呼吸科实习生自我鉴定

呼吸科实习生自我鉴定（共9篇）

呼吸科实习生自我鉴定篇1

呼吸科是很忙很累的，而且特别要注意自我保护，每天带着12层的口罩穿梭于病房，大多数病人是哮喘，肺结核，肺癌的病人，他们很可怜的。实习的三周不仅扎针输液的技术有了质的飞跃，更重要的是我在这里学会了微笑，虽然带着厚厚的口罩，但是一句关怀亲切的微笑，唠一句家常不仅能够使病人得到少许安慰，更重要的是也缓解了自己给病人输液扎针时的紧张，在一个融融洽和谐的氛围中更能一针见血，即使扎不上病人一般也不会刻意为难你。这就是人与人之间的沟通吧!

还有就是一些专科知识，例如呼吸机的使用，肺炎、哮喘、肺心病、呼衰、肺结核病人的护理，临终病人的护理。记得进科室的第二天就亲眼目睹了一个病人从抢救到死亡的过程，那位老人只剩下了一把骨头，像一具骷髅。很奇怪的是，第一次在临床面对死亡并没有想象中的那么害怕，人从出生到死亡就是一个生命过程，怎么样把这个过程过的充实精彩是我们生的人必须思考的问题，在病床奄奄一息时无憾此生，足已。

呼吸科实习生自我鉴定篇2

1 制定切实可行的教学计划

教学计划是根据一定的教育目的和培养目标制定的教育教学指导文件, 是对临床实习工作的全面安排。

1.1 总体安排

每周安排理论授课、操作技能培训各一次。通过晨间教学提问、观摩查房、教学查房、病历书写等措施, 加强临床教学各环节的实习。

1.2 呼吸科护理重点内容

(1) 掌握呼吸内科护理常规、常见病及护理, 分级护理的原则和内容;

(2) 掌握疑难病症的观察及护理;

(3) 掌握危重病人的观察及配合医师抢救, 熟练运用三联针、给氧、吸痰术、口对口呼吸、胸外心脏按压等技术;

(4) 掌握心电监护仪、微量泵的使用方法及注意事项;

(5) 能够准备和配合医师进行各种穿刺术, 包括胸腔穿刺、腹腔穿刺等;

(6) 熟悉呼吸科常用急救药品及保管方法;

(7) 熟悉呼吸系统常见疾病的病因、发病机制、临床表现、护理诊断、治疗要点, 并遵循护理程序对病人实施整体护理。

2 耐心细致地做好入科培训

学生入科后, 由护士长或总带教老师详细介绍专科特点、护理要求、病区环境、病房布局、治疗室、监护室、抢救药品、物品、设备的位置及相关要求, 了解医护人员和患者的基本情况。要让她们明白护士的基本义务和做一名合格护士的基本条件, 在临床实习中, 体会患者的痛苦, 了解患者的心理感受, 培养她们对患者有爱心、同情心和责任心。从而使她们尽快熟悉工作环境, 增加信心, 为完成实习任务打好基础。

在了解科室基本情况的基础上, 给实习学生分配带教老师, 由具体带教老师说明班次特点, 实行一对一带教。

3 不断提高带教老师的能力和水平

所有带教老师都必须熟练掌握呼吸科常见病的护理常规、危重病人的抢救工作和各种仪器的操作方法, 并能准确无误地传授给实习生。带教老师是学生的一面镜子, 要起到率先垂范, 以身作则的作用, 做学生的榜样和楷模。带教老师要认真负责, 经常研究学生的实习大纲, 制定详细的带教计划, 要有针对性地将护理学的重点、难点及相关学科的新进展、新技术和防范护理安全等方面的知识传授给学生, 做到放手不放眼, 尽快让学生熟悉各项护理技术操作。同时要主动关心、帮助学生, 使学生在步入社会的初期就得到正确的价值观、人生观的熏陶和锻炼。

4 强化法制观念教育

护理安全与法律法规有着密不可分的关系。法律意识淡薄, 法律知识缺失是引起实习差错事故的重要因素之一, 对实习生进行法律法规教育是防范实习差错的必要的手段, 对保护患者、带教老师及学生的利益具有重要意义。所以, 有必要对实习生进行相关法律法规教育, 反复强调医疗安全的重要性、严格执行规章制度和护理操作规程的重要意义, 始终把患者的生命安全放到第一位。在临床带教中, 重视学生对医院各项规章制度的学习, 安排多种形式的法律及相关知识讲座, 对临床工作中易出现差错的环节及时指出和提醒, 培养学生谦虚谨慎、一丝不苟的工作作风, 让实习生明确自己的身份, 告知她们执行任何操作都必须在带教老师的指导下进行。

