铁皮石斛组织培养报告（精选8篇）
摘 要: 为试验铁皮石斛茎段组织培养与栽培，以铁皮石斛茎段为外植体，结合铁皮石斛的生物学特性，综述铁皮石斛组织培养与栽培的过程技术。观察研究基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛生长的影响。验证和探究铁皮石斛茎段组织培养技术并对铁皮石斛的组织培养与栽培管理技术进行了思考与展望。关键词: 铁皮石斛;组织培养;茎段;移栽;驯化 0.引言
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium Sw．)多年生草本植物，又名黑节草，俗称铁皮枫斗，分布于云南、安徽、贵州、浙江、江西、广东和广西等地，是我国传统名贵珍稀中药材，其有效成分主要为石斛多糖、石斛碱、氨基酸等，其中石斛多糖的含量高达21.7%，能显著提高机体免疫功能，具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效。现代药理学研究发现，石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用。
铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝。铁皮石斛是2005版《中华人民共和国药典》收载的3种石斛属植物之一，为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低，是一种珍稀的药用植物和和名贵的室内观赏植物.。
铁皮石斛自然繁殖力极低, 常规繁殖又较困难, 且多年来对铁皮石斛的采集量远大于其生长量, 野生铁皮石斛自然繁殖已濒临绝迹。由于药用价值高，人为的过度开采与生态破坏，野生铁皮石斛已濒临灭绝，1987年国务院将其列为国家重点保护植物。1 材料与方法 1.1 试验材料
野生云南铁皮石斛，取材于浙江农林大学组培实验室，取其茎段作为外植体进行组织培养。1.2 试验方法 1.2.1 外植体消毒
取铁皮石斛的茎，去除多余叶片后用解剖刀将茎切成含 3 ～ 4 个节点的茎段，保留节点。依次用中性洗涤剂清洗，自来水冲洗 20min，用 70% 的乙醇浸泡 10 ～ 60 s，再转入 0.1% 的氯化汞中，灭菌 5 ～11 min 后倒去氯化汞溶液，用无菌水反复漂洗材料 3-5 次。用无菌纸吸去茎段上多余水分，将其切成 1 ～2 cm 带一个芽点的茎段，接种到培养瓶中培养。1.2.2 培养基制备
铁皮石斛培养基均添加 3% 蔗糖，0.7% 琼脂，pH 值为 5.8。按不同目的在基本培养基中加入 6-BA、NAA、IBA，每个培养瓶分装 50 m 培养基，密封。经过 121 ℃高温灭菌 25 min。不定芽的诱导培养基是在基本培养基 MS 中加入细胞分裂素和生长素，采用不用浓度水平的 NAA 和6-BA。组培苗的壮苗与生根，将生长状态稳
定的试管苗接种于添加不同激素组合的 1/2 MS 培养基上。(1)诱导培养基: ①MS+6-BA0.5mg／I。+NAA 0.05mg／L+AC(活性炭)29／L；
②MS+6-BAl．0mg／L+NAA0．1mg／L+AC29／L。
(2)增殖培养基: 花宝3号39／L+6一BA2．5mg／L+NAA0．25mg／I。+AC29／L。
(3)生根培养基:1／2 MS+IBA0．5mg／L+AC29／L。培养基中添加蔗糖209／L，pH5．2～5．4 1.2.3 培养条件
接种铁皮石斛培养材料的组培苗在组织培养室中培养，培养温度为(26 ± 2)℃，光照 14 h/d，光强1 500 ～ 2 000 lx。1.2.4诱导培养
用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下，接种在诱导培养基①中进行培养。15～20天后，外植体开始萌动，茎段膨大，切面及顶部组织形成疏松组织。继续培养20天后，转入培养基②中，切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物，随着培养时间的延长，颗粒物长大形成直径1～2mm的类原球茎颗粒物。
1.2.5增殖培养
将诱导形成的原球茎转入到增殖培养基中，原球茎增殖速度很快，增殖倍数可达3～4倍，同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1～2片小叶，原球茎的增殖与芽分化同时进行。
1.2.6 生根培养
取诱导形成的不定芽，要求芽高2 ～3 cm，带3 ～5片叶的不定芽，将其接种到不同处理的生根培养基上，进行培养。培养30天左右，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到90％以上。
2.移栽与驯化 2.1移栽前的准备 2.1.1炼苗
当苗高3cm以上、具3～4片叶时，便可炼苗。移栽前先将瓶苗至炼苗房进行2~3周的炼苗，让瓶苗从封闭稳定的环境向开放变化的环境过渡，慢慢适应自然环境，等瓶苗生长健壮、叶色正常，根长3cm以上，肉质茎有3~4个节间、长有4~5片叶，叶色正常，根长3cm以上，有4~5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异。炼苗目的：
炼苗的主要目的是使组培苗适应外界的环境——温差，湿度差以及微生物环境。炼苗方法：
1）将待炼苗的材料放置于欲移栽的环境，不开盖保持4-5天； 2）半开盖保持1-2天后，全开盖再炼苗2-3天 2.1.2出瓶
组培苗出瓶时，打开瓶塞将培养基与小苗一起轻轻取出，整齐放置于盆中待清洗，污染苗、裸根苗或少根苗分别放置。正常组培苗先
