君子兰的移植方法和注意事项（精选4篇）
移栽时的注意事项和栽后管理：
1、君子兰移栽时首先要控制大盆水分，待盆土半干时，将侧芽从母株中分出，伤口涂以草木灰。待伤口无液体渗出时，再上盆栽植，上盆后适宜置于半阴处，保持温度20~25℃条件下管理，一月后可发芽。
2、君子兰移栽后不能浇水过湿，保持盆土干后浇水有利它的根系恢复生长，盆土过湿容易引起烂根，因换盆时根系受伤容易长时间浸水后出现烂根的问题。做到干后浇水才不易烂根。
3、移栽后的20天内不适合晒太阳，要防其脱水死亡，放在室内向阳通风处有利光合作用减少徒长现象，有利君子兰换盆后的恢复生长，一个月后可适当的移出室外晒1-2个小时的早晚太阳。
关键词：激光透明带打孔辅助孵化,激光透明带薄化辅助孵化,冻融胚胎移植
体外受精-胚胎移植是临床较为常见的一种受孕方法[1],其胚胎移植成功率较低[2],原因除了胚胎质量不佳和子宫容受性差以外,也可能与冻融过程中透明带硬化、使得胚胎无法顺利孵出有关[3],因而对于解冻后的胚胎如何实施有效的孵化成为辅助生殖领域的重要研究课题。 目前临床较为常用的辅助孵化手段为激光透明带打孔辅助孵化[4]、激光透明带薄化辅助孵化[5]。 为了探讨激光透明带打孔和激光透明带薄化辅助孵化方法在冻融胚胎移植中的应用效果,本次研究选取于广东省佛山市妇幼保健院(以下简称“我院”) 行体外受精胚胎移植周期中有剩余可利用胚胎冷冻保存的病例280例为研究对象,分析患者的冻融胚胎的移植情况、妊娠情况以及不同年龄组和不同胚胎评分患者的临床妊娠率,现报道如下:
1 资料与方法
1.1一般资料
选择2011年10月~2013年10月我院行体外受精胚胎移植周期中有剩余可利用胚胎冷冻保存的病例280例作为研究对象,入选标准为:年龄为21~45岁, 基础血卵泡刺激素(FSH)值正常(3~12 U/L),在治疗期间无盆腔感染病史,子宫内膜厚度≥8 mm,前次解冻移植胚胎形态良好 (移植2个或3个无损伤Ⅰ、Ⅱ 级胚胎)而未妊娠者。 所有入选患者均与本中心签署相关知情同意书。 采用数字随机法分为两组,140例行激光透明带打孔辅助孵化为对照组, 受试者年龄21~43岁 ,平均 (31.5±3.4)岁 ; 不孕原因包括 : 输卵管因素83例(59.3%),男性因素26例(18.6%),排卵障碍19例(13.6%),不明原因12例(8.6%);子宫内膜准备情况:自然周期85例(60.7%),激素替代周期55例(39.3%);子宫内膜平均厚度(10.5±1.9)mm。 140例行激光透明带薄化辅助孵化为观察组, 受试者年龄23~45岁 ,平均 (31.8±4.1)岁 ; 不孕原因包括 : 输卵管因素82例(58.6%),男性因素29例(20.7%),排卵障碍18例(12.9%),不明原因11例(7.9%);子宫内膜准备情况:自然周期87例(62.1%),激素替代周期53例(37.9%);子宫内膜平均厚度(10.4±2.0)mm。两组患者年龄、不孕原因组成等基线资料比较差异均无统计学意义(P > 0.05),具有可比性。
1.2 方法
实施胚胎冷冻与胚胎解冻时,可将移植后剩余可用胚胎行玻璃化冷冻, 但要确保胚胎碎片≤25%,冷冻操作和胚胎解冻时要严格按照试剂盒说明书进行, 试剂盒购自于Kitazato公司。子宫内膜准备时,对于冻融胚胎的移植,可采用自然周期方案,也可采用激素替代周期方案,要根据患者的具体情况而定,月经周期规律,有排卵者可采用自然周期方案,月经周期不规律者可采用激素替代周期方案,然后可行辅助孵化。
激光透明带打孔辅助孵化时,要选择胚胎卵周隙的最大部位,进行连续激光打孔时,可切除部分透明带,要确保透明带的中心部位可以被穿破,还不能损伤胚胎细胞。 可将胚胎放入移进培养液,于培养箱中, 等待移植。
激光透明带薄化辅助孵化时,要选择合适的激光能量,一般为2 ms或3 ms,要选择胚胎卵周隙的最大部位,将透明带削薄时,范围控制在1/4,可削薄透明带厚度60%~80%,不要穿透透明带内侧,然后将胚胎放入移进培养液,于培养箱中,等待移植。