5 根据学生特点做到因材施教

近年来, 临床实习学生主要是90后人群, 其中大多数为独生子女。她们的思维方式、工作态度、处事风格等方面的表现都具有鲜明的时代特征。她们的缺点主要表现为:一是自制力差, 上班迟到早退, 一旦有空闲不是玩手机就是闲聊天, 缺乏学习自觉性和主动性;二是不虚心求教, 偶尔受到批评就会顶撞老师;三是面对工作和学习中的问题多选择逃避, 缺乏迎难而上、持之以恒的钉子精神。针对以上存在的问题, 带教老师应该从以下几个方面入手解决。

(1) 耐心正确地指导, 而不是动不动就训斥。认真细致地讲解基本知识, 准确示范基本技能, 手把手地教, 适时给予表扬、鼓励, 使学生逐步树立信心, 增加学习的兴趣。

(2) 对于少数屡教不改、性格怪癖的学生, 要心平气和的去跟她们沟通, 了解她们的想法, 走进她们的内心世界, 用心去体会她们的难处, 积极解决她们的困难, 从而从内心深处感化她们, 使她们成为积极向上、充满阳光的好学生。

6 严格做好出科测试

每批实习生实习结束后, 科内要进行理论、操作考试。考试时要严格按照实习计划要求进行组织。考试完毕, 针对考试结果, 对学生考试情况进行评价和纠正。对于学生未掌握的理论知识, 应再次进行讲解;对于未按照规范要求的技能操作, 应给予纠正, 直至学生完全掌握。另外, 带教老师要认真填写实习鉴定, 表扬其优点, 提出其不足之处, 准确对学生进行评价, 以利于学生的进步, 帮助学生成为一名合格的实习护士。

摘要：临床实习是护理专业教学的重要环节, 对培养学生运用所学的知识和基本理论分析问题、解决问题的能力十分重要。如何做好临床带教工作, 从制定教学计划、做好入科培训、提高带教老师素质、强化法制观念教育、因材施教、做好出科测试等方面进行了探讨。

关键词：呼吸科,实习,带教,做法

参考文献

[1]殷磊.护理学基础[M].人民卫生出版社, 2004.

呼吸科实习生自我鉴定篇3

摘要：为了解猪繁殖与呼吸道综合征在新疆的流行现状，以及病毒毒株的分子生物学特征，对疑似该病病料进行地方毒株的分离，并对其进行鉴定。采集新疆乌鲁木齐市七道湾某猪场疑似PRRS病死的猪只肺脏及淋巴结等组织病料，将其处理后接种到Marc-145细胞上，并盲传3代；对分离株进行毒力测定（TCID50），应用RT-PCR方法对出现CPE的细胞培养物进行分子检测。结果显示，分离到的新疆病毒株可发生细胞病变，在Marc-145细胞上的TCID50为10-5·mL-1。RT-PCR检测结果用琼脂糖凝胶电泳鉴定基因序列，将测序结果与GenBank已发表的PRRSV毒株基因序列进行对比分析。研究证明所分离到的病毒为PRRSV，命名为XJ-Q。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒；分离；鉴定

中图分类号：S852.651 文献标识码： A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.11.008

猪繁殖与呼吸道综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）俗称蓝耳病，是猪群发生以繁殖障碍和呼吸系统症状为特征的一种急性、高度传染的病毒性传染病。其临床特征是仔猪出现不同程度的呼吸道病症及待产母猪的繁殖障碍，如木乃伊胎、弱仔、死胎或流产，死亡率高[1]。该病于20世纪80年代末、90年代初在美国报道，而后迅速传遍世界各个养猪国家，在猪群密集、流动频繁的地区更易流行，常造成严重经济损失[2]，严重影响了养猪业的生产安全。1987年PRRS首先发现于美国，1991年，Wensvoort等首次利用猪肺泡巨噬细胞（PAM）从中分离出了PRRS病原（Lelystad）[2]。中国于1996年由郭宝清等[3-6]首次从流产胎儿中分离到猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus， PRRSV），从而证实我国也存在猪繁殖与呼吸综合征，之后迅速蔓延至全国各地区[7-8]。为了解该病在新疆的流行现状，及PRRSV抗体依赖性和高变异性增强等特点，进一步丰富 PRRSV毒株基因组的信息数据，笔者对采自新疆乌鲁木齐七道湾地区的病料组织处理后经Marc-145细胞培养后得到的培养物进行毒力测定、RT-PCR鉴定及测序鉴定，得到新疆地方毒株，为进一步了解该病的流行现状及其生物学特性提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病料采集在新疆乌鲁木齐市某养猪场无菌采集疑似猪蓝耳病死猪的肺脏、淋巴结等组织病料，-70 ℃保存备用。