在自来水中洗净培养基，特别要洗掉琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，再换自来水清洗一次。裸根或少根组培苗经过上述清洗后，还需将小苗根部置于100mg/L的ABT生根粉中浸泡15分钟，以进行生根诱导。污染苗经过清洗后，用1000倍多菌灵浸泡整株小苗10分钟。后期管理得当可有效控制污染的发生。栽种于已灭菌的基质中(移栽前浇透水)，放置在遮光度50％～60％、湿度达80％以上的温室中，2个月后，成活率达90％以上。2.1.3基质的准备
移栽铁皮石斛组培苗要选择适宜的基质。铁皮石斛的根是气生根，有明显的好气性和浅根性，因此，要求基质以疏松透气、排水良好、不易发霉、无病菌和害虫潜藏者为宜。可以选择水苔、石灰石、碎砖、树皮、刨花、蕨根、板边、菌糠、木糠等为移栽基质。
铁皮石斛不宜深植，种植时根系向四周均匀展开，将基质填充根部、基部必须露出，否则易造成烂根。移栽后隔5天再浇水效果较好。30天内每隔1天喷雾1次，水量不宜过多，期间勿施肥，待小苗恢复正常生长后才开始常规的水肥管理。2.1.4栽培场地的选择
铁皮石斛喜温暖、多雾、微风、清洁、散射光环境，忌阳光直射和曝晒。在移栽过程中要创造条件，为铁皮石斛创造最佳的生长环境。铁皮石斛原产区大多处于温带和亚热带，全年气候温暖、湿润，冬季气温在0℃以上。根据铁皮石斛的生长习性，要考虑场地的光照、温度、湿度、通风等自然因素。笔者认为最好选择在大棚内移栽，而且
要移栽在高架畦，这样容易满足铁皮石斛生长的最佳环境要求，而且很多自然因素容易控制。在建造育苗大棚时要满足以下三个条件：
（1）育苗大棚要通电、通水、通路，要求棚宽6m、长30m、棚肩高107m以上、棚顶高2.8m以上，棚顶覆盖塑料无滴薄膜和70%遮荫度的遮荫网，棚内安装有自来水管，大棚四周和入口装有40目的防虫网。有条件的，棚内还要装有自动或手动控制的喷雾系统（最好既能喷雾，又能喷肥、喷药），这样可以防晒、防雨、防虫、保温、保湿、透气，还能大大减少劳动量。
（2）棚内搭建畦底架空的高架种植畦。可用角钢、砖头、木条或方条等材料作为种植畦的框架，然后铺设孔径为0.3~0.5cm的塑料平板作为栽培基质的支撑面，要求畦宽1~1.2m，畦长度可自定，畦底架空高度30~50cm。种植畦上方装有可随时喷雾的喷头，喷雾饿时间最好能控制。没有条件的，也可以用喷雾器来代替。搭建高架种植畦的目的是为了使水分和透气容易控制，从而为组培苗生长提供最佳水分，保证通风透气，又能同时喷肥喷药，移栽成活率高，大面积移栽时能大大节省劳动力。
（3）在种植畦上铺5~8cm厚的基质，摊平。移栽前用0.3%高锰酸钾或1000倍多菌灵药液对基质喷洒消毒。
2.2移栽
2.2.1移栽时间
移栽最佳季节应为日平均气温在15~30℃时，气温过低或过高均不宜出瓶移栽。一般来说，在铁皮石斛主产地，除了最冷的1-2月以
及最热的7-8月外均可栽培。部分高海拔地区，除了12月至次年3月，其余时间均可栽培。
2.2.2移栽方法
用镊子将组培苗小心取出，洗去培养基后，即可移植到种植畦上。移栽时用手指在基质挖2~3cm深的小洞，轻轻把石斛根部放入小洞，注意不要弄断石斛的肉质根，然后用基质盖好。裸根苗或少根苗最好分开种，以便于管理。移栽密度为500株/m2，株行距为4cm×5cm。2.3移栽后的管理
2.3.1温度管理
人工移栽铁皮石斛组培苗要满足其冬暖夏凉的要求。组培苗生长适宜温度为20~30℃。夏季温度高时，大棚内须通风散热，并常喷雾来降温保湿，每天喷雾3~5次，每次喷雾2~5分钟；冬季气温低时，大棚四周要密封好，以防冻伤组培苗。2.3.2湿度管理
刚移栽的组培苗对水分很敏感，缺水则生长缓慢、干枯、成活率低。而喷雾过多则渍水烂根，温度高、湿度大时还易引发软腐病大规模发生。移栽后一周内（幼苗尚未发新根）空气湿度宜保持在90%左右，一周后，植株开始发新根，空气湿度可保持在70%~80%。种植畦干湿交潜有利于发根长芽。
2.3.3肥水管理
大棚移栽期间的施肥以叶面肥为主。由于石斛为气生根，因此要喷施适宜的叶面肥作为营养液，以供给植株充足的养分，利早发根长
芽。叶面肥可以选择硝酸钾、磷酸二氢钾、腐植酸类等，以及进口三元复合肥和稀释的MS培养基等。一般移栽后一周，植株新根发生后开始喷施千分之一的硝酸钾或磷酸二氢钾，7~10天喷一次，连续喷3次。长出新芽后每隔10-15天喷3‰的三元复合肥等。一般情况下，施肥后两天停止浇水。若空气对流太大，则视基质干湿度适当喷雾补水。
3.病虫害防治
铁皮石斛的主要病害有软腐病、黑斑病、炭疽病等。软腐病发病快，严重时整株腐烂解体呈湿腐状；黑斑病危害叶片，使叶片枯萎；石斛炭疽病危害叶片及肉质茎，受害叶片出现黑色或褐色病斑。针对这些常见病害要加强棚内管理、注意通风透光、适当降低棚内湿度，及时施药并拔出病株带离。铁皮石斛的主要虫害有蜗牛、菲盾蚧、红蜘蛛等。其中，蜗牛是常见害虫，危害幼茎、嫩叶、花蕾和幼果。可用诱杀、人工捕杀或撒石灰、茶麸防治；石斛菲盾蚧寄生于植株叶片边缘或背面吸食汁液，可将集中有菲盾蚧的老枝烧毁或用40％乐果乳油 1 000 倍等喷雾杀灭； 红蜘蛛可通过除周边环境的杂草或喷低毒杀螨剂800～1 000 倍防治。铁皮石斛为珍贵药材，因此铁皮石斛的病虫害防治应尽可能以预防、物理防治和生物防治为主，不用或采用低毒农药；一旦发现有病虫害应及时采取相应措施，避免病虫害情的加重。4.思考与展望
有效地控制污染是植物离体培养成功的关键。外植体造成的污染
