血细胞分析仪的原理（推荐7篇）
1．1 流式细胞仪的基本概念 流式细胞仪（flow cytonletry，FCM）是对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析的仪器，主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术，计算机对数据的采集和分析技术等。流式细胞仪以流式细胞术为理论基础，是流体力学、激光技术、电子工程学、分子免疫学、细胞荧光化学和计算机等学科知识综合运用的结晶。流式细胞术是一种自动分析和分选细胞或亚细胞的技术。其特点是：测量速度快、被测群体大、可进行多参数测量，即对同一个细胞做有关物理、生物化学特性的多参数测量，且在统计学上有效。
1．2 流式细胞仪的发展简史 最早的流式细胞仪雏形诞生于1934年，Moldavan提出使悬浮的单个血红细胞流过玻璃毛细管，在亮视野下用显微镜进行计数，并用光电记录装置测量的设想。1953年Crosland-Taylor根据牛顿流体在圆形管中流动规律设计了流动室。其后又经过Coulter、Parker & Horst、Kamentsky、Gohde、Fulwyler、Herzenberg等人的不断改进，设计了光电检测设备和细胞分选装置、完成了计算机与流式细胞仪的物理连接及多参数数据的记录和分析、开创了细胞的免疫荧光染色及检测技术、推广流式细胞仪在临床上的应用。近20年来，随着流式细胞仪及其检测技术的日臻完善，人们越来越致力于样品制备、细胞标记、软件开发等方面的工作，以扩大FCM的应用领域和使用效果。
宋平根的《流式细胞术的原理和应用》是迄今为止对流式细胞仪及其技术阐述的最为详尽和透彻的中文著作。这本书非常详细地介绍了流式细胞术的历史、结构、原理、技术指标等，例举了其在医学和生物工程中的应用，非常适合从事此方面专业研究的人。由于这本书是13年前出版的，所以基本上没有涉及植物流式细胞仪检测技术。此外对于只需要对流式细胞仪有些基本认识的人士来说，这本书太复杂太深奥。谢小梅主要介绍了流式细胞仪在生物工程中的应用。杨蕊概括了流式细胞仪的工作原理，简单提及了流式细胞仪的应用。本文在分析这三篇论著或文章的优缺点后，用比较通俗的语言介绍了掌握流式细胞仪检测技术必须了解的一些原理，并对目前市场上的主流型号进行了客观的性能概括。2 流式细胞仪的工作原理和技术指标
2．1 流式细胞仪工作原理 除电源外，流式细胞仪主要由四部分组成：流动室和液流系统：激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统，其中流动室是仪器的核心部件。这四大部件共同完成了信号的产生、转换和传输的任务。
流动室和液流系统
流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成，常用光学玻璃、石英等透明、稳定的材料制作。设计和制作均很精细，是液流系统的心脏。样品管贮放样品，单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出；鞘液由鞘液管从四周流向喷孔，包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液，一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用，被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体，受到振荡信号可发生振动。
激光源和光学系统
经特异荧光染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。常用的光源有弧光灯和激光；激光器又以氩离子激光器为普遍，也有配和氪离子激光器或染料激光器。光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。汞灯是最常用的弧光灯，其发射光谱大部分集中于300～400nm，很适合需要用紫外光激发的场合。氩离子激光器的发射光谱中，绿光514nm和蓝光488nm的谱线最强，约占总光强的80%；氪离子激光器光谱多集中在可见光部分，以647nm较强。免疫学上使用的一些荧光染料激发光波长在550nm以上，可使用染料激光器。将有机染料做为激光器泵浦的一种成份，可使原激光器的光谱发生改变以适应需要即构成染料激光器。例如用氩离子激光器的绿光泵浦含有Rhodamine6G水溶液的染料激光器,则可得到550～650nm连续可调的激光，尤在590nm处转换效率最高，约可占到一半。为使细胞得到均匀照射，并提高分辨率，照射到细胞上的激光光斑直径应和细胞直径相近。因此需将激光光束经透镜会聚。光斑直径d可由下式确定：d=4λf/πD。λ为激光波长；f为透镜焦距；D为激光束直径。色散棱镜用来选择激光的波长，调整反射镜的角度使调谐到所需要的波长λ。为了进一步使检测的发射荧光更强，并提高荧光讯号的信噪比，在光路中还使用了多种滤片。带阻或带通滤片是有选择性地使某一滤长区段的光线滤除或通过。例如使用525nm带通滤片只允许FITC（Fluoresceinisothiocyanate,异硫氰荧光素）发射的525nm绿光通过。长波通过二向色性反射镜只允许某一波长以上的光线通过而将此波长以下的另一特定波长的光线反射。在免疫分析中常要同时探测两种以上的波长的荧光信号，就采用二向色性反射镜，或二向色性分光器，来有效地将各种荧光分开。
光电管和检测系统
经荧光染色的细胞受合适的光激发后所产生的荧光是通过光电转换器转变成电信号而进行测量的。光电倍增管（PMT）最为常用。PMT的响应时间短，仅为ns数量级；光谱响应特性好，在200～900nm的光谱区，光量子产额都比较高。光电倍增管的增益从10到10可连续调节，因此对弱光测量十分有利。光电管运行时特别要注意稳定性问题，工作电压要十分稳定，工作电流及功率不能太大。一般功耗低于0.5W；最大阳极电流在几个毫安。此外要注意对光电管进行暗适应处理，并注意良好的磁屏蔽。在使用中还要注意安装位置不同的PMT，因为光谱响应特性不同，不宜互换。也有用硅光电二极管的，它在强光下稳定性比PMT好。
从PMT输出的电信号仍然较弱，需要经过放大后才能输入分析仪器。流式细胞计中一般备有两类放大器。一类是输出信号辐度与输入信号成线性关系，称为线性放大器。线性放大器适用于在较小范围内变化的信号以及代表生物学线性过程的信号，例DNA测量等。另一类是对数放大器，输出信号和输入信号之间成常用对数关系。在免疫学测量中常使用对数放大器。因为在免疫分析时常要同时显示阴性、阳性和强阳性三个亚群，它们的荧光强度相差1～2个数量级；而且在多色免疫荧光测量中，用对数放大器采集数据易于解释。此外还有调节 便利、细胞群体分布形状不易受外界工作条件影响等优点。
计算机和分析系统
经放大后的电信号被送往计算机分析器。多道的道数是和电信号的脉冲高度相对应的，也是和光信号的强弱相关的。对应道数年纵坐标通常代表发出该信号的细胞相对数目。多道分析器出来的信号再经模-数转换器输往微机处理器编成数据文件，或存贮于计算机的硬盘和软盘上，或存于仪器内以备调用。计算机的存贮容量较大，可存贮同一细胞的6～8个参数。存贮于计算机内的数据可以在实测后脱机重现，进行数据处理和分析，最后给出结果。除上述四个主要部分外，还备有电源及压缩气体等附加装置。
2．1．1 信号的产生、转换和传输 在压力作用下，鞘液管中的鞘液被持续不断地压入流动室，形成一股稳定地连续的液流，保证了样本液稳定地处于鞘液液流的轴线上，并以单个细胞形式直线通过激光照射区。激光照射区又称测量区，是指液流与激光束垂直相交的点。当细胞携带荧光素标记物（每种物质携带的标记物不同吗?）通过激光照射区时，产生代表细胞内部不同物质、不同波长的荧光信号，这些信号以细胞为中心，向空间360°立体角发射，产生散射光和荧光信号。散射光不依赖任何细胞样品的制备技术，因此被称为细胞的物理参数或固有参数。散射光又包括前向角散射和测向角散射。前向角散射与被测细胞直径的平方密切相关，测向角散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更敏感，可提供有关细胞内精细结构和颗粒性质的信息。荧光信号也有二种；一种是细胞自身在激光照射下发出的微弱荧光信号，另一种是经过特异荧光素标记后的细胞受激发照射后得到的荧光信号。在免疫分析中常要同时探测两种以上波长的荧光信号，就采用二向色性反射镜，或二向色性分光器，来有效地将各种荧光分开。
经荧光染色的细胞受到适合的光激发后产生的荧光是通过光电转换器转变成电信号而进行测量的。最常用的光电转换器是光电倍增管（PMT）。从PMT输出的电信号需要经过放大后才能输入分析仪器。流式细胞仪中一般备有两类放大器。一类是线性放大器，其输出信号与输入信号成线性关系。线性放大器适用于在较小范围内变化的信号以及代表生物学线性过程的信号，如DNA测量等。另一类是对数放大器，其输出信号和输入信号之间成常用对数关系。在免疫学测量中常使用对数放大器。放大后的电信号被传送到计算机，再经模一数转换器传输到微机处理器形成数据文件，保存在计算机上。保存在计算机上的数据可在脱机后再进行数据处理和分析。