1.3 观察指标
复苏情况(复苏、未复苏)、胚胎情况(完整胚胎、 非完整胚胎)、移植胚胎的形态学评分、移植胚胎数、 临床妊娠情况(妊娠、未妊娠)、胚胎种植情况(胚胎种植成功、胚胎种植未成功)、怀胎情况(单胎、多胎)、流产情况(流产、未流产)、不同年龄组的临床妊娠率 (≥35岁 、<35岁 )、不同胚胎评分组的临床妊娠率 (< 5分、5~7分、>7分)。
1.4 评定标准
胚胎评分的评定标准:参考敖磊等[6]研究,依据D1、D2、D3的胚胎形态实施序贯评分,10分为满分。
1.5 统计学方法
采用SPSS 16.0统计学软件进行数据分析, 计量资料数据用均数±标准差(±s)表示,两组间比较采用t检验 ;计数资料用率表示 ,组间比较采用 χ2检验 ,以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组冻融胚胎的移植情况和妊娠情况比较
两组冻融胚胎的移植情况和妊娠情况比较结果显示,观察组复苏率、完整胚胎率、移植胚胎的形态学评分、移植胚胎数与对照组比较,差异无统计学意义 (P > 0.05)。 观察组胚胎种植率、妊娠率 、多胎率均明显高于对照组,观察组流产率明显低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)。 见表1。
2.2 不同年龄组患者临床妊娠率比较
两组不同年龄患者的临床妊娠率比较,差异无统计学意义(χ2=0.005,P=0.941)。 见表2。
2.3 不同胚胎评分患者的临床妊娠率比较
不同胚胎评分患者的临床妊娠率比较结果显示, 不同胚胎评分比较时,两组临床妊娠率比较,差异无统计学意义(χ2=0.271,P > 0.05)。 见表3。
3 讨论
体外受精-胚胎移植又称试管婴儿,是临床较为常见的一种受孕方法[7],其操作过程如下:1药物诱导多卵泡发育。 可使用促性腺激素释放激素激动剂联合促性腺激素促排卵方案。 2经阴道超声取卵。 可实施阴道超声取卵术,在阴道超声下进行操作,要将穿刺针刺入卵泡,抽吸卵泡液。3体外授精与胚胎培养。取卵后,要将精子与卵子共同培养,让精子通过自身运动进入卵泡,实现两性物质的融合。4胚胎移植。将体外培养形成的胚胎装入细管中经宫颈管送入宫腔中的过程称为胚胎移植。 5黄体支持。 可给予患者黄体酮支持治疗, 也可给予绒毛膜促性腺激素支持治疗,在移植后第14 d可行妊娠实验, 确认怀孕后可行黄体支持3个月。
目前,体外受精-胚胎移植的胚胎移植成功率较低[8],难度较大 ,原因也很多 ,较为常见的有胚胎质量不佳、胚胎无法正常孵出、子宫容受性差等。 随着医疗科技水平的不断进步, 胚胎冷冻技术越来越受到关注。 如今胚胎冷冻技术已经成为医学界辅助生育技术中的重要环节,是一种促进妊娠机会增加、降低胚胎浪费率的有效方法。 胚胎冷冻的实质是将患者移植后的剩余胚胎通过冷冻的形式加以保存, 以便于再次应用, 这样做不仅减少了资源浪费和生殖中心处理胚胎所需的时间和费用, 也同时减轻了患者经济负担, 目前已经成为很多生殖中心的常规剩余胚胎处理方法。
有研究表明,冻融可使透明带硬化,是移植失败的一个常见原因[9]。 目前对于胚胎孵出有两种解释 :一种是机械作用,即在胚胎发育过程中通过细胞数的增加而最终形成的压力与囊胚腔的不断收缩-扩张作用而至透明带的最终破裂;另一种通过化学作用对透明带进行部分消化使透明带破裂。 以上两种解释均基于胚胎的正常结构与发育过程。 而不孕妇女的透明带厚度个体间差异大,个别妇女,尤其高龄、基础FSH升高的妇女,其卵子透明带厚度、质地、结构等发生异常,如变厚、变硬、弹性变小等。 成功受精后,可见透明带硬化,胚胎需要从透明带中逸出,在分裂期胚胎时生成的分解素与物理性扩张可造成透明带变薄。 囊胚期内细胞团从透明带中孵出,是胚胎完成着床的先决条件。 胚胎在体外培养过程中,培养基本身会导致透明带变硬,同时胚胎在冻融过程中透明带硬化现象会进一步加剧,影响了冷冻胚胎移植的妊娠结局。 还有, 包括冷冻损伤、不理想的外培养条件、透明带较厚、胚胎质量不好、女性年龄等诸多问题都可能影响透明带的质地,造成硬化,降低透明带弹性,从而阻碍了体外发育的胚胎移植后正常从经由透明带孵出,造成胚胎孵出失败[10]。