最复杂，也最难控制，其原因可能是细菌引起的，也可能是真菌引起的。微生物可能是腐生的，也可能是内生的，最难处理的则是内生菌。铁皮石斛外植体含有较多的内生真菌，从铁皮石斛根中分离出内生真菌约25种，因此铁皮石斛的外植体消毒应特别注意也较为困难。不定芽诱导和增殖的基本培养基以MS为宜，同时，植物生长调节物质对铁皮石斛的组织培养起重要作用，虽然用量小，但在植物组织培养中使用的激素包括生长素、细胞分裂素等，而 NAA 和6-BA组合常用于诱导不定芽和生根。结果与其他研究报道的铁皮石斛不定芽诱导培养基配方有所不同，可能与培养的石斛品种有关。同时，适宜的接种密度和不同的外植体部位都会对不定芽的诱导和增殖产生一定的影响。试验结果表明，低浓度的 NAA、IBA 对组培苗根系生长具有显著的促进作用，而高浓度的 NAA、IBA 均对组培苗根系生长有明显的抑制作用。适合铁皮石斛组培苗生根培养基为: 1/2 MS + 0.5mg/LNAA，其次为1/2 MS + 0.5 mg/L IBA。
目前，铁皮石斛组织培养的研究大多集中在快速繁殖、扩大繁殖系数等方面，今后应加强铁皮石斛的基础性研究，如共生菌、光照、温度、湿度、栽培基质等对石斛生长发育的影响，从而深入掌握石斛生长发育的营养需求，物质合成与分解等新陈代谢规律，确定铁皮石斛类群生长的最佳生态环境，将研究方向和成果与大田栽培紧密结合起来，才能从根本上解决铁皮石斛培养困难，人工种植困难，产量低等问题。参考文献：
1 种子萌发
1.1 胚龄
不同种龄的种子萌发率不一样。叶秀嶙等[1]取铁皮石斛2~6个月种龄的种子进行组织培养发现,种龄愈长,萌发率愈高。2个月种龄的种子接入改良N6培养基中,萌发率仅为6%;3个月种龄的种子接入改良N6培养基中,培养2周后开始萌发,萌发率为87%;4~6个月种龄的种子接入培养基中,只要培养一周即可萌发,萌发率为95%。曾宋君等[2,3]将铁皮石斛种子接入改良N6培养基中进行组织培养,亦得到相似的结论,幼胚胚龄在60 d以下时,萌发率极低,随着胚龄的增长,其萌发期逐渐缩短,萌发率逐渐升高,成苗率也逐渐升高,但到达一定的胚龄后,差异并不明显。
1.2 基本培养基
铁皮石斛种子在N6,改良N6,MS,1/2MS,SH、KS、VW、Kundson C,1/2N6,White[1,2,3,4,5,6,7,8,9,10]等培养基上均可萌发。赵天榜等[4]比较N6、MS等14种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响,除B5外,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以N6最好,SH、Kn、MS次之,1/2MS、1/2Vw最差。曾宋君等[3]将铁皮石斛种子在SH、改良N6、MS、KS、VW、Kundson C培养基中培养,得出最适培养基为改良N6或自制PT培养基。罗吉凤等[5]比较了MS、1/2MS、1/2N6和White培养基对铁皮石斛种子萌发的影响,30 d种子发芽率均达到95%,但1/2MS培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3 激素
在培养基中添加一定浓度的NAA可促进种子的萌发[2,3,6,7,8],浓度以0.2~0.5 mg·L-1最适合胚的萌发和生长,过高起抑制作用[2,3,8]。2,4-D[2,3,7]对胚的萌发起抑制作用。6-BA[2,3,7]对胚萌发后的生长起抑制作用。KT、IAA[3]对胚萌发和成苗的影响不大,当浓度超过1 mg·L-1时,对胚萌发和成苗起抑制作用。ABA有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用,但张铭等[7]发现ABA能显著提高铁皮石斛原球茎的质量,浓度以0.5 mg·L-1为最佳。
1.4 天然添加物
在培养基中添加适量的马铃薯汁[6,9,10]、香蕉汁[10]、椰乳[2,3]可促进铁皮石斛种胚的萌发,但张玲等[9]认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响,干扰其正常发育过程。
1.5 炭源
在组培过程中适当添加活性炭,可以吸附代谢过程中产生的废弃物,防止组织褐变,并刺激胚胎的发生与生根,可加入2%蔗糖[2,5]。曾宋君等[3]在改良N6+NAA0.2 mg·L-1的最适培养基上,发现以白糖、片糖为炭源时,胚萌发和成苗的效果比蔗糖好,这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素。
2 原球茎增殖
2.1 基本培养基
铁皮石斛原球茎增殖可以1/2MS[5,10,11,12,13],MS[14]等作为基本培养基。张治国等[11]研究了6种不同培养基对铁皮石斛原球茎增殖的影响,结果表明,1/2MS是原球茎增殖的适宜培养基。
2.2 激素
适宜的NAA、KT、6-BA浓度对原球茎的增殖起促进作用。唐桂香等[10]以1/2MS为基本培养基,发现BA1.0 mg·L-1和NAA0.1 mg·L-1有利于原球茎诱导增殖。蒋林等[12]研究表明,1/2MS+NAA1.0 mg·L-1+KT0.2 mg·L-1比较适合原球茎的增殖。蒋波等[13]以1/2MS为基本培养基,添加BA2.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1或6-BA3.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1的激素,原球茎的增殖系数较大。陈兆贵等[14]认为原球茎增殖以MS+NAA1.0 mg·L-1+6-BA1.0 mg·L-1+KT1.0 mg·L-1为最佳,35 d增殖倍数达到5倍。
2.3 天然添加物