参数（例如：细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构）测量原理
流式细胞仪可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π（360°）的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关，因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变，其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关，还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。
在流式细胞术测量中，常用的是两种散射方向的散射光测量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②侧向散射（SSC），又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。一般说来，前向角散射光的强度与细胞的大小有关，对同种细胞群体随着细胞截面积的增大而增大；对球形活细胞经实验表明在小立体角范围内基本上和截面积大小成线性关系；对于形状复杂具有取向性的细胞则可能差异很大，尤其需要注意。侧向散射光的测量主要用来获取有关细胞内部精细结构的颗粒性质的有关信息。侧向散射光虽然也与细胞的形状和大小有关，但它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感，也能对细胞质内较大颗粒给出灵敏反映。
在实际使用中，仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时，可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。
荧光信号主要包括两部分：①自发荧光，即不经荧光染色细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光；②特征荧光，即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光，其荧光强度较弱，波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中，对于结合水平不高的荧光抗体来说，如何提高信噪比是个关键。一般说来，细胞成分中能够产生的自发荧光的分子（例核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞/活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。
减少自发荧光干扰、提高信噪比的主要措施是：①尽量选用较亮的荧光染料；②选用适宜的激光和滤片光学系统；③采用电子补偿电路，将自发荧光的本底贡献予以补偿。
2．1．2 流式细胞仪分选原理 并不是所有的流式细胞仪都具有分选功能。流式细胞仪的分选功能是由细胞分选器来完成的。由喷嘴射出的液流柱在电信号作用下发生振动，断裂形成均匀的小液滴。根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选，而后由充电电路对选定细胞液滴充电，带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转，落入收集器中。使用不同孔径的喷孔及改变液流速度，可能会改变分选效果。从参数测定经逻辑选择再到脉冲充电需要一段延迟时间。精确测定延迟时间是决定分选质量的关键，可根据具体要求进行适当调整。
2．1．3 数据的显示和分析 数据处理主要包括数据的显示和分析。单参数直方图是使用最多的图形显示形式，既可用于定性分析，又可用于定量分析。单参数直方图是由X、Y二方向组成的二维平面图。横座标X是所测的荧光或散射光的强度，用“道数”（Channel No．）来表示。选择的放大器类型不同，标度不同。纵座标Y通常表示被测细胞的绝对数目。正常情况下，数据分析得到的图形为具有一个或若干个峰的曲线图。对曲线图的解释应该具体问题具体分析。
除直方图外，数据显示方式还包括二维点图、二维等高图、假三维图和列表模式等。二维点图也是比较常用的数据显示类型。它显示两个独立参数与细胞相对数之间的关系，也是二维平面图，横纵坐标可以根据自己选定的被测参数自行决定，点的位置表明了细胞和颗粒具有的二个被测参数的数值。二维点图所提供的信息量要大于单参数直方图。
数据分析的方法大体可分为参数法和非参数法两大类。当被检测的生物学系统能够用某种数学模型时则多使用参数方法。非参数分析法不用对显示的图像做任何假设，也不采用数学模型，分析程序可以很简单，也可能很复杂。临床医学较常使用非参数分析法。
2．2 流式细胞仪性能的技术指标 流式细胞仪性能的技术指标主要有荧光分辨率、荧光灵敏度、适用样品浓度、分选纯度等。荧光分辨率是指分辨两个相邻峰的最小距离，通常用变异系数（CV值）来表示。现在市场上主流型号出厂时的荧光分辨率应该小于2.0%。荧光灵敏度反映了仪器探测最小荧光光强的能力。一般用荧光微球上可测出的FITC的最少分子数来表示。目前仪器均可达到1000左右。仪器工作时样品浓度一般在105～107细胞/ml。分析速度/分选速度是指流式细胞仪每秒种可分析或分选的颗粒数目。一般分析速度为5000～10000，分选速度控制在1000以下。流式细胞仪测量的数据是相对值，因此需要在使用前对系统进行校准或标定。流式细胞仪的校准有二个目的，即仪器的准直调整和定量标度。通常使用标准微球作为非生物学标准样品，鸡血红细胞做为生物学标准样品。主流流式细胞仪型号及其特性介绍
目前拥有市场较大份额的公司是美国的BD（Becton-Dickinson）公司、Beckman-Coulter公司（原名称Coulter）和德国的Partec公司。
3．1 BD公司流式细胞仪介绍 BD公司生产的流式细胞仪都冠以FACs（fluorescence activated cell sorter），即荧光激活细胞分选器。其型号种类比较齐全，如早期的FACSort、FACS Canto、FACSean。现在市场上供应的型号有五种：FACSCount（小型流式细胞仪）、FACS CAlibur（流式细胞仪）、FACSA ria（流式细胞分选仪）、FACSV antage SETM（多色分析和高速分选流式细胞仪）、LSR II（数字化分析型流式细胞仪）。
FACSCount为精确计数淋巴细胞CD3，CD4，CD8绝对数而设计的。FACSCalibur是全自动多色流式系统，偏重于临床，其整体设计帮助临床医生快速实现常规免疫表型、CD4T细胞计数、DNA、网织红细胞、血小板等临床分析，兼具分选功能。配备有二根激光管，可同时检测4个荧光参数。可识别粘联细胞。
BD FACSA ria流式细胞分选仪为台式高速细胞分选仪，获取速度达70，000细胞/s，分析速度达50，000/s。使用石英杯流动检测池固定光路校准技术。使用三种激光，多色分析，分析参数可达15色。两管或四管分选，可以使用多种规格的收集管。液流监测系统白动监测液流断点，检查堵塞，实现了细胞分选的无人操作。配件BDACDU装置，可以在微孔板或载波片上定量分选细胞。
FACSV antage SETM是在FACSV antage的细胞分选功能基础上推出的分选增强型流式细胞仪。六色荧光分析系统，点对点分选，配置FACS Diva数字化系统，提供全面的配套试剂。速度和功能优于FACSV antage。BD LSR II是LSR的数字化升级版，其性能介于FACSV antage SE和FACS Calibur之间，是专为生命科学研究设计的台式机。配备固定校准的紫外激光，四种激光立体空间激发、十色荧光同时分析、电子系统数字化、比较易学易用。
3．2 Beckman-Coulter公司流式细胞仪介绍 Beckman-Coulter公司生产的流式细胞仪以Profile（早期，现已停产）和EPICS系列为代表，近年又推出了Cytomics FC500系列。EPICS系列是大型流式细胞仪，目前市场上有XL、XL-MCL和ALTRA三种型号，其中ALTRA具有分选功能，适用于免疫学、细胞生理、分子生物学、遗传学、微生物学、水质分析和植物细胞分析。Cytomics FC500系列流式细胞仪体积小，可自动进行5种颜色的分析，适用于免疫学检测，如人类HIV诊断。特别是FC500MPL的独特设计可以在同一系统上使用12×75mm的离心管和24或96孔的平板。特别适合工作量大的实验室。
这二个公司主要针对医学研究和临床工作进行设计和生产，其产品可应用于生物医学基础研究以及临床检测的许多领域，如遗传、肿瘤、血液、免疫等诸多研究中红细胞、T细胞、淋巴细胞亚群测定、检测早期细胞凋亡、肿瘤细胞免疫测定等。这二个公司的流式细胞仪价格昂贵，我国主要购买、使用的单位基本上都是一些医疗机构。
