亲。——高尔基
5，我的第一个启蒙老师是我的母亲。” ——茅盾5
3、孝敬，诚信，励志名言
1，兄弟敦和睦，朋友笃诚信。（陈子昂）
2，孝在于质实，不在于饰貌。（桓宽）
3，爱亲者，不敢恶于人；敬亲者，不敢慢于人。（《孝经》）
4，非淡泊无以明志，非宁静无以致远。（诸葛亮）
5，世上无难事，只怕有心人。
6，欲要看究竟，处处细留心。
7，虚心万事能成，自满十事九空。
8，滴水能把石穿透，万事功到自然成。
9，宝剑锋从磨砺出，梅花香自苦寒来。
勤奋学习,珍惜时间，母爱的名人名言
勤奋学习：
10业精于勤，荒于嬉。行成于思，毁于随。——韩愈
11学问是苦根上长出来的甜果。——李嘉
4、勤奋学习：
1，业精于勤，荒于嬉。行成于思，毁于随。——韩愈
2，学问是苦根上长出来的甜果。——李嘉图
3，要知天下事，须读古人书。——冯梦龙
4，不知则问，不能则学。——董仲舒
5，不积跬步，无以至千里；不积小流，无以成江海。——荀况
6，锲而舍之，朽木不折；锲而不舍，金石可镂。——荀况
7，提出一个问题，往往比解决一个问题更重要。——爱因斯坦
8，读一本好书，就是和许多高尚的人谈话。——歌德
9，虚心使人进步，骄傲使人落后，我们应当永远记住这个真理。—— 毛泽东 10，天才是百分之一的灵感加百分之九十九的勤奋。——爱迪生
诗句部分
16、描写春天的诗句 ——孟浩然《春晓》
春色满园关不住 ——叶绍翁《游园不值》
不知细叶谁裁出 ——贺知章《咏柳》
春风又绿江南岸 ——王安石《泊船瓜舟》
故人西辞黄鹤楼 ——李白《送孟浩然之广陵》
17、描写夏天的诗句
——辛弃疾《西江月》
小荷才露尖尖角 ——杨万里《小池》
接天莲叶无穷碧 ——杨万里《晓出净慈寺送林子方》
18、描写秋天的诗句(李绅)
常恐秋节至(《汉乐府?长歌行》)
窗含西岭千秋雪(杜甫)
湖光秋月两相和(刘禹锡 可怜九月初三夜
19、描写冬天的诗句
墙角数枝梅 ——王安石《梅花》
孤舟蓑笠翁 ——柳宗元《江雪》
千山鸟飞绝 ——柳宗元《江雪》
20、描写花的诗句
人面不知何处去
春色满园关不住 ——叶绍翁《游园不值》
接天莲叶无穷碧 —--杨万里《晓出净慈寺送林子方》
墙角数枝梅寒独自开。——宋 王安石《梅花》
21、描写风的诗句 夜来风雨声 ——孟浩然《春晓》
野火烧不尽 ——白居易《草》
随风潜入夜 ——杜甫《春夜喜雨》
22、描写月亮的诗句
举头望明月
举杯邀明月
可怜九月初三夜
月落乌啼霜满天
小时不识月
23、描写山的诗句(柳宗元《江雪》)
白日依山尽)
会当凌绝顶(杜甫《望岳》
国破山河在(杜甫《春望》)
空山不见人(王维《鹿柴》)
相看两不厌)
青山遮不住(辛弃疾《菩萨蛮•书江西造口壁》)
不识庐山真面目。(苏轼《题西林壁》)
24、描写雨的诗句
南朝四百八十寺
清明时节雨纷纷
25、有关人物气节的诗句
粉骨碎身全不怕
不要人夸好颜色
26、有关爱国的诗句
感时花溅泪
却看妻子愁何在死去元知万事空
王师北定中原日
27、赞美老师的诗句
一日为师
28、有关珍惜时间的诗句
不饱食以终日
光阴似箭
少壮不努力
名言格言谚语部分
1、有关志向方面的志当存高远。
三军可夺帅也
2、关于雪的冬天麦盖三层被
3、有关珍惜时间的抛弃时间的人
盛年不重来
.黑发不如勤学早
一寸光阴一寸金
莫等闲
光阴似箭
4、有关人物气节的人生自古谁无死
5、有关爱国的先天下之忧而忧
6、描写坚持不懈的,朽木不折;锲而不舍,金石可镂——荀 子
有恒心,有胆力,方能成功——周恩来
不要失去信心,只要坚持不懈,就终会有成果——钱学森
天下无难事易事 ——袁枚
读不在三更五鼓——郭沫若
精诚所至——蔡锷
7、学习方面的读书破万卷
千里之行
8、关于团结的一根筷子易折断
人心齐
9、关于诚信的君子一言
言必行
诚是做人的核心
诚信是金
5、表示各种快的成语——————吃得快
风驰电掣——开得快——————成得
不假思索——动得快——————懂得快
灵机一动——想得快——————变得快
四、根据意思写出含有“手”字的成语。
形容敏捷——（）
形容聪颖——（）形容高兴——（）
形容凶狠——（）形容卑鄙——（）
形容亲密——（）形容惊慌——（）
由于血细胞分析仪操作简便、快速、结果准确和精密度高,少量血液即可为临床提供多项、及时、可靠和有效的分析参数,极大地提高了血液检验结果的效率和质量。它正取代传统的显微镜检查法(形态学检查除外)而被广泛应用,但如果不经过严格的性能评价,对仪器的性能不了解就盲目使用,其检验误差将大大超过手工操作的误差。此外,新的血细胞分析仪在安装后或维修后均应按照国际血液学标准化委员会的规定对仪器的性能进行测试、评价,合格后方能使用。为了解迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪白细胞分类的性能,我们对该仪器进行了评价试验,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪及原装配套试剂、质控物。Olympus光学显微镜由奥林巴斯光学株式会社提供;EDTA-K2真空采血管由湖南省浏阳市医用仪具厂提供,批号:080318;瑞特-吉姆萨(Wright-Giemsa)染液,由科室自制。
1.2 标本采集
本院门诊及临床住院患者,清晨空腹采集肘静脉血2mL(EDTA-K2抗凝)。
1.3 仪器准备