椰子汁[5]、苹果汁[12]对原球茎的增殖有较好的效果,但香蕉汁[11,12]对原球茎的增殖有抑制作用。张治国等[11]认为原球茎增殖时最好不添加任何天然提取物。
2.4 炭源
添加活性炭能使原球茎的增殖量显著增加[5,10,11,12],这可能是活性炭吸附了某种不利于原球茎增殖的物质,蔗糖浓度0.5%~0.3%。周根余等[15]比较了不同炭源对铁皮石斛原球茎生长的影响,发现原球茎在蔗糖中生长最快,浓度3%,葡萄糖中其次,而乳糖中最慢。
3 原球茎分化
3.1 基本培养基
铁皮石斛原球茎分化可以1/2MS[5,12,13,16],MS[14]等作为基本培养基。张治国等[16]比较了VW、N6、1/2MS、B5、KC等6种基本培养基对原球茎分化的影响,发现6种基本培养基附加马铃薯提取液和植物激素后,原球茎均可分化,但以1/2MS培养基作为原球茎分化的基本培养基最适宜,叶色浓绿,出苗整齐,这与刘瑞驹等[6]的报道一致。
3.2 激素
培养基中添加BA和NAA后可加快原球茎分化的进程[5,10,12,13,14,16]。张治国等[16]报道了BA和NAA不同的组合及浓度对原球茎分化的影响,在分化前期(40 d),高浓度的BA和低浓度NAA组合,加快原球茎分化进程,1~2片叶的分化苗占50%以上,以2 mg·L-1BA和0.2 mg·L-1NAA组合最好。培养到60 d后NAA浓度高的组合,分化苗整齐,尤其是0.2 mg·L-1BA和2mg.L-1NAA组合,小苗生长发育快。蒋波等[13]报道以1/2MS为基本培养基,添加BA2.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1或BA3.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1的激素,有利于原球茎的分化。陈兆贵等[14]以MS+NAA1.0 mg·L-1+6-BA3.0 mg·L-1+KT1.0 mg·L-1为培养基,45 d原球茎分化率达84%。罗吉凤等[5]认为原球茎分化适宜的培养基为1/2MS+BA2 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+IBA0.1 mg·L-1+蔗糖3%。唐桂香等[10]研究发现,BA对原球茎诱导芽影响大,而NAA对原球茎诱导芽影响小。
3.3 天然添加物
土豆汁[12]、马铃薯提取液[10,16]能有效促进原球茎的分化,香蕉汁[12,16]对原球茎的分化有抑制作用。
3.4 炭源
培养基中加入活性炭能促进原球茎的分化[5,10,16]。张治国等[16]研究了蔗糖浓度对原球茎分化的影响,发现蔗糖为2%时,分化率为100%,此时原球茎的增殖率达最高,当蔗糖为3%时,原球茎不再分化,且增殖率随蔗糖浓度的增高而下降。这可能是因为培养基的渗透压过高,抑制了原球茎的分化和生长。故在原球茎分化中,蔗糖浓度以3%为分化的临界值,而蔗糖2%为原球茎分化的适宜浓度。
4 生根与壮苗
4.1 基本培养基
铁皮石斛试管苗生根壮苗常用的基本培养基有1/2MS[4,6,10,12,14,17,18]、MS[4,5,9]、B5[9,17]N6[2,4,9]等。赵天榜等[4]研究N6、MS等14种培养基对铁皮石斛种胚苗生长的影响,以N6最好,SH、MS次之,1/2MS、1/2VW最差。张玲等[9]比较了MS、B5、N6、KC四种培养基对幼苗生长的影响,发现N6培养基最有利于幼苗的生长,其株高和根数都比其它培养基好,B5次之。刘骅等[17]比较了1/2MS、B5、VW、KC等4种基本培养基对试管苗生长的影响,发现培养到120 d时,B5培养基上的小苗生长最好,其次为1/2MS培养基,而KC和VW培养基上的试管苗生长明显不如B5和1/2MS。
4.2 激素
在基本培养基中添加NAA[4,6,10,12,17]、IAA[17,18]、IBA[14,17,18]等激素有助于试管苗生根壮苗。赵天榜等[4]在1/2N6培养基内添加2 mg·L-1或1 mg·L-1NAA,可提高石斛种胚苗分蘖率6.00~7.14倍。唐桂香等[10]研究了不同NAA含量对铁皮石斛苗成活率和生根的影响,结果表明NAA有助于试管苗的生根,以0.5 mg·L-1试管苗平均根数最多和平均根长最长。
4.3 天然添加物
在基本培养基中加入香蕉汁[2,3,4,5,6,12,13,14,17]、马铃薯汁[3,4,6,9,17]、荸荠汁[17]、绿豆芽汁[3]、苹果汁[12]、椰子乳[13]等能促进铁皮石斛幼苗的生长和根系的发育,香蕉汁的促进作用最为显著[2,3,4,9,13,17]。
4.4 炭源
铁皮石斛在生根培养时加入活性炭有利于试管苗的生长[3,5,10,12,17],能使根系长得更加粗壮[3]。唐桂香等[10]认为在培养基中添加活性炭有助于提高试管苗的成活率,但对苗的根数和根长影响小。
5 其他外植体的离体培养
除种子作外植体外,以铁皮石斛的茎尖、茎段、幼叶、种胚苗、幼根为外植体,均可培育出组培苗[4]。以茎尖、茎段为外植体,培养途径为茎尖、茎段→诱导形成不定芽→不定芽增殖→不定芽分化→生根壮苗,形成完整试管苗。
5.1 不定芽诱导
曾宋君等[2]比较N6、MS、KS、VW、KC等培养基,以MS为基本培养基效果较好。朱艳等[19]比较1/2MS、B5、改良N6、KC等4种培养基对茎段分化丛生芽的影响,结果表明以1/2MS诱导丛生芽效果最好。张伟等[20]比较N6、MS、1/2N6、1/2MS等培养基对试管苗生长的影响,结果表明,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以改良N6最佳,MS次之。张启香等[21]比较1/2MS、MS、VW等培养基,结果表明以1/2MS诱导效果最好。周俊辉等[22]比较N6、B5、MS、KC等4种基本培养基对铁皮石斛芽诱导和增殖的影响,以B5效果最好。NAA[2,22,23,24]、6-BA[2,19,21,22,23,24]、KT[19,21]、IBA[20]、LH[21]在不定芽诱导过程中具有良好的促进作用,NAA浓度通常0.1~0.5 mg·L-1,6-BA浓度通常0.5~2.0 mg·L-1。