3．3 Partec公司流式细胞仪介绍 与BD和Becman-Coutler公司的产品相比，德国Partec公司生产的流式细胞仪的共同特点是体积小，造价低，易操作，便于携带，适合植物学研究，适合边远地区和发展中国家。德国Partec公司的产品分为三类：CCA家族、PAS家族和CyFlow家族（Galaxy为早期产品，已停产）。CCA家族包括细胞计数分析仪CCA和倍性分析仪PA-I。它是单或双参数的台式小型机，可以进行一些常规分析，如核DNA测定（检测倍性或细胞周期）、细胞计数、细胞凋亡。它的特点是体积小，易操作，价格低，检测范围广，可以检测多种荧光素（如PI、DAPI、Fluorescein）发出的荧光。PAS家族包括粒子分析系统PAS、粒子分析系统III（PAS-III）和倍性分析仪PA-II。提供三种激光器的三种组合，可检测十余种荧光染料。最多可检测和记录八个独立荧光参数。倍性分析仪PA能够在2分钟内自动测量植物的倍性水平，检测异倍体。可以对叶片、幼苗、种子、果皮、根、花等植物材料进行分析。在大多数植物中，异倍体染色体的检测分辨率为±1条染色体。PA-I使用HBO-100汞灯，属于弧光灯，可产生紫外激发光和蓝光。PA-II中增加了488nm氩离子激光器，能够检测几乎所有的荧光染料，如DAPI，Hoeehst，PI，EB，MMC，FITC，FDA等。汞灯发光是电流经过气体时，气体电离产生的。它能提供最佳的激发波长。
CyFlow（R）SL配备三种激光管，可应用于诸如人类健康、微生物学、工业应用、过程控制、生态学等研究。如HIV扫描中免疫标记细胞计数、食品处理过程中的微生物计数、细胞凋亡等。它使用l2 V直流电，特别适合边远地区和发展中国家。
国际上20世纪80年代开始将流式细胞仪检测应用到植物的研究中（Galbraith，1983），众多学者都认为流式细胞仪是一种准确、快速的检测DNA含量的方法（Michaelson，1991）。应用范围主要是利用流式细胞仪研究属内、属间多种植物的DNA含量（Baird，1994；Jacob，1996；HALL，2000）和倍性水平（Costich，1993；Meng，2002）、检测体细胞杂种（Pfosser，1995；Keller，1996）和游离小孢子培养再生株（Kim，2003）的DNA含量。过去我国应用这一检测技术的植物研究工作者寥寥无几，且大多是在国外实验室完成的。研究内容包括植物生理、程序性死亡、倍性鉴定等。植物研究中使用的流式细胞仪基本上都是Partec公司的产品，也有少量是BD公司生产的流式细胞仪。BD公司的产品主要定位于医学研究与应用，与Partec产品相比，不太适合从事植物染色体倍性的鉴定。主要体现在不能提供植物样品制备技术/试剂，数据获取软件可同时检测到的倍性数目少。鉴于目前我国科研院所中使用较多的是BD公司生产的流式细胞仪，在下一篇中将会对利用BD流式细胞仪进行植物倍性检测的技术和技巧做详细报告。
如何选择流式细胞仪
自七十年代出现第一代流式细胞仪以来，随着计算机技术、电子制造技术、激光技术及荧光素合成技术的不断发展，现代流式细胞仪已今非昔比，制造工艺、功能、精确度有了质的飞跃。
流式细胞仪生产厂商推出各种不同型号的流式细胞仪来满足用户的不同需要。现生产流式细胞的厂商全球至少有六家，各厂商产品又有不同的系列，各具特点。如何从众多的型号中挑选出最适合自己的机型，我们还需从分析应用出发，评估自己的需求来决定什么样的流式细胞仪最具性价比、最适合自己。⑴、DNA倍体分析
DNA分析是流式细胞仪最初且是现在应用最广检测项目。由于恶性细胞DNA含量通常与正常细胞不同，存在异倍体细胞，所以现有很研究评价异倍体细胞与肿瘤恶性度及其预后的关系。DNA含量检测还可提供细胞周期方面的信息，这在细胞生物学中运用很广泛。特别地，它可表示出细胞毒性药物对细胞作用过程。这些DNA检测还可与细胞表面标志物标记同时进行，这样在细胞混合培养中，可通常追踪表达特异标志物的细胞显示其生长周期情况。所有方法都是基于染料能与核酸起特异的化学反应并发射出荧光，常用的染料为PI，DAPI。
流式细胞仪要求：488nm光源，575nm滤光片。⑵、细胞生存能力实验
使用Heochest 33342染料与DNA特异性结合，后因细胞活力不同，染料的结合程度也各异，故可评估细胞的活性度。
流式细胞仪要求：360nm光源，455nm滤光片。⑶、计数外周血中检测网织红细胞
使用TO染料能够特异性地与RNA结合，结合系数高达3000，故具有很好的性价比。流式细胞仪要求：488nm光源，525nm滤光片，液量绝对计数系统。
⑷、外周血、骨髓采集物中CD34阳性干细胞计数，临床上用于骨髓移植前干细胞数理的测定
使用标准ISHAG方案，需要DNA或其他核染料占用FITC通道，PE标记CD34抗体，PE-CY5标记CD45抗体。流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片，液量绝对计数系统。⑸、交叉淋巴细胞、粒细胞毒实验
检测识别供体血清中免疫球蛋白与受体粒细胞之间是否存在反应有着重要临床意义，因为这种反应会导致移植后发热、移植后肺损伤及免疫性粒细胞缺乏症。流式细胞仪可检测全血样本与血清孵育后粒细胞上结合的人免疫球蛋白。FITC标记人免疫球蛋白抗体、PE标记粒细胞表面标志物、PE-CY5标记HLA抗体。流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。⑹、血小板自身抗体检测
血小板自身抗体识别人血小板抗原，会引起各种临床相关症状，如新生儿自免性血小板减少症、输血后紫癜、难治性血小板减少。流式细胞可快速准确地检测血小板自身抗体。FITC标记抗人免疫球蛋白抗体、PE标记识别血小板抗体。
流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm滤光片。⑺、移植交叉配型
原细胞毒实验，主要用于避免移植物超急性排拆反应。流式细胞仪用于监测T或B细胞是否受到受体血清中免疫球蛋白攻击，作为HLA配型前的预实验。流式细胞仪因其高精确性已成为该领域内的金标准。FITC标记抗人免疫球蛋白抗体、PE标记识别T细胞CD3或B细胞CD29抗体。仪器要求：488nm光源，525nm、575nm滤光片。⑻、检测细胞经抗原或细胞有丝分裂刺激后活化效应
淋巴细胞早期活化指标CD69可用来检测免疫治疗效果。流式细胞使用三色分析可监测淋巴细胞各亚群活化情况：FITC标记的CD3抗体、PE标记的CD8抗体、PE-CY5标记的CD69抗体。流式细胞仪要求：488nm光源，525nm、575nm、575nm滤光片。⑼、检测细胞内因子（TH1/TH2细胞检测）
未活化的淋巴细胞所分泌的细胞因子极少，用流式细胞仪很难检测出来，因此在检测前需刺激活化。活化所用的刺激素为PMA 佛波酯+Ionomycin。淋巴细胞在刺激素的作用下，活化分泌细胞因子到细胞外。因流式细胞仪只能对细胞表面或内部的抗原进行检测，如细胞因子分泌到细胞外则检测不到，因此必须阻止细胞因子的分泌。抑制细胞因子分泌的试剂为Brefedlin A或Monensin。Th1/Th2细胞首先是CD4+T细胞，因此存在着用CD4来设定细胞群的问题。我们知道CD4不但在T 细胞上表达，还在所有的单核细胞上表达，因此单独用CD4设门无法将CD4+T细胞区分开来。那么我们用CD3和CD4双参数设门是否可以呢？回答是否定的。因为在佛波酯的刺激作用下CD4 抗原的表达会迅速下调，甚至完全丧失，所以不适合于设门。用CD3和CD8设门，因CD8不受佛波脂的影响且绝大多数CD3+CD8-的细胞都是CD3+CD4+细胞，因此可用CD3+CD8-细胞群来确定CD4+T细胞群。FITC标记CD8，PE标记IL-4和，PE-CY5标记IFN-r，APC或PE-CY7标记CD3。
流式细胞仪要求：488nm或633nm（仅限APC染料）光源，525nm、575nm、675nm，767nm滤光片。⑽、细胞增殖状态检测
核增殖抗PCNA、Ki67、BrdUrd用于衡量细胞增殖分裂状况，在评估肿瘤预后有重要意义。为些标志物的检测一般同细胞表面标志物同时检测。FITC标记PCNA或Ki67或BrdUrd，PE或（并）PE-CY5标记细胞表面标志物。
流式细胞仪要求：488nm或633nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。⑾、染色体分析
流式细胞仪染色分析运用两种特异性染料：Hoechest33258与核苷酸AT结合；Chromomycin A3与GC相结合。从而在双参数坐标上根据染色体ATCG含量的不同识别各种染色体。平时进行的染色体分析耗时且需要操作者极具经验，而用流式细胞仪时可快速地识别出异常染色体，如加配分选系统可将这些异常染色体分选出来作进一步分析。
流式细胞仪要求：360nm或488nm光源，450nm、580nm滤光片。⑿、BrdUrd标记追踪细胞分化
通过细胞分化时涉入溴化尿嘧啶，再使用抗BrdUrd抗体及PI核酸染料可精确识别它们。在流式细胞仪上可清楚地识别出处于G1、S、G2、M期的细胞，在肿瘤研究中有着重要作用。流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm滤光片。⒀、淋巴细胞亚群分析