早在20世纪80年代末,研究者Cohen等报道了单精子卵胞浆显微注射(ICSI)用于透明带处理对于提高胚胎种植率具有更为积极的作用, 该报道第一次大胆的提出了在透明带上通过打通1个小孔来促进囊胚体孵出、从而促进妊娠的想法[11]。 随后,越来越多的临床研究开始在透明带处理方面进行探索,并有不少试验证实了Cohen的假设, 通过透明带打孔促进胚胎经由透明带孔孵出而获得更高的妊娠率[12]。 近年来随着该项技术不断深入和广泛的 应用与研究,现阶段透明带打孔法已经逐渐发展为机械法、酸化法、激光法等多种方式,打孔只是一类通称,其包含有在透明带上打孔和打薄透明带。 目前在世界范围内, 采用何种方式进行透明带打孔具有更大的优势尚无定论。 大多数研究认为无论采取哪种方法都有一定的提高妊娠率的作用, 但促进妊娠的作用相当,胚胎种植率与妊娠率无显著性差异。 但也有报道持不同观点,有研究发现,冻融胚胎中应用1/2透明带薄化法的效果要更优于应用1/4透明带薄化法;对不同年龄段女性而言,年龄在38岁以上者,采用激光打孔法的促妊娠效果要比酸化法更有价值[13,14]。 这一研究对于进一步探索打孔方法的效果差异性具有重要的指导意义。
高龄女性本身在体外受精-胚胎移植的操作效果方面就存在更多的不利因素,其妊娠率要低于低龄女性, 可能与高龄女性体内激素水平的改变有密切关系[15]。 由于激素水平下降,透明带易发生变硬,从而影响胚胎孵出。 还有,高龄女性的激素水平变化还可造成周围组织分泌的胚胎细胞溶解酶减少,从而影响胚胎的孵育。 另外,高龄女性卵巢储备功能下降、卵子质量差、子宫内膜容受性下降、胚胎可能呈现非整倍体增加等问题, 都可能是影响高龄女性体外受精-胚胎移植操作效果不如低龄女性的重要因素。 由此可见, 对于高龄女性的体外受精-胚胎移植操作, 不仅要更好地完成透明带打孔和促进胚胎孵出,还应综合改善女性患者的身体状况和生殖器官功能,从而提高妊娠成功率。
辅助孵化是一种较为常用的孵化方法,需要对胚胎透明带进行人工操作,以削减厚度,有助于胚胎孵出。 辅助孵化的机制分析如下:实施辅助孵化,胚胎孵化前机械性阻力可有效被克服。 如果胚胎的活力较差,完成孵化的能量将严重不足,而辅助孵化可将囊胚扩张与孵化能量阈值降低。 行体外培养时,胚胎发育较为缓慢,子宫内膜胚胎着床的时间较早,实施辅助孵化可调整孵化的时间差,让胚胎发育与子宫内膜达到同步化。 实施辅助孵化的方法有多种,激光辅助孵化是较为常用的一种[10],在激光下透明带将气化 , 实现瞬间打孔或薄化,操作的时间很短,定位也非常准确,具有诸多优势。
激光透明带打孔辅助孵化打孔时,厚度要与透明带相当,这是其优势所在。 但该方法也存在一定的弊端,激光光束容易对胚胎造成损伤,如果打穿透明带会让卵裂期胚胎完全暴露在子宫内环境中,不利于胚胎着床。 而激光透明带薄化辅助孵化是一种新型的辅助孵化方法[11],可有效避免传统激光透明带打孔辅助孵化对卵裂期胚胎造成的影响,通过对透明带的薄化作用,可消薄区域的1/4透明带周长,深度可控制在透明带厚度60%~80%,不用打穿透明带,可减少胚胎细胞的热损伤。
本次研究的结果也表明,激光透明带打孔和激光透明带薄化辅助孵化方法均是冻融胚胎移植的有效方法,观察组复苏率(98.6%)、完整胚胎率(97.1%)、 移植胚胎的形态学评分(5.84±0.96分)、移植胚胎数 [(2.20±0.18) 个 ] 均高于对照组 [97.9% 、96.4% 、 (5.73 ± 0.82)分、(2.19±0.17)个]。 不同年龄、不同胚胎评分两组临床妊娠率比较,无明显差异。 观察组胚胎种植率 (60.0% )、 临床妊娠率 (49.3% )、 多胎率 (43.5% ) 均明显高于对照组(44.3%)、(36.4%)、(21.6%),观察组流产率(7.2%)明显低于对照组(19.6%)。 说明激光透明带打孔和激光透明带薄化辅助孵化方法的操作是安全有效的。 激光透明带薄化辅助孵化方法能进一步提高冻融胚胎的种植率和妊娠率,临床应用效果更为显著,值得临床推广使用。