5.2 不定芽增殖
将丛生芽切割后继续在此培养基上培养,可增殖产生大量丛生芽[2,23]。在不定芽增殖培养中可添加香蕉汁[20,22]、土豆汁[20,22]、椰子汁[22]等天然附加物,周俊辉等[22]认为添加椰子汁对芽的增殖效果最好。
5.3 生根壮苗
生根壮苗适宜的培养基有N6+10%香蕉汁[2],1/2MS+IBA0.1 mg·L-1[23],1/2MS+10%香蕉汁+0.5%AC[19],改良N6+0.2 mg·L-1NAA+10%香蕉汁[20],MS+NAA0.05 mg·L-1+KT0.1 mg·L-1+叶酸2.0 mg·L-1+La稀土10 mg·L-1[21],1/2MS+NAA0.7 mg·L-1[24]等。在生根培养基中通常加入香蕉汁[2,19,20]、蔗糖[19,23]可促进生根壮苗。
6 讨论与展望
6.1 菌根技术和试管苗移栽
关于铁皮石斛组织培养的研究目前已取得一定的进展,成功培育出试管苗,但有关试管苗移栽方面的报道还很少,目前普遍存在移栽成活率低,苗期管理困难的问题。郭顺星等[25]从野生铁皮石斛中分离获得内生真菌25种,其中5种真菌可促进铁皮石斛种子萌发,7种真菌可与铁皮石斛幼苗形成共生关系,3种真菌对幼苗生长有促进作用。因此分离和筛选促进铁皮石斛生长发育的适宜菌根真菌,是提高试管苗移栽成活率,解决生产的关键问题之一。朱艳等[26]比较不同基质对铁皮石斛试管苗移栽成活率的影响,结果表明最适宜的基质是1/3泥炭+1/3锯末+1/3珍珠岩,覆以苔藓类伴生植被可大大提高移栽成活率。李进进等[27]研究了栽培基质和扩繁代数对移栽成活率的影响,移栽的基质以松树皮与碎石、花生壳与碎石综合效果较好,移栽成活率达到95%以上。原球茎繁殖代数应控制在4代内,茎段繁殖代数应控制在6代以内,否则会明显降低移栽成活率。
6.2 组织培养次生代谢产物的研究
进行组织培养研究时,直接以组织培养物替代原药材使用或者生产活性成分也是解决铁皮石斛资源短缺的方法之一,但目前涉及该方面的研究还很少。黄民权等[28]从铁皮石斛愈伤组织中提取到的水溶性多糖含量达21.0%,愈伤组织培养物和它的原植物二者在多糖含量,多糖的单糖化学组成等方面存在明显的相似性。张东青等[29]研究表明铁皮石斛原药材及其试管培养物的多糖含量均在10%以上,以原药材的含量最高。因此,以愈伤组织培养物替代它的原植物具有广阔的前景,值得进一步的研究和开发。
6.3 展望
顾慧芬等[30]研究表明,铁皮石斛组培苗和野生品多糖含量基本相同。范俊安等[31]对植物形态及茎、叶等组织构造的对比研究和总多糖含量比较表明,铁皮石斛组培品和野生品植物形态相似,组织结构基本相同,主要成分总多糖含量无显著性差异,二者药材品质相近。因此,铁皮石斛试管苗经大田栽培后可替代野生药材,通过组织培养培育大量试管苗,发展铁皮石斛人工栽培是解决铁皮石斛资源紧缺问题的有效途径。
摘要：近年来,对铁皮石斛的需求日趋增加,而野生资源难以满足市场需求,组织培养技术使大规模人工栽培成为可能。从种子萌发、原球茎分化、生根与壮苗、原球茎增殖等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养技术的研究概况,并展望了发展前景。
摘 要 试验以铁皮石斛假鳞茎作为实验材料，研究铁皮石斛初代培养中，适宜腋芽萌发的生长调节剂浓度组合。结果表明，将消毒后的茎段水平放置于MS+NAA0.3 mg/L+6-BA2 mg/L培养基中，10 d左右开始萌发，且萌发的腋芽长且壮，为9组不同生长调节剂浓度组合培养基中最佳的初代培养基。
关键词 铁皮石斛；初代培养；培养基
中图分类号：S682.31 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2016.21.021
铁皮石斛（Dendrobium officinale）属兰科（Orchideceae）石斛属（Dendrobium）多年生附生性草本植物，既是我国传统的名贵中药材[1]，也是价格昂贵的出口药材[2]。多分布于海拔近千米的山地半阴湿岩石上，加上长期采挖，野生铁皮石斛资源日渐枯竭[3-4]。而铁皮石斛的种子细如微尘，且无胚乳，自然条件下萌发率极低（低于5%[5]）须与兰菌共生才能萌发[6]，实生苗人工栽培比较困难；并且传统的分株、扦插等繁殖方式生长周期长，繁殖率低，远不能满足生产需要[7]。铁皮石斛离体快繁技术无污染、成苗周期短，且能在短期内大量繁殖，因此是解决此问题的一个有效方法。本试验以铁皮石斛假鳞茎作为实验材料，对铁皮石斛离体快繁途经中初代培养的植物生长调节剂浓度配比进行筛选，找到诱导出腋芽的最佳培养基，以便继续后来的增殖培养，短期内获得无菌健康植株。力求对铁皮石斛的种质资源保护提出有效途径，以及对铁皮石斛的离体快繁及工厂化育苗提供一些理论基础。
1 材料与方法
1.1 植物材料
以铁皮石斛带腋芽假鳞茎作为试验材料进行研究。
1.2 试验方法
去掉假鳞茎上面的叶片和叶鞘，切成长约1.5 cm的带节茎段，用软毛刷蘸取洗洁精液清洗茎段表面，再用自来水持续冲洗1 h。然后滤干水分，在70%酒精中浸泡8 s，用无菌水冲洗2～3次，再用10%次氯酸钠浸泡
10 min，最后用无菌水冲洗3～5次，等待接种。