外周血CD3、CD4、CD8、CD19、NK等各类淋巴细胞亚群定量分析。
流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm滤光片，液量绝对计数系统。⒁、白血病免疫分型
CD45设门三色白血病免疫分型。
流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光，参数越多检测越为灵敏。⒂、血小板分析
血小板活化实验、血小板功能分析。血小板识别抗体及相应活化指标。
流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片，液量绝对计数系统。⒃、白血病、淋巴瘤微小残留病灶检测
根据初诊免疫分型结果，多参数联合设门检测是否有残留白血病细胞，监测白血病的复发。T系白血病微小残留病灶检测
流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片，液量绝对计数系统。B系白血病微小残留病灶检测，液量绝对计数系统
流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光，参数越多检测越为灵敏。
髓系白血病微小残留病灶检测，液量绝对计数系统
流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光，参数越多检测越为灵敏。
⒄、细胞凋亡分析
DNA凋亡峰检测、ANNEXIN-V/PI双染法凋亡检测。流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm滤光片。⒅、肿瘤耐药分析
P-gp、LRP、MRP、BCRP各类耐药蛋白表达及功能检测。流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。⒆、强直性脊柱炎诊断
检测淋巴细胞B27表达强度及百分比，诊断强直性脊柱炎。流式细胞仪要求： 488nm光源，525nm、575nm、675nm滤光片。⒇、PNH诊断
外周血或骨髓检测淋巴细胞、粒细胞、红细胞或单核细胞CD55、CD59表达强度或百分比，确诊夜间阵发性血红蛋白尿。
1 测量原理
1.1 计数原理
血液中红细胞、白细胞和血小板计数采用库尔特原理。库尔特原理是指不良导体颗粒(血细胞等)通过小孔时，导致小孔内外两电极间电阻发生瞬时变化，产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。红细胞和血小板由于体积差别大、脉冲大小差别大，可在同一测量池中计数红细胞和血小板的数量，分别得出红细胞和血小板分布直方图。在白细胞计数池中，经溶血剂破坏红细胞后，对剩下的白细胞进行计数。
1.2 比色原理
血红蛋白测量依据朗伯比尔定律，即在单色光垂直透过溶液后得到的吸光度与溶液的浓度成正比。在白细胞计数时，血红蛋白测量池中红细胞被溶血剂破坏后，释放的血红蛋白与溶血剂结合转化为稳定的血红蛋白衍生物，其颜色的深浅与血红蛋白浓度成正比。
1.3 分类计数原理
基于鞘流技术的流式细胞术[1]。根据体积、高频电导、激光散射3个参数区分细胞类型。
1.3.1 白细胞分类计数原理
血液经过溶血剂裂解红细胞后，加入稳定剂使白细胞接近于体内自然状态，通过流式细胞池，测量体积、高频电导、激光散射3个参数，得到三维坐标散点图。由于各种白细胞的体积大小、细胞膜表面特征、胞质中颗粒性、核浆比等特性不同，在三维坐标散点图中可区分5个白细胞群，还可对幼稚细胞、原始细胞、异常淋巴细胞等进行提示。
1.3.2 网织红细胞分类计数原理
血细胞经过活体染色后，在流式细胞池中，测量体积、高频电导、激光散射3个参数，根据网织红细胞中颗粒染色情况，得到成熟红细胞和网织红细胞三维坐标分布散点图。
2 常见故障分析
2.1 故障一
自动吸样针磨损。
2.1.1 故障现象
仪器表现为自动模式分析血样时经常报警显示部分吸样，不显示计数结果。自动吸样装置有漏水处。
2.1.2 故障分析与处理
自动穿刺吸样针与样本管橡胶盖的长期摩擦，导致其管壁逐渐变薄，吸样口和冲洗口变大。吸样口变大会造成吸取血样时流速过快，导致血样探测器报警显示部分吸样。冲洗口变大会造成冲洗液射出方向偏上，使冲洗液溢出。处理方法：当自动吸样针磨损不严重时，可将连接自动吸样针的吸样连接管和冲洗连接管打活结，以降低吸样和冲洗的流速。若自动吸样针磨损严重，则必须更换。
2.2 故障二
穿刺样本管定位传感器污染或损坏。
2.2.1 故障现象
自动模式分析血样时，样本管停留在穿刺位，自动吸样针停止动作，仪器报警显示样本管前进或后退不完全。
2.2.2 故障分析与处理
穿刺样本管定位传感器是光学传感器，当血渍和试剂结晶污染传感器光学表面时，可导致传感器不能正常工作，甚至损坏传感器。处理方法：用万用表检测传感器是否损坏。当传感器处于“开”状态时，传感器的白色线对地电压应该小于1 V，若大于1 V，可用酒精棉签清理传感器光学表面，使之恢复正常。当传感器处于“断”的状态时，传感器的白色线对地电压应该大于4 V，若低于3 V，则表明传感器已无法正常工作，必须更换。
2.3 故障三
流式细胞池内壁光洁度下降。
2.3.1 故障现象
仪器执行开机程序，本底测试不能通过，显示网织红细胞电压错误。
2.3.2 故障分析与处理
仪器使用一段时间后，流式细胞池内壁光洁度下降，导致网织红细胞电压偏高，超出了0.20～1.20 V电压范围。执行清洗流式细胞池和系统测试后，不能排除故障，导致白细胞分类计数不能进行。处理方法：可在流式细胞池上方2个接线口之间接入1个15～20Ω的电阻，再执行系统测试程序，网织红细胞电压恢复到正常范围。
2.4 故障四
流式细胞池堵塞。
2.4.1 故障现象
血样分析无白细胞分类计数结果，白细胞散点图中散点稀少，仪器显示流式细胞池部分堵塞。
2.4.2 故障分析与处理
由于血样抗凝不完全，使小凝块堵塞流式细胞池。经多次执行清洗流式细胞池程序，仍然不能清通。处理方法：先观察仪器分析血样时混匀池中血样和分类试剂添加情况。若正常，说明流式细胞池堵塞。分别脱开流式细胞池出入口，用软管连接流式细胞池出口，注射器注入蒸馏水反冲。因为流式细胞池孔径微小，在流式细胞池入口连续有小水滴流出，表明流式细胞池已经疏通，可正常使用。
2.5 故障五
白细胞计数池内壁污染或血红蛋白灯老化。
2.5.1 故障现象
仪器显示血红蛋白电压超出范围。多次执行血红蛋白灯电压调整程序，不能恢复正常。
2.5.2 故障分析与处理
血红蛋白电压超出范围后，执行血红蛋白灯电压调整程序，一般都能恢复正常。若不能恢复，多为白细胞计数池内壁严重污染或血红蛋白灯老化。处理方法：首先观察白细胞计数池血红蛋白测量窗内壁是否有纤维蛋白丝黏附，若有，则执行关机程序让清洗剂浸泡30 min，然后再执行开机程序和血红蛋白灯电压调整程序。若仍然不能排除故障，则调整血红蛋白灯和血红蛋白感应器位置，使其与白细胞计数池血红蛋白测量窗中心对齐，再执行血红蛋白灯电压调整程序;若无效，则表示血红蛋白灯老化，必须更换。
2.6 故障六
红细胞计数池外电极连接线断裂。
2.6.1 故障现象
仪器执行开机程序显示本底升高。每个样本红细胞和血小板计数结果都升高，而平均红细胞体积和平均血小板体积都降低。
2.6.2 故障分析与处理
电极在使用过程中，由于连接线密闭不严遭到液体腐蚀，出现断裂，导致小孔外电极开路。计数红细胞和血小板时受静电干扰而结果升高。处理方法：用万用表测量确认连接线断裂。由于电极连接线封装在红细胞计数池外壁中，要更换电极则须先更换计数池，若不想更换计数池，可用导线直接连接外电极，从计数池上部开口引出，再连接接线柱，经试验，结果满意。
2.7 故障七
第20号压管阀断裂。
2.7.1 故障现象
仪器不显示故障信息，质控和血样本计数结果都稍偏低。同一样本重复计数以及同一质控品日间测试，结果都呈进行性下降。
2.7.2 故障分析与处理
压管阀是塑料元件，由气压控制其动作，长期使用后老化，出现断裂，使阀动作失效，一般不易观觉。第20号压管阀动作时开通连接自动吸样针冲洗管，使管中残留冲洗液排空。而当第20号压管阀断裂开通无效时，残留的冲洗液在自动吸样针穿刺入样本管后会被吸入样本管，样本被稀释，使结果降低。处理方法：更换压管阀。
3 小结
HMX血细胞分析仪是全自动免维护仪器，但每日工作完成后，应执行关机程序并保持30 min以上，使仪器管路浸泡清洗。日常工作中经常观察是否有漏气、漏水现象。对长期受压变形的管道及时移位或更换，可有效降低日常故障发生率。
参考文献
关键词 教学设计 教学实践 细胞呼吸 生物学教学
中图分类号 G633.91 文献标识码 B
1 教材分析与教学策略
“细胞呼吸原理的应用”涉及对细胞呼吸原理的理解，在学生学习掌握细胞呼吸过程、理解呼吸原理的基础上，展示细胞呼吸原理在生产实践中的应用。教材中通过“放眼社会——细胞呼吸和发酵技术”一段内容，将细胞呼吸和现代生物技术结合起来，通过对农业中一些生产实践措施的学习，使学生懂得细胞呼吸在农业生产中应用的重要性，在粮食、蔬菜、水果贮藏、环境保护等方面的重要性，实现了科学、技术、社会的有机统一。