夏季君子兰处在半休眠状态，忌强光照射，需要将它放在阴凉通风的地方，早晚接受散射光;也可以将君子兰连盆埋在沙子里，早晚朝着沙子喷水，也可以达到降温目的。
2、注意浇水
夏季蒸发量大，君子兰需水量也就大，大概5-7天浇一次水，浇水最好用雨水或沉淀24小时的自来水，防止土壤变质。
3、注意施肥
一、场地器材布置的注意事项
(一) 布置要整洁、美观
场地打扫得清洁平坦, 线画得清晰规范, 网挂得端端正正, 球放得整整齐齐, 能使人感到舒适、明快, 从而激发上课的兴趣和积极性。相反, 场地杂乱不平, 线模糊不清, 球满地乱滚。学生心里就会产生不愉快的感觉, 难以引起对课的兴趣, 从而影响教学效果。
(二) 布置要合理
1.课堂的位置选择要注意方向, 尽可能背向阳光, 减少风沙以及其他干扰物的影响, 特别是器械体操和投掷项目更应注意。
2.课堂位置还应注意背景, 要努力突出本课教学内容, 如在篮球场上进行排球教学时, 用明晰的线条、整齐的网架、鲜明的标志带、适用的裁判椅等突出排球教学的气氛, 这样就可以减少和排除学生因意向篮球而造成对排球学习的干扰。
3.移动器材的放置, 向固定器材靠拢。各种练习场地间的距离要得当, 要根据学校的环境和条件充分利用地形组织教学, 也要方便指导与学生练习。
4.要有利于轮换练习时的队伍调动, 有利于增加练习密度和适当的生理负荷, 有利于教师观察和调控整个体育教学。
(三) 布置要新颖
同一教学内容, 同一种器械都可以用不同形式进行练习。可经常变换组合方式和图形等, 以求新颖, 使学生每次上课都有新鲜感和美感, 以获得快乐。如在进行技巧教学过程中, 可把体操垫摆成口字形、三角形、梅花形, 也可把全部垫子拼成一整块等。设计并变换使用各种图案, 能使学生经常觉得新颖有趣。
(四) 利用错觉心理
精心布置场地, 有些学生上课时, 一看到器械较高, 就产生惧怕情绪, 不敢练习了。教师应利用语觉和其他安全措施, 对场地器材做适宜的布置, 可以减少或排除学生的畏惧心理。如把跳高架之间距离拉大, 增加沙坑内沙子的高度, 在单、双杠下面垫上较厚的垫子等, 都可收到积极的效果。
(五)
布置的场地要符合安全原则, 课前应周密检查, 严防伤害事故的发生。
二、场地器材布置的原则
(一) 从整体出发, 精心设计
在安排场地器材时, 应从体育课的整体出发, 科学运筹, 精心设计。一般每节课都要安排两项教材, 因此, 一个项目器材与场地的安排应顾及到另一项教学内容的进行, 即第一个教材学完后, 其场地布置和器材的安排应有利于第二个教材的学习, 并尽量减少不必要的整队与调队。
(二) 便于课堂管理与控制
1. 器材的放置应在教师的视野之内, 同时也要方便学生互相观察。
例如, 在进行往返接力赛跑游戏时, 笔者将纵队安排成扇形队形 (图1) 和“八”字队形 (图2) , 这样既便于教师和后面同学的观察又避免后面的学生向前拥挤, 使课堂秩序混乱。
2. 队形和场地的安排, 要便于教师的观察与知道。
例如, 在进行技巧教学时, 垫子虽然是可以任意安放的器材, 但如果安排不合理, 就不便于教师全面观察与指导, 不利于发挥教师的主导作用。在实践中笔者经常使用如下两种方法 (图3、图4) 。
(三) 要有利于增大课的密度和运动负荷
为了让学生有更多的练习机会, 解决场地器材不足的困难, 通常采用分组轮换的方法组织教学, 但更为重要的是应重视场地器材的合理安排和使用。例如:女生进行肩肘倒立的学习时, 应横放垫子, 使每块垫子可以两人同时练习。又如, 原地跳远的练习, 在保证安全的前提下, 可以安排2~3人同时进行练习。这样, 可以充分挖掘场地器材的使用潜力, 让学生有更多的机会进行练习, 增大课的密度和负荷, 提高锻炼身体的实效。