以MS为基本培养基（蔗糖30 g/L、琼脂7 g/L），添加不同浓度的NAA（0.2～0.4 mg/L）和6-BA（1.0～
3.0 mg/L），形成9种不同生长调节剂浓度的培养基组合。将经灭菌的假鳞茎切成长约1 cm的带节茎段，分别接种于不同初代培养基中，接种方式分水平放置和直立放置两种，接种后置于温度24±2 ℃、光照强度1 600～2 000 lx、光照时间14 h/d中培养。每个处理30瓶。重复3次，接种后
30 d，对萌发的腋芽高度和直径进行测量统计分析。
2 结果与分析
2.1 茎段不同放置方式对腋芽萌发的影响
本试验对带节茎段采取两种接种方式，一种是直立放置，另一种是水平放置。结果发现，水平放置的茎段约10 d开始萌发腋芽，萌芽率100%；而直立放置的茎段约15 d后腋芽才开始萌发，萌芽率只有65%。且水平放置的带节茎段萌发的腋芽无论从高度还是直径都受植物生长调节剂浓度配比的影响，而直立放置的带节茎段，萌发的腋芽平均高度1～2 cm，直在3～4 mm，其数值基本不受植物生长调节剂浓度配比的影响。且相同植物生长调节剂浓度配比中，水平放置的茎段萌发的腋芽较直立放置的较高且较壮，见表1，诱导腋芽萌发效果更好。
2.2 不同生长调节剂浓度配比对腋芽萌发的影响
茎段接种30 d后，对所有生长调节剂浓度组合的培养基中外植体已萌发的腋芽进行高度与直径的统计。见表1，相同生长调节剂浓度组合的培养基中，无论是萌发的腋芽的平均高度、还是平均直径，水平放置的方式优于直立放置。NAA浓度为0.2 mg/L时，萌发的腋芽高度较矮，直径偏小，当NAA浓度增大到4 mg/L时，配合
1 mg/L的6-BA，腋芽平均高度达到最大值，为5.45 cm，但是腋芽细弱，平均直径仅为2.25 mm。MS+NAA0.3 mg/L+
6-BA3 mg/L培养基中，萌发的腋芽最粗壮，平均直径达到
6.16 mm，但是平均高度只有2.81 cm。从萌发的腋芽高度及粗壮度等综合考虑，在9组不同生长调节剂的浓度配比中，MS+NAA0.3 mg/L+6-BA2 mg/L培养基中腋芽平均高度为
4.11 cm，平均直径为5.03 mm，两项指标均衡，为铁皮石斛初代培养的最佳培养基。
3 讨论
本试验以铁皮石斛的带节茎段作为外植体进行初代培养，发现水平放置的带节茎段较之直立放置，腋芽诱导的时间更短、诱导率更高，且质量更好。有研究表明，生长素和细胞分裂素的种类和浓度是影响离体快繁的关键因素之一，采用NAA与6-BA居多[8]，在所选择的3个NAA浓度梯度中，随着浓度增大，腋芽萌发的高度随之增加；NAA浓度为0.3 mg/L时，配合不同浓度梯度的6-BA腋芽直径数值相对较大。通过初代培养萌发的腋芽继续培养10～20 d，转接入继代培养基后，培养约10 d，在其基部切口处能继续增殖，长出3～4个新芽，再进行增殖培养，可获得大量丛生芽。
铁皮石斛的离体快繁一般有2个途径：一是原球茎途径，多使用种子作为外植体[9]，此途径增殖系数大，能获得大量组培苗，但培养周期较长，费用较高；二是丛生芽途径，多使用带节茎段作为外植体，增殖系数没有原球茎途径大，但外植体容易获得，培养周期相对较短，且费用较低，是工厂化大量生产常选用的途径。本试验对铁皮石斛初代培养的探索仅限于对接种方式以及两种植物生长调节剂的浓度配比选择，在培养过程中，发现直立放置的带节茎段有部分基部褐化，最后死亡，并未成功诱导出腋芽，而水平放置的带节茎段均诱导出腋芽，且无褐化现象，具体原因尚不清楚，可能与代谢物质的运输方向有关。
参考文献
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铁皮石斛的最佳吃法----煎熬铁皮石斛。
1.取新鲜的铁皮石斛10-20克或者干铁皮枫斗5克，用清水冲洗干净。
2.将清洗干净处理好的铁皮石斛或铁皮枫斗放入锅内，加适量的水，用大火煮沸转慢火煎30分钟即可取汁饮，可重复冲泡，直至无味，连渣嚼服。
3.一时喝不完的可以先装入保温瓶保温，喝的时候再倒。
铁皮石斛的食用方法:
方法一：入膳——洗净切碎或拍破和鸡鸭等材料一起文火炖2-3小时，连渣食用。或用文火煎煮后取汁备用，加入其他原料可煮粥、做羹、煲汤等。(功效：养阴生津、抵虚热、微汗、筋骨酸痛等常见的体虚症。)
方法二：泡茶——洗净后切薄片，用开水冲泡后饮用，可重复冲泡，连渣食用。(功效：开胃健脾、降火理气、对慢性咽喉炎疗效显著。)
方法三：鲜吃——取新鲜铁皮石斛若干，洗净入口细嚼，味甘而微黏，清新爽口，余渣吞咽即可。(功效：强阴益精、开胃健脾。)
方法四：煎汤——洗净切碎或拍破加水入锅用文火先煎煮30分钟，后放入1-2克西洋参再煮30分钟，可重复煎煮，连渣食用。近代名医张锡纯说：“铁皮石斛最耐久煎，应劈开先煎，得真味”
(功效：补虚养阴，清热。)
方法五：熬膏——洗净切碎或拍破可加其他中药材加水煎汁，连煎两次，弃渣后用小火浓缩，再加冰糖，继续熬制成膏状引用。(功效：对劳损虚弱、肢节多痛、体乏、夜多盗汗等症状有显著疗效。)
方法六：浸酒——洗净切碎拍破、单味或和其他物料一起浸入40度以上酒中，3个月后即可食用。(功效：补肾养阴、生精祛风。)
铁皮石斛的药用价值：
性味功效：味甘，性微寒。
生津养胃;滋阴清热;润肺益肾;明目强腰。
药理作用
生津作用：铁皮石斛具有生津作用，主要表现为促进腺体分泌和脏器运动。
降血糖作用：铁皮石斛对可降低链脲霉素诱发糖尿血糖值。
增强机体免疫力：铁皮石斛颗粒(TPSH)可促进荷瘤动物巨噬细胞的吞噬功能，增强T淋巴细胞的增殖和分化及NK细胞的活性，并能明显提高荷瘤动物的血清溶血素值，提示TPSH无论是对非特异性免疫功能，或是特异性细胞免疫以及体液免疫功能，均有一定的提高作用。
铁皮石斛的真伪鉴别：