教育过程就是让学生在知识、能力、情感、态度与价值观等层次上得到综合全面的发展，就知识层面上讲，不能让学生仅成为知识的接受“桶”，更重要的是让学生获得学习知识的方法策略，使学生能够主动地、不断地更新知识，实现知识层面上的与时俱进；同时在能力培养上也应加强学生获取知识和应用知识的能力。教学这部分内容时教师可充分发挥学生学习的主体性地位，引导学生通过上网查阅、检索报刊杂志、社会实践等途径收集相关信息，通过课堂交流、讨论学习，教师与学生的合作总结，达到培养学生自主性学习的目的，并为将来的终身学习打下基础，从而更好地实现新课标要求。
2 教学目标
2．1 知识目标
说明细胞呼吸的原理和意义，了解其在生产和生活中的应用（通过实验，探讨酵母菌细胞的呼吸方式）。
2．2 能力目标
通过将细胞呼吸原理应用于生产生活实践的学习，落实科学、技术、社会相互关系的教育目标，培养学生收集信息、处理信息的能力，培养学生发散思维能力和自主学习知识的能力；通过交流，培养学生的表达交流能力，提高学生应用所学知识解决实际问题的能力。
2．3 情感、态度与价值观目标
通过设计相应的活动，让学生去体验、培养，激发兴趣，引起他们对社会、科学、环境、生活等问题的关注。
3 教学重点与难点
3．1 重点
细胞呼吸原理的应用。
3．2 难点
对现代发酵技术的理解。
4 教学过程设计
课前，教师准备好多媒体课件，准备一瓶制好的酒酿，几天前分发给学生小组酒酿药，让学生请教家长或其他人，学习制作酒酿，探讨酵母菌在酿酒中的细胞呼吸方式，布置学生查阅细胞呼吸原理应用的相关知识，准备在课堂上进行交流讨论学习。
4．1 创设教学情景，激发学生学习兴趣
上课铃响，师生互行礼。教师：平时我们可能都吃过哈密瓜，但你们可能没有思考过哈密瓜为何这么甜？有哪位同学能解释吗？学生们由于学过了光合作用和细胞呼吸相关知识，课前又有了一定的准备，纷纷举手发言回答：有的说与光合作用有关，有的说与细胞呼吸有关，有的说与光合作用和细胞呼吸都有关系，还有的说与气温、日照的长短也有关系。对于学生们的不同回答，教师给予赞许的眼神，对他们的回答做出肯定或解释，指出哈密瓜为何这么甜是由于出产地新疆独特的气候条件决定的，新疆日照长，光合作用时间长，由于昼夜温差大，细胞呼吸消耗有机物少，糖分积累多而引起。
通过这一特定事例结合学生的生活经验展开，将有利于激发学生的学习兴趣，激活学生的科学思维，进而提高课堂教学的有效性。
4．2 细胞呼吸原理的应用
教师：细胞呼吸进行的场所在哪里？影响细胞呼吸的因素有哪些？（学生思考后回答，场所为细胞质基质和线粒体，影响因素有温度、氧气、CO2浓度等。）细胞呼吸对生物体来说有何意义呢？（学生思考回答：细胞呼吸为生物体生命活动提供能量，为生物体的各种有机物之间的相互转化提供重要的中间产物。）
教师指出：细胞呼吸的原理在生产实践中有广泛的应用，如人们日常生活中每逢婚丧喜事，都要摆酒席，无酒不成席，你们知道酒是怎么来的吗？酒与酒酿一样吗？请同学展示自己制作的酒酿。教师再让学生品尝自已制好或买来的酒酿（必须是安全的）。然后让学生介绍自己是如何制作的？（学生品尝后讨论交流，有的与自己制作的对比，说他的酒酿变黄，有的说他的酒酿有点酸、不甜，有的有浓密的酒香味且很甜，学生纷纷提出质疑，为什么会产生不同的结果呢？通过制作，培养了学生的动手实践能力，通过交流，培养了学生质疑、发散思维的能力、社会交往与语言表达交流的能力，与其他同学合作学习的能力，同时也能引领学生进一步去探究，探究始于质疑。）
师总结：听了同学们的介绍，我们明白了酒酿的大致制作过程，制作是否成功与糯米饭的蒸制、洒水拌药、控温保温等措施有密切关系。其作用的微生物主要是酵母菌，它是一种兼性厌氧型微生物，在适宜条件下酵母菌前期主要进行有氧呼吸，大量增殖，通过代谢产生二氧化碳和水等成分，由于水的产生，造成缺氧环境，使酵母菌转入以厌氧呼吸为主，产生酒精和二氧化碳。
师：其实酒和酒酿是有区别的，酒酿是基质（这里指糯米饭）在微生物（主要是酵母菌）的作用下（发酵）而形成的，主要由酒渣、糖、乙醇、水等物质组成。而酒是通过上述发酵过程作用到一定时期，再通过一定方法（如蒸馏）提取出主要成分乙醇兑制而成的，它主要是由乙醇和水组成。酒和酒酿的制作都经历了一个发酵过程。
教师用多媒体展示工业用发酵罐示意图，指导学生阅读教材第71页“细胞呼吸与发酵技术”。
教师指出，微生物或其他生物的细胞在有氧或无氧条件下繁殖或积累其代谢产物的过程都称为发酵。现代发酵技术将微生物学、生物化学和化学工程学等的基本原理有机结合，在发酵罐中充分利用微生物或其他生物的代谢活动来生产各种有用的物质。
投影：利用麦芽、葡萄、粮食和酵母菌以及发酵罐等，在控制通气的条件下，可以生产各种酒；利用淀粉、醋酸杆菌或谷氨酸棒状杆菌以及发酵罐，在控制通气的条件下，可以生产食醋或味精。
此外，应用发酵技术生产青霉素、链霉素、红霉素等数百种抗生素，此外结合基因工程技术，利用发酵技术可大量生产干扰素、胰岛素、生长激素等药物，生产预防疟疾、狂犬病、脊髓灰质炎等的疫苗，还生产酱油、单细胞蛋白等发酵产品。
（有关发酵工程技术，这里不多强调，以后继续学习时，教师可要求学生课后通过互联网进一步查阅相关资料。）
师：上述生产过程中，应用了细胞呼吸原理的哪些方面呢？
学生思考讨论，说法不一。最后，教师指出需氧型微生物和厌氧型微生物对氧的需求不同；不同微生物的代谢产物也有所不同；有些微生物在有氧条件下的呼吸产物与无氧条件下的呼吸产物也不同。
教师展示多媒体课件图片：
材料一：包扎伤口时，需用透气的消毒纱布或松软的创可贴等敷料。
材料二：花盆里的土壤板结后，空气不足，会影响根系生长，需要及时松土透气。
材料三：稻田也需要定期排水，否则水稻幼根会因缺氧而变黑、腐烂。
讨论：分析上述材料，说明上述现象又是如何利用细胞呼吸原理的呢？
学生经过讨论后纷纷发言，教师与学生共同总结：
材料一：用透气的消毒纱布或松软的创可贴等敷料，主要是为了防止厌氧性微生物如破伤风杆菌的大量繁殖而引起破伤风。因为在通气的条件下，伤口处有足够的氧气，可抑制厌氧型病原微生物的繁殖。
材料二与材料三：在有氧条件下，根细胞可进行需氧呼吸，保证根细胞进行各项生命活动的能量需求。植物在缺氧条件下进行无氧呼吸产生酒精，对根细胞有毒害作用。
师问：有人认为，食物只要存放在冰箱中就不会变质了，你对这一看法有什么不同意见？
由于这一问题都非常贴近学生的生活，学生因此很感兴趣，都纷纷发表自已的看法，绝大多数同学都认为依然会变质。
师问：那是什么原因造成的呢？
学生思索，讨论交流，这有助于培养学生的发散思维能力，合作学习的能力。
教师与学生一起总结：冰箱中贮存食品可使食品贮存时间稍长些而不变质，但不可能一直不变质，由于有的微生物在零下低温的环境中依然能生存，因此冰箱中即使在冷冻条件下，也存在微生物的活动。低温只不过降低了微生物细胞内酶的活性，使细胞呼吸减弱，代谢活动慢，但仍旧能进行细胞呼吸，分解有机物，产生代谢产物，从而使食品腐败变质。
师：对于一些熟食品，除了保存在冰箱中，还可采用哪些方法来延长保质期？与细胞呼吸原理有何关系？
生：灭菌、除氧（真空包装）、低温、干燥等；消除或降低微生物的细胞呼吸。
师：除了上述事例外，请同学们再举例说明生产生活中还有哪些应用细胞呼吸原理的事例？
学生们积极思索。
生1：水稻生产中的适时露田和晒田等措施的实质就是为了改善土壤通气条件以增强根系的细胞呼吸。
师：对，通过上述措施，可促进根系呼吸，为植物主动吸收矿质营养提供更多的能量，同时也为细胞的分裂、植株的生长和发育等提供能量和各种原料，有助于水稻长得根深叶茂。
生2：粮食贮藏、果蔬保鲜贮藏时，要注意降低温度和保持干燥，以降低细胞呼吸，减少有机物的消耗，延长保存期限。
师：对，但同学们思考一下，该生说法上有哪些不妥的地方呢？
学生们积极思索，有人指出，果蔬保鲜贮存时，还应避免水分过多的散失，以免降低品质，农贸市面上水果蔬菜批发商批发出售的水果蔬菜往往都用塑料袋包裹，目的是为了减少水分的损失，使品质不致下降。
师：对，其中还有什么奥秘呢？
生：不解。
师：除了上述目的外，我们知道，细胞呼吸会产生CO2，高浓度的CO2会抑制细胞呼吸，从而减少有机物的消耗。如：果农和菜农将采摘的水果和蔬菜放在地窖中，可较长时间保存，是由于地窖中透气性差，由于水果、蔬菜的细胞呼吸，窖内CO2浓度增大，O2浓度下降，致使细胞呼吸受到抑制，代谢速率降低，有机物的分解速率降低，保存的时间可长些。
师：为了保存鲜果，也可通过充氮、降温等措施抑制细胞呼吸。请同学们举例说说看。
学生讨论，翻阅课文资料等参考书籍。
生：如苹果、梨、柑、橘等果实在0~1℃时可贮藏几个月不坏；荔枝一般只能短期保鲜，但采用低温速冻等方法可保鲜6~8个月。
师：投影，展示一幅当地夏末拍摄的茄子照片，上有许多黄化叶，大部叶子被虫咬食几乎只剩下叶脉，如何利用细胞呼吸原理采取相应措施，使茄子复苏，争取秋季多结果？
在教师的引导下，学生讨论得出：采取中耕松土施肥、摘除老叶、黄化叶、过度虫伤叶等措施。
师：其实，细胞呼吸原理的应用，还有很多例子，如盆栽花卉在晚上放在卧室是否科学？外出早锻炼是选择日出前还是日出后更为科学？……
4．3 归纳小结