1.1.2 细胞及血清 Marc-145细胞系，由畜牧科学院兽医研究所传染病实验室提供；胎牛血清（FBS）为生工生物产品。

1.1.3 主要试剂及试剂盒胰蛋白酶和青链霉素实验室保存，DMEM培养基、Trizol试剂为生工生物产品；TaKaRa One Step RNA PCR Kit（AMV）、DNA Marker DL2000购自TaKaRa公司。

1.2 方法

1.2.1 病料处理青链霉素清洗病料数次，剪碎、研磨，加入适量的DMEM培养液将其稀释至1∶3，反复冻融3次，分装至1.5 mL无菌离心管中，3 000 r·min-1离心10 min后留上清液，0.22 μm过滤膜除菌，保留滤液为待分离病毒液，保存在-70 ℃备用。

1.2.2 细胞培养复苏Marc-145细胞：从液氮罐中取出细胞冻存管，瞬时放于37 ℃水浴恒温锅内，同时用镊子轻轻摇晃冻存管2 min将管内物质完全融化后，在生物安全柜内用移液器取出Marc-145细胞移入离心管中，加入无FBS DMEM至4.5 mL，1 000 r·min-1离心5 min。倒掉上清液，补加细胞生长液至7 mL，用吸管慢慢吹打混匀，移入培养瓶中，在倒置显微镜下观察细胞是否吹打散开，放入37 ℃的CO2培养箱中，左右摇晃，拧上培养瓶瓶盖（不可拧紧，稍有空隙，保证CO2能进入瓶内）。隔夜后，弃去旧培养液，用无FBS DMEM培养液洗1次瓶内细胞，再加入7 mL生长液（含10%胎牛血清FBS），酒精棉球擦拭瓶盖及培养瓶上半身，放入培养箱内，如此传至第3代进行病毒分离。

1.2.3 病毒分离将1.2.1处理后的病料上清液经0.22 μm过滤除菌，取1 mL过滤菌液接种于单层的Marc-145细胞，37 ℃温箱中吸附60～90 min，期间每30 min摇晃1次，使病毒液均匀接触细胞层，而后加入维持液（含2%胎牛血清）至7 mL，放于5% CO2 37 ℃培养箱培养3～5 d。盲传3代，观察细胞病变（CPE）。

1.2.4 病毒的电镜观察取致细胞病变的细胞培养物，反复冻融3次，1 000 r·min-1离心15 min，浓缩后加0.8%甲醛灭活，2%磷钨酸负染，透射电镜观察。

1.2.5 病毒TCID50滴定将长成单层的Marc-145细胞消化后移入96孔培养板内，每孔细胞单层生长大约80%密度，用于接种病毒，步骤如下。

待测病毒液稀释：将病毒液置于灭菌后的EP管中，采用维持液培养基进行10倍递增稀释，取10-3～10-7稀释度，每个稀释度5个孔，每孔加入病毒液100 μL，同时设置2列对照孔（用维持液代替病毒液）。置于37 ℃ 5% CO2培养箱中吸附1 h，之后弃去病毒液，用无血清的DMEM洗涤后，加入100 μL维持液培养48 h后逐日观察，直至第5天记录出现CPE的孔数，计算CPE比率。