从外观上说，铁皮枫斗呈暗黄绿色至黄绿色，大小匀称、美观，常可见残留的叶鞘纤维，表面有光泽，手感沉重;用其它石斛加工而成的，则颜色呈金黄色、黄色或黄褐色，无光泽或仅现少量光泽，个或大或小，手感轻浮。
从口感上鉴别，铁皮枫斗具有特有的清香味，富含黏液，嚼之，具有浓厚黏滞感，微甘，渣少;而其它石斛有的含有黏液，有的基本不含，味淡或微苦，没有清香味，渣多。
铁皮石斛花食用量取决于各人的身体状况,不同人身体情况不同,每日的鲜 铁皮石斛花食用量也不同,健康与亚健康人的每天服用量一般在10-20克即可,病人用量则视疾病严重程度、所处治疗阶段、病程长短、病人体质、症状明显程度、年龄、季节等因素而定,一般每天服用量要在10-20之间,每天的用量可分2到3次吃完。由于消费者买到的铁皮石斛花是一克一克买的,很多人家里没有很精确的电子秤,就算有电子秤也不太可能每次吃时都称一下重量,只能凭感觉抓上若干个,感觉量不合适会适当增减,感觉量合适再拿来服用,既然是估计就会有误差,为了让误差尽可能小,我们有必要知晓每次该吃几克铁皮石斛花,要根据自身情况确定自己每天合适的铁皮石斛用量(以克计,参考第一段所述),接着确定自己每天服用几次,然后用日服用量÷日服用次数计算出每次的服用量;
关键词：铁皮石斛,人工栽培,组织培养
铁皮石斛Dendrobium candidum Wall.ex Lind L.是兰科石斛 (Dendrobium) 多年生附生草本植物, 为传统、名贵的中药材, 是《中华人民共和国药典》中被收载的5种石斛属植物之一, 含多种生物碱和石斛多糖等有效成分, 并证实它具有抗菌消炎、滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、润喉明目、延年益寿之功效[1]。但铁皮石斛对生长环境的要求十分严格, 自然条件下种子萌发率极低, 生长极缓慢, 栽培困难且周期长, 资源非常有限, 已属于珍稀濒危植物, 再加上滥采滥用将导致其枯竭, 从而使直接利用野生铁皮石斛受到了极大的制约[1]。所以寻求一种规模化种植技术已成为当今研究的热点。本文以铁皮石斛为研究对象, 对近十年的相关文献进行整理, 并针对铁皮石斛的人工栽培情况进行总结, 为铁皮石斛的人工栽培提供一定的理论依据。
1 种苗获得
结合文献及本人暑期实践的结果, 大部分中药种植区没有大力发展种植铁皮石斛的主要原因是铁皮石斛种苗的价格太过昂贵。铁皮石斛的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两大类。因为由种子获得种苗的有性繁殖在自然条件下极难实现, 所以为了快速大量获得种苗, 一般多采用离体组织培养来进行繁殖。
组织培养一般以无菌幼苗茎段、原球茎及人工种子为外植体进行诱导。以MS为基本培养基, 在其基础上进行一定的改进。如加入各种激素 (IBA、NAA、6-BA、KT等) 、有机提取物 (土豆汁、椰子汁、苹果汁、香蕉提取液、萝卜提取液等) 和无机添加物 (硒、活性炭、稀土元素等) 。近来随着真菌诱导子在提高红豆杉、长春花和新疆紫草等药用植物人工栽培细胞中的有效成分含量报导的增多, 有人也着手研究了能促进铁皮石斛的组培苗生长分化的真菌诱导子, 发现接种石斛小菇、兰小菇后, 铁皮石斛原球茎增殖明显加快[3]。综合各种组培方法, 发现在铁皮石斛的组织培养中, 原球茎增殖以MS+NAA 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+KT 1.0mg/L为最佳;分化以MS+NAA 1.0mg/L+6-BA 3.0mg/L+KT 1.0mg/L为最佳;壮苗生根以1/2MS+IBA 2.0mg/L+水解酪蛋白500mg/L+10%香蕉提取液为最佳[3]。在此培养条件下, 进行悬浮培养。此外, 为提高生产效率, 达到节能增效目的, 可采用蒋慧萍[4]的建议, 利用袋式培养代替常规瓶式培养。
2 栽培
栽培前首先要进行场地的选择与大棚的搭建。由于铁皮石斛耐旱而喜阴凉湿润环境, 怕直射光。所以首先要选择比较潮湿的场地, 保持相对湿度70%以上, 温度25℃左右。其次要进行一定的遮阴措施, 使其光照条件保持60~70μmol·m-2s-1、12h/d左右[5]。除此, 如有条件可采用不同的光进行照射, 因为研究发现绿光能较好地促进体胚发育, 蓝光有利于生物量的积累[6]。然后将组织培养所得的苗置于自然光照、温度下, 打开瓶盖炼苗7~10d, 然后将其取出, 用自来水冲去根部培养基, 移植到适宜的移栽基质中。基质的组成较为多样, 一般由泥炭、树皮和刨花等组成。培养过程中可根据生长状况适当调节其比例, 如泥炭:树皮:刨花=2∶4∶4的透气性和保水保肥性能良好[7]。
3 载后管理
铁皮石斛组培苗移栽后除了保持适宜的条件, 添加一定的肥料外, 还需加强病虫害的防治。一般可在移栽2周后喷叶面肥 (0.2%尿素液或惠满丰) 进行营养补充, 以促进新根生长。也可以采用1.0mg/L的6-BA进行叶片表面处理以促进侧芽的萌发[8]。铁皮石斛病虫害主要包括黑斑病和蜗牛。黑斑病主要危害移植苗的叶片, 引起黑褐色病斑。老叶基本不被侵染, 但可侵染2~3年植株上抽出的新叶。处理方法是剪去受感染叶片, 然后用50%多菌灵800倍液、75%甲基托布津1000倍液喷杀。实验研究时有人利用活体微生物控制黑斑病, 取得了一定的实验成果, 但其运用到实际栽培中的报道还未见到[9]。蜗牛为常见害虫, 在整个生长期都可为害, 常咬食嫩叶。防治方法可人工捕杀也可毒饵诱杀 (用50%辛硫磷乳油0.5kg加鲜草50kg拌湿, 于傍晚撤在田间诱杀) , 或者在畦四周撒石灰, 防止蜗牛爬入畦内为害。
4 采收