通过本节内容的学习，使学生更进一步加深了对细胞呼吸原理的理解，使他们对细胞呼吸原理在生产、生活等方面的应用有了一个更为明确具体的认识，它与人们的生活息息相关，使他们懂得应该认真学习生物科学知识，并将所学知识应用到生产实践活动中，更好地服务于社会。
通过总结，让学生明确科学技术就是生产力，激发学生学习生物科学的热情和兴趣，体现出新课程标准的理念，使新课程三维目标真正落到实处。
4．4 布置作业
为了拓宽知识面，教师布置学生课余时间走访污水处理厂，利用所学细胞呼吸的知识原理以及其他相关知识原理，对工厂排放的有机污水及城镇居民排放的生活污水是如何处理的，你能否提出一些其他的好建议？以此写一篇小论文。
5 教学反思
1、白细胞五分类全自动血细胞分析仪，检测速度CBC/Diff ≥59 标本/小时。
2、测定参数包括细胞计数，细胞分类，幼稚细胞，异型淋巴细胞等，不少于26项, 其中研究用参数不得少于6项。
★
3、血小板检测要求有脉冲编辑、重叠校正、两次计数等至少3项技术确保检测准确
4、要有嗜碱细胞的检测通道
★
5、能用末梢全血检测白细胞五项分类，所需试剂种类为5种
6、CBC+Diff分析全血进样量要求：≤53L
7、有废液报警功能
★
8、要求有原厂生产的校准品和质控品，要求校准品有溯源性，并提供溯源性证明文件。★
9、免费提供的实验室质量保证活动（IQAP），达到实验室与国际接轨。★
10、CAP认可的免日常维护，操作简便。★
11、精密度要求达到 WBC RBC Hgb HCT <2% <2%(10X103细胞/µl)(5X106细胞µl)
<1%
(15g/dl)
<2% <5%(45%)(300X103细胞/µl)PLT
★
12、厂家在河南省有独立注册的服务机构（提供营业执照）
★
13、中标单位须在中标通知书下发三日内，携带中标通知书与厂家授权书（或代理商授权书）与用户签订合同。肺功能检查仪检测(便携式）
一、检测项目：
用力肺活量(FVC)、肺年龄、静息肺活量(SVC)、最大通气量(MVV)、支气管扩张试验（BD）、支气管激发试验(PC20)
二、测量指标：
1、FVC(用力肺活量）：FVC、PEF、FEV0.75、FEV1、FEV3、FEV6、FEV0.75/FVC、FEV1/FVC、FEV3/FVC、FEV6/FVC、FEV0.75/FEV6、FEV1/FEV6、EVE、LUNG AGE
2、流速容积曲线：PIE、FIVC、FIV1、FIV1/FIVC
3、呼吸峰流速：PEFT、MEF75、MEF50、MEF25、FEF75、FEF50、FEF25、MMEF、FET25、FET50、MIF75（FIF75)、MIF50(FIF50)、MIF25(FIF25)、FEF50/FIF50（R50）
4、肺龄、肺器官年龄损害程度
5、VC/SVC(静息肺活量）：VC/SVC、ERV、IRV、TV、IC、IVC
6、MVV（最大肺通气量）：MVV、MVVF、MRF
7、支气管扩张试验（BD）：VC/SVC，FVC，MVV
8、支气管激发试验：PC20
三、技术性能/指标：
★
1、全中文操作界面及可选不同格式的打印报告，方便各级医院，特别是基层医护人员操作使用
★
2、采用可调彩色6英寸触摸屏，薄膜按键方便选择、快捷操作
3、最新的LILLY型压差式双向流速传感器，测试精确度高重复性好
★
4、传感器采用航天纳米UM薄膜过滤技术，耐用且防止交叉感染，方便更换、清洗、消毒。★
5、内置自动BTPS传感器，实时调整环境数据，实时校对传感器有效保障测试数据的精准度
★
6、专门设有特殊人群测试指导卡通动画，提高老龄及幼龄受测者的测试质量。
★
7、专门设有激发试验，扩张试验规程菜单，按不同测试要求自行编辑药物名称和剂量，检查结果自动计算，结果用不同颜色曲线标识，清晰明了，无需额外高额购买激发升级软件，检测质量稳定，性价比高，准确安全
★
8、全面的肺通气功能检查和一口气用力肺活量检查可供选择，医护人员可因临床检查或大规模体检的要求相互切换，提高工作效率。更适合体检中心与疾控中心 ★
9、专门设有由全球肺创仪肺功能预计值公式专责委员郑劲平的预计值公式。适合全球所有年龄，多民族男女。可根据测试者年龄自动采用成人或儿童预计值公式，统计数据广泛、准确、权威。
★
10、自带高速热敏打印机和USB输出端口，可通过仪器热敏打印图文丰富的报告，或通过USB输出端口连接计算机打印A4纸报告，中文报告显示，随意编辑所需的项目参数
11、测试结果自动分析并选择最佳结果，储存空间300份完整报告，并储存电脑数据库 ★
12、内置蓄电池，可交流、直流两用。可便携使用，方便医生临床，外出体检使用。★
13、可升级心、肺功能检测仪
14、流速：16L/WITH
精度：±5%或50ml/s（更大值适用）
15、容积范围：0.025L-8L
容量精确度：±3%或50毫升（更大值适用）
16、产品通过CE认证，中国与美国FDA认证和ISO国际认证
★
一、开关电源的原理和发展趋势
第一节
高频开关电源电路原理
高频开关电源由以下几个部分组成：
图12-1
(一)主电路
从交流电网输入、直流输出的全过程，包括：
1、输入滤波器：其作用是将电网存在的杂波过滤，同时也阻碍本机产生的杂波反馈到公共电网。
2、整流与滤波：将电网交流电源直接整流为较平滑的直流电，以供下一级变换。
3、逆变：将整流后的直流电变为高频交流电，这是高频开关电源的核心部分，频率越高，体积、重量与输出功率之比越小。
4、输出整流与滤波：根据负载需要，提供稳定可靠的直流电源。
(二)控制电路
一方面从输出端取样，经与设定标准进行比较，然后去控制逆变器，改变其频率或脉宽，达到输出稳定，另一方面，根据测试电路提供的数据，经保护电路鉴别，提供控制电路对整机进行各种保护措施。
(三)检测电路
除了提供保护电路中正在运行中各种参数外，还提供各种显示仪表数据。
(四)辅助电源
提供所有单一电路的不同要求电源。
第二节
开关控制稳压原理
图12-2 开关K以一定的时间间隔重复地接通和断开，在开关K接通时，输入电源E通过开关K和滤波电路提供给负载RL，在整个开关接通期间，电源E向负载提供能量；当开关K断开时，输入电源E便中断了能量的提供。可见，输入电源向负载提供能量是断续的，为使负载能得到连续的能量提供，开关稳压电源必须要有一套储能装置，在开关接通时将一部份能量储存起来，在开关断开时，向负载释放。图中，由电感L、电容C2和二极管D组成的电路，就具有这种功能。电感L用以储存能量，在开关断开时，储存在电感L中的能量通过二极管D释放给负载，使负载得到连续而稳定的能量，因二极管D使负载电流连续不断，所以称为续流二极管。在AB间的电压平均值EAB可用下式表示：
EAB=TON/T*E
式中TON为开关每次接通的时间，T为开关通断的工作周期（即开关接通时间TON和关断时间TOFF之和）。
由式可知，改变开关接通时间和工作周期的比例，AB间电压的平均值也随之改变，因此，随着负载及输入电源电压的变化自动调整TON和T的比例便能使输出电压V0维持不变。改变接通时间TON和工作周期比例亦即改变脉冲的占空比，这种方法称为“时间比率控制”（Time Ratio Control,缩写为TRC）。
按TRC控制原理，有三种方式：
(一)、脉冲宽度调制（Pulse Width Modulation,缩写为PWM）
开关周期恒定，通过改变脉冲宽度来改变占空比的方式。
(二)、脉冲频率调制（Pulse Frequency Modulation,缩写为PFM）
导通脉冲宽度恒定，通过改变开关工作频率来改变占空比的方式。
(三)混合调制
导通脉冲宽度和开关工作频率均不固定，彼此都能改变的方式，它是以上二种方式的混合。
第三节开关电源的发展和趋势
1955年美国罗耶（GH.Roger）发明的自激振荡推挽晶体管单变压器直流变换器，是实现高频转换控制电路的开端，1957年美国查赛（Jen Sen）发明了自激式推挽双变压器，１９６４年美国科学家们提出取消工频变压器的串联开关电源的设想，这对电源向体积和重量的下降获得了一条根本的途径。到了１９６９年由于大功率硅晶体管的耐压提高，二极管反向恢复时间的缩短等元器件改善，终于做成了２５千赫的开关电源。
目前，开关电源以小型、轻量和高效率的特点被广泛应用于以电子计算机为主导的各种终端设备、通信设备等几乎所有的电子设备，是当今电子信息产业飞速发展不可缺少的一种电源方式。目前市场上出售的开关电源中采用双极性晶体管制成的１００kHz、用ＭＯＳ－ＦＥＴ制成的５００kHz电源，虽已实用化，但其频率有待进一步提高。要提高开关频率，就要减少开关损耗，而要减少开关损耗，就需要有高速开关元器件。然而，开关速度提高后，会受电路中分布电感和电容或二极管中存储电荷的影响而产生浪涌或噪声。这样，不仅会影响周围电子设备，还会大大降低电源本身的可靠性。其中，为防止随开关启-闭所发生的电压浪涌，可采用R-C或L-C缓冲器，而对由二极管存储电荷所致的电流浪涌可采用非晶态等磁芯制成的磁缓冲器。不过，对1MHz以上的高频，要采用谐振电路，以使开关上的电压或通过开关的电流呈正弦波，这样既可减少开关损耗，同时也可控制浪涌的发生。这种开关方式称为谐振式开关。目前对这种开关电源的研究很活跃，因为采用这种方式不需要大幅度提高开关速度就可以在理论上把开关损耗降到零，而且噪声也小，可望成为开关电源高频化的一种主要方式。当前，世界上许多国家都在致力于数兆Hz的变换器的实用化研究。