按Reed-Muench两式法计算TCID50。

1.2.6 病毒RNA的提取及RT-PCR 病毒RNA的提取：取750 μL病毒液，按照生工生物公司Trizol剂盒的操作步骤提取病毒总RNA。

RT-PCR反应。按照TaKaRa One Step RNA PCR Kit（AMV）试剂盒，利用自行设计的特异性引物，在PCR反应管中加以下溶液及试剂：RNA模板0.5 μL，10×PCR Buffer 2.5 μL，2.5 mmol·（LdNTPs 2.5 μL）-1，引物（上、下游引物）1 μL，MgCl2 5 μL，RNase Inhibitor（4 μ·μL-1） 0.5 μL，AMVRTase 0.5 μL，AMV-Optimized Tap 0.5 μL，用无RNA酶水补足25 μL。PCR反应条件：预变性温度50 ℃，时间30 min；预变性94 ℃，时间2 min；变性温度94 ℃，时间30 s；退火温度56 ℃，时间30 s；延伸温度72 ℃，时间1 min，循环次数30；延伸温度72 ℃，时间10 min。

电泳：取PCR扩增产物5 μL用0.8%琼脂糖凝胶（含0.5 μg·mL-1EB）电泳，100 V电压40 min进行电泳检测。

2 结果与分析

2.1 病毒分离结果

2.2 病毒的电镜观察

2.3 PRRSV分离株TCID50测定结果

统计接种病毒的96孔细胞培养板，在5 d后出现CPE的情况，并用Reed-Muench法计算距离比得出TCID50结果为10-5·（100μL-1），即PRRSV分离株在Marc-145细胞上的增殖毒价为TCID50105·mL-1。

2.4 RT-PCR鉴定结果

琼脂糖凝胶电泳结果表明，利用RT-PCR方法扩增出大小与预计结果一致的片段434 bp（图3）。将测得的序列与Gen Bank 数据库中已知序列进行比对及相似性分析，结果表明，此分离病毒为PRRSV。

3 结论与讨论

细胞分离、鉴定时PRRSV是最常用、也是最准确的诊断方法之一。PRRSV分离主要使用低成本的传代细胞如Marc-145细胞、猪肺泡巨噬细胞PAM[2]、CL2621细胞[9]。根据PRRSV分离株不同细胞嗜性也不同[10-11]。PRRSV更偏爱在PAM上复制，且亲嗜性最高，但是PAM制备技术难度较大，CL2621细胞是专利细胞。目前对PRRSV既敏感又方便的细胞为Marc-145和从Marc-145中克隆出的HS2H细胞。有实验证明，PRRSV新疆分离株适宜在Marc-145细胞上生长[12]，并从中分离到病毒，故本研究采用Marc-145细胞进行PRRSV的分离培养，同时也证实了新疆地区分离株在Marc-145细胞上培养有很好的增殖并能产生典型的CPE。

对PRRSV的检测方法很多，包括血清中和试验（SN）、核酸探针杂交技术、间接免疫荧光抗体试验（IFA）、过氧化酶单层试验（IPMA）、胶体金抗体检测技术（GIA）、乳胶凝集试验（LAT）、RT-PCR及重组蛋白分子诊断技术[13-14]等。实验室检测方法有：病毒的分离（VI），间接免疫荧光（IFA），血清中和试验（SVN），ELISA，RT-PCR等。猪繁殖与呼吸综合征的检测方法众多，各有优点，其中病毒的分离、免疫荧光抗体染色法和免疫过氧化物酶染色法等均需细胞培养才行，因工作量大、周期长，故不利于在基层推广应用。而过氧化物酶单层试验需要大量猪肺泡巨噬细胞，同间接免疫荧光试验一样，在检测时会因为操作活毒而产生实验室安全隐患，并且过氧化物酶单层试验与间接免疫荧光试验不适合大范围检测，RT-PCR方法则相对快速、简便、特异性强。ELISA和IFA在众多检测PRRSV的方法中，步骤较为繁琐，不适合快速诊断，而RT-PCR可快速鉴别诊断PRRSV，故本试验采用RT-PCR方法进行分离病毒的检测。

本研究分离国内新疆毒株，选用Marc-145细胞进行分离培养，连续传代，盲传3代即产生明显的细胞病变。根据分离病毒毒株致Marc-145的CPE、毒价滴定、RT-PCR反应以及与GenBank上登陆的基因序列对比，证实所分离的病毒为PRRSV，与有关文献报道一致[15]，成功地从组织病料中分离得到猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），将其命名为PRRSV新疆株（XJ-Q）。细胞出现CPE后取其感染物，从中提取RNA并通过PCR法鉴定，结果与预期相符，从而实现了对所获得分离培养物进行快速、确切的鉴定。成功分离获得的新疆分离株将为新疆PRRSV基因遗传变异分析的研究奠定基础。

参考文献：

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