铁皮石斛茎高、茎粗、平均鲜重和多糖、氨基酸含量随着铁皮石斛的栽培时间都在发生着动态变化。随着栽培时间的延长, 铁皮石斛试管苗茎高及生物产量逐渐增加, 而茎粗反而变小, 其多糖含量先升后降, 在第12个月达到高峰, 氨基酸总量及主要氨基酸含量则呈直线上升趋势[10]。比较不同采收期铁皮石斛多糖含量, 发现12月份采收的多糖含量最高, 所以认为采收以冬季为佳[11]。分析铁皮石斛不同采收期、生长期糖含量的动态变化规律, 可发现其最佳生长期为1.5~2年, 最佳采收季节在12月-3月[12]。丁亚平等人则根据铁皮石斛的不同治疗功效来确定采收期, 结果表明以清音明目为治疗目的时, 应在第4年采收;以增强免疫为治疗目的时, 宜在第1年或第3年采收;若兼顾上述两者及产量, 则铁皮石斛的最佳采收期在第3年秋季[13]。
5 展望
石斛为兰科植物之一，对人体有驱解虚热，益精强阴等疗效。石斛属为兰科中最大的一个属，包括约1100种植物，中国约63种石斛属植物，供作药用的石斛属植物39种。现研究为西双版纳产出的石斛品质最高。
1969年春，越共中央主席胡志明的心脏病突然加重，根据他的愿望和越南劳动党的要求，周恩来总理在日理万机的情况下，亲自挑选医务人员，认真审阅病情、研究治疗方案，先后派遣了四个医疗组携带药品器材前去抢救。在医疗组出发前，周恩来亲自接见了他们，并再三叮嘱，一定要竭尽全力救治。医疗组当时就携带了名贵中药——“救命仙草”铁皮石斛。
由于野生铁皮石斛对自然生态条件要求苛刻，其生境独特，对如光照、湿度、温度等小气候环境要求十分严格，其密集的须根系附着于石壁砂砾上吸收岩层水分和养料，裸露空中的须根则从空气中的雾气、露水吸收水分，依靠自身叶绿素进行光合作用。因此，石斛受小气候环境中水分，尤其是空气湿度的严格限制，分布地域极为狭窄。而其自然繁殖率又极低，早在上个世纪八十年代，铁皮石斛就被国家列为重点保护的珍惜濒危药用植物。为了拯救濒危铁皮石斛，让铁皮石斛能够更好的发挥作用于价值，服务广大民众，国家与各地政府相继出台了相应的政策，对野生铁皮石斛资源予以立法保护、倡导人工种植。
目前，人工种植以云南西双版纳的环境最为适宜，西双版纳位于云南南部，特殊的地理气候和生态环境非常适合珍稀植物石斛对生长环境的独特需求，尤其是铁皮石斛。由于地理和气候条件的限制，外界适合石斛的生长周期全年150-250天，而在西双版纳，无需人工干预，全年至少有320天以上的自然基础环境适合石斛的生长，相对产值较高，品质优良，营养价值最为丰富。
对于铁皮石斛的应用，早在东汉末年的《神农本草经》中就有记载，而明代医学家李时珍《本草纲目》中也记载：“石斛除痹下气，补五脏虚劳羸瘦，强阴益精，久服，厚肠胃，补内绝不足。”意思是铁皮石斛去湿除痹，降气，补五脏虚弱，强健形体，滋阴。主治脾胃受损或功能虚弱，长期服用能够使消化系统的肠胃功能得到增强；补养内脏衰弱和功能上的不足。
现代医学实验证实，在临床上多用于治疗慢性咽炎、肠胃疾病、眼科疾病，血栓闭塞性疾病、糖尿病、关节炎、癌症的治疗或辅助治疗。其主要的十大功效有：
1、抗衰老，提高免疫力
石斛能显著提高超氧化物歧华酶（SOD）水平，降低过氧化脂质（LPO），调节脑单胺类神经介质水平，抑制类似单胺氧化酶（MAO），起到延缓衰老的作用。近些年备受关注的石斛兰多糖也具有显著的免疫增强活性和抗衰老、抗辐身等多种功效。如铁皮枫斗晶、
石斛散、清咽宁、益肠汤、石斛露、石斛精、养阴口服液及石斛片等。以铁皮石斛加工的“枫斗”或“耳环石斛”，被称为“金耳环”、“金枫斗”，畅销于东南亚及欧、美。
2、活血化瘀，提高心脑血管功能
石斛含有酯类成分，具有活血化瘀、扩张血管及抗血小板凝结，治疗血栓闭塞脉搏管炎，脑血栓形成，动脉硬化性闭塞等作用。由石斛、金银花等药材提取加工的脉络宁注射液，有清热养阴、活血化瘀等功能。
3、抗肿瘤
石斛中提取的菲类和联苄类物质，有抗肺癌、卵巢腺癌和前髓细胞白血病的作用。能促进T细胞生长和淋巴细胞产生抑制因子，起到增强免疫的作用。金钗石斛的醋酸乙酯提取物对人体肺癌细胞、人体卵巢腺癌细胞、人体早幼粒细胞白血病具有显著的细胞毒性作用。特别对肺癌细胞有极大抑制作用，抑制率高达74.7%-97.2%。从石斛兰粗提物中分离鉴定出的2个化合物Lusianthridin和denbinobin，具有与粗提物同样的药理作用，且前者对移植肉瘤S-180也有抑制作用。
4、治疗消化系统疾病
石斛对肠管有兴奋作用，可使收缩幅度增加。药理试验表明，口服石斛煎剂能促进胃液分泌，帮助消化。石斛碱与非西汀药效相似而作用较弱，石斛浸膏能刺激小肠平滑肌的收缩，促进胃肠蠕动。石斛对慢性萎缩性胃炎能收到独特、满意的效果。
5、治疗眼科疾病
石斛对眼科疾病有明显的治疗作用，对半乳糖性白内障不仅有抑制作用，而且有一定的治疗作用，其保持晶状体的百分率为36.8%。在治疗白内障方面，对半乳糖所致的酶活性异常变化有抑制可纠正作用，也能阻止或纠正因半乳糖性白内障所致的晶状体总脂类与总胆固醇的比例失调。中药处主“清睛粉”用石斛兰、麦冬等组成，有滋阴散热、疏风清热、通络散结、退翳明目之功效，用于联合翼状胬肉切除、角膜移植手术，效果较好。“石斛夜光丸”由石斛兰、人参等25味中药材组成，对治疗白内障、青光眼、视神经炎等有较好疗效。
6、其它作用
石斛是我国传统的名贵中药，现代临床医学证实，石斛兰能抑制肾脏微粒体Na/K-ATP酶活性，可滋阴清热。糖尿病逐渐成为影响人类健康的第一大杀手。现代医学研究认为，石斛兰可显著降低糖尿病菌模型大鼠血糖、胰高血糖素，增加胰岛素、C肽的分泌。抑制胰岛素降解，提高胰岛素敏感指数，抑制游离脂肪酸的分泌，显著降低肥胖糖尿病模型大鼠的肿瘤坏死因子。
【铁皮石斛组织培养报告】推荐阅读：
铁皮石斛市场竞争分析07-02