二、开关电源与电流检测电路
1、功率开关电路的电路拓扑分为电流模式控制和电压模式控制。电流模式控制具有动态反应快、补偿电路简化、增益带宽大、输出电感小、易于均流等优点，因而取得越来越广泛的应用。而在电流模式的控制电路中，需要准确、高效地测量电流值，故电流检测电路的实现就成为一个重要的问题。
本节介绍了电流检测电路的实现方法，并探讨在电流检测中常遇见的电流互感器饱和、副边电流下垂的问题，最后用实验结果分析了升压电路中电流检测方法。
2、电流检测电路的实现
在电流环的控制电路中，电流放大器通常选择较大的增益，其好处是可以选择一个较小的电阻来获得足够的检测电压，而检测电阻小损耗也小。
电流检测电路的实现方法主要有两类：电阻检测（resistivesensing）和电流互感器（currentsensetransformer）检测。
电阻检测有两种，如图12-
3、图12-4所示。
图12-3
图12-4
当使用图1直接检测开关管的电流时还必须在检测电阻RS旁并联一个小RC滤波电路，如图12-5所示。因为当开关管断开时集电极电容放电，在电流检测电阻上产生瞬态电流尖峰，此尖峰的脉宽和幅值常足以使电流放大器锁定，从而使PWM电路出错。
但是在实际电路设计时，特别在设计大功率、大电流电路时采用电阻检测的方法并不理想，因为检测电阻损耗大，达数瓦，甚至十几瓦；而且很难找到几百毫欧或几十毫欧那么小的电阻。
实际上在大功率电路中实用的是电流互感器检测，如图4所示。电流互感器检测在保持良好波形的同时还具有较宽的带宽，电流互感器还提供了电气隔离，并且检测电流小损耗也小，检测电阻可选用稍大的值，如一二十欧的电阻。电流互感器将整个瞬态电流，包括直流分量耦合到副边的检测电阻上进行测量，但同时也要求电流脉冲每次过零时磁芯能正常复位，尤其在平均电流模式控制中，电流互感器检测更加适用，因为平均电流模式控制中被检测的脉冲电流在每个开关周期中都回零。
图12-5
为了使电流互感器完全地磁复位，就需要给磁芯提供大小相等方向相反的伏秒积。在多数控制电路拓扑中，电流过零时占空比接近100％，所以电流过零时磁复位时间在开关周期中只占很小的比例。要在很短的时间内复位磁芯，常需在电流互感器上加一个很大的反向偏压，所以在设计电流互感器电路时应使用高耐压的二极管耦合在电流互感器副边和检测电阻之间。
3、防止电流检测电路饱和的方法
如果电流互感器的磁芯不能复位，将导致磁芯饱和。电流互感器饱和是一个很严重的问题，首先是不能正确测量电流值，从而不能进行有效的电流控制；其次使电流误差放大器总是“认为”电流值小于设定值，这将使电流误差放大器过补偿，导致电流波形失真。
电流互感器检测最适合应用在对称的电路，如推挽电路、全桥电路中。对于单端电路，特别是升压电路，会产生一些我们必须关注的问题。对于升压电路，电感电流就是输入电流，那么在电流连续工作方式时，不管充电还是放电，电感电流总是大于零，即在直流值上叠加一个充放电的波形。因此电流互感器不能用于直接测量升压电路的输入电流，因为电感电流不能回零而使直流值“丢失”了；并且电流互感器因不能磁复位而饱和，从而失去过流保护功能，输出产生过压等。在降压电路中也存在同样的问题，电流互感器不能用于直接测量输出电流。
图12-6 解决这个问题的方法是用两个电流互感器分别测量开关电流和二极管电流，如图12-6所示实际的电感电流是这两个电流的合成，这样每个电流互感器就有足够的时间来复位了。但要注意这两个电流互感器的匝比应一样，以保持检测电阻RS上的电流对称。
功率因数校正电路一般采用升压电路，用双互感器检测，但在线电流过零时，电流互感器也特别容易饱和。因为此时的占空比约为100％，从而容易造成磁芯没有足够的时间复位。为此可以在外电路中采取一些措施来防止电流互感器饱和。如采用电流放大器输出箝位来限制其输出电压，并进一步限制占空比小于100％，电路如图12-7所示。设定箝位电压的过程很简单，在刚起动时电流放大器箝位在一个相对较低的值（大约4V），系统开始工作，但过零误差很大；一旦系统正常工作后，箝位电压将升高，电流互感器接近饱和，箝位电压最多升到6.5V（低电压大负载时）并且电流的THD在可接受的范围内（<10％），以限制最大占空比。设定的箝位电压不能太低，否则将使电流过零畸变大。
如果需要更好的特性或需要运行在宽范围，可以用图12-8的电路，这个电路将根据线电压反向调节箝位电压。
图12-7
图12-8
每个电流脉冲都使磁芯复位以克服磁芯饱和的方法，除了改进外电路还可以改进电流检测电路。一般利用电流检测电路自复位，即利用磁芯中存储的能量和电流互感器的开路阻抗在短时间内产生足够的伏秒积来复位。但当占空比大于50％，特别是接近100％时，可能没有足够的时间来使磁芯复位，这时除电流放大器输出箝位外，还可以采用强制复位电路。
图12-9 强制磁芯复位的电路很多，如使用附加线圈或中心抽头的线圈，但最简单的方法是采用图12-
9、图12-10所示电路来强制磁芯复位。脉冲电流来时强制复位电路和自复位电路的工作没有差别，当复位时从VCC通过Rr来的电流加入磁芯复位电流，寄生电容快速充电，副边电压反向，伏秒积增加，磁芯复位速度加快。如果需要得到负的检测电压而又不想用负电压强制复位时则用图12-10所示电路。
对于电流检测电路磁芯复位还要考虑的一个因素是副边线圈的漏电感和分布电容。为了减小损耗，一般选择匝比较大的电流互感器，但匝比大，副边线圈的漏电感和分布电容大。漏电感影响电流上升和下降的时间，分布电容则影响电流互感器的带宽。并且在磁芯复位时，副边电感和分布电容谐振，如果分布电容大，则谐振频率低，周期长，那么在占空比大、磁芯复位时间短时，副边线圈就没有足够的时间来释放能量使磁芯复位了。所以应尽量不选择匝比太大的电流互感器。
图12-10
电流互感器的下垂效应
电流互感器副边的脉冲电流要减去电流互感器绕组上的脉冲电压在副边产生的一个从零开始随时间线性增长的磁化电流，才等于检测电阻上的电流，该磁化电流的大小为：
Idroop=nUs / Ls·△t（1）
式中：US——副边电压
LS——副边电感
n——Ns/Np
Δt——电流波脉宽
刚开始时副边电流是原边电流的n倍，但随时间增加，磁化电流加大，副边电流下降得很厉害，这就是电流互感器的下垂效应。所以为了得到较大的副边检测电压不应完全靠增加检测电阻Rs的值来实现，也要靠减小副边下垂效应来增加副边的脉冲电流，同时Rs的值大也将使磁芯复位困难。
如式（1）所示，副边电感值越大，下垂效应越小；匝比越小，下垂效应也越小，但最好不要靠减少副边的匝数来减小匝比，因为这将使副边的电感减小了，应在空间允许的情况下增加原边匝数来减小匝比。
5、实验结果
在功率因数校正电路中，使用如图12-6所示的检测电路，并采用如上所述防磁芯饱和及减小下垂效应的措施，在电流互感器的变比为1∶50，副边电感为30mH,取副边电压为2V,电流波脉宽为5μs时,得：
相对于十多安培的检测电流，该电流下降效应并不明显。
6、结语
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电动机也称为“马达”，把电能转变为机械能的机器。利用电动机可以把发电机所产生的大量电能，应用到生产事业中去。构造和发电机基本上一样，原理却正好相反，电动机是通电于转子线圈以引起运动，而发电机则是借转子在磁场中之运动产生电流。为了获得强大的磁场起见，不论电动机还是发电机，都以使用电磁铁为宜。电动机因输入的电流不同，可分为直流电动机与交流电动机：
1、直流电动机——用直流电流来转动的电动机叫直流电动机。因磁场电路与电枢电路连结之方式不同，又可分为串激电动机、分激电动机、复激电动机。
2、交流电动机——用交流电流来转动的电动机叫交流电动机。种类较多，主要有：
（1）整流电动机——使串激直流发电机，作交流电动机用，即成此种电动机，因交流电在磁场与电枢电路中，同时转向，故力偶矩之方向恒保持不变，该机乃转动不停。此种电动机因兼可使用交、直流，故又称“通用电动机”。吸尘器、缝纫机及其他家用电器等多用此种电动机。
（2）同步电动机——电枢自一极转至次一极，恰与通入电流之转向同周期的电动机。此种电动机不能自己开动，必须用另一电动机或特殊辅助绕线使到达适当的频率后，始可接通交流电。倘若负载改变而使转速改变时，转速即与交流电频率不合，足使其步调紊乱，趋于停止或引起损坏。因限制多，故应用不广。
（3）感应电动机——置转子于转动磁场中，因涡电流的作用，使转子转动的装置。转动磁场并不是用机械方法造成的，而是以交流电通于数对电磁铁中，使其磁极性质循环改变，可看作为转动磁场。通常多采用三相感应电动机（具有三对磁极）。直流电动机的运动恰与直流发电机相反，在发电机里，感生电流是由感生电动势形成的，所以它们是同方向的。在电动机里电流是由外电源供给的感生电动势的方向和电枢电流I方向相反。
【关键词】国际;准则;血细胞分析仪;血涂片;复审;评估
Evaluation of the applicability of the international criteria for blood
smears review on the SysmexXE-2100 hematology analyzer.