(四) 要有利于安全卫生, 防止伤害事故发生
在安排场地时, 应避免组与组之间相互干扰, 特别是投掷的教材, 应注意两组场地间的距离。另外, 还要注意器械的间距。器械安放的方向, 注意避免光线的直射, 反光或逆光等。另外, 在进行快速奔跑性练习或追逐游戏等活动时, 注意不要离障碍物太近, 要留有充分的余地, 以免伤害事故的发生。
(五) 制作替代器材
教师根据教材内容和实际情况, 可制作土器材或替代器材, 同样可收到异曲同工的效果。例如, 可用两个凳子, 架上竹竿进行跨栏练习, 用橡皮筋代替横竿进行跳高练习;用垒球、布沙袋代替实心球;如果学校没有网球场, 可利用楼侧墙壁进行击球练习, 也可用一橡皮筋的一头栓球, 另一头固定在地上进行击球练习。如篮球场少, 可在墙上、柱子上安上多个篮圈, 解决篮球场少的问题。若没有杠铃, 可以两人一组, 一人骑在另一人的肩上手扶墙壁做深蹲起, 锻炼腿部力量。没有哑铃时可用两块砖顶替哑铃锻炼上肢;还可以自制一些简便实用的单杠、双杠、沙袋等替代器材。
三、场地器材的布置方法
场地器材的安排与布置因教学内容、学校及学生实际情况的不同而有多种设计, 归纳起来, 有如下几种基本方法:
(一) 相邻安排法
相邻安排法是指一堂课同时进行两项教材的教学时, 将两项教材的教学场地相邻安排。这种方法的优点是:两项教材场地相邻, 减少了队伍的调动, 避免浪费时间。
(二) 重叠安排法
这种方法是当一堂课进行两项教材教学时, 相继安排在同一个场地进行。其优点是可以发挥场地的潜力, 提高场地的使用率, 特别是对缺乏场地, 且场地过于狭小的一些学校。例如, 笔者在进行跳箱 (或山羊) 和圆圈接力两项教材教学时, 同时安排在一个圆圈的场地内 (图5) , 这样可以一场多用, 解决场地过小的矛盾。
在较小的场地或上课的班次较多的情况下, 在有限的场地里, 可以用重叠法安排出图案新颖、线条整齐的场地。
(三) 流水作业安排法
当进行两个以上教材练习时, 可以按教材先后顺序, 充分利用场地条件, 不受约束地以流水作业的形式安排场地。这种方法适用于场地设备条件较好的学校采用。例如, 图6是在一节课中首先学习广播操, 采取四列横队的定位操练习, 然后让学生站成“马蹄形”队伍, 分四组进行跳箱 (或山羊) 的练习, 跳箱练习结束后, 让学生站成“八”字形队伍, 分四组站在一条直线上, 进行单足跳比赛完绕过小旗回到自己原来的位置。
(四) 综合安排法
根据学校的实际和教学的需要, 灵活地应用相邻法、重叠法。
四、场地器材布置的要求
(一) 教师要事先了解同步上课的班级长量, 教学内容, 在此基础上再考虑场地器材的安排布置。
(二) 队伍的调动, 场地的布置要从学校的具体条件出发, 结合体育教材的特点, 使各种队形变换和场地器材安排更趋于合理, 切忌不能过分追求形式, 场地器材的布置应为完成教学任务服务。
(三) 注意场地标志线的合理运用, 使用各种场地器材, 都要通过—定的标志线来组织学生。标画场地一般是采用线段法, 常用白粉画线。这样有利于把场地器材的安排和队伍的调动与走向相结合, 以利于体育课有条不紊地进行。标志线应该整洁、清晰, 不宜过多, 使学生容易辨认。教师在调队前, 应向学生讲明站队的地点、方向、对列队形的要求、标志线的特征等, 特别要做好排头与排尾学生的工作, 使他们起到一定的组织与导向作用。
总之, 只要我们要充分发挥人的主观能动性, 利用好身边的人、物、环境、地理、自然条件和现有的体育设施, 就能有效地布置和利用好场地器材, 上好一节高效率的体育课。
参考文献
[1]高凤山.课堂.讲授.示范体育教学ABC[M].北京:人民体育出版社, 1992.09:73-74
[2]金雁群等.体育语言学[M].太原:山西高校联合出版社, 1992.04:191-195