对BC-5500全自动血细胞分析仪进行日常清洗维护,进行本底检查,满足要求后(WBC≤0.3×109/L、RBC≤0.03×1012/L、HGB≤1g/L、HCT≤0.005、PLT≤10×109/L)做质控。按国际血液学标准化委员会(ICSH)的有关规定对白细胞分类进行测试[1]。所有检测均在采血后4h内完成[2]。
1.4 评价方法
应用迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪进行全血通道测定,每份标本连续测定3次,取后两次结果的平均值作为白细胞分类的测定值;同时,按白细胞测定结果将所有标本分为白细胞降低组(WBC<4×109/L)、白细胞正常组(4×109/L≤WBC≤10×109/L)及白细胞增高组(WBC>10×109/L)。每份标本均制作3张血片(其中2张染色,另1张存放备用),分别由2名经验丰富且长期从事血液形态学检验的工作人员采用双盲法,各由镜分类200个白细胞,共计分类400个白细胞,计算白细胞分类的结果,并与仪器法分类结果进行相关性比较。
1.5 统计学分析
应用SPSS 10.0软件对所有数据进行统计学处理及相关性分析。
2 结果
⑴白细胞降低组、白细胞正常组及白细胞增高组白细胞分类结果中,中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较好,而单核细胞和嗜碱性粒细胞两种方法相关性较差。白细胞具体分类结果分别见表1、表2、表3。
⑵所有检测标本中,共12份标本仪器未分类,其中急性淋巴细胞白血病2例,慢性粒细胞性白血病3例,急性粒细胞性白血病5例,传染性单核细胞增多症1例,再生障碍性白血病1例。
3 讨论
血细胞分析仪是医院临床检验应用最为广泛的仪器之一,随着检测技术、检测方法的不断发展及计算机技术在医学领域的广泛应用,血细胞分析技术也从二维空间转向到三维结构,从白细胞三分群转向到五分类。目前,国内外主流五分类血细胞分析仪检测方法一般为:电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法;光散射和细胞化学染色联合检测法;电阻抗和射频电导联合检测法及多角度激光偏振光散射检测法[3,4,5]。本试验仪器,迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪采用半导体激光系统,通过多角度的激光散射,可以提供细胞的大小、细胞核、细胞颗粒大小等复杂的信息,并结合细胞化学染色技术,准确地把嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞区分开来,同时可以筛选各类异常、幼稚细胞,从而实现更精确的五分类检测结果[6]。为临床医生提供更准确、更全面的血细胞分析结果,方便其为患者开展更准确的血液疾病检查,达到早发现、早治疗的目的。
从试验结果可看出,中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较好,其仪器测定结果可信度较高;而单核细胞和嗜碱性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较差,可能与单核细胞体积较大,一般分布在血片边缘和末端,导致手工镜检时易产生误差。嗜碱性粒细胞两种方法相关系数均不到0.4,大概与其在正常血液中数量极少有关[7,8,9,10]。此外,对于某些白血病患者,该仪器无法对白细胞进行分类,提示异常细胞及幼稚细胞的存在,应用手工镜检进行白细胞分类[11,12]。
综上所述,通过对迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪白细胞分类的评价,该仪器能准确分类计数中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞,而对单核细胞和嗜碱性粒细胞其分类结果可信度较低,且对有异常细胞及幼稚细胞的血液标本可能存在无法分类现象。该仪器作为血液筛查可基本满足临床需要,但对于异常标本,手工镜检则是一个很好的补充。
摘要：目的对迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪白细胞分类进行评价。方法应用BC-5500全自动血细胞分析仪对白细胞降低组、白细胞正常组及白细胞增高组各标本进行全血通道检测,并同时进行手工镜检。结果白细胞降低组、白细胞正常组及白细胞增高组白细胞分类结果中,中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较好,而单核细胞和嗜碱性粒细胞两种方法相关性较差。对某些白血病标本,仪器存在不分类现象。结论迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪能准确分类计数中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞,而对单核细胞和嗜碱性粒细胞其分类结果可信度较低。该仪器作为血液筛查可基本满足临床需要,但对于异常标本,手工镜检则是一个很好的补充。
关键词：血细胞分析仪,白细胞,手工镜检法,血液筛查
参考文献
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