Wu Qi-kang,Li Lan-fang,Tan ZI-yi,Wang Yan-ting,Luo Xiao-qun
（ Department of Clinical Laboratory, Foshan No.1 People’s Hospital,Foshan 528000）
【Abstract】Object:To evaluate the applicability of the international criteria for blood smear review on the SysmexXE-2100 hematology analyzer.Methods: to detect 200 blood samples by hematology analyzer Sysmex-XE2100 and divide them into two groups,sieving group and sieved group according to the criteria of international boold smear redetection,And then blood smears were reviewed with optical microscope. Results: 200 cases of the samples examined, 36 cases of true positive (18%), true negative 128 cases (64%); 32 cases of false positive (16%), four cases of false-negative (2%). 82% accuracy rate.Conclusion: Performance of microscopic observa-tion following analyzer detection according to the international criteria for blood smear review presented good efficiency, whichwould be improved if clinical condition could also be considered.
【Key words】International; Criteria; Hematology analyzer; Blood smear; Review; Evaluation
【中圖分类号】R-331
【文献标识码】B
【文章编号】1007-8231（2011）10-1807-02顺应社会科学技术的发展，近年来血细胞分析的工作量日益增大，只有全面使用先进的血细胞分析仪才能提高工作效率，节省人力资源。但我们也不能过分依赖血细胞分析仪的检测结果，因为血细胞分析仪的缺陷是未能对血液中异常细胞进行全方位识别，只能作简单提示。例如异淋、幼稚细胞、桨细胞、巨核细胞等。但如果每份标本都进行涂片势必会降低检验科的工作能力，由于劳动强度增加会带来费用的提高。由此可以看出血细胞分析仪检测完用国际血涂片进行复审是十分重要的。经过3年的研究，2005年颁发出了国际血液复审准则，以下将主要阐述如何根据国际血液复审准则对SysnexXE-2100血细胞分析仪的相适程度进行评估。
1材料及方法
1.1分析对象：本研究选取我院10例就诊患者抗凝静脉血液样本2.0mL，经过混匀充分后再存放在室温内。在经过采血后2小时内对样本测试完成，并且将每份样本做成2张血涂片。
1.2仪器与试剂：一台来自日本东亚公司的SysnexXE-2100血细胞分析仪，以及与之配套的试剂和全血质控，生物显微镜，首先对血细胞分析仪用配套校准品进行核准，将样本测定前作为全血质控品，这样可以确保仪器始终处在正常情况。
2实验方法
2.1检测 采用血细胞分析仪检测：（1）用SysnexXE-2100血细胞分析仪对全血细胞进行分析，在2小时内完成这些样本的测定，在针对通过血液分析议测定出来的超过国际血涂片复审准则的参数要进行重新测定，这样可以去除因为仪器原因而引起的偶然因素产生的影响，主要包括堵塞，不明原因的干扰。（2）将已经通过国际血涂片复审准则合格的样本分类，主要是依据范围进行分析，在这一准则范围里的称为筛组，而在这一准则范围外部的称为过筛组。
2.2涂片检测 ：根据《全国临床检验操作规程》［2]需要制作血涂片时，先进行瑞氏染色和显微镜阅片的制作，这种操作必须是需要有10年以上的检验科血液室工经历，并且还能熟练操作血液形态学的实验的技术人员。进行这种操作的主要步骤：首先，将血涂片放在低倍显微镜下观察，要选取“体尾”交界处的红细胞分布比较均匀的观察范围，其次，将100个白细胞进行分类计数，并且在选定的观察范围内记载下白细胞和红细胞等各种形态以及特殊发现。最后针对种类细胞的组成率和形态的描述进行记录。③形态学 1）、RBC明显大小不均(大小相差1倍以上) ，染色质异常的RBC>30%)；2）、巨大PLT>15%；3）、可见PLT聚集；4）、有Dohle小体的细胞>10%；5）、有中毒颗粒的中性粒细胞>10%；6）、空泡变性粒细胞>10%；7）、原始/幼稚细胞≥1%；8）、早幼/中幼粒细胞≥1%；9）、晚幼粒细胞>2%；10）、异型淋巴细胞>5%；11）、NRBC≥1%；12）、浆细胞≥1%。显微镜镜检结果符合上述12条中任何一条即为阳性。
2.3分析方法 ：记录仪器检测各项数据及报警类别,做好符合国际血涂片复审准则条款号的阳性标识;记录涂片镜检所得到的各项数据及形态特征,以文献中标准判别是否为阳性血涂片［1]。将仪器法血细胞分析和涂片镜检结果进行比较判别,如果仪器检测结果在筛组范围内,同时又被判为阳性血涂片,此样本属真阳性;如果仪器检测结果在过筛组范围内,同时又非阳性血涂片,此样本属真阴性;如果仪器检测结果在筛组范围内,但为非阳性血涂片,此样本属假阳性;如果器检测结果过筛组范围内,但为阳性血涂片,此样本属假阴性。
3结果
3.1 机测结果 ：200例样品经机测后其结果按国际血涂片复审准则分成在筛组和过筛组。其中在筛组(检测结果在国际血涂片复审准则范围内者)有68 例 ,占总检测率34 %。过筛组(检测结果在国际血涂片复审准则范围外者)有 132 例 ,占总检测率66 %;在过筛组中有2例在初次机测时超出复检过筛标准 ,经反复机测确认为正常 ,占总检测率 1 %。
3.2 200例样品涂片经人工镜检,以文献中标准判别,真阴性有160例,其中过筛组128例,;筛组32例,;阳性40例,其中在过筛组4例,在筛组36例.所以真阴性率为64%,假阳性率为32%,假阴性率为2%,真阳性率为18%,准确率为82%。
3.3真、假阳性涉及条款分析 在真阳性36例中,同时涉及条款数>2条者有12(33.3%),≥1条者28例(77.7%),最多者可涉及6个条款。而在假阳性38例中,同时涉及条款数为2条者仅4例(11.1%);涉及单一条款的28例,其中涉及5号条
款(首次检测白细胞数<4×109/L者)有8例,涉及35号条款(仪器提示“异淋/原始淋巴”)有9例涉及。
4讨论
虽然血细胞分析已经实现全面自动化，但仍不能完全代替显微镜检查，因血细胞分析仪无法对血液中异常细胞进行全方位识别，只能作简单提示；对血液中的非血细胞成分不能识别；不能有效识别人为原因造成的误差等等。1981年,美国临床实验室标准化委员会制定H20P作为白细胞分类计数的参考方法后,就提出了三分类和二分类血细胞分析仪检测后重新进行涂片镜检的建议,我国也制定了相应指南。上世纪9年代,五分类分析仪得到广泛运用,它是一类具有更多形态学参数、更多提示信号以及融合流式细胞术、自动控制和模式识别等高新技术的仪器。那么用这种仪器检测后是否还需涂片镜检?如何合理明智地结合效率、费用和仪器制定新的准则,优化患者服务程序?许多学者都认为是亟待解决的问题并进行了深入研究［1]［5]。
虽然SysmexXE-2100全自动血细胞分析仪能够满足临床检测大批量样品的需求,还可以为临床提供包括有核红细胞(NRBC),光学法血小板,幼稚型网织红细胞,造血祖细胞等新参数的检测信息。另外SysmexXE-2100血细胞分析仪还配备了两个血小板检测通道,分别用阻抗法和光学法进行检测,当电阻抗法检测RBC/PLT出现异常提示时,可自动切换进行激光形态检测血小板(RET/PLT-O),以准确测定混有大血小板、血小板凝集块、小红细胞、红细胞碎片和白细胞碎片的异常标本的血小板数量%进一步保证了病理状态下血小板检测结果的准确性。［8]但是理想的血液检查应为仪器记数细胞,镜检观察形态［9],血细胞分析仪只能起到过筛作用 ,只有通过镜检才能减少漏检、漏诊和误诊。由于过筛的目的是筛出正常、重点检有异常标本,因此 ,过筛的原则是尽可能不出现假阴性 ,否则就要漏诊。假阳性标本经过复检后即可得到纠正。但如假阳性结果过多 ,复检量太大 ,就达不到过筛的目的 ,浪费人力，笔者依据国际血涂片复审准则，初步评估了国际血涂片复审准则对SysmexXE-2100血细胞分析仪的适用性, 在选取的200例患者中，有36例是真阳性，占18%，有128例是真阴性，占64%，有32例是假阳性，占16%，有4例是假阴性，占2%。准确率为82%。经证实，认为国际血涂片复审准则对SysmexXE-2100血细胞分析仪具有良好的有效性。
参考文献
［1］ Barnes PW, McFadden SL, Machin SJ et al. The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CDC and WBC differential analysis.Lab Hematol,2005,11:83
［2]杨国元.实用血液病手册.第1版.武汉:湖北科學技术出版社,1995,245~270
［3] 胡良平.检验医学科研设计与统计分析.第1版.北京:人民军医出版社,2004,168~16
［4] 李雪宏,张淑贞,黄海燕,等.三分群血细胞分析仪复检过筛标准的建立及应用.检验医学与临床,2008,5(9):513-514
［5] 王昌富,邓明富,艾红梅,等.应用国际血涂片复审准则对XT1800i 血细胞分析仪的评估.华中医学杂志,2008,32(1):7-8
［6] 孙芾,王厚芳,于俊峰等.血细胞显微镜复检标准的制定及临床应用.中华检验医学杂志,2005,28(2):155-157
［7] 孙芾,王厚芳,林宏等.机测后显微镜的标准和应用.江西医学检验,2004,22(4):291-292
［8]. 陈梅,方伟祯,王敏等。SysmexXE-2100全自动血细胞分析仪与显微镜目测法测定白细胞分类结果比较.江西医学检验,2004,22(5):446-447